《西番蓮 組培苗》征求意見稿編制說明

編制說明《西番蓮組培苗》（征求意見稿）編制說明一、工作簡況根據(jù)中《中國熱帶作物學會團體標準管理辦法（試行）》物學會團體標準制定項目計劃。起草單位為中國熱帶農業(yè)科學院熱帶作物品種資源研究所、廣西壯族自治區(qū)農業(yè)科學院、廊坊市維金農業(yè)科技有限公司、海南保亭瑞華生態(tài)農業(yè)有限公司、海南催化農業(yè)發(fā)展科技有限公司。目前，西番蓮屬(PassifloraLinnaeus)有597種，有欣賞和鮮食兩大類，大多數(shù)為觀賞類植物，可供鮮食的有60多種。原產于南美洲的巴西、巴拉圭、秘魯、阿根廷、厄瓜多爾等地。屬于西番蓮科西番蓮屬草質藤本植物（中國植物志其分類主要基于形態(tài)學特征和遺傳學關系，它們在形態(tài)、生長習性以及適應性上都有所不同。常見的西番蓮品種包括紫色西番蓮和黃色西番蓮，還有其他如青皮西番蓮、香蕉西番蓮、木瓜西番蓮等，它們在果實顏色、口感以及適應性等方面都有所差異，西番蓮是短平快的高經濟效益果樹（4~6個月廣泛種植于熱帶、亞熱帶地區(qū)。西番蓮（Passifloraedulis）主栽品種主要為紫色西番蓮和黃色西番蓮，西番蓮果實具有獨特濃郁的芳香風味和豐富的營養(yǎng)價值，西番蓮富含維生素C、礦物質（如鉀、鐵、鈣等）、多種抗氧化物質、膳食纖維和果膠等，對增強人體免疫力、維持血壓穩(wěn)定和預防多種慢性疾病發(fā)生以及促進腸道蠕動，改善消化功能等有著重要作用。其果實被涉及鮮果、果汁、飲料、果脯、果酒、奶制品等產品的開發(fā)。我國西番蓮栽培歷史已超過100年，自臺灣省1901年從日本引入紫果西番蓮（PassifloraedulisSims）。1987年經國務院發(fā)展南亞熱帶作物開發(fā)辦公室批準，將西番蓮列為我國南方重點開發(fā)的作物之一。目前，西番蓮的國內外市場呈現(xiàn)出穩(wěn)步增長的態(tài)勢。在國外，北美、歐洲和亞洲等地區(qū)，百香果已經成為一種受歡迎的水果，其產業(yè)規(guī)模不斷擴大，以巴西、厄瓜多爾等國家種植面積最大。在國內，福建、廣西、云南等省份對百香果產業(yè)日趨重視，隨著鄉(xiāng)村振興戰(zhàn)略的實施，加之消費者對健康飲食的追求和對新奇特水果的好奇心的增加，百香果的市場需求也在逐年增長。近幾年來，其種植面積以年均20%的速度增長，西番蓮產業(yè)得到快速發(fā)展，截止至2021年，我國西番蓮種植面積達到110萬畝，全年主產區(qū)產量已突破100萬噸，較上年新增7.532020年為93萬噸）。成為了我國熱區(qū)鄉(xiāng)村振興、農民脫貧致富的重要支柱產業(yè)。在國內外對西番蓮需求急劇攀升的背景下，隨著西番蓮產業(yè)迅猛發(fā)展，西番蓮種苗選擇、栽培模式及病蟲害等問題日漸突出，尤其是種苗質量、病毒病是對產業(yè)的發(fā)展影響巨大。目前西番蓮種苗繁育技術主要是嫁接、扦插和實生苗繁育，西番蓮組培苗培育技術尚未成熟。市場上銷售的西番蓮種苗包括以下幾類：一是嫁接苗，其根系發(fā)達，抗根腐、莖基腐病、抗逆性增強，但接穗容易受母本帶毒程度影響，并引起砧木品種性狀同化接穗品種性狀的可能性；二是扦插苗不收砧木的影響，能夠保持母本的優(yōu)良性狀，結果早、成本低，但遺傳母本的帶病癥狀，導致抗逆性、易感病，特別是莖基腐病；三是實生苗，實生苗根系發(fā)達，抗病性強，植株健壯、生長旺盛，但是結果期晚，品種性狀變異系數(shù)高，果實品質不穩(wěn)定。上述3種育苗方式無法同時解決種苗復壯、性狀穩(wěn)定、植株生長旺盛、抗逆抗病性強的問題，造成優(yōu)質健康種苗培育難度加大。因此，利用植物細胞具有全能性的原理，通過植物組織培養(yǎng)技術實現(xiàn)西番蓮種苗復壯，并保持母本遺傳性狀，保證苗木質量。打贏種業(yè)翻身仗。