銅綠假單胞菌實(shí)驗(yàn)活動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)

銅綠假單胞菌實(shí)驗(yàn)活動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告

一、生物學(xué)特性

(一)種類(lèi)和細(xì)菌分型

銅綠假單胞菌原稱(chēng)綠膿桿菌,在自然界分布廣泛,為土壤中存在的最常見(jiàn)的細(xì)菌之各種水、空氣,人的皮膚、呼吸道和腸道等都有本菌的存在。本菌存在的重要條件是潮濕的環(huán)境。假單胞菌屬根據(jù)其RNA/DNA的同源性可分為五個(gè)主要型,銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)是其代表菌種。本菌生長(zhǎng)對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求不高。菌體O抗原有兩種成分:一種為內(nèi)毒素蛋白,是一種保護(hù)性抗原;另一種為酯多糖,具有特異性。根據(jù)其結(jié)構(gòu)可將銅綠假單胞菌分成12個(gè)血清型,此外還可利用噬菌體或銅綠假單胞菌素分型。

(二)來(lái)源

銅綠假單胞菌的學(xué)名是Pseudomonasaeruginosa,當(dāng)中的Pseudomonas是由希臘語(yǔ)的pseudo及monas所組成,意即虛假的單元,是早期微生物學(xué)用作描述病菌用的。而Aerug1nosa則是銅綠,即銅與空氣中的氧氣、二氧化碳和水等物質(zhì)反應(yīng)產(chǎn)生的物質(zhì),又稱(chēng)銅銹,化學(xué)式為Cu2(OH)2CO3,正好表達(dá)了這種細(xì)菌所產(chǎn)生的青色色素。綠膿素(Pyo-cynin)的生物合成是以群體效應(yīng)來(lái)調(diào)控的,就像充滿(mǎn)囊腫性纖維化病人肺部的銅綠假單胞菌的生物膜一樣。

(三)傳染性

銅綠假單胞菌是人體正常菌群之一,在腸道中繁殖,為環(huán)境中主要污染源之一,銅綠假單胞菌可由各種途徑傳播,但主要是通過(guò)污染醫(yī)療器具及帶菌醫(yī)護(hù)人員引起的醫(yī)源性感染而傳播的。

(四)傳播途徑

通過(guò)污染醫(yī)療器具及帶菌醫(yī)護(hù)人員引起醫(yī)源性感染。感染多見(jiàn)于皮膚黏膜受損部位,如燒傷、創(chuàng)傷或手術(shù)切口等。感染部位與細(xì)菌的入口及病人的易感性有關(guān)。

(五)易感性

人類(lèi)對(duì)銅綠假單胞菌沒(méi)有天然免疫力,人群普遍易感。

(六)潛伏期

銅綠假單胞菌平均潛伏期為48h至72h。(七)劑量一效應(yīng)關(guān)系

銅綠假單胞菌是重要的醫(yī)院內(nèi)病原菌之一。在醫(yī)院的洗滌槽、防腐溶液和貯尿容器中?？砂l(fā)現(xiàn)這種細(xì)菌,并可通過(guò)醫(yī)護(hù)人員將病菌傳給病人,特別是在灼傷和新生兒重癥監(jiān)護(hù)室。但目前尚未見(jiàn)有銅綠假單胞菌對(duì)人準(zhǔn)確感染劑量的報(bào)道。

(八)致病性

綠膿假單胞菌在正常情況下不致病,當(dāng)機(jī)體抵抗力低下時(shí)可致病,還可引起病人死亡。本菌為條件致病菌,該菌通常伴隨毒力較強(qiáng)的細(xì)菌而存在于病灶中,但偶爾也可單獨(dú)引起暴露于外部的組織感染。銅綠假單胞菌的主要致病物質(zhì)是內(nèi)毒素,此外尚有菌毛、莢膜、胞外酶和外毒素等多種致病因子。

(九)變異性

銅綠假單胞菌感染的治療易產(chǎn)生耐藥性,但沒(méi)有找到耐藥是銅綠假單胞菌變異引起的證據(jù),但可以肯定細(xì)菌生物膜(Biofilm)在銅綠假單胞菌感染中廣泛存在,是導(dǎo)致抗菌治療失敗的重要原因之一。

