2023-2024學(xué)年湖北省武漢市部分重點(diǎn)中學(xué)高二下學(xué)期期末聯(lián)考生物試卷（解析版）

高級(jí)中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1湖北省武漢市部分重點(diǎn)中學(xué)2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期期末聯(lián)考試卷一、選擇題：本題共18小題，每題2分，共36分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是符合題目要求的。1.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)通常是家庭式或作坊式的，豆豉一般以黃豆為原料，通過微生物群落共同發(fā)酵而成。利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作風(fēng)味豆豉的主要工藝流程如下圖。下列敘述正確的是（）A.傳統(tǒng)方法制作豆豉，以混合菌種的液體發(fā)酵為主B.參與前期發(fā)酵、后期發(fā)酵過程中的菌種代謝類型一致C.調(diào)味過程中添加鹽可抑制雜菌生長(zhǎng)，白酒和風(fēng)味料只是調(diào)節(jié)口味D.黃豆煮熟的目的主要是破壞黃豆內(nèi)部結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)變性，同時(shí)起到消毒的作用〖答案〗D【詳析】A、傳統(tǒng)發(fā)酵是以混合菌種的固體或半固體發(fā)酵為主，A錯(cuò)誤；B、結(jié)合圖示可知，參與前期發(fā)酵的菌種需要氧氣，后發(fā)酵過程密封發(fā)酵，是厭氧型，故代謝不一致，B錯(cuò)誤；C、調(diào)味過程中添加鹽可抑制雜菌生長(zhǎng)，白酒和風(fēng)味料既可以調(diào)節(jié)口味也可以抑制雜菌生長(zhǎng)，C錯(cuò)誤；D、蛋白質(zhì)在高溫條件下空間結(jié)構(gòu)改變而變性，黃豆煮熟的目的主要是破壞黃豆內(nèi)部結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)變性，易于被酶水解，同時(shí)起到消毒的作用，D正確。故選D。2.研究發(fā)現(xiàn)，小鼠四倍體胚胎具有發(fā)育缺陷，只能發(fā)育成胎盤等胚胎以外的結(jié)構(gòu)。ES細(xì)胞能夠誘導(dǎo)分化形成除胎盤外的其他細(xì)胞類型。四倍體胚胎與ES細(xì)胞的嵌合體則會(huì)使二者的發(fā)育潛能相互補(bǔ)償，可得到ES小鼠。下列敘述正確的是（）A.嵌合體胚胎發(fā)育至原腸胚時(shí)需移植入與之生理狀態(tài)相同的小鼠子宮內(nèi)才可以進(jìn)一步發(fā)育B.嵌合體胚胎移植時(shí)，可通過對(duì)受體注射免疫抑制劑來提高移植成功率C.ES細(xì)胞和iPS細(xì)胞都只能從胚胎中獲取，限制了二者的廣泛應(yīng)用D.嵌合體發(fā)育形成的ES小鼠基因型與供體ES細(xì)胞的基因型相同〖答案〗D〖祥解〗胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)。包括體外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。胚胎工程的許多技術(shù)，實(shí)際是在體外條件下，對(duì)動(dòng)物自然受精和早期胚胎發(fā)育條件進(jìn)行的模擬操作?！驹斘觥緼、嵌合體胚胎發(fā)育至桑葚胚或囊胚期再移植入與之生理狀態(tài)相同的小鼠子宮內(nèi)才可以進(jìn)一步發(fā)育，A錯(cuò)誤；B、同種生物的嵌合體胚胎移植時(shí)，外來胚胎移入子宮不會(huì)引起免疫排斥，故不需要對(duì)受體注射免疫抑制劑，B錯(cuò)誤；C、ES細(xì)胞存在于早期胚胎或原始性腺，只能從胚胎中獲取，iPS細(xì)胞是人工誘導(dǎo)產(chǎn)生的，可以從體細(xì)胞中誘導(dǎo)產(chǎn)生，C錯(cuò)誤；D、四倍體胚胎只能發(fā)育成胎盤等胚胎以外的結(jié)構(gòu)，而ES

細(xì)胞能夠誘導(dǎo)分化形成除胎盤外的其他細(xì)胞類型，四倍體胚胎與ES細(xì)胞的嵌合體則會(huì)使二者的發(fā)育潛能相互補(bǔ)償，可得到ES小鼠，所以嵌合體發(fā)育形成的ES小鼠基因型與供體ES細(xì)胞的基因型相同，D正確。故選D。3.下列有關(guān)發(fā)酵工程及其應(yīng)用表述正確的是（）A.通過發(fā)酵工程從微生物細(xì)胞中提取的單細(xì)胞蛋白，可制成微生物飼料B.微生物農(nóng)藥是利用微生物或其代謝物來防治病蟲害的C.選育的菌種可直接向發(fā)酵罐中接種從而進(jìn)行相關(guān)發(fā)酵D.分離、提純產(chǎn)物是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)〖答案〗B〖祥解〗發(fā)酵工程，是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種新技術(shù)。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種的選育、培養(yǎng)基的配制、滅菌、擴(kuò)大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過程和產(chǎn)品的分離提純等方面。【詳析】A、單細(xì)胞蛋白即微生物菌體，不需要從微生物細(xì)胞中提取，A錯(cuò)誤；B、微生物農(nóng)藥是利用微生物或其代謝物來防治病蟲害的，是生物防治的重要手段，B正確；C、選育的菌種通過擴(kuò)大培養(yǎng)后，再向發(fā)酵罐中接種從而進(jìn)行相關(guān)發(fā)酵，C錯(cuò)誤；D、發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)，D錯(cuò)誤。故選B。4.草莓營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，中國國內(nèi)優(yōu)良品種草莓栽培的品種很多。下圖為利用現(xiàn)代生物技術(shù)改良草莓品系的過程，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.過程Ⅱ可直接用聚乙二醇作為化學(xué)誘導(dǎo)劑來誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合B.過程Ⅰ的原理是基因重組，能定向改變生物的遺傳性狀C.利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，可以實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種D.雜種細(xì)胞A形成的標(biāo)志是再生出新的細(xì)胞壁〖答案〗A〖祥解〗過程Ⅰ是利用基因工程技術(shù)把胰島素基因?qū)刖G色草莓細(xì)胞，胰島素基因得到了表達(dá)，產(chǎn)生了產(chǎn)胰島素的草莓，定向改變了草莓的性狀。過程Ⅱ利用植物細(xì)胞融合技術(shù)獲得了具鳳梨味的綠草莓?！驹斘觥緼、在進(jìn)行體細(xì)胞雜交之前，必須先利用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的原生質(zhì)體，再用聚乙二醇作為化學(xué)誘導(dǎo)劑來誘導(dǎo)原生質(zhì)體的融合，A錯(cuò)誤；B、過程Ⅰ利用基因工程技術(shù)，其原理是基因重組，使導(dǎo)入了胰島素基因的草莓產(chǎn)生了胰島素，能定向改變生物的遺傳性狀，B正確；C、利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，可以實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種,C正確；D、雜種細(xì)胞A形成的標(biāo)志是再生出細(xì)胞壁，該過程涉及的細(xì)胞器主要是高爾基體，D正確。故選A。5.研究者從溫泉中篩選出能高效產(chǎn)生耐高溫淀粉酶的嗜熱細(xì)菌的過程如圖1所示。將得到的嗜熱細(xì)菌懸液轉(zhuǎn)接到特定固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用碘液作顯色處理，結(jié)果如圖2所示。下列敘述正確的是（）A.過程①②一般都取1ml.菌液轉(zhuǎn)移B.圖中的Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基應(yīng)在滅菌后將pH調(diào)至中性或弱堿性C.實(shí)驗(yàn)中所有的操作工具都必須采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌D.若操作正確，可從圖2中挑選周圍不顯藍(lán)色的菌落作為目標(biāo)菌種的純培養(yǎng)物〖答案〗D〖祥解〗選擇培養(yǎng)基是指一類根據(jù)特定微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某理化因素抗性的原理而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。具有只允許特定的微生物生長(zhǎng)，而同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)的功能?！驹斘觥緼、過程①為稀釋過程，一般都取1ml菌液轉(zhuǎn)移，過程②為稀釋涂布過程，一般取0.1ml菌液進(jìn)行涂布，A錯(cuò)誤；B、微生物培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)先調(diào)pH再滅菌，B錯(cuò)誤；C、實(shí)驗(yàn)使用的培養(yǎng)基應(yīng)采用高壓蒸汽滅菌，而培養(yǎng)皿等一般使用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌，C錯(cuò)誤；D、淀粉與碘液反應(yīng)呈藍(lán)色，且淀粉酶可將淀粉水解，實(shí)驗(yàn)的目的是要篩選出能高效產(chǎn)生耐高溫淀粉酶的嗜熱細(xì)菌，則可從圖2中挑選周圍不顯藍(lán)色的菌落作為目標(biāo)菌種的純培養(yǎng)物，D正確。故選D。6.植物細(xì)胞工程在農(nóng)業(yè)，醫(yī)藥工業(yè)等方面有著廣泛的應(yīng)用，相關(guān)敘述正確的是（）A.快速繁殖花卉過程中，可以改良植物的性狀B.利用花藥離體培養(yǎng)獲得玉米幼苗，直接從中選擇出具有優(yōu)良性狀的個(gè)體C.植物組織培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)的細(xì)胞容易受到培養(yǎng)條件和誘變因素的影響而產(chǎn)生突變D.植物頂端分生組織附近的病毒很少，甚至無病毒，因此人們?yōu)榱双@得抗病毒苗常常利用莖尖進(jìn)行植物組織培養(yǎng)〖答案〗C【詳析】A、植物的快速繁殖技術(shù)是指用于快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術(shù)，它可以保持植物的遺傳特性，不可以改良植物的性狀A(yù)錯(cuò)誤；B、利用花藥離體培養(yǎng)可獲得玉米幼苗的單倍體，再經(jīng)過誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍后，再直接從中選擇出具有優(yōu)良性狀的個(gè)體，這樣能夠極大的縮短育種年限，B錯(cuò)誤；C、在植物的組織培養(yǎng)過程中，由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷增殖的狀態(tài)，因此易受培養(yǎng)條件和誘變因素(如射線、化學(xué)物質(zhì)等)的影響而產(chǎn)生突變，C正確；D、植物頂端分生區(qū)附近（如莖尖）的病毒極少，甚至無病毒，因此，切取一定大小的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗，用這種方法獲得的植株不抗病毒，D錯(cuò)誤。