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發(fā)酵重組大腸桿菌產(chǎn)(+)γ-內(nèi)酰胺酶及酶的固定化研究的任務(wù)書任務(wù)書任務(wù)名稱:發(fā)酵重組大腸桿菌產(chǎn)(+)γ-內(nèi)酰胺酶及酶的固定化研究任務(wù)目的:本任務(wù)的主要目的是研究利用重組大腸桿菌發(fā)酵產(chǎn)生(+)γ-內(nèi)酰胺酶,并對其進(jìn)行固定化研究。通過實(shí)驗(yàn)研究,了解發(fā)酵技術(shù)和酶固定化技術(shù),加深對生物技術(shù)的理解,提高實(shí)驗(yàn)操作和研究能力。任務(wù)背景:γ-內(nèi)酰胺酶是一種廣泛存在于生物體內(nèi)的酶,它具有很強(qiáng)的催化活性和專一性,可用于醫(yī)療、生物制藥、精細(xì)有機(jī)合成等領(lǐng)域。因此,開發(fā)高效且安全的γ-內(nèi)酰胺酶生產(chǎn)技術(shù)具有非常重要的研究價(jià)值。發(fā)酵技術(shù)是生產(chǎn)高效酶類產(chǎn)品的一種重要方法,它具有操作簡單、生產(chǎn)成本低、產(chǎn)品純度高等優(yōu)點(diǎn)。固定化技術(shù)是將酶綁定到載體材料上形成固定化酶的過程,固定化酶具有長壽命、穩(wěn)定性好、再生性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。因此,研究發(fā)酵技術(shù)和酶固定化技術(shù)對于制備高效酶類產(chǎn)品有著重要作用。任務(wù)內(nèi)容:1.建立發(fā)酵大腸桿菌生產(chǎn)(+)γ-內(nèi)酰胺酶的實(shí)驗(yàn)方法;2.優(yōu)選產(chǎn)酶菌株,優(yōu)化生產(chǎn)條件,獲得高效產(chǎn)酶菌株;3.對生產(chǎn)的大腸桿菌進(jìn)行酶水解活性測試,并對產(chǎn)酶能力進(jìn)行分析;4.通過理論分析和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),選擇最佳的固定化材料和方法;5.進(jìn)行固定化后酶的活性測定和穩(wěn)定性分析;6.對比生產(chǎn)純度和活性較高的自由酶和固定化酶,以及前者和后者的成本分析;7.對研究結(jié)果進(jìn)行分析和總結(jié),并進(jìn)一步推廣和應(yīng)用。任務(wù)要求:1.按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行實(shí)驗(yàn),保證操作的有效性和可重復(fù)性;2.嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)計(jì)劃和時(shí)間計(jì)劃進(jìn)行實(shí)驗(yàn)和記錄,及時(shí)報(bào)告進(jìn)展和情況;3.對實(shí)驗(yàn)過程和實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行歸納、分析、總結(jié)和交流;4.書面報(bào)告中必須包括實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)結(jié)果、實(shí)驗(yàn)分析和總結(jié)等內(nèi)容;5.要求實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范、數(shù)據(jù)準(zhǔn)確,報(bào)告書寫規(guī)范、結(jié)論可靠。任務(wù)計(jì)劃:階段一:熟悉實(shí)驗(yàn)儀器,查閱相關(guān)文獻(xiàn),制定實(shí)驗(yàn)方案,并完成實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作。階段二:進(jìn)行大腸桿菌發(fā)酵生產(chǎn)實(shí)驗(yàn),并進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。階段三:固定化酶的實(shí)驗(yàn)研究,從多個(gè)方面進(jìn)行固定化酶的活性測定和穩(wěn)定性分析。階段四:總結(jié)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告并進(jìn)行交流。參考文獻(xiàn):1.XUANWei-jie,PENGBiao-qing,XUYan-ping,etal.Cloning,expressionandpurificationofthecarboxylesteraseCRN-4fromBeauveriabassianainPichiapastorisandstudyingitskineticproperties[J].JournalofXi'anUniversityofArchitectureandTechnology(NaturalScienceEdition),2017,49(1):91-97.2.馬慧玲,楊瑤瑤,張恒江,等.探究內(nèi)質(zhì)網(wǎng)信號胞內(nèi)定向制導(dǎo)鏈接表達(dá)載體在超高表達(dá)載體構(gòu)建中的作用[J].天津科技大學(xué)學(xué)報(bào),2018,34(5):20-27.3.熊相偉,華夏,王獲.固定化葡萄酒釀酶的研究現(xiàn)狀[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2016(11):218-221.4.武鵬輝
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