(十)環(huán)境中的穩(wěn)定性

銅綠假單胞菌對(duì)外界環(huán)境的抵抗力較強(qiáng),在潮濕處能長(zhǎng)期生存,對(duì)紫外線(xiàn)不敏感,濕熱55℃1h才被殺滅。

(十一)藥物敏感性

治療銅綠假單胞菌的臨床感染,以復(fù)合青霉素類(lèi)、三或四代頭孢菌素、三或四代喹諾酮類(lèi)等藥物為好。有些菌株對(duì)磺胺、鏈霉素、氯霉素敏感,但極易產(chǎn)生耐藥性。青霉素對(duì)此菌無(wú)效,但慶大霉素和多粘菌素B、E,氨基甙類(lèi)、第三和第四代頭孢菌素(頭孢哌酮、頭孢曲松、頭孢匹羅、頭孢唑南等,后兩種為三線(xiàn)抗菌藥物,應(yīng)慎用)等抗生素作用較明顯,一些半合成的青霉素類(lèi)抗生素,比如阿洛西林和哌拉西林對(duì)綠膿桿菌也有很強(qiáng)的抗菌作用,其有效率約為80%,磷霉素對(duì)其也有效,但效果不如以上的抗生素。聯(lián)合用藥可減少耐藥菌株的產(chǎn)生。

(十二)消毒劑敏感性

本菌對(duì)化學(xué)藥物的抵抗力比一般革蘭陰性菌強(qiáng)大。1:2000的氯己定、度米芬和新潔爾滅、1:5000的消毒凈,5min內(nèi)均可將其殺死。0.5%~1%醋酸也可迅速使其死亡,對(duì)多種化學(xué)消毒劑與抗生素有抗性或耐藥性。

(十三)物理滅活

本菌的抵抗力較其他革蘭陰性菌強(qiáng),56℃需1h才可殺死該菌

(十四)在宿主體外存活

在生長(zhǎng)過(guò)程中,本菌對(duì)營(yíng)養(yǎng)的要求不高。對(duì)有正常菌群存在的臨床標(biāo)本或采自環(huán)境中的標(biāo)本應(yīng)接種選擇性培養(yǎng)基,如麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(MAC);對(duì)無(wú)正常菌群存在的臨床標(biāo)本如血液、腦脊液、穿刺液等可接種普通或血瓊脂培養(yǎng)基。在普通瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)18~24h可以見(jiàn)到扁平、濕潤(rùn)的菌落。該菌所產(chǎn)生的帶熒光的水溶性青膿素與綠膿素相結(jié)合,將使得培養(yǎng)基呈亮綠色。在血瓊脂平板上生長(zhǎng)時(shí),可以見(jiàn)到在菌落的周?chē)腥苎h(huán),菌落呈金屬光澤;如果是在液體培養(yǎng)基中,則呈渾濁狀生長(zhǎng),在液體表面形成菌落,而在培養(yǎng)基底部細(xì)菌的生長(zhǎng)不良。(十五)與其他生物和環(huán)境的交互作用

銅綠假單胞菌引起的很多感染發(fā)生在衰弱或免疫受損的住院病人身上。它是重癥監(jiān)護(hù)室感染的第二位最常見(jiàn)的病原菌,是引起呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎的常見(jiàn)原因,除醫(yī)院內(nèi)獲得感染外,HIV感染者很容易在社區(qū)獲得該菌的感染,而且-一且被銅綠假單胞菌感染,?？沙霈F(xiàn)晚期HI感染的體征,本菌所致感染的臨床表現(xiàn)取決于受累部位,在住院病人中,若口咽部有綠膿桿菌和其他革蘭陰性桿菌共同繁殖,則氣管插管,氣管切開(kāi)或間歇性壓呼吸可引起肺部感染。

(十六)預(yù)防和治療方案

(1)銅綠假單胞菌廣泛存在于于自然界,通過(guò)多種途徑在醫(yī)院內(nèi)傳播,因此,必須嚴(yán)格消毒器械、數(shù)料,醫(yī)務(wù)人員及護(hù)理員勤洗手,認(rèn)真執(zhí)行無(wú)菌操作,對(duì)于于患者應(yīng)子隔離,對(duì)于數(shù)料應(yīng)子焚毀。同時(shí),積極治療原發(fā)疾患,去除誘發(fā)因素等,銅綠假單胞菌菌苗分多價(jià)和單價(jià)兩種,兩者對(duì)感染的防治均有一定效果,與多價(jià)高效抗血清合用可以提高菌苗的免疫原性。其他如內(nèi)毒素菌苗、OPE菌苗等以細(xì)菌組分制備的化學(xué)疫苗對(duì)保護(hù)同型菌株的攻擊也有一定作用。