故選C7.實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程如圖所示。下列敘述正確的是（）A.圖中丙和丁分別表示的是原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)，其培養(yǎng)原理不同B.傳代培養(yǎng)時(shí)，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞直接用離心法收集，無須再用酶處理C.體外培養(yǎng)的細(xì)胞既能貼壁生長(zhǎng)又能懸浮生長(zhǎng)，都會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在95%的氧氣和5%的CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的CO?用于維持pH〖答案〗B〖祥解〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物器官、組織。將材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用膠原蛋白酶）處理（消化），形成分散的單個(gè)細(xì)胞，將處理后的細(xì)胞移入培養(yǎng)基中配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液。懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到互相接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，出現(xiàn)接觸抑制。此時(shí)需要將出現(xiàn)接觸抑制的細(xì)胞重新使用胰蛋白酶處理。再配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液?！驹斘觥緼、丙培養(yǎng)細(xì)胞1是原代培養(yǎng)，該過程是獲得組織細(xì)胞中進(jìn)行的初次培養(yǎng)，丁培養(yǎng)細(xì)胞2是傳代培養(yǎng)，該過程是將分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)稱傳代培養(yǎng)，二者培養(yǎng)原理相同，都為細(xì)胞的增殖，A錯(cuò)誤；B、傳代培養(yǎng)時(shí)，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞沒有出現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)的現(xiàn)象，因而可以直接用離心法收集，無須再用酶處理，B正確；C、、體外培養(yǎng)的細(xì)胞既能貼壁生長(zhǎng)又能懸浮生長(zhǎng)，能貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞不會(huì)，C錯(cuò)誤；D、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在95%的空氣不是氧氣和5%的CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的CO?用于維持培養(yǎng)液的pH，D錯(cuò)誤。故選B。8.為探究矮牽牛原生質(zhì)體的培養(yǎng)條件和植株再生能力，某研究小組的實(shí)驗(yàn)過程如下圖。下列敘述正確的是（）A.過程①獲得的原生質(zhì)體是由細(xì)胞膜、液泡膜以及這兩層膜之間的細(xì)胞質(zhì)組成B.獲取的原生質(zhì)體不宜懸浮在低滲溶液中，以防止其吸水漲破C.過程②需提高生長(zhǎng)素的比例以促進(jìn)芽的分化D.過程③需用秋水仙素處理誘導(dǎo)細(xì)胞壁再生〖答案〗B〖祥解〗由圖可知，①表示用纖維素酶和果膠酶處理得到原生質(zhì)體的過程；②③均表示再分化過程?！驹斘觥緼、原生質(zhì)層是由細(xì)胞膜、液泡膜以及這兩層膜之間的細(xì)胞質(zhì)組成，A錯(cuò)誤；B、獲取的原生質(zhì)體不宜懸浮在低滲溶液中，以防止其吸水漲破，B正確；C、②誘導(dǎo)芽分化時(shí)，需要提高細(xì)胞分裂素的比例，C錯(cuò)誤；D、③可以表示誘導(dǎo)根的分化形成幼苗，此時(shí)細(xì)胞壁已經(jīng)形成，不需要使用秋水仙素，D錯(cuò)誤。故選B。9.多種方法獲得的早期胚胎，均需移植給受體才能獲得后代。下圖列舉了幾項(xiàng)技術(shù)成果。據(jù)此分析，下列相關(guān)敘述正確的是（）A.胚胎移植前可取內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的細(xì)胞鑒定性別B.①過程得到的試管動(dòng)物與供體母本性狀相同C.③可通過②技術(shù)實(shí)現(xiàn)擴(kuò)大化生產(chǎn)，①②可通過③技術(shù)實(shí)現(xiàn)性狀改良D.②過程將牛的體細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞中，培育獲得克隆動(dòng)物是一種培育新物種的方式〖答案〗C【詳析】A、胚胎移植前可取滋養(yǎng)層的細(xì)胞鑒定性別，A錯(cuò)誤；B、①過程得到的試管動(dòng)物性狀是由提供卵子的供體母本和提供精子的父本共同決定的，B錯(cuò)誤；C、克隆技術(shù)可得到大量同種個(gè)體，所以③轉(zhuǎn)基因動(dòng)物可通過②克隆動(dòng)物技術(shù)實(shí)現(xiàn)擴(kuò)大化生產(chǎn)，轉(zhuǎn)基因技術(shù)可導(dǎo)入外源優(yōu)良基因，所以①②可通過③轉(zhuǎn)基因技術(shù)實(shí)現(xiàn)性狀改良，C正確；D、過程②是克隆技術(shù)，將牛的體細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞中，培育獲得克隆動(dòng)物遺傳物質(zhì)基本與供體牛基本相同，進(jìn)而得到大量同種個(gè)體，所以沒有培育新物種，D錯(cuò)誤。故選C。10.乳腺癌、胃癌細(xì)胞表面有大量的HER2蛋白，T細(xì)胞表面有CD3蛋白和CD28蛋白。研究人員將上述三種蛋白作為抗原分別制備單克隆抗體，然后將其在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)制備得到三特異性抗體，簡(jiǎn)稱三抗(如下圖)，下列敘述正確的是（）A.同時(shí)注射3種抗原蛋白，可刺激B細(xì)胞增殖分化為分泌三抗的漿細(xì)胞B.利用抗原一抗體雜交的原理篩選圖示三抗時(shí)需要3種相應(yīng)抗原蛋白C.該抗體的基本組成單位是氨基酸，其功能與分子的空間結(jié)構(gòu)無關(guān)D.用單克隆抗體技術(shù)制備的三種抗體直接融合可得到三特異性抗體〖答案〗B〖祥解〗單克隆抗體的制備過程：①給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，然后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；②誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合；③利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；④進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；⑤用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選出來的雜交瘤細(xì)胞或?qū)⑵渥⑷胄∈蟾骨恢信囵B(yǎng)，最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。【詳析】A、同時(shí)注射3種抗原會(huì)刺激B細(xì)胞分化形成不同的漿細(xì)胞，進(jìn)而產(chǎn)生三種抗體，但一種漿細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體，并不能產(chǎn)生三抗，A錯(cuò)誤；B、由于抗體具有特異性，所以利用抗原—抗體雜交的原理篩選圖示三抗時(shí)需要3種相應(yīng)抗原蛋白，B正確；C、抗體的本質(zhì)是蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)的基本組成單位是氨基酸，蛋白質(zhì)的功能與分子的空間結(jié)構(gòu)密切相關(guān)，C錯(cuò)誤；D、三特異性抗體指的是一種抗體，通過蛋白質(zhì)工程構(gòu)建三特異性抗體的基因表達(dá)載體，然后獲得相應(yīng)的雜交瘤細(xì)胞，最終獲得三特異性抗體，不是三種單抗融合而成，D錯(cuò)誤。故選B。11.不對(duì)稱PCR是利用不等量的一對(duì)引物來產(chǎn)生大量單鏈DNA(ssDNA)的方法。加入的一對(duì)引物中含量較少的被稱為限制性引物，含量較多的被稱為非限制性引物。PCR反應(yīng)的最初的若干次循環(huán)中，其擴(kuò)增產(chǎn)物主要是雙鏈DNA(dsDNA)，但當(dāng)限制性引物消耗完后，就會(huì)產(chǎn)生大量的ssDNA。不對(duì)稱PCR的過程如下圖所示。假設(shè)模板DNA分子初始數(shù)量為a個(gè)，6次循環(huán)后開始擴(kuò)增產(chǎn)ssDNA。下列敘述正確的是（）A.該不對(duì)稱PCR過程中需要.26a個(gè)限制性引物B.兩種引物與模板鏈結(jié)合時(shí)，需將溫度控制在72℃左右C.據(jù)圖可知，最后大量獲得的ssDNA與圖中甲鏈的堿基序列相同D.上述過程中子鏈分別沿限制性引物的5'端、非限制性引物的3'端延伸〖答案〗C〖祥解〗PCR原理：在解旋酶作用下，打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端向3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈?！驹斘觥緼、PCR擴(kuò)增時(shí)引物是新子鏈的一部分，假設(shè)模板DNA分子初始數(shù)量為a個(gè)，6次循環(huán)后產(chǎn)生a.26個(gè)DNA分子，因此該不對(duì)稱PCR過程中需要（26-1）a個(gè)限制性引物，A錯(cuò)誤；B、當(dāng)將溫度降至50℃左右時(shí)，兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對(duì)原則與模板鏈結(jié)合，B錯(cuò)誤；C、非限制性引物是與乙鏈結(jié)合，所以最后大量獲得的ssDNA與圖中甲鏈的堿基序列一致，C正確；D、擴(kuò)增時(shí)耐高溫DNA聚合酶將4種脫氧核苷酸連接至引物的3'端，D錯(cuò)誤。故選C。12.某細(xì)菌DNA分子上有4個(gè)Sau3AI的酶切位點(diǎn)，經(jīng)Sau3AI處理后會(huì)形成4個(gè)大小不同的DNA片段。若是用BamHI處理，則只會(huì)形成2個(gè)大小不同的DNA片段。Sau3AI和BamHI的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如表所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）限制酶名稱識(shí)別序列及切割位點(diǎn)BamHIG↓GATCCSau3AI↓GATCA.若用兩種酶共同處理，會(huì)形成6個(gè)大小不同的DNA片段B.