第三章細(xì)胞生物學(xué)研究方法習(xí)題及答案

第三章細(xì)胞生物學(xué)研究方法習(xí)題一、選擇題1正常細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基中長需加入血清，主要是因?yàn)檠逯泻校–）A.氨基酸B.核酸C.生長因子D.維生素2冷凍蝕刻技術(shù)主要用于（A）。A.電子顯微鏡B.光學(xué)顯微鏡C.原子力顯微鏡D.激光共聚焦顯微鏡3建立分泌單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞是通過下列哪種技術(shù)構(gòu)建的？（A）A.細(xì)胞融合B.核移植C.病毒轉(zhuǎn)化D.基因轉(zhuǎn)移4關(guān)于光鏡的使用，下列哪項(xiàng)有誤？（C）A.觀察標(biāo)本時(shí)，應(yīng)雙眼同時(shí)睜開、雙手并用B.按照從低倍鏡到高倍鏡到油鏡的順序進(jìn)行操作C.使用油鏡時(shí)，需要在標(biāo)本上滴上香柏油，將聚光器降至最低，光圈全部開放。5為了實(shí)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)某種蛋白質(zhì)的亞細(xì)胞精細(xì)定位，可對該蛋白進(jìn)行標(biāo)記，下面哪種標(biāo)記可行（C）A.GFP標(biāo)記B.免疫熒光標(biāo)記C.免疫電鏡技術(shù)D.熒光染料直接染色6為了提高雌性乳牛出生的比例，可在體外將攜帶X染色體和Y染色體的鏡子分離開，進(jìn)行人工授精。最好的分離方法使（A）A.流式細(xì)胞分選術(shù)B.離心技術(shù)C.細(xì)胞電泳D.層析7為了觀察病毒，可通過何種方法進(jìn)行觀察（B）A.相差顯微鏡觀察B.負(fù)染色后用電鏡觀察C.激光共聚焦顯微鏡觀察D.以上都錯(cuò)8以下哪些技術(shù)一般不用于分離活細(xì)胞？（CD）（可多選）A.流式細(xì)胞技術(shù)B.細(xì)胞電泳C.超速離心D.差速離心9某研究生為了研究一特定膜蛋白的胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域的功能，需要制備和分離外翻的細(xì)胞膜泡，為了獲得無污染的外翻膜泡，下列選項(xiàng)中，哪些是他在實(shí)驗(yàn)中有可能使用到的?（BD）（可多選）A.SDSB.凝集素C.流式細(xì)胞儀D.柱層析10綠色熒光蛋白GFP（GreenFluorescentProtein）基因與目的基因融合后，轉(zhuǎn)入細(xì)胞后可以（ABD）（可多選）A.檢測融合蛋白在細(xì)胞中的準(zhǔn)確定位B.檢測目的基因所編碼的蛋白在細(xì)胞中的含量C.檢測目的基因所編碼的蛋白在細(xì)胞中的分子結(jié)構(gòu)D.檢測目的蛋白質(zhì)在細(xì)胞中的表達(dá)量E.以上答案都不對二、填空題1流式細(xì)胞儀可以定量測定細(xì)胞中的DNA，RNA或某種特異蛋白的含量及細(xì)胞群體中上述成分含量不同的細(xì)胞數(shù)量。2從創(chuàng)新的觀點(diǎn)看，1665年胡克發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的兩個(gè)主要?jiǎng)?chuàng)新點(diǎn)是切片技術(shù)和——光學(xué)顯微技術(shù)創(chuàng)新。3體外培養(yǎng)的細(xì)胞，不論原代細(xì)胞還是傳代細(xì)胞一般不保持體內(nèi)原有的細(xì)胞形態(tài)。但大體可以分為兩種基本形態(tài):成纖維樣細(xì)胞與上皮樣細(xì)胞。三、判斷題1顯微鏡成像質(zhì)量好壞的重要指標(biāo)是其放大倍數(shù)。（x）2光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡下都可以觀察到彩色圖像。（x）3雖然龜?shù)淖罡邏勖?75歲，而小鼠的的壽命只有幾年，但它們的細(xì)胞在體外培養(yǎng)分裂的極限基本相同。（）4正常細(xì)胞培養(yǎng)中除了培養(yǎng)基外常加血清，主要是因?yàn)檠逯泻写罅康陌被?。（x）5體外培養(yǎng)的細(xì)胞，一般保持體內(nèi)原有的細(xì)胞形態(tài)。（x）6經(jīng)冷凍蝕刻技術(shù)處理后的樣品，在電子顯微鏡下所觀察到的圖像是樣品本身所形成的。（x）7經(jīng)流式細(xì)胞儀分離出來的細(xì)胞可繼續(xù)培養(yǎng)。（）四、名詞解釋RNAi（RNAinterference）1、RNAi：RNA干擾是指與靶基因同源的雙鏈RNA誘導(dǎo)的特異轉(zhuǎn)錄后基因沉默現(xiàn)象。其作用機(jī)制是雙鏈RNA被特異的核酸酶降解，產(chǎn)生干擾小RNA（siRNA），這些siRNA結(jié)合其他元件形成“RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合物”（RISC），RISC與同源的靶RNA互補(bǔ)結(jié)合，特異性酶降解靶RNA，從而抑制、下調(diào)基因表達(dá)。