(2)在治療方面,若感染位于外表而且局限,可用1%醋酸沖洗或局部應(yīng)用多粘菌素B或多粘菌素E.即可奏效。壞死組織必須擴(kuò)清,而膿腫則必須引流。若需腸外給藥治療,用妥布霉素或慶大霉素5mg/(kg·d)分劑給予,可治愈大多數(shù)銅綠假單胞菌性尿路感染。根據(jù)臨床反應(yīng),可將劑量減少到3mg/(kg·d)以盡量減少副作用。

(3)對(duì)全身性感染或粒細(xì)胞缺乏的病人,應(yīng)該用一種對(duì)銅綠假單胞菌有效的氨基糖與一種抗假單胞菌青霉素合用。對(duì)嗜中性白細(xì)胞減少并且腎功能處于邊緣狀態(tài)的病人,可用非氨基糖苷類(lèi)聯(lián)合療法,例如雙重B內(nèi)酰胺或B內(nèi)酰胺加一種氟喹諾酮,也是安全的。尿路感染?？捎敏绕S西林或環(huán)丙沙星或其他氟喹諾酮類(lèi)藥物治療。但氟唑諾酮類(lèi)不應(yīng)該用于兒童,因?yàn)樵撍帉?duì)軟骨有不良作用。兩種抗假單胞菌藥物合用時(shí),在治療過(guò)程中出現(xiàn)耐藥菌株的機(jī)會(huì)明顯減少。

二、實(shí)驗(yàn)相關(guān)活動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與控制

(一)實(shí)驗(yàn)室感染性因子的種類(lèi)、來(lái)源和危害

1.感染性因子的種類(lèi)根據(jù)銅綠假單胞菌生物學(xué)特性和本中心實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力范圍,本實(shí)驗(yàn)室可能的感染因子為銅綠假單胞菌病原體本身。

2.感染性因子的來(lái)源

(1)用于銅綠假單胞菌檢測(cè)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)的各類(lèi)樣品、化妝品、一次性使用衛(wèi)生用品、飲用天然礦泉水等及血液標(biāo)本。

(2)樣本采集和抗體檢測(cè)過(guò)程涉及的所有實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所。

(3)實(shí)驗(yàn)室操作中可能產(chǎn)生的含病毒的氣溶膠。

3.感染性因子可能造成的危害(1)在實(shí)驗(yàn)室工作中,被銅綠假單胞菌污染的銳器刺傷造成的皮膚黏膜感染。

(2)各種原因?qū)е碌母腥拘砸后w飛濺或微滴濺出從而污染器物表面或地面等,造成意外食入感染。

(3)工作人員帶菌等引起感染是較可能的實(shí)驗(yàn)室獲得性感染方式。(4)被污染的實(shí)驗(yàn)器材、器Ⅲ等對(duì)實(shí)驗(yàn)立至環(huán)境造成污。

(5)實(shí)驗(yàn)室廢棄物對(duì)環(huán)境造成污染。

(二)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)活動(dòng)過(guò)程中的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與控制

1.實(shí)驗(yàn)方法

(1)風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別未采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè);使用新的或變更的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)前,未經(jīng)技術(shù)確認(rèn),可能存在安全風(fēng)險(xiǎn)。

(2)風(fēng)險(xiǎn)控制措施盡量采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè),在使用新的或變更的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)前,必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的技術(shù)確認(rèn)。

2.樣品采集

(1)水樣、一次性使用衛(wèi)生用品、消毒產(chǎn)品、醫(yī)療器械、化妝品的采集

①主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材采樣剪刀或鑷子、盛樣容器等。

②主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別水樣、一次性使用衛(wèi)生用品、消毒產(chǎn)品、醫(yī)療器械、化妝品等樣品中可能存在感染性病原體。采樣人員采樣不規(guī)范、盛樣容器密合不嚴(yán)、意外破損等,可導(dǎo)致樣品濺灑、溢出、滲漏而污染環(huán)境;同時(shí),銳器使用不當(dāng),存在意外刺傷或劃傷采樣人員的風(fēng)險(xiǎn)。