2020年中央經濟工作會議首次提出，年中央全面深化改革委員會第二十次會議，會議審議通過《種業(yè)振興行動方案》，會議強調種源安全升至國家級戰(zhàn)略高度，實現(xiàn)種業(yè)自立自強，種源自主可控；2022年、2023年中央一號文件分別指出，大力推進種源等農業(yè)關鍵核心技術攻關，推動農業(yè)關鍵核心技術攻關，加快前沿技術突破，深入實施種業(yè)振興行動。目前，我國種業(yè)的目標是在種業(yè)戰(zhàn)略安全的基礎上，強調科技創(chuàng)新，加強種質資源保護利用和種子庫建設、生物育種商業(yè)化應用，做大做強相關企業(yè)為發(fā)展目標。目前在現(xiàn)行的西番蓮相關的行業(yè)、地方標準方面有NY/T491-2021（西番蓮）、NYT2517-2013（植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南西番蓮）、NY/T3972-2021（西番530-2021（西番蓮（百香果）種質資源描述規(guī)范）、DB46/T番蓮）病毒檢測技術規(guī)程）等。涉及到百香果種苗繁育、栽培技術、育苗技術、嫁接苗繁育、病毒檢測、無病毒種苗繁育、采收與貯運等，未涉及西番蓮組培苗等相關技術規(guī)程。西番蓮組培苗標準的缺乏，不利于攻克西番蓮種苗脫毒復壯的技術瓶頸，不利于規(guī)范化西番蓮苗木品種的純正和穩(wěn)定性，不利于西番蓮產業(yè)發(fā)展的穩(wěn)定性、可持續(xù)性。（二）起草單位項目下達后，以中國熱帶農業(yè)科學院熱帶作物品種資源研究所為牽頭單位，廣西壯族自治區(qū)農業(yè)科學院、桂林市農業(yè)科學研究中心、以廊坊市維金農業(yè)科技有限公司、海南催化農業(yè)發(fā)展科技有限公司、海南保亭瑞華生態(tài)農業(yè)有限公司為參與單位；通過充分討論，團隊積極組織技術骨干成立標準編制工作小組，組長為項目負責人，主要參與起草人15人。具體人員分工如下：員調員研員究員員研心研員調調項目承擔單位在標準制定項目計劃下達后，成立了標準起草小組，并對小組成員進行任務分工，通過收集品種、分析文獻資料、產業(yè)調研、標準制定方案的研討、技術路線，驗證標準關鍵技術環(huán)節(jié)，征集專家意見和反復修訂標準等多項內容，主要完成了以下工作：（1）文獻資料的收集、調研和分析為了制定好西番蓮組培苗規(guī)程，起草小組收集、查閱西番蓮種苗生產技術相關資料，包括我國在2021年頒布的NY/T3972-2021《西番蓮種苗》，不同省份發(fā)布的DB46/T530-2021《西番蓮（百香果）種質資源描述規(guī)范》、DB46/T實驗站宋順等主編的《百香果栽培與病蟲害防治》等行業(yè)標準、專著及論文。通過對文獻資料的查閱、整理、調研和分析，多次組織人員分赴西番蓮不同產區(qū)進行調研，實地考察西番蓮苗木生產的相關單位、企業(yè)，交流并收集產業(yè)種源瓶頸問題和促進產業(yè)發(fā)展的相關意見，最終確定了標準的制定原則和主體框架。西番蓮組培苗標準側重優(yōu)良品種的枝條采集、外植體消毒、組織培養(yǎng)、扦插和嫁接、苗木出圃等。（2）標準的起草通過對所收集資料的分析，在借鑒《NY/T3972-2021西番蓮種苗》等資料的基礎上，以中國熱帶農業(yè)科學院熱帶作物品種資源研究所、廣西壯族自治區(qū)農業(yè)科學院、桂林市農業(yè)科學研究中心長期從事西番蓮種苗培育、組培苗擴繁技術作為制定標準的基礎，以廊坊市維金農業(yè)科技有限公司、海南催化農業(yè)發(fā)展科技有限公司、海南保亭瑞華生態(tài)農業(yè)有限公司等企業(yè)多年從事種苗生產、種植的積累經驗為標準制定的參考基礎，通過充分討論、交流之后，確定外植體采集、處理、消毒、腋芽誘導、繼代培養(yǎng)、生根誘導、移栽、管理、起苗、出圃、苗木檔案等11項技術。在確定了技術標準內容的基礎上，我們GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1了《西番蓮組培苗》標準草案。