該方法已經(jīng)發(fā)展成為基因治療、基因結(jié)構(gòu)功能研究的快速有效的方法Monoclonalantibody2、中文名稱單克隆抗體。是指由一個(gè)被特定抗原免疫的B淋巴細(xì)胞與雜交瘤細(xì)胞融合后形成的雜交細(xì)胞產(chǎn)生的針對該特異性抗原的抗體。單克隆抗體具有高度特異性，在生物學(xué)研究和臨床上都有廣泛而重要的用途細(xì)胞工程3、細(xì)胞工程是應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的理論和方法，按照人們的設(shè)計(jì)藍(lán)圖，進(jìn)行在細(xì)胞水平上的遺傳操作及進(jìn)行大規(guī)模細(xì)胞和組織培養(yǎng)的學(xué)科。當(dāng)前細(xì)胞工程所涉及的主要技術(shù)領(lǐng)域有細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞融合、細(xì)胞拆合、染色體操作及基因轉(zhuǎn)移等方面。根據(jù)設(shè)計(jì)要求，按照需要改造的遺傳物質(zhì)的不同操作層次，可將細(xì)胞工程學(xué)分為染色體工程、染色體細(xì)胞工程、細(xì)胞質(zhì)工程和細(xì)胞融合工程。五、簡答、思考題1細(xì)胞生物學(xué)研究成功的關(guān)鍵在于運(yùn)用模式生物。試舉出三種生物學(xué)上常用的模式生物，并逐一說明該模式生物在生物學(xué)研究中的用途和優(yōu)勢1、常用的模式生物及其在生物學(xué)研究中的用途和優(yōu)勢如下：（1）大腸桿菌用途：常用工程改良的大腸桿菌來大量擴(kuò)增質(zhì)粒和表達(dá)蛋白等。優(yōu)勢：大腸桿菌是原核生物的代表，它的基因組信息量少而全，是研究原核生物的良好模式生物。此外，大腸桿菌還是良好的生物學(xué)研究工具。（2）果蠅果蠅是昆蟲的代表。用途：蟾宮果蠅倆進(jìn)行基因和遺傳研究。如遺傳規(guī)律的分析、染色體特性研究、胚胎發(fā)育的基因調(diào)控和細(xì)胞分化機(jī)制研究、神經(jīng)退行性疾病和學(xué)習(xí)、認(rèn)知等領(lǐng)域的研究等。優(yōu)勢：果蠅基因組信息全面，而且現(xiàn)有全面的針對果蠅的系統(tǒng)研究工具，全世界積累了大量果蠅品系，這些都對果蠅研究提供了便利。（3）小鼠用途：常作為哺乳動(dòng)物遺傳學(xué)、組織學(xué)、胚胎學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)導(dǎo)尿管的研究材料。優(yōu)勢：小鼠是哺乳動(dòng)物的模式生物，與人的親緣關(guān)系在各種模式生物中最近，在小鼠身上的實(shí)驗(yàn)一般放在最后，在得到初步結(jié)果后再到小鼠身上驗(yàn)證。2細(xì)胞生物學(xué)研究常用的技術(shù)有哪些？請列舉3種不同的細(xì)胞生物學(xué)研究方法對現(xiàn)代生命科學(xué)研究的影響.2、細(xì)胞生物學(xué)研究的常用技術(shù)有（1）顯微成像技術(shù)顯微成像技術(shù)包括直接成像和間接成像，是細(xì)胞生物學(xué)最基本的研究方法，可分為光學(xué)顯微技術(shù)和電子顯微技術(shù)。光學(xué)顯微技術(shù)包括普通雙筒顯微鏡、熒光顯微鏡、相差顯微鏡、暗視野顯微鏡、倒置顯微鏡等。光學(xué)顯微技術(shù)是研究細(xì)胞顯微結(jié)構(gòu)的重要工具。電子顯微鏡技術(shù)包括投射電子顯微鏡、掃描電子顯微鏡、電子數(shù)碼顯微鏡等。電子顯微鏡是研究亞顯微結(jié)構(gòu)的主要工具。（2）細(xì)胞化學(xué)技術(shù)細(xì)胞化學(xué)技術(shù)包括酶細(xì)胞化學(xué)技術(shù)、免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)、細(xì)胞分選技術(shù)、其中流式細(xì)胞技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)和現(xiàn)代生物技術(shù)中的重要研究方法。（3）細(xì)胞工程技術(shù)細(xì)胞工程技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)與遺傳學(xué)的交叉領(lǐng)域，主要利用細(xì)胞生物學(xué)的原理和方法結(jié)合工程學(xué)的技術(shù)手段，按照人們預(yù)先的設(shè)計(jì)，有計(jì)劃地改變或創(chuàng)造細(xì)胞遺傳性。包括體外大量培養(yǎng)和繁殖細(xì)胞，或獲得細(xì)胞產(chǎn)品、或利用細(xì)胞體本身。主要要內(nèi)容包括：細(xì)胞融合、細(xì)胞生物反應(yīng)器、染色體轉(zhuǎn)移、細(xì)胞器移植、基因移植、細(xì)胞及組織培養(yǎng)。（4）分離技術(shù)分離技術(shù)包括細(xì)胞組分的分離和生物大分子的分離，為揭示生物大分子在細(xì)胞內(nèi)的空間定位、相互關(guān)系及其功能的研究提供了有力的工具。3為什么用于光學(xué)顯微鏡觀察的石蠟切片厚度可達(dá)20μm，而用于電子纖維筋觀察的超薄切片的厚度必須小于0.1μm？如