③風(fēng)險(xiǎn)控制措施采集容器必須防水、防漏,容器外面要包裹足量的吸收性材料,以便容器打破或泄漏時(shí),能吸收溢出的所有液體。在使用剪刀、鑷子、玻璃容器等銳器時(shí)必須規(guī)范操作,做好防護(hù),防止刺傷或劃傷。

(2)血樣的采集

①主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材一次性采血針、真空采血管、消毒棉簽及一次性利器盒。

②主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別血液樣品可能存在不明感染性病原體,真空采血管密封蓋意外脫落或采血針內(nèi)殘留血滴落,造成血樣濺灑從而污染人員或環(huán)境;采血針頭存在意外刺傷或劃傷采樣人員的風(fēng)險(xiǎn)。

③風(fēng)險(xiǎn)控制措施使用一次性采血針和真空采血管,采樣人員經(jīng)過(guò)正規(guī)采血培訓(xùn),并熟練掌握采血技巧。采血前做好個(gè)人防護(hù)(防護(hù)服、乳膠手套、口罩);認(rèn)真、仔細(xì)、謹(jǐn)慎操作,抽血后的針頭直接放入利器盒內(nèi),禁止用手直接接觸使用后的針頭或?qū)⑹褂煤蟮尼橆^重新套上針頭套;采好血后直立于試管架中,防止倒翻;消毒棉簽等污染物放入醫(yī)療廢棄物專(zhuān)用袋中,統(tǒng)一消毒處理。

3.樣品的包裝和運(yùn)送

(1)主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材真空密封采血管、外螺旋蓋玻璃瓶、PV螺旋蓋采樣罐管)主容器、95千帕樣品運(yùn)輸罐、B類(lèi)標(biāo)本運(yùn)輸箱(UN3373冷藏箱)、運(yùn)送車(chē)輛。

(2)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別盛樣容器不堅(jiān)固、密合不嚴(yán),有可能存在樣品濺灑、溢出、滲漏;樣本運(yùn)輸包裝不符合生物安全要求,可能導(dǎo)致樣品的側(cè)翻、滲漏,造成污染擴(kuò)散。

(3)風(fēng)險(xiǎn)控制措施盛裝樣品容器必須堅(jiān)固、不易破碎,盡可能選用塑料制品,采樣后必須檢查容器的密合性。樣品嚴(yán)格按照B類(lèi)要求包裝和運(yùn)送,由采樣人員專(zhuān)車(chē)運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室。

4.樣品接收和前處理

(1)主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材剪刀、鑷子、振蕩器、均質(zhì)器、均質(zhì)袋、離心機(jī)、生物安全柜、潔凈工作臺(tái)等。

(2)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別樣品管理員未按實(shí)驗(yàn)室《樣品管理程序》(XJK/CX32)要求接收樣品;樣品前處理時(shí),打開(kāi)感染性樣本包裝的動(dòng)作過(guò)猛,會(huì)造成樣品側(cè)翻;離心操作時(shí)發(fā)生離心管破裂等意外情況。

(3)風(fēng)險(xiǎn)控制措施

①樣品接收必須在專(zhuān)用的區(qū)域進(jìn)行,合同評(píng)審人員和收樣人員嚴(yán)格按照《樣品管理程

序》(ⅪJK/CX32)要求交接樣品,不得擅自打開(kāi)樣品包裝,收樣后及時(shí)洗手。

②開(kāi)始檢測(cè)前,對(duì)盛裝感染性材料樣品的容器,必須在生物安全柜中緩慢打開(kāi),開(kāi)啟的容器管口不能對(duì)著操作者。

③對(duì)含有感染性的樣品離心振蕩時(shí),必須將離心蓋封嚴(yán)實(shí),并關(guān)上離心機(jī)蓋。

④實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備應(yīng)急藥箱,發(fā)生手剪傷等意外事件時(shí)應(yīng)立即進(jìn)行消毒包扎處理。

⑤當(dāng)發(fā)生離心管或均質(zhì)袋意外破裂、濺出時(shí),及時(shí)對(duì)所有涉及污染的部位進(jìn)行消毒處理。同時(shí),按《二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室建設(shè)與管理》“實(shí)驗(yàn)室意外事故的處置”章節(jié)處置。

