JJF(京) 137-2024 快速核酸檢測儀校準規(guī)范

北京市地方計量技術規(guī)范JJF(京)137-2024北京市市場監(jiān)督管理局發(fā)布JJF(京)137-2024I 1核酸檢測儀校準規(guī)范DB32/T3762－2020新型要的計算方式是以擴增過程前（3～15）個循環(huán)的熒光值的103.2等溫擴增技術isothermalamplificationte2特定基因在某一生物體基因組中所含的個數(shù)以及每個生快速核酸檢測儀（以下簡稱檢測儀）是基于實時熒—— ————JJF(京)137-202436校準條件6.1環(huán)境條件6.1.2相對濕度：≤85%。6.2測量標準及其他設備測量范圍：(0～120)℃,分辨力不低于0.01℃,最大允許誤差：±0.1℃,采樣間隔不大于0.1s。6.2.2核酸標準物質(zhì)應使用國家有證標準物質(zhì)。包括：新型冠狀病毒核酸標準物質(zhì)或其他病原體標準物質(zhì)，相對不確定度不大于20%(k=2)。7校準項目和校準方法7.1校準前準備將溫度測量儀的溫度傳感器放置于檢測儀加熱模塊設定孔中。按圖1所示，獨立控溫檢測儀逐個對加熱模塊或同時對多個加熱模塊進行檢測；按圖2所示，非獨立控溫的檢測儀加熱模塊作為一個整體進行校準，以16通道檢測儀為例，均勻選擇測量點，每增加8通道可增加2個測量點。7.1.2測量程序根據(jù)檢測儀說明書設定控溫程序，基于實時熒光PCR技術和基于等溫擴增技術的411213646516171ΔTmax=Tmax-Ts（1）?Tmin=Tmin-Ts5——溫度設定值，℃。基于等溫擴增技術的檢測儀溫度達到設定溫度2——第j個測量點；max——測量點j實測最高溫度，℃;min——測量點j實測最低溫度，℃。thiV=1thi——測量點數(shù)量；——第j個測量點；——循環(huán)次數(shù)，n=5；6基于等溫擴增技術的檢測儀從常溫狀態(tài)升溫至95℃,截取(50±±0.5)℃的溫度范圍內(nèi)計算升溫速率(圖4),按式(6)計算： JJF(京)137-202477.2.4平均降溫速率基于實時熒光PCR技術的檢測儀，從95℃降溫至40℃的5次循環(huán)(圖5),截取從(90±0.5)℃降溫至(50±0.5)℃的溫度范圍內(nèi)計算降溫速率，按式(7)和(8) Va——平均降溫速率，℃s;Vdi第j個測量點降溫速率，℃/s;m——測量點數(shù)量；Ta(50±0.5)℃溫度點第i次測量值，℃;Th(90±0.5)℃溫度點第i次測量值，℃;7.2.5平均溫度過沖量檢測儀按設定程序運行，從(40±0.5)℃升溫至(95±0.5)℃時，溫度測量儀測定溫度值超出設定值的量(圖6),按式(9)計算平均溫度過沖量：8JJF(京)137-2024 AT平均溫度過沖量，℃;m—測量點數(shù)量；T.設定溫度值，℃;Timax——第j個測量點6次測得的最大過沖溫度值，℃;7.2.6溫度均勻度待檢測儀設定溫度達到穩(wěn)定后，均勻讀取將溫度測量儀測得的20組數(shù)據(jù)，溫度均勻度按式(10)計算：Timax第i個測量點測得的最高溫度，℃;Timin第i個測量點測得的最低溫度，℃。7.2.7樣本檢測重復性將標準物質(zhì)稀釋到檢測儀標稱的檢出限濃度(參照配套試劑盒說明書進行稀釋),檢查其檢出限。再將標準物質(zhì)稀釋到高于檢出限的一定濃度(例1000copies/mL)作為樣本，對同一模塊或通道進行6次測量，分別記錄測量的Ct(18～27供參考，可根據(jù)不同檢測儀9SD=i(yi-M)2（11）MM）；），n)“校準證書”的校準人、核驗人、批準A.1基于實時熒光PCR技術快速核酸檢測儀校準123A1A8過沖量(℃)平均溫度過沖量(℃)平均升溫速率(℃/s）平均降溫速率(℃/s）設定溫度(℃)均勻度(℃)A.2基于等溫擴增技術快速核酸檢測儀校準原始記錄123最大偏差(℃)最小偏差(℃)溫度波動度(℃)123過沖量(℃)平均溫度過沖量(℃)平均升溫速率(℃/s）校準證書內(nèi)頁格式(推薦)設定溫度點(℃)溫度上偏差(℃)溫度下偏差(℃)溫度波動度(℃)平均溫度過沖量(℃)平均升溫速率(℃/s)平均降溫速率(℃/s)溫度均勻度(℃)確定度(℃)數(shù)不同測量