上述兩種限制酶切割后可形成相同的黏性末端C.該DNA分子上有兩個(gè)BamH1的酶切位點(diǎn)D.該細(xì)菌DNA分子是環(huán)狀的〖答案〗A〖祥解〗限制酶主要從原核生物中分離純化出來。特異性：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種?！驹斘觥緼、分析題干信息知該DNA分子上有4個(gè)Sau3AI的酶切位點(diǎn)，有2個(gè)BamHI的酶切位點(diǎn)，但是BamHI識(shí)別序列中包含Sau3AI的識(shí)別序列，所以同時(shí)用兩種酶共同處理，不會(huì)形成6個(gè)大小不同的DNA片段，A錯(cuò)誤；B、BamHI和Sau3AI兩種限制酶切割后形成的黏性末端均為GATC，B正確；C、該DNA分子上有4個(gè)Sau3AI的酶切位點(diǎn)，經(jīng)Sau3AI處理后形成4個(gè)DNA片段，可知該DNA分子為環(huán)狀DNA，用BamHI處理后，得到2個(gè)DNA片段，說明該DNA分子上有兩個(gè)BamHI的酶切位點(diǎn)，C正確；D、該DNA分子上有4個(gè)Sau3AI的酶切位點(diǎn)，經(jīng)Sau3AI處理后形成4個(gè)DNA片段，可知該DNA分子為環(huán)狀DNA，D正確。故選A。13.某同學(xué)利用洋蔥為實(shí)驗(yàn)材料，進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.該同學(xué)也可選擇雞血、豬肝等動(dòng)物細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料提取DNA，但方法可能有所不同B.向含有DNA的粗提取液中加入體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精后，出現(xiàn)的白色絲狀物為DNAC.鑒定DNA時(shí)需先將DNA溶解在2mol/LNaCl溶液，再加入二苯胺試劑并進(jìn)行沸水浴加熱D.將洋蔥切碎加研磨液研磨、過濾后，濾液放置4℃冰箱中靜置幾分鐘后，DNA存在于沉淀物中〖答案〗D【詳析】A、不同類型的生物材料(如植物細(xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞、微生物)中DNA的提取過程雖有相似之處，但也存在差異。例如，使用動(dòng)物血液作為實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，通常利用紅細(xì)胞破裂釋放出的DNA進(jìn)行提取，而不需要研磨和去除細(xì)胞壁的過程，A正確；B、在DNA提取過程中，當(dāng)加入高濃度酒精后，DNA會(huì)因不溶于酒精而析出，形成白色的絮狀或絲狀沉淀，這就是粗提取得到的DNA，B正確；C、鑒定DNA時(shí)，常用的方法之一就是二苯胺顯色反應(yīng)。需要將DNA樣品溶解在適當(dāng)?shù)腘aCl溶液中，然后加入二苯胺試劑，在沸水中加熱后，若存在DNA，則反應(yīng)液會(huì)變?yōu)樗{(lán)色，C正確；D、在DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中，通常首先通過研磨和加入適量的洗滌劑與食鹽溶液來釋放細(xì)胞中的DNA，并破壞細(xì)胞膜和其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)。然后，在此混合液中DNA會(huì)溶解在溶液中，并隨同蛋白質(zhì)、多糖等其他物質(zhì)一起存在。DNA在一定濃度的NaCl溶液中溶解度較高，所以初步處理后的濾液經(jīng)過離心或靜置后，DNA不會(huì)形成沉淀，而是在溶液中，D錯(cuò)誤。故選D。14.如圖表示培育轉(zhuǎn)基因抗病毒農(nóng)作物的過程圖，下列有關(guān)敘述正確的是（）A.a過程中目的基因需要插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA中B.實(shí)驗(yàn)用的Ti質(zhì)粒中通常至少含有一個(gè)抗生素合成基因C.我國科學(xué)家將Bt基因?qū)朊藁?xì)胞采用了農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法D.抗病毒基因一旦導(dǎo)入農(nóng)作物細(xì)胞中，就能獲得抗病毒農(nóng)作物〖答案〗A〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定?！驹斘觥緼、a過程構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，需要將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA分子中，否則農(nóng)桿菌將不能把目的基因轉(zhuǎn)移至農(nóng)作物的染色體上，A正確；B、基因工程中常用抗生素抗性基因作為標(biāo)記基因來篩選含有目的基因的受體細(xì)胞，因此重組質(zhì)粒中通常要至少保留一個(gè)標(biāo)記基因，B錯(cuò)誤；C、我國科學(xué)家將Bt基因?qū)朊藁?xì)胞采用了花粉管通道法，C錯(cuò)誤；D、抗病毒基因即使導(dǎo)入農(nóng)作物細(xì)胞中，也不一定能獲得抗病毒植株，還需要經(jīng)過多次檢測(cè)和篩選才行，D錯(cuò)誤。故選A。15.常規(guī)PCR只能擴(kuò)增兩引物間的DNA區(qū)段，要擴(kuò)增已知DNA序列兩側(cè)的未知DNA序列，可用反向PCR技術(shù)。反向PCR技術(shù)擴(kuò)增的原理如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.酶切階段，L中不能含有酶切時(shí)所選限制酶的識(shí)別序列B.環(huán)化階段，可選用E.coliDNA連接酶或T4DNA連接酶C.圖中引物，應(yīng)選擇引物1和引物4，且二者間不能互補(bǔ)配對(duì)D.PCR擴(kuò)增，每輪循環(huán)前應(yīng)加入限制酶將環(huán)狀DNA切割成線狀〖答案〗D〖祥解〗PCR只能擴(kuò)增兩端序列已知的基因片段，反向PCR可擴(kuò)增中間一段已知序列，而兩端序列未知的基因片段。酶切時(shí)用限制性內(nèi)切酶，環(huán)化時(shí)用DNA鏈接酶，再用引物和DNA聚合酶擴(kuò)增。在環(huán)化后，通過一對(duì)方向相反的引物實(shí)現(xiàn)已知序列兩側(cè)基因序列的擴(kuò)增。【詳析】A、在酶切階段，已知序列L中不能含有酶切時(shí)所選限制酶的識(shí)別序列，不然會(huì)將已知序列L切斷，造成序列識(shí)別混亂，A正確；B、T4DNA連接酶或E.coliDNA連接酶都可以用來連接黏性末端，因此環(huán)化階段，可選用E.coliDNA連接酶或T4DNA連接酶，B正確；C、PCR過程需要兩種引物，能分別與目的基因兩條鏈的3'端通過堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合，為保證延伸的是已知序列兩側(cè)的未知序列，應(yīng)該選擇引物1和引物4，且二者間不能互補(bǔ)配對(duì)，C正確；D、質(zhì)粒上目的基因擴(kuò)增不受模板環(huán)狀形態(tài)干擾，不需要添加限制酶就可以擴(kuò)增出所需片段，D錯(cuò)誤。故選D。16.基因工程自20世紀(jì)70年代興起后，在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等方面得到了飛速的發(fā)展。下列關(guān)于基因工程應(yīng)用的敘述正確的是（）A.通過X射線、紫外線綜合處理，將青霉素產(chǎn)量低的菌種培育成產(chǎn)量高的菌株屬于基因工程技術(shù)的應(yīng)用B.通過將腸乳糖酶導(dǎo)入到奶牛乳腺細(xì)胞中，以降低乳汁中乳糖含量，從而解決部分人群的乳糖不耐受問題C.與人細(xì)胞分泌的天然生長(zhǎng)激素相比，將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)氪竽c桿菌制備的工程菌無法對(duì)生長(zhǎng)激素進(jìn)行正常的加工和修飾D.通過制備山羊膀胱生物反應(yīng)器，使人乳鐵蛋白基因只存在于膀胱細(xì)胞中，進(jìn)而可以從尿液中分離純化出所需要的人乳鐵白蛋白，實(shí)現(xiàn)大量制備的目的〖答案〗C〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳析】A、通過X射線、紫外線綜合處理，將青霉素產(chǎn)量低的菌種培育成產(chǎn)量高的菌株屬于誘變育種，A錯(cuò)誤；B、乳糖酶可降解乳糖，可降低乳汁中乳糖含量，科學(xué)家是通過將腸乳糖酶基因?qū)氲侥膛Ｈ橄偌?xì)胞中，而不是乳糖酶，B錯(cuò)誤；C、由于大腸桿菌缺乏對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行加工和分裝的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，因此與人細(xì)胞分泌的天然生長(zhǎng)激素相比，將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)氪竽c桿菌制備的工程菌無法對(duì)生長(zhǎng)激素進(jìn)行正常的加工和修飾，C正確；D、作為膀胱生物反應(yīng)器的山羊體內(nèi)所有細(xì)胞都含有目的基因，但是只有在于膀胱細(xì)胞中才能表達(dá)目的基因，D錯(cuò)誤。故選C。17.已知生物體內(nèi)有一種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Y，如果將蛋白Y中某一個(gè)氨基酸替換，改變后的蛋白質(zhì)Y1不但保留了蛋白Y原有的功能，而且具備了酶的催化功能。下列敘述正確的是（）A.蛋白質(zhì)工程和基因工程的根本區(qū)別是操作對(duì)象的差異B.可以通過對(duì)Y蛋白基因改造或人工合成獲得Y1蛋白基因C.蛋白質(zhì)工程在設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)時(shí)的依據(jù)是現(xiàn)有基因的脫氧核苷酸序列D.蛋白質(zhì)工程與中心法則的信息流動(dòng)方向一致，即DNA→mRNA→蛋白質(zhì)〖答案〗B〖祥解〗蛋白質(zhì)工程概念及基本原理（1）蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)）。（2）蛋白質(zhì)工程崛起的緣由：基因工程只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)。（3）蛋白質(zhì)工程的基本原理：它可以根據(jù)人的需求來設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，又稱為第二代的基因工程。（4）基本途徑：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有氨基酸序列→找到對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因），最終還是回到基因工程上來解決蛋白質(zhì)的合成?！驹斘觥緼、蛋白質(zhì)工程和基因工程的根本區(qū)別是蛋白質(zhì)工程可制造出自然界沒有的蛋白質(zhì)，A錯(cuò)誤；B、蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，因此可以通過對(duì)Y蛋白基因改造或人工合成獲得Y1蛋白基因，B正確；C、蛋白質(zhì)工程在設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)時(shí)的依據(jù)是人類的意愿，C錯(cuò)誤；D、蛋白質(zhì)工程與中心法則的信息流動(dòng)方向相反，D錯(cuò)誤。