5.樣本檢測(cè)過(guò)程

(1)主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材培養(yǎng)箱、水浴箱、微生物膜過(guò)濾系統(tǒng)、細(xì)菌鑒定和藥敏測(cè)試儀、生物安全柜、振蕩器、吸管和試管、移液器及吸頭、接種環(huán)、培養(yǎng)皿等。

(2)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別

①對(duì)水樣、一次性使用衛(wèi)生用品、消毒產(chǎn)品、醫(yī)療器械、化妝品等樣品進(jìn)行分離鑒定生化試驗(yàn)、藥敏試驗(yàn)等實(shí)驗(yàn)活動(dòng)均涉及活菌操作。在檢測(cè)過(guò)程中移液、水樣過(guò)濾、混勻震蕩、劃線(xiàn)分離、涂片染色、離心等操作都可產(chǎn)生氣溶膠。雖然銅綠假單胞菌不通過(guò)呼吸道感染,但由于樣品可能含有其他未知的病原體,也不應(yīng)忽視。

②實(shí)驗(yàn)過(guò)程中玻璃器材意外破碎或滲漏、離心操作時(shí)離心管意外破裂等事故,可造成液體濺出從而污染設(shè)備表面或工作臺(tái)面等環(huán)境,間接污染操作者的皮膚、黏膜。

(3)風(fēng)險(xiǎn)控制措施

①開(kāi)展檢測(cè)時(shí)檢測(cè)人員應(yīng)按照二級(jí)生物安全防護(hù)要求做好自身防護(hù)措施,涂抹物等具有感染性的材料的操作必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后必須對(duì)桌面、臺(tái)面及時(shí)進(jìn)行消毒處理。

②必須使用移液器或吸球移取樣液,旋蓋和移液操作的動(dòng)作要輕緩,所有吸管應(yīng)用棉塞,移液頭盡可能使用帶濾芯的,以減少對(duì)移液器或吸球的污染。

③使用直徑2~3mm且完全封閉、手柄的長(zhǎng)度小于6cm的接種環(huán)分離細(xì)菌,盡可能使用封閉式微型電加熱器消毒接種環(huán),避免在酒精燈的明火上加熱從而引起感染性物質(zhì)的爆濺。

④盡可能以塑料器皿代替玻璃器皿,若必須使用玻璃器皿,只能用實(shí)驗(yàn)室級(jí)玻璃(硼硅酸鹽),且任何破碎或有裂紋的器皿都應(yīng)丟棄。禁止用手直接接觸使用后的針頭、刀片玻璃碎片等銳器。嚴(yán)禁用帶有注射針頭的注射器吸液,更不可當(dāng)吸管用,用過(guò)的銳器應(yīng)直接放入利器盒,消毒后廢棄。

⑤在任何可能導(dǎo)致潛在的傳染性物質(zhì)濺出的操作過(guò)程中,應(yīng)保護(hù)好面部、眼睛和嘴。6.菌株使用、保存和運(yùn)輸

(1)主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材接種針(環(huán))、菌株保存管、生物安全柜、95千帕樣品運(yùn)輸罐、B類(lèi)標(biāo)本運(yùn)輸箱(UN3373冷藏箱)、運(yùn)送車(chē)輛。

(2)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別

①保菌操作不規(guī)范、個(gè)人防護(hù)不到位、保菌磁珠管等保菌容器意外破損、磁珠掉落等會(huì)導(dǎo)致病原菌污染實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和實(shí)驗(yàn)人員。

②銅綠假單胞菌使用和保存未按照《菌(毒)種管理規(guī)程》(XJK/CX37)要求實(shí)施管理,存在菌株被惡意使用及污染環(huán)境等生物安全隱患。

③運(yùn)送包裝不符合生物安全要求,或運(yùn)輸工具無(wú)安全保障,則易造成污染擴(kuò)散,甚至樣本丟失。

(3)風(fēng)險(xiǎn)控制措施

①銅綠假單胞菌分離純化及保菌操作應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。

②銅綠假單胞菌標(biāo)準(zhǔn)菌株的使用、保存嚴(yán)格按照《菌(毒)種管理規(guī)程》(XJK/CX37)要求進(jìn)行操作,實(shí)行雙人雙鎖保管,嚴(yán)防菌株被惡意使用而造成生物危害。