在標準起草過程中，起草小組對每項技術標準進行驗證，對標準進一步補充和完善，從而確保各項技術的準確性和權并對本標準的“征求意見稿”發(fā)送到我國廣西、貴州、海南、福建、云南、廣東等西番蓮主產區(qū)的高校和科研機構的專家，廣泛征求意見。二、標準編制原則和確定標準主要內容的論據(jù)（一）編制原則在本標準的制定過程中，結合西番蓮產業(yè)當前和長遠發(fā)展需要，以“先進性、實用性、統(tǒng)一性、規(guī)范性”的原則，權威為本標準編寫的指導思想，注重標準的“科學性、準確性、通用性和可操作性”，以保證種苗質量為目標。按照國家標準GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》、《標準化工作導則第2部分：標準中規(guī)范性技術要素內容的確定方法》（GB/T1.2）嚴格進行編寫。（二）主要內容以及確定依據(jù)1、標準的主要技術要點說明（1）本標準規(guī)范性引用文件本標準引用的文件主要有《NY/T2517植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南西番蓮》。（2）關于標準主要技術指標確定的說明我國西番蓮苗木生產主要集中在廣西、海南、福建、貴州等高校、科研單位和企業(yè)。通過現(xiàn)場考察和會議交流等方式，收集了解西番蓮苗木生產過程的不足和需求等，結合本起草單位現(xiàn)有的西番蓮組織培養(yǎng)技術經驗及多年積累的西番蓮苗木繁育技術的基礎上，確定了外植體采集、處理、消毒、腋芽誘導、繼代培養(yǎng)、生根誘導、移栽、管理、起苗、出圃、苗木檔案等11項技術作為《西番蓮組培苗》標準制定的主要技術內容，使本標準具備適應性和可操作性。（3）關于“等級要求”的分類在獲得組培苗的前提下，對組培苗進行質量分級。起草小組查閱大量的不同物種組培苗繁育的相關資料，前往海南、廣西、福建等西番蓮主產區(qū)的種苗生產企業(yè)進行實地調研，并就企業(yè)對西番蓮種苗的分級管理標準進行交流、分析，結合試驗，從中總結出種苗生長勢、整齊性、健壯程度一致的種苗，并初步分出等級。4~54~5隨機抽取15株優(yōu)異品種的組培扦插苗種植在田間無病害的地塊上進行田間性狀觀察，包括植物學特征、花期、盛果期、果實性狀和產量。觀察與統(tǒng)計按照NY/T2517規(guī)定進（5）組培苗出圃移栽成活的組培苗經過2個月?lián)嵊耘嗪螅凑彰缒敬笮≡俅芜M行分類管理。對于保持母本田間性狀的植株，當移栽苗的高度達到30cm~50cm，植株生長健壯、葉片深綠、無病害的狀態(tài)，方可以出圃。三、主要試驗（或驗證）的分析、綜述報告，技術經濟論證，預期的經濟結果（一）主要試驗或驗證的分析、綜述報告1、主要試驗（或驗證）的主體主要試驗主體為本標準主持單位中國熱帶農業(yè)科學院熱帶作物品種資源研究所，起草參與單位為廣西壯族自治區(qū)農業(yè)科學院、桂林市農業(yè)科學研究中心長期從事西番蓮種苗培育、組培苗擴繁技術作為制定標準的基礎，以廊坊市維金農業(yè)科技有限公司、海南催化農業(yè)發(fā)展科技有限公司、海南保亭瑞華生態(tài)農業(yè)有限公司。2、主要試驗（或驗證）的方法、手段起草單位是國內西番蓮種質組織培養(yǎng)技術、新品種育種水平較高的單位，在組培苗和果實生產方面有很好的研究基礎與豐富經驗，主要通過實驗調查、會議研討、文獻查閱、征求意見等方法和途徑對標準中涉及的相關指標進行試驗3、試驗結果的統(tǒng)計分析根據(jù)西番蓮不同主產區(qū)的試驗結果，收集、總結相關方（1）西番蓮外植體采集根據(jù)項目組前期分別在多日雨天或陰天及晴天的天氣條件下采集外植體消毒試驗結果發(fā)現(xiàn)，在雨天采集外植體，消毒效果最差，污染率最高，其次是陰天，晴天采集外植體，消毒效果最好，污染率較低。因此，應宜在連續(xù)多日天氣晴朗的環(huán)境下采集生長勢旺盛、無明顯病毒病癥狀的健壯植株作為采集對象。