故選B。18.生物技術(shù)的安全性與倫理性一直是人類關(guān)注和討論的熱點(diǎn)問題。下列敘述正確的是（）A.治療性克隆是無性生殖，生殖性克隆是有性生殖B.只要有證據(jù)表明產(chǎn)品有害，就應(yīng)該禁止轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用C.基因編輯技術(shù)可用于疾病預(yù)防領(lǐng)域研究，但不能用于設(shè)計(jì)完美嬰兒D.生殖性克隆人理論上能豐富人類基因的多樣性，可在特定人群中進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)〖答案〗C【詳析】A、治療性克隆和生殖性克隆都是基于核移植的無性生殖，A錯(cuò)誤；B、轉(zhuǎn)基因作為一項(xiàng)技術(shù)本身是中性的，有證據(jù)表明產(chǎn)品有害，就應(yīng)該禁止該產(chǎn)品的應(yīng)用，而不是禁止轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用，B錯(cuò)誤；C、基因編輯技術(shù)可用于疾病預(yù)防領(lǐng)域研究，但若設(shè)計(jì)完美試管嬰兒，已經(jīng)涉及到新生命的誕生，會(huì)造成生物技術(shù)安全與倫理問題，所以不能用于設(shè)計(jì)完美嬰兒，C正確；D、克隆為無性繁殖，可見生殖性克隆人不能豐富人類基因的多樣性，我國禁止生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)，D錯(cuò)誤。故選C。二、非選擇題：本題共4小題，共64分。19.某些老陳醋會(huì)出現(xiàn)產(chǎn)氣現(xiàn)象，原因是老陳醋中含有產(chǎn)氣細(xì)菌。產(chǎn)氣細(xì)菌是一類能產(chǎn)生過氧化氫酶的細(xì)菌，產(chǎn)氣菌產(chǎn)生的氣體積累會(huì)引起脹瓶，影響產(chǎn)品安全。實(shí)驗(yàn)小組以瓶裝變質(zhì)老陳醋(脹瓶)、未變質(zhì)老陳醋為實(shí)驗(yàn)材料，篩選出導(dǎo)致老陳醋產(chǎn)氣的細(xì)菌?；卮鹣铝袉栴}：（1）為了篩選產(chǎn)氣細(xì)菌，實(shí)驗(yàn)人員設(shè)置了甲、乙、丙三組培養(yǎng)基，甲作為空白對(duì)照組，乙接種未變質(zhì)的老陳醋，丙接種_________。闡述如何從上述培養(yǎng)基中初步篩選疑似產(chǎn)氣細(xì)菌的菌株：_____________。（2）實(shí)驗(yàn)小組初步篩選出了A1、A2和A3三株疑似的產(chǎn)氣細(xì)菌，篩選過程如下圖所示。①過程a的接種方法是______________。如需統(tǒng)計(jì)菌落的數(shù)目，最好選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，以防止培養(yǎng)時(shí)間不足導(dǎo)致______________，或培養(yǎng)時(shí)間太長(zhǎng)導(dǎo)致_____________。②現(xiàn)有5%的過氧化氫溶液，A1、A2和A3菌株，必要的培養(yǎng)基等實(shí)驗(yàn)器材。寫出判斷A1、A2和A3三種菌株是否為產(chǎn)氣細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)思路：_____________。（3）分別用三組平板培養(yǎng)A1、A2、A3三種菌株，然后在培養(yǎng)基上分別加入等量一定濃度的青霉素溶液，培養(yǎng)一段時(shí)間后可以觀察到一圈清晰區(qū)(抑菌圈)。測(cè)量清晰區(qū)的直徑，數(shù)據(jù)如下表：細(xì)菌不同濃度青霉素條件下清晰區(qū)直徑/mm5/(μg·mL?1)7.5/(μg·mL?1)10/(μg·mL?1)15/(μg·mL?1)20/(μg·mL?1)A10.2281317A2710121516A356566該實(shí)驗(yàn)的目的是_____________。從表中數(shù)據(jù)可以看出，不同濃度青霉素對(duì)A1菌株的影響是_____________.〖答案〗（1）①.等量的變質(zhì)老陳醋②.對(duì)比乙和丙培養(yǎng)基上的菌落特征，從丙培養(yǎng)基上分離出和乙培養(yǎng)基形態(tài)不同的菌落（2）①.稀釋涂布平板法②.遺漏菌落的種類和數(shù)目③.菌落粘連影響計(jì)數(shù)④.將A1、A2和A3菌株分別接種到滴有5%的過氧化氫溶液的培養(yǎng)基上，若產(chǎn)生氣泡則為產(chǎn)氣細(xì)菌（3）①.探究不同濃度青霉素對(duì)A1、A2、A3菌株的抑制作用②.在一定范圍內(nèi)，隨著青霉素濃度的增加，對(duì)A1的抑菌效果越來越好〖祥解〗題中用瓶裝變質(zhì)老陳醋（脹瓶）、未變質(zhì)老陳醋為實(shí)驗(yàn)材料，經(jīng)過分離、純化、并初步篩選出A1、A2和A3三株疑似的產(chǎn)氣細(xì)菌，進(jìn)一步探究了不同濃度青霉素對(duì)A1、A2、A3菌株的抑制作用，表中數(shù)據(jù)所示的清晰區(qū)直徑（抑菌圈）越大，代表該菌種生長(zhǎng)受到的抑制作用越強(qiáng)?！拘?詳析】為了篩選產(chǎn)氣細(xì)菌，實(shí)驗(yàn)人員設(shè)置了甲、乙、丙三組培養(yǎng)基，甲作為空白對(duì)照組，乙接種未變質(zhì)的老陳醋，丙接種等量的變質(zhì)老陳醋，對(duì)比乙和丙培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)，從丙培養(yǎng)基上分離出和乙培養(yǎng)基形態(tài)不同的菌落，可以從上述培養(yǎng)基中初步篩選疑似產(chǎn)氣細(xì)菌的菌株?！拘?詳析】過程a所得待測(cè)培養(yǎng)基中菌落的分布較為均勻，據(jù)此判斷，該過程所采用的接種方法為稀釋涂布平板法。統(tǒng)計(jì)菌落種類和數(shù)量時(shí)要每隔24h觀察統(tǒng)計(jì)一次，直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定，能有效防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的種類和數(shù)目；或培養(yǎng)時(shí)間太長(zhǎng)導(dǎo)致菌落粘連影響計(jì)數(shù)、培養(yǎng)基表面干燥脫水影響菌落數(shù)目的統(tǒng)計(jì)。因?yàn)槔详惔字械漠a(chǎn)氣細(xì)菌是一類能產(chǎn)生過氧化氫酶的細(xì)菌，若有5%的過氧化氫溶液，A1、A2和A3菌株，必要的培養(yǎng)基等實(shí)驗(yàn)器材，可以將A1、A2和A3菌株分別接種到滴有5%的過氧化氫溶液的培養(yǎng)基上，觀察是否產(chǎn)生氣泡，若產(chǎn)生氣泡則為產(chǎn)氣細(xì)菌。【小問3詳析】根據(jù)題意和表格信息分析可知，該實(shí)驗(yàn)的目的是探究不同濃度青霉素對(duì)A1、A2、A3菌株的抑制作用。從表中數(shù)據(jù)可以看出，在一定范圍內(nèi)，隨著青霉素濃度的增加，對(duì)A1的抑菌效果越來越好。20.甘草酸(GA)是甘草地下部分的一種重要生理活性物質(zhì)，具有阻止病毒復(fù)制、恢復(fù)免疫力、抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)等功效。傳統(tǒng)的GA一直依賴于植物提取，屬于資源依賴型產(chǎn)品。科研人員一直在探索借助生物工程技術(shù)生產(chǎn)GA，以解決甘草酸及其他稀缺天然產(chǎn)物獲取過程中存在的資源短缺等問題。（1）甘草酸由于其在植物細(xì)胞中含量低，栽培甘草質(zhì)量差異較大，科研人員可通過細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，以獲得_____________(初生代謝物/次生代謝物)，主要應(yīng)用的技術(shù)是_____________，來獲得大量甘草細(xì)胞，用于誘導(dǎo)和提取甘草酸。（2）在明確甘草酸的生物合成途徑和其中幾種關(guān)鍵酶后，科研人員嘗試借助基因工程和發(fā)酵工程，開發(fā)了酵母細(xì)胞工廠合成甘草酸的途徑。具體如下：Ⅰ構(gòu)建基因表達(dá)載體。科研人員獲取幾種關(guān)鍵酶基因，借助PCR技術(shù)大量擴(kuò)增后，為使其在受體細(xì)胞中高效表達(dá)，要將獲得的目的基因插入______________和_____________之間，構(gòu)建出基因表達(dá)載體。Ⅱ?qū)⒛康幕驅(qū)胧荏w細(xì)胞。將基因表達(dá)載體導(dǎo)入感受態(tài)的酵母菌細(xì)胞中。Ⅲ為了快速檢測(cè)甘草酸，科研人員利用細(xì)胞工程技術(shù)制備了抗甘草酸的單克隆抗體，其基本操作過程如圖所示。圖中給小鼠注射甘草酸一牛血清白蛋白結(jié)合抗原的目的是______________；相較于植物細(xì)胞融合，促進(jìn)過程②特有的方法是_____________來誘導(dǎo)細(xì)胞甲和骨髓瘤細(xì)胞的融合。進(jìn)行過程③的篩選后，得到雜交瘤細(xì)胞。④過程的目的是______________。制備的單克隆抗體檢測(cè)GA所利用的技術(shù)是______________.〖答案〗（1）①.次生代謝物②.植物細(xì)胞培養(yǎng)（2）①.啟動(dòng)子②.終止子③.對(duì)小鼠進(jìn)行免疫處理，得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞④.滅活病毒誘導(dǎo)法⑤.通過抗體檢測(cè)呈陽性來獲得分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞⑥.抗原-抗體雜交技術(shù)〖祥解〗題圖分析：圖示為利用細(xì)胞工程技術(shù)制備了抗甘草酸的單克隆抗體過程，其中①為對(duì)小鼠進(jìn)行免疫處理，②是誘導(dǎo)細(xì)胞甲與骨髓瘤細(xì)胞融合，③是篩選得到細(xì)胞丙，④對(duì)的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培育和抗體檢測(cè)，⑤對(duì)細(xì)胞丁進(jìn)行體內(nèi)或體外培養(yǎng)?！拘?詳析】植物代謝會(huì)產(chǎn)生一些一般認(rèn)為不是植物基本生命活動(dòng)所必需的產(chǎn)物稱為次生代謝產(chǎn)物，甘草酸屬于次生代謝產(chǎn)物；細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，主要應(yīng)用的技術(shù)是植物細(xì)胞培養(yǎng)，是指在離體條件下對(duì)單個(gè)植物細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)使其增殖技術(shù)。【小問2詳析】Ⅰ、啟動(dòng)子是一段特殊序列的DNA片段，位于基因上游，緊挨轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)，是RNA聚合酶結(jié)合和識(shí)別的部位，有了它才能驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄；終止子也是一段特殊序列的DNA片段，位于基因下游，使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停下來；故構(gòu)建基因表達(dá)載體應(yīng)將獲得的目的基因插入到啟動(dòng)子和終止子之間。Ⅲ、圖中給小鼠注射甘草酸一牛血清白蛋白結(jié)合抗原的目的是對(duì)小鼠進(jìn)行免疫處理，得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞。圖中過程②是誘導(dǎo)細(xì)胞甲和骨髓瘤細(xì)胞融合的過程，該過程使用特有的方法是滅活病毒誘導(dǎo)法，是動(dòng)物細(xì)胞特有的誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法。然后在HAT培養(yǎng)基上進(jìn)行過程③的第一次篩選后，得到細(xì)胞丙是雜交瘤細(xì)胞。然后再進(jìn)行第二次篩選即④過程，過程④代表對(duì)上述培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)過多次篩選獲得細(xì)胞丁，目的是通過抗體檢測(cè)呈陽性來獲得分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞；制備的單克隆抗體檢測(cè)GA甘草酸所利用的技術(shù)是抗原-抗體雜交技術(shù)。21.中國科學(xué)家在國際上首次成功構(gòu)建了高比例胚胎干細(xì)胞貢獻(xiàn)的活嵌合體猴(將食蟹猴的胚胎干細(xì)胞注入到受體胚胎后發(fā)育而成)，這對(duì)于理解靈長(zhǎng)類胚胎干細(xì)胞全能性具有重要意義，為遺傳修飾模型猴的構(gòu)建奠定了技術(shù)基礎(chǔ)。其技術(shù)路線如下圖所示：注：胚胎干細(xì)胞是指食蟹猴胚胎干細(xì)胞，具有較高的多能性。（1）科學(xué)家將綠色熒光基因(GFP)導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，用于檢測(cè)胚胎干細(xì)胞在胚胎和個(gè)體中的分布。嵌合體猴體內(nèi)綠色熒光散亂分布的原因是______________.（2）可用囊胚的_____________部分的細(xì)胞做DNA分析，進(jìn)行性別鑒定。嵌合體猴體中體細(xì)胞的基因型_____________(填“相同”或“不同”)。（3）嵌合體猴胚胎的培育涉及到了胚胎移植技術(shù)。此技術(shù)對(duì)代孕受體的要求是_____________。若想進(jìn)一步提高胚胎的利用率，可采用_____________技術(shù)。（4）科學(xué)家還利用胚胎干細(xì)胞的細(xì)胞核進(jìn)行了核移植實(shí)驗(yàn)得到克隆猴，并分別對(duì)克隆猴、卵細(xì)胞供體猴、代孕母猴和干細(xì)胞供體猴的線粒體DNA中某一特異性序列進(jìn)行了檢測(cè)、比對(duì)。分析可知，克隆猴的線粒體DNA特異性序列與______________一致，原因是______________.〖答案〗（1）注入的胚胎干細(xì)胞與桑葚胚細(xì)胞嵌合發(fā)育為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞，共同發(fā)育為幼猴的各種組織（2）①.滋養(yǎng)層②.不同（3）①.同種的、生理狀態(tài)相同的雌性動(dòng)物②.胚胎分割（4）①.卵細(xì)胞供體猴②.克隆猴的線粒體DNA來源于卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，與代孕母體猴和干細(xì)胞供體猴無關(guān)〖祥解〗干細(xì)胞在形態(tài)上：體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性。干細(xì)胞按分化潛能可分為全能干細(xì)胞（如胚胎干細(xì)胞可以分化形成所有的成體組織細(xì)胞，甚至發(fā)育成為完整的個(gè)體）、多能干細(xì)胞（具有多向分化的潛能，可以分化形成除自身組織細(xì)胞外的其他組織細(xì)胞，如造血干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞、皮膚干細(xì)胞等）和專能干細(xì)胞（維持某一特定組織細(xì)胞的自我更新，如腸上皮干細(xì)胞）三種類型。【小問1詳析】綠色熒光基因(GFP)導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，胚胎干細(xì)胞與桑葚胚細(xì)胞嵌合發(fā)育為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞，進(jìn)而共同發(fā)育為幼猴的各種組織，故嵌合體猴體內(nèi)綠色熒光散亂分布?！拘?詳析】可用囊胚的滋養(yǎng)層的細(xì)胞進(jìn)行性別鑒定，根據(jù)綠色熒光散亂分布判斷嵌合體猴體中體細(xì)胞的基因型不同?！拘?詳析】胚胎移植是將胚胎移入同種的、生理狀態(tài)相同的雌性動(dòng)物，通過胚胎分割可以提高胚胎的利用率。【小問4詳析】分析圖示可知，克隆猴的線粒體DNA特異性序列與卵細(xì)胞供體猴一致，并且不同于代孕母體猴和干細(xì)胞供體猴?？寺『锏木€粒體DNA來源于卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，與代孕母體猴和干細(xì)胞供體猴無關(guān)。22.科研團(tuán)隊(duì)通過轉(zhuǎn)基因獲得了一種大腸桿菌工程菌，成為監(jiān)測(cè)殘留在生物組織或環(huán)境中的四環(huán)素水平的“報(bào)警器”，其監(jiān)測(cè)原理如圖1所示，天然大腸桿菌不具備圖1中所示基因。（1）在上述研究中，需導(dǎo)入天然大腸桿菌的目的基因有______________。(選填序號(hào))①四環(huán)素合成相關(guān)基因②GFP基因③TetR基因④RNA聚合酶基因（2）據(jù)圖1，環(huán)境中四環(huán)素水平越高，該種大腸桿菌工程菌的熒光______________(選填“增強(qiáng)”“減弱”“不變”)。試概述該種四環(huán)素檢測(cè)方法的原理：_________________。（3）圖2是2個(gè)DNA片段、質(zhì)粒及其上的限制性內(nèi)切核酸酶的識(shí)別序列的分布情況；其中質(zhì)粒上的代表青霉素抗性基因。表為相關(guān)限制性內(nèi)切核酸酶的識(shí)別序列與切割位點(diǎn)。限制酶EcoRIXbaISpeIBamHI識(shí)別序列及切割位點(diǎn)5'…G↓AATTC…3'3'…CTTAA↑G…5'5'…T↓CTAGA…3'3'…AGATC↑T…5'5'…A↓CTAGT…3'3'…TGATC↑A…5'5'…G↓GATCC…3'3'…CCTAG↑G…5'若要拼接DNA片段1和2，結(jié)合圖2和上表中信息，在特定工具酶作用下能成功拼接的位點(diǎn)處堿基序列為____________或_______________。（4）研究人員設(shè)計(jì)了一個(gè)同時(shí)含DNA片段1和2的重組質(zhì)粒的拼接方案，結(jié)合圖表信息，你認(rèn)為最終建構(gòu)成功的重組質(zhì)粒示意圖最合理的是______________。（5）為了確定組質(zhì)粒和大腸桿菌工程菌建構(gòu)成功，可用PCR技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，PCR完成以后常采用_____________來鑒定PCR的產(chǎn)物。也可通過觀察四環(huán)素濃度變化是否能引起大腸桿菌工程菌熒光強(qiáng)度的相應(yīng)改變來進(jìn)行鑒定?！即鸢浮剑?）②③（2）①.增強(qiáng)②.當(dāng)環(huán)境中沒有四環(huán)素時(shí)，由于tetR基因的表達(dá)產(chǎn)物tetR蛋白對(duì)啟動(dòng)子2的抑制作用，使得GFP基因不能表達(dá)出綠色熒光蛋白而不發(fā)光，當(dāng)環(huán)境中存在四環(huán)素時(shí)，可以解除這種抑制作用，且四環(huán)素水平越高，表達(dá)的GFP蛋白越多，熒光越強(qiáng)(或表述為：四環(huán)素可解除tetR蛋白對(duì)GFP基因表達(dá)的抑制作用，并使大腸桿菌工程菌的GFP蛋白表達(dá)量隨四環(huán)素水平的增加而增加)（3）①.5'…TCTAGT…3'5'…ACTAGA…3'②.3'…AGATCA…5'3'…TGATCT…5'（4）D（5）瓊脂糖凝膠電泳〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定?！拘?詳析】據(jù)圖1分析可知，啟動(dòng)子1可與RNA聚合酶結(jié)合，促進(jìn)TetR基因的表達(dá)TetR蛋白，TetR蛋白抑制啟動(dòng)子2與RNA聚合酶的結(jié)合，抑制GFP（綠色熒光蛋白）基因的表達(dá)綠色熒光蛋白。四環(huán)素可以抑制TetR蛋白的作用，因此當(dāng)環(huán)境中沒有四環(huán)素時(shí)，GFP（綠色熒光蛋白）基因不表達(dá)；當(dāng)環(huán)境中有四環(huán)素時(shí)，四環(huán)素能夠解除TetR蛋白對(duì)啟動(dòng)子2的抑制作用，最終使菌體發(fā)出綠色熒光。因此可以通過檢測(cè)熒光強(qiáng)弱來判定環(huán)境中的四環(huán)素濃度，因此需導(dǎo)入天然大腸桿菌的目的基因有②③?！拘?詳析】據(jù)圖1分析可知，當(dāng)環(huán)境中不含四環(huán)素時(shí)，該大腸桿菌工程菌TetR基因的表達(dá)的TetR蛋白會(huì)抑制啟動(dòng)子2與RNA聚合酶的結(jié)合，抑制GFP（綠色熒光蛋白）基因的表達(dá)綠色熒光蛋白，因此不發(fā)處熒光。當(dāng)環(huán)境中有四環(huán)素時(shí)，四環(huán)素能夠解除TetR蛋白對(duì)啟動(dòng)子2的抑制作用，最終使菌體發(fā)出綠色熒光。并且環(huán)境中四環(huán)素水平越高，抑制TetR蛋白作用越強(qiáng)，解除TetR蛋白對(duì)啟動(dòng)子2的抑制作用的能力越強(qiáng)，GFP（綠色熒光蛋白）基因表達(dá)能力越強(qiáng)，熒光就會(huì)增強(qiáng)。因此，概述該種四環(huán)素檢測(cè)方法的原理：四環(huán)素可以打破（解除）tetR蛋白對(duì)GFP基因表達(dá)的抑制作用，并使大腸桿菌工程菌的GFP蛋白表達(dá)量隨四環(huán)素水平的增加而增加，或表述為：當(dāng)環(huán)境中沒有四環(huán)素時(shí)，由于tetR基因的表達(dá)產(chǎn)物tetR蛋白對(duì)啟動(dòng)子2的抑制作用，使得GFP基因不能表達(dá)出綠色熒光蛋白（GFP蛋白）而不發(fā)光，當(dāng)環(huán)境中存在四環(huán)素時(shí)，可以解除這種抑制作用，綠色熒光蛋白得以表達(dá)并發(fā)光，四環(huán)素水平越高，表達(dá)的GFP蛋白越多，熒光越強(qiáng)。【小問3詳析】據(jù)圖2分析可知，DNA片段1兩端的限制酶識(shí)別序列分別是XbaⅠ和EcoRⅠ，而DNA片段2兩端的限制酶識(shí)別序列是SpeⅠ和BamHⅠ，若要讓兩個(gè)DNA片段連接在一起，需要經(jīng)酶切后獲得相同的黏性末端。據(jù)表格分析，XbaⅠ和SpeⅠ酶切能獲得相同的黏性末端，因此DNA片段1用XbaⅠ酶切，DNA片段2用SpeⅠ酶切，然后在用DNA連接酶將兩個(gè)DNA片段連接在一起，所以在特定工具酶作用下能成功拼接的位點(diǎn)處堿基序列為5'…TCTAGT…3'