枝條的采集應選抽長幼嫩的新梢頂端，長度（2）外植體消毒處理㎝的嫩枝頂芽，剪去嫩葉，保留葉柄，在中性洗滌劑溶液中浸泡10min~15min，流水沖洗至無泡沫；取出瀝干（若田間外植體則出用棉花絮輕擦拭頂芽莖干移到無菌超凈臺中用75%乙醇溶液消毒30s，無菌水漂洗2次。接種外植體前將解剖刀和鑷子在酒精燈或恒溫滅菌器300℃滅菌30min，冷卻后使用。結果顯示，處理2X和5X消毒效果較佳，外植體存活率分別達90.9%、81.8%，因此利用濃度為0.1%~0.15%HgCl溶液浸泡外植體8min后，對外植體的存活率影響最低。585858（3）腋芽誘導利用L9(34)正交設計試驗，接種于不同細胞分裂素組合(ZT0.01㎎/L~0.05㎎/L，6-BA0.3~2.0㎎/L)MS培養(yǎng)基(含30g/L白糖和7g/L瓊脂粉，pH5.8~6.0)中，每個組合接種30個，重復3次。白光為組培光源，晝夜交替12h培養(yǎng)，光照強度2500~5000lx，培養(yǎng)溫度莖尖萌芽發(fā)育情況，30d統(tǒng)計腋芽平均萌發(fā)率和萌芽系數(shù)。結果表明：在16種組合處理中，添加ZT和6-BA均對因此，以MS+6-BA1.5mg/L+ZT0.02mg/L作為外植體腋芽誘導萌發(fā)最適培養(yǎng)基。（4）增殖、繼代培養(yǎng)根據(jù)L16(45)正交設計試驗，從外植體上切取腋芽，接種于不同激素濃度組合6-BA(0.3~1.5㎎/L)、IBA(0.01~0.05㎎/L)、ZT(0.01~1.0㎎/L)的MS固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)4~8周，觀察芽增殖與伸長情況，統(tǒng)計芽伸長與增殖系數(shù)。16種組合數(shù)據(jù)分析表明，生長素IBA對芽莖的伸長和增殖不顯著，加大細胞分裂素6-BA的濃度，降低ZT濃度，芽伸長和增殖系數(shù)增加，培養(yǎng)30d后莖枝伸長2.5±0.5㎝，0.05mg/L+IBA0.01mg/L+NAA0.01mg/L作為黃果西番蓮芽增殖與叢生芽形成的最適培養(yǎng)基，MS+6-BA0.3mg/L+ZT0.05mg/L為紫果西番蓮芽增殖與叢生芽形成的最佳培養(yǎng)基。（5）不定芽生根培養(yǎng)采用L16(45)正交設計試驗，分離叢生芽，取長度2.5㎝單莖枝，將單莖枝轉接至IBA0~2.0㎎/L)和NAA(1.0~2.0㎎/L)不同濃度組合的MS培養(yǎng)基上，每個組合處理15個，重復3次；12d后觀察莖枝生根和根系生長情況，30d統(tǒng)計生根率。是影響紫果西番蓮不定芽形成根系的關鍵因子；1/2MS和NAA是誘導黃果西番蓮嫩莖生根、根系發(fā)達的主要因素。因MS+NAA0.7mg/L作為黃果西番蓮生根培養(yǎng)基。（6）組培苗移栽馴化在自然光照、室溫條件下，按照一級、二級的標準對組培苗進行質量分級；將健壯、長勢一致的瓶苗，在同一室內放置15d，揭蓋、煉苗1d~3d；取出幼苗，清洗幼苗基部培移栽至營養(yǎng)基質土中保溫、保濕管理。移栽21d~25d后按照小苗進行常規(guī)管理。經多菌靈消毒和前期保濕管理對幼苗成活率的影響較（二）技術經濟論證、預期的經濟效果《西番蓮組培苗》標準的制定將規(guī)范西番蓮組培苗的生產，提高西番蓮種苗生產技術水平，對性狀優(yōu)良但抗逆性低、生長勢弱的種質資源的保存和復壯種苗具有重要作用，促進種苗生產企業(yè)從低端育苗向中端育苗轉化及組培、嫁接等多項種苗繁育技能的專業(yè)人員的培養(yǎng)，對促進百香果產業(yè)可持續(xù)發(fā)展、綜合提升產業(yè)經濟效益、增加就業(yè)率等具有長遠的社會影響；有助于推廣科學、可持續(xù)的種苗生產方法和理念，提高農業(yè)生產的科學性和規(guī)范性。2、預期的經濟效果《西番蓮組培苗》標準的制定，不僅為西番蓮產業(yè)提 供西番蓮健康種苗繁育關鍵技術，而且在一定程度上緩解農戶對西番蓮苗木質量的擔憂，降低劣質種苗導致的經濟損失。組培苗生長勢旺盛、抗逆性