和5'…ACTAGA…3'或者是3'…AGATCA…5'和3'…TGATCT…5'?！拘?詳析】ABCD、根據(jù)小問3分析，DNA片段1用XbaⅠ酶切，DNA片段2用SpeⅠ酶切，然后在用DNA連接酶將兩個(gè)DNA片段連接在一起，啟動(dòng)子1和啟動(dòng)子2是反向連接的，如圖CD所示，兩個(gè)片段經(jīng)連接后的序列既不能被SpeⅠ酶切，也不能被XbaⅠ酶切，綜上所述，ABC錯(cuò)誤，D正確。故選D?！拘?詳析】為了確定組質(zhì)粒和大腸桿菌工程菌建構(gòu)成功，可用PCR技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，PCR完成以后常采用瓊脂糖凝膠電泳來鑒定PCR的產(chǎn)物。因?yàn)橥ㄟ^瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)可以知道DNA分子大小，進(jìn)而可以證明重組質(zhì)粒的大小是否符合預(yù)期。湖北省武漢市部分重點(diǎn)中學(xué)2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期期末聯(lián)考試卷一、選擇題：本題共18小題，每題2分，共36分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是符合題目要求的。1.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)通常是家庭式或作坊式的，豆豉一般以黃豆為原料，通過微生物群落共同發(fā)酵而成。利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作風(fēng)味豆豉的主要工藝流程如下圖。下列敘述正確的是（）A.傳統(tǒng)方法制作豆豉，以混合菌種的液體發(fā)酵為主B.參與前期發(fā)酵、后期發(fā)酵過程中的菌種代謝類型一致C.調(diào)味過程中添加鹽可抑制雜菌生長(zhǎng)，白酒和風(fēng)味料只是調(diào)節(jié)口味D.黃豆煮熟的目的主要是破壞黃豆內(nèi)部結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)變性，同時(shí)起到消毒的作用〖答案〗D【詳析】A、傳統(tǒng)發(fā)酵是以混合菌種的固體或半固體發(fā)酵為主，A錯(cuò)誤；B、結(jié)合圖示可知，參與前期發(fā)酵的菌種需要氧氣，后發(fā)酵過程密封發(fā)酵，是厭氧型，故代謝不一致，B錯(cuò)誤；C、調(diào)味過程中添加鹽可抑制雜菌生長(zhǎng)，白酒和風(fēng)味料既可以調(diào)節(jié)口味也可以抑制雜菌生長(zhǎng)，C錯(cuò)誤；D、蛋白質(zhì)在高溫條件下空間結(jié)構(gòu)改變而變性，黃豆煮熟的目的主要是破壞黃豆內(nèi)部結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)變性，易于被酶水解，同時(shí)起到消毒的作用，D正確。故選D。2.研究發(fā)現(xiàn)，小鼠四倍體胚胎具有發(fā)育缺陷，只能發(fā)育成胎盤等胚胎以外的結(jié)構(gòu)。ES細(xì)胞能夠誘導(dǎo)分化形成除胎盤外的其他細(xì)胞類型。四倍體胚胎與ES細(xì)胞的嵌合體則會(huì)使二者的發(fā)育潛能相互補(bǔ)償，可得到ES小鼠。下列敘述正確的是（）A.嵌合體胚胎發(fā)育至原腸胚時(shí)需移植入與之生理狀態(tài)相同的小鼠子宮內(nèi)才可以進(jìn)一步發(fā)育B.嵌合體胚胎移植時(shí)，可通過對(duì)受體注射免疫抑制劑來提高移植成功率C.ES細(xì)胞和iPS細(xì)胞都只能從胚胎中獲取，限制了二者的廣泛應(yīng)用D.嵌合體發(fā)育形成的ES小鼠基因型與供體ES細(xì)胞的基因型相同〖答案〗D〖祥解〗胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)。包括體外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。胚胎工程的許多技術(shù)，實(shí)際是在體外條件下，對(duì)動(dòng)物自然受精和早期胚胎發(fā)育條件進(jìn)行的模擬操作?！驹斘觥緼、嵌合體胚胎發(fā)育至桑葚胚或囊胚期再移植入與之生理狀態(tài)相同的小鼠子宮內(nèi)才可以進(jìn)一步發(fā)育，A錯(cuò)誤；B、同種生物的嵌合體胚胎移植時(shí)，外來胚胎移入子宮不會(huì)引起免疫排斥，故不需要對(duì)受體注射免疫抑制劑，B錯(cuò)誤；C、ES細(xì)胞存在于早期胚胎或原始性腺，只能從胚胎中獲取，iPS細(xì)胞是人工誘導(dǎo)產(chǎn)生的，可以從體細(xì)胞中誘導(dǎo)產(chǎn)生，C錯(cuò)誤；D、四倍體胚胎只能發(fā)育成胎盤等胚胎以外的結(jié)構(gòu)，而ES

細(xì)胞能夠誘導(dǎo)分化形成除胎盤外的其他細(xì)胞類型，四倍體胚胎與ES細(xì)胞的嵌合體則會(huì)使二者的發(fā)育潛能相互補(bǔ)償，可得到ES小鼠，所以嵌合體發(fā)育形成的ES小鼠基因型與供體ES細(xì)胞的基因型相同，D正確。故選D。3.下列有關(guān)發(fā)酵工程及其應(yīng)用表述正確的是（）A.通過發(fā)酵工程從微生物細(xì)胞中提取的單細(xì)胞蛋白，可制成微生物飼料B.微生物農(nóng)藥是利用微生物或其代謝物來防治病蟲害的C.選育的菌種可直接向發(fā)酵罐中接種從而進(jìn)行相關(guān)發(fā)酵D.分離、提純產(chǎn)物是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)〖答案〗B〖祥解〗發(fā)酵工程，是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種新技術(shù)。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種的選育、培養(yǎng)基的配制、滅菌、擴(kuò)大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過程和產(chǎn)品的分離提純等方面?！驹斘觥緼、單細(xì)胞蛋白即微生物菌體，不需要從微生物細(xì)胞中提取，A錯(cuò)誤；B、微生物農(nóng)藥是利用微生物或其代謝物來防治病蟲害的，是生物防治的重要手段，B正確；C、選育的菌種通過擴(kuò)大培養(yǎng)后，再向發(fā)酵罐中接種從而進(jìn)行相關(guān)發(fā)酵，C錯(cuò)誤；D、發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)，D錯(cuò)誤。故選B。4.草莓營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，中國國內(nèi)優(yōu)良品種草莓栽培的品種很多。下圖為利用現(xiàn)代生物技術(shù)改良草莓品系的過程，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.過程Ⅱ可直接用聚乙二醇作為化學(xué)誘導(dǎo)劑來誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合B.過程Ⅰ的原理是基因重組，能定向改變生物的遺傳性狀C.利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，可以實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種D.雜種細(xì)胞A形成的標(biāo)志是再生出新的細(xì)胞壁〖答案〗A〖祥解〗過程Ⅰ是利用基因工程技術(shù)把胰島素基因?qū)刖G色草莓細(xì)胞，胰島素基因得到了表達(dá)，產(chǎn)生了產(chǎn)胰島素的草莓，定向改變了草莓的性狀。過程Ⅱ利用植物細(xì)胞融合技術(shù)獲得了具鳳梨味的綠草莓?！驹斘觥緼、在進(jìn)行體細(xì)胞雜交之前，必須先利用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的原生質(zhì)體，再用聚乙二醇作為化學(xué)誘導(dǎo)劑來誘導(dǎo)原生質(zhì)體的融合，A錯(cuò)誤；B、過程Ⅰ利用基因工程技術(shù)，其原理是基因重組，使導(dǎo)入了胰島素基因的草莓產(chǎn)生了胰島素，能定向改變生物的遺傳性狀，B正確；C、利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，可以實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種,C正確；D、雜種細(xì)胞A形成的標(biāo)志是再生出細(xì)胞壁，該過程涉及的細(xì)胞器主要是高爾基體，D正確。故選A。5.研究者從溫泉中篩選出能高效產(chǎn)生耐高溫淀粉酶的嗜熱細(xì)菌的過程如圖1所示。將得到的嗜熱細(xì)菌懸液轉(zhuǎn)接到特定固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用碘液作顯色處理，結(jié)果如圖2所示。下列敘述正確的是（）A.過程①②一般都取1ml.菌液轉(zhuǎn)移B.圖中的Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基應(yīng)在滅菌后將pH調(diào)至中性或弱堿性C.實(shí)驗(yàn)中所有的操作工具都必須采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌D.若操作正確，可從圖2中挑選周圍不顯藍(lán)色的菌落作為目標(biāo)菌種的純培養(yǎng)物〖答案〗D〖祥解〗選擇培養(yǎng)基是指一類根據(jù)特定微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某理化因素抗性的原理而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。具有只允許特定的微生物生長(zhǎng)，而同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)的功能。【詳析】A、過程①為稀釋過程，一般都取1ml菌液轉(zhuǎn)移，過程②為稀釋涂布過程，一般取0.1ml菌液進(jìn)行涂布，A錯(cuò)誤；B、微生物培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)先調(diào)pH再滅菌，B錯(cuò)誤；C、實(shí)驗(yàn)使用的培養(yǎng)基應(yīng)采用高壓蒸汽滅菌，而培養(yǎng)皿等一般使用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌，C錯(cuò)誤；D、淀粉與碘液反應(yīng)呈藍(lán)色，且淀粉酶可將淀粉水解，實(shí)驗(yàn)的目的是要篩選出能高效產(chǎn)生耐高溫淀粉酶的嗜熱細(xì)菌，則可從圖2中挑選周圍不顯藍(lán)色的菌落作為目標(biāo)菌種的純培養(yǎng)物，D正確。故選D。6.植物細(xì)胞工程在農(nóng)業(yè)，醫(yī)藥工業(yè)等方面有著廣泛的應(yīng)用，相關(guān)敘述正確的是（）A.快速繁殖花卉過程中，可以改良植物的性狀B.利用花藥離體培養(yǎng)獲得玉米幼苗，直接從中選擇出具有優(yōu)良性狀的個(gè)體C.植物組織培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)的細(xì)胞容易受到培養(yǎng)條件和誘變因素的影響而產(chǎn)生突變D.植物頂端分生組織附近的病毒很少，甚至無病毒，因此人們?yōu)榱双@得抗病毒苗常常利用莖尖進(jìn)行植物組織培養(yǎng)〖答案〗C【詳析】A、植物的快速繁殖技術(shù)是指用于快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術(shù)，它可以保持植物的遺傳特性，不可以改良植物的性狀A(yù)錯(cuò)誤；B、利用花藥離體培養(yǎng)可獲得玉米幼苗的單倍體，再經(jīng)過誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍后，再直接從中選擇出具有優(yōu)良性狀的個(gè)體，這樣能夠極大的縮短育種年限，B錯(cuò)誤；C、在植物的組織培養(yǎng)過程中，由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷增殖的狀態(tài)，因此易受培養(yǎng)條件和誘變因素(如射線、化學(xué)物質(zhì)等)的影響而產(chǎn)生突變，C正確；D、植物頂端分生區(qū)附近（如莖尖）的病毒極少，甚至無病毒，因此，切取一定大小的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗，用這種方法獲得的植株不抗病毒，D錯(cuò)誤。故選C7.實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程如圖所示。下列敘述正確的是（）A.圖中丙和丁分別表示的是原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)，其培養(yǎng)原理不同B.傳代培養(yǎng)時(shí)，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞直接用離心法收集，無須再用酶處理C.體外培養(yǎng)的細(xì)胞既能貼壁生長(zhǎng)又能懸浮生長(zhǎng)，都會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在95%的氧氣和5%的CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的CO?用于維持pH〖答案〗B〖祥解〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物器官、組織。將材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用膠原蛋白酶）處理（消化），形成分散的單個(gè)細(xì)胞，將處理后的細(xì)胞移入培養(yǎng)基中配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液。懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到互相接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，出現(xiàn)接觸抑制。此時(shí)需要將出現(xiàn)接觸抑制的細(xì)胞重新使用胰蛋白酶處理。再配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液?！驹斘觥緼、丙培養(yǎng)細(xì)胞1是原代培養(yǎng)，該過程是獲得組織細(xì)胞中進(jìn)行的初次培養(yǎng)，丁培養(yǎng)細(xì)胞2是傳代培養(yǎng)，該過程是將分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)稱傳代培養(yǎng)，二者培養(yǎng)原理相同，都為細(xì)胞的增殖，A錯(cuò)誤；B、傳代培養(yǎng)時(shí)，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞沒有出現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)的現(xiàn)象，因而可以直接用離心法收集，無須再用酶處理，B正確；C、、體外培養(yǎng)的細(xì)胞既能貼壁生長(zhǎng)又能懸浮生長(zhǎng)，能貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞不會(huì)，C錯(cuò)誤；D、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在95%的空氣不是氧氣和5%的CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的CO?用于維持培養(yǎng)液的pH，D錯(cuò)誤。故選B。8.為探究矮牽牛原生質(zhì)體的培養(yǎng)條件和植株再生能力，某研究小組的實(shí)驗(yàn)過程如下圖。下列敘述正確的是（）A.過程①獲得的原生質(zhì)體是由細(xì)胞膜、液泡膜以及這兩層膜之間的細(xì)胞質(zhì)組成B.獲取的原生質(zhì)體不宜懸浮在低滲溶液中，以防止其吸水漲破C.過程②需提高生長(zhǎng)素的比例以促進(jìn)芽的分化D.過程③需用秋水仙素處理誘導(dǎo)細(xì)胞壁再生〖答案〗B〖祥解〗由圖可知，①表示用纖維素酶和果膠酶處理得到原生質(zhì)體的過程；②③均表示再分化過程。【詳析】A、原生質(zhì)層是由細(xì)胞膜、液泡膜以及這兩層膜之間的細(xì)胞質(zhì)組成，A錯(cuò)誤；B、獲取的原生質(zhì)體不宜懸浮在低滲溶液中，以防止其吸水漲破，B正確；C、②誘導(dǎo)芽分化時(shí)，需要提高細(xì)胞分裂素的比例，C錯(cuò)誤；D、③可以表示誘導(dǎo)根的分化形成幼苗，此時(shí)細(xì)胞壁已經(jīng)形成，不需要使用秋水仙素，D錯(cuò)誤。故選B。9.多種方法獲得的早期胚胎，均需移植給受體才能獲得后代。下圖列舉了幾項(xiàng)技術(shù)成果。據(jù)此分析，下列相關(guān)敘述正確的是（）A.胚胎移植前可取內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的細(xì)胞鑒定性別B.①過程得到的試管動(dòng)物與供體母本性狀相同C.③可通過②技術(shù)實(shí)現(xiàn)擴(kuò)大化生產(chǎn)，①②可通過③技術(shù)實(shí)現(xiàn)性狀改良D.②過程將牛的體細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞中，培育獲得克隆動(dòng)物是一種培育新物種的方式〖答案〗C【詳析】A、胚胎移植前可取滋養(yǎng)層的細(xì)胞鑒定性別，A錯(cuò)誤；B、①過程得到的試管動(dòng)物性狀是由提供卵子的供體母本和提供精子的父本共同決定的，B錯(cuò)誤；C、克隆技術(shù)可得到大量同種個(gè)體，所以③轉(zhuǎn)基因動(dòng)物可通過②克隆動(dòng)物技術(shù)實(shí)現(xiàn)擴(kuò)大化生產(chǎn)，轉(zhuǎn)基因技術(shù)可導(dǎo)入外源優(yōu)良基因，所以①②可通過③轉(zhuǎn)基因技術(shù)實(shí)現(xiàn)性狀改良，C正確；D、過程②是克隆技術(shù)，將牛的體細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞中，培育獲得克隆動(dòng)物遺傳物質(zhì)基本與供體牛基本相同，進(jìn)而得到大量同種個(gè)體，所以沒有培育新物種，D錯(cuò)誤。故選C。10.乳腺癌、胃癌細(xì)胞表面有大量的HER2蛋白，T細(xì)胞表面有CD3蛋白和CD28蛋白。研究人員將上述三種蛋白作為抗原分別制備單克隆抗體，然后將其在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)制備得到三特異性抗體，簡(jiǎn)稱三抗(如下圖)，下列敘述正確的是（）A.同時(shí)注射3種抗原蛋白，可刺激B細(xì)胞增殖分化為分泌三抗的漿細(xì)胞B.利用抗原一抗體雜交的原理篩選圖示三抗時(shí)需要3種相應(yīng)抗原蛋白C.該抗體的基本組成單位是氨基酸，其功能與分子的空間結(jié)構(gòu)無關(guān)D.用單克隆抗體技術(shù)制備的三種抗體直接融合可得到三特異性抗體〖答案〗B〖祥解〗單克隆抗體的制備過程：①給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，然后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；②誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合；③利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；④進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；⑤用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選出來的雜交瘤細(xì)胞或?qū)⑵渥⑷胄∈蟾骨恢信囵B(yǎng)，最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！驹斘觥緼、同時(shí)注射3種抗原會(huì)刺激B細(xì)胞分化形成不同的漿細(xì)胞，進(jìn)而產(chǎn)生三種抗體，但一種漿細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體，并不能產(chǎn)生三抗，A錯(cuò)誤；B、由于抗體具有特異性，所以利用抗原—抗體雜交的原理篩選圖示三抗時(shí)需要3種相應(yīng)抗原蛋白，B正確；C、抗體的本質(zhì)是蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)的基本組成單位是氨基酸，蛋白質(zhì)的功能與分子的空間結(jié)構(gòu)密切相關(guān)，C錯(cuò)誤；D、三特異性抗體指的是一種抗體，通過蛋白質(zhì)工程構(gòu)建三特異性抗體的基因表達(dá)載體，然后獲得相應(yīng)的雜交瘤細(xì)胞，最終獲得三特異性抗體，不是三種單抗融合而成，D錯(cuò)誤。故選B。11.不對(duì)稱PCR是利用不等量的一對(duì)引物來產(chǎn)生大量單鏈DNA(ssDNA)的方法。加入的一對(duì)引物中含量較少的被稱為限制性引物，含量較多的被稱為非限制性引物。PCR反應(yīng)的最初的若干次循環(huán)中，其擴(kuò)增產(chǎn)物主要是雙鏈DNA(dsDNA)，但當(dāng)限制性引物消耗完后，就會(huì)產(chǎn)生大量的ssDNA。不對(duì)稱PCR的過程如下圖所示。假設(shè)模板DNA分子初始數(shù)量為a個(gè)，6次循環(huán)后開始擴(kuò)增產(chǎn)ssDNA。下列敘述正確的是（）A.該不對(duì)稱PCR過程中需要.26a個(gè)限制性引物B.兩種引物與模板鏈結(jié)合時(shí)，需將溫度控制在72℃左右C.據(jù)圖可知，最后大量獲得的ssDNA與圖中甲鏈的堿基序列相同D.上述過程中子鏈分別沿限制性引物的5'端、非限制性引物的3'端延伸〖答案〗C〖祥解〗PCR原理：在解旋酶作用下，打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端向3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。【詳析】A、PCR擴(kuò)增時(shí)引物是新子鏈的一部分，假設(shè)模板DNA分子初始數(shù)量為a個(gè)，6次循環(huán)后產(chǎn)生a.26個(gè)DNA分子，因此該不對(duì)稱PCR過程中需要（26-1）a個(gè)限制性引物，A錯(cuò)誤；B、當(dāng)將溫度降至50℃左右時(shí)，兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對(duì)原則與模板鏈結(jié)合，B錯(cuò)誤；C、非限制性引物是與乙鏈結(jié)合，所以最后大量獲得的ssDNA與圖中甲鏈的堿基序列一致，C正確；D、擴(kuò)增時(shí)耐高溫DNA聚合酶將4種脫氧核苷酸連接至引物的3'端，D錯(cuò)誤。故選C。12.某細(xì)菌DNA分子上有4個(gè)Sau3AI的酶切位點(diǎn)，經(jīng)Sau3AI處理后會(huì)形成4個(gè)大小不同的DNA片段。若是用BamHI處理，則只會(huì)形成2個(gè)大小不同的DNA片段。Sau3AI和BamHI的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如表所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）限制酶名稱識(shí)別序列及切割位點(diǎn)BamHIG↓GATCCSau3AI↓GATCA.若用兩種酶共同處理，會(huì)形成6個(gè)大小不同的DNA片段B.上述兩種限制酶切割后可形成相同的黏性末端C.該DNA分子上有兩個(gè)BamH1的酶切位點(diǎn)D.該細(xì)菌DNA分子是環(huán)狀的〖答案〗A〖祥解〗限制酶主要從原核生物中分離純化出來。特異性：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種。【詳析】A、分析題干信息知該DNA分子上有4個(gè)Sau3AI的酶切位點(diǎn)，有2個(gè)BamHI的酶切位點(diǎn)，但是BamHI識(shí)別序列中包含Sau3AI的識(shí)別序列，所以同時(shí)用兩種酶共同處理，不會(huì)形成6個(gè)大小不同的DNA片段，A錯(cuò)誤；B、BamHI和Sau3AI兩種限制酶切割后形成的黏性末端均為GATC，B正確；C、該DNA分子上有4個(gè)Sau3AI的酶切位點(diǎn)，經(jīng)Sau3AI處理后形成4個(gè)DNA片段，可知該DNA分子為環(huán)狀DNA，用BamHI處理后，得到2個(gè)DNA片段，說明該DNA分子上有兩個(gè)BamHI的酶切位點(diǎn)，C正確；D、該DNA分子上有4個(gè)Sau3AI的酶切位點(diǎn)，經(jīng)Sau3AI處理后形成4個(gè)DNA片段，可知該DNA分子為環(huán)狀DNA，D正確。故選A。13.某同學(xué)利用洋蔥為實(shí)驗(yàn)材料，進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.該同學(xué)也可選擇雞血、豬肝等動(dòng)物細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料提取DNA，但方法可能有所不同B.向含有DNA的粗提取液中加入體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精后，出現(xiàn)的白色絲狀物為DNAC.鑒定DNA時(shí)需先將DNA溶解在2mol/LNaCl溶液，再加入二苯胺試劑并進(jìn)行沸水浴加熱D.將洋蔥切碎加研磨液研磨、過濾后，濾液放置4℃冰箱中靜置幾分鐘后，DNA存在于沉淀物中〖答案〗D【詳析】A、不同類型的生物材料(如植物細(xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞、微生物)中DNA的提取過程雖有相似之處，但也存在差異。例如，使用動(dòng)物血液作為實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，通常利用紅細(xì)胞破裂釋放出的DNA進(jìn)行提取，而不需要研磨和去除細(xì)胞壁的過程，A正確；B、在DNA提取過程中，當(dāng)加入高濃度酒精后，DNA會(huì)因不溶于酒精而析出，形成白色的絮狀或絲狀沉淀，這就是粗提取得到的DNA，B正確；C、鑒定DNA時(shí)，常用的方法之一就是二苯胺顯色反應(yīng)。需要將DNA樣品溶解在適當(dāng)?shù)腘aCl溶液中，然后加入二苯胺試劑，在沸水中加熱后，若存在DNA，則反應(yīng)液會(huì)變?yōu)樗{(lán)色，C正確；D、在DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中，通常首先通過研磨和加入適量的洗滌劑與食鹽溶液來釋放細(xì)胞中的DNA，并破壞細(xì)胞膜和其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)。然后，在此混合液中DNA會(huì)溶解在溶液中，并隨同蛋白質(zhì)、多糖等其他物質(zhì)一起存在。DNA在一定濃度的NaCl溶液中溶解度較高，所以初步處理后的濾液經(jīng)過離心或靜置后，DNA不會(huì)形成沉淀，而是在溶液中，D錯(cuò)誤。故選D。14.如圖表示培育轉(zhuǎn)基因抗病毒農(nóng)作物的過程圖，下列有關(guān)敘述正確的是（）A.a過程中目的基因需要插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA中B.實(shí)驗(yàn)用的Ti質(zhì)粒中通常至少含有一個(gè)抗生素合成基因C.我國科學(xué)家將Bt基因?qū)朊藁?xì)胞采用了農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法D.抗病毒基因一旦導(dǎo)入農(nóng)作物細(xì)胞中，就能獲得抗病毒農(nóng)作物〖答案〗A〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定?！驹斘觥緼、a過程構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，需要將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA分子中，否則農(nóng)桿菌將不能把目的基因轉(zhuǎn)移至農(nóng)作物的染色體上，A正確；B、基因工程中常用抗生素抗性基因作為標(biāo)記基因來篩選含有目的基因的受體細(xì)胞，因此重組質(zhì)粒中通常要至少保留一個(gè)標(biāo)記基因，B錯(cuò)誤；C、我國科學(xué)家將Bt基因?qū)朊藁?xì)胞采用了花粉管通道法，C錯(cuò)誤；D、抗病毒基因即使導(dǎo)入農(nóng)作物細(xì)胞中，也不一定能獲得抗病毒植株，還需要經(jīng)過多次檢測(cè)和篩選才行，D錯(cuò)誤。故選A。15.常規(guī)PCR只能擴(kuò)增兩引物間的DNA區(qū)段，要擴(kuò)增已知DNA序列兩側(cè)的未知DNA序列，可用反向PCR技術(shù)。反向PCR技術(shù)擴(kuò)增的原理如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.酶切階段，L中不能含有酶切時(shí)所選限制酶的識(shí)別序列B.環(huán)化階段，可選用E.coliDNA連接酶或T4DNA連接酶C.圖中引物，應(yīng)選擇引物1和引物4，且二者間不能互補(bǔ)配對(duì)D.PCR擴(kuò)增，每輪循環(huán)前應(yīng)加入限制酶將環(huán)狀DNA切割成線狀〖答案〗D〖祥解〗PCR只能擴(kuò)增兩端序列已知的基因片段，反向PCR可擴(kuò)增中間一段已知序列，而兩端序列未知的基因片段。酶切時(shí)用限制性內(nèi)切酶，環(huán)化時(shí)用DNA鏈接酶，再用引物和DNA聚合酶擴(kuò)增。在環(huán)化后，通過一對(duì)方向相反的引物實(shí)現(xiàn)已知序列兩側(cè)基因序列的擴(kuò)增。【詳析】A、在酶切階段，已知序列L中不能含有酶切時(shí)所選限制酶的識(shí)別序列，不然會(huì)將已知序列L切斷，造成序列識(shí)別混亂，A正確；B、T4DNA連接酶或E.coliDNA連接酶都可以用來連接黏性末端，因此環(huán)化階段，可選用E.coliDNA連接酶或T4DNA連接酶，B正確；C、PCR過程需要兩種引物，能分別與目的基因兩條鏈的3'端通過堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合，為保證延伸的是已知序列兩側(cè)的未知序列，應(yīng)該選擇引物1和引物4，且二者間不能互補(bǔ)配對(duì)，C正確；D、質(zhì)粒上目的基因擴(kuò)增不受模板環(huán)狀形態(tài)干擾，不需要添加限制酶就可以擴(kuò)增出所需片段，D錯(cuò)誤。故選D。16.基因工程自20世紀(jì)70年代興起后，在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等方面得到了飛速的發(fā)展。下列關(guān)于基因工程應(yīng)用的敘述正確的是（）A.通過X射線、紫外線綜合處理，將青霉素產(chǎn)量低的菌種培育成產(chǎn)量高的菌株屬于基因工程技術(shù)的應(yīng)用B.通過將腸乳糖酶導(dǎo)入到奶牛乳腺細(xì)胞中，以降低乳汁中乳糖含量，從而解決部分人群的乳糖不耐受問題C.與人細(xì)胞分泌的天然生長(zhǎng)激素相比，將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)氪竽c桿菌制備的工程菌無法對(duì)生長(zhǎng)激素進(jìn)行正常的加工和修飾D.通過制備山羊膀胱生物反應(yīng)器，使人乳鐵蛋白基因只存在于膀胱細(xì)胞中，進(jìn)而可以從尿液中分離純化出所需要的人乳鐵白蛋白，實(shí)現(xiàn)大量制備的目的〖答案〗C〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斘觥緼、通過X射線、紫外線綜合處理，將青霉素產(chǎn)量低的菌種培育成產(chǎn)量高的菌株屬于誘變育種，A錯(cuò)誤；B、乳糖酶可降解乳糖，可降低乳汁中乳糖含量，科學(xué)家是通過將腸乳糖酶基因?qū)氲侥膛Ｈ橄偌?xì)胞中，而不是乳糖酶，B錯(cuò)誤；C、由于大腸桿菌缺乏對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行加工和分裝的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，因此與人細(xì)胞分泌的天然生長(zhǎng)激素相比，將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)氪竽c桿菌制備的工程菌無法對(duì)生長(zhǎng)激素進(jìn)行正常的加工和修飾，C正確；D、作為膀胱生物反應(yīng)器的山羊體內(nèi)所有細(xì)胞都含有目的基因，但是只有在于膀胱細(xì)胞中才能表達(dá)目的基因，D錯(cuò)誤。故選C。17.已知生物體內(nèi)有一種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Y，如果將蛋白Y中某一個(gè)氨基酸替換，改變后的蛋白質(zhì)Y1不但保留了蛋白Y原有的功能，而且具備了酶的催化功能。下列敘述正確的是（）A.蛋白質(zhì)工程和基因工程的根本區(qū)別是操作對(duì)象的差異B.可以通過對(duì)Y蛋白基因改造或人工合成獲得Y1蛋白基因C.蛋白質(zhì)工程在設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)時(shí)的依據(jù)是現(xiàn)有基因的脫氧核苷酸序列D.蛋白質(zhì)工程與中心法則的信息流動(dòng)方向一致，即DNA→mRNA→蛋白質(zhì)〖答案〗B〖祥解〗蛋白質(zhì)工程概念及基本原理（1）蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)）。（2）蛋白質(zhì)工程崛起的緣由：基因工程只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)。（3）蛋白質(zhì)工程的基本原理：它可以根據(jù)人的需求來設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，又稱為第二代的基因工程。（4）基本途徑：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有氨基酸序列→找到對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因），最終還是回到基因工程上來解決蛋白質(zhì)的合成?！驹斘觥緼、蛋白質(zhì)工程和基因工程的根本區(qū)別是蛋白質(zhì)工程可制造出自然界沒有的蛋白質(zhì)，A錯(cuò)誤；B、蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，因此可以通過對(duì)Y蛋白基因改造或人工合成獲得Y1蛋白基因，B正確；C、蛋白質(zhì)工程在設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)時(shí)的依據(jù)是人類的意愿，C錯(cuò)