③銅綠假單胞菌陽(yáng)性菌株的上送應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行規(guī)范3層包裝(同“樣品采集”),攜帶“可感染人類(lèi)的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運(yùn)輸許可證”,由專(zhuān)車(chē)運(yùn)送,并由專(zhuān)業(yè)人員全程護(hù)送。7.實(shí)驗(yàn)室的清潔和消毒

(1)主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材70%~75%的酒精、施康清洗消毒液Ⅰ。

(2)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別工作完畢后,若不及時(shí)對(duì)工作臺(tái)面、生物安全柜進(jìn)行消毒,有可能會(huì)對(duì)下次操作人員造成污染或感染。

(3)風(fēng)險(xiǎn)控制措施工作完畢后,及時(shí)對(duì)檢測(cè)所涉及的工作臺(tái)面、地面和生物安全柜進(jìn)行消毒,使用稀釋100倍的施康清洗消毒液Ⅰ擦拭,用消毒液清潔后要干燥20min以上。生物安全柜用70%~75%的酒精擦拭消毒。待實(shí)驗(yàn)和消毒完畢后,先脫去手套,再脫去防護(hù)服,并正確用肥皂和流水洗手。

8.廢棄物處置

(1)主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材醫(yī)療廢棄物專(zhuān)用袋、硬質(zhì)耐高壓且防滲漏的垃圾桶、高壓滅菌器

(2)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別

①樣品采集和實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過(guò)程產(chǎn)生的感染性廢棄物,包括培養(yǎng)基、標(biāo)本和陽(yáng)性菌種及所有實(shí)驗(yàn)過(guò)程涉及的用品,釋放前未按照規(guī)范要求處理,導(dǎo)致感染或致病因子外泄而污染環(huán)境。

②樣品采集和實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過(guò)程產(chǎn)生的被污染的損傷性廢棄物,如一次性使用采血用具載玻片、玻璃試管、玻璃安瓿、培養(yǎng)皿等,未按照要求規(guī)范處理,存在意外刺傷或劃傷工作人員的隱患。

(3)風(fēng)險(xiǎn)控制措施實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理應(yīng)遵循《醫(yī)療廢棄物管理?xiàng)l例》《醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)醫(yī)療廢棄物管理辦法》《醫(yī)療廢物專(zhuān)用包裝袋、容器和警示標(biāo)志標(biāo)準(zhǔn)》等相關(guān)法規(guī)要求,分類(lèi)收集,規(guī)范處置。所有損傷性廢棄物必須放置于有警示標(biāo)識(shí)的硬質(zhì)、防漏、防銳器刺破的專(zhuān)用利器盒中;所有感染性廢棄物必須放置于有警示標(biāo)識(shí)的醫(yī)療廢物專(zhuān)用包裝袋中;使用高效消毒液浸泡或高溫高壓滅菌后集中處理,集中存放至中心指定的醫(yī)療廢棄室,由有資質(zhì)的醫(yī)療廢棄物處理單位上門(mén)收集、集中處置。同時(shí),做好廢棄物處置交接記錄,所有相關(guān)記錄應(yīng)定期整理歸檔。

(三)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)活動(dòng)中其他風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與預(yù)防控制措施

1.電力

(1)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別斷電或電壓不穩(wěn),存在引發(fā)電氣設(shè)備故障的隱患。斷電可使運(yùn)行中的生物安全柜、檢測(cè)設(shè)備突然停止工作,致使實(shí)驗(yàn)活動(dòng)被迫中斷,存在感染性物質(zhì)外溢從而污染操作人員和環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)。

(2)預(yù)防控制措施實(shí)驗(yàn)室由雙路市電供電,并為關(guān)鍵儀器設(shè)備配備應(yīng)急電源(UPS),避免實(shí)驗(yàn)室由斷電可能引發(fā)的生物安全風(fēng)險(xiǎn),確保檢測(cè)工作順利進(jìn)行。

2.電氣操作

(1)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)涉及的電氣操作,包括實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)內(nèi)電氣設(shè)備的啟動(dòng)、關(guān)閉、安裝和維修;設(shè)備層內(nèi)UPS、空調(diào)機(jī)組等電氣設(shè)備的啟動(dòng)、關(guān)閉和維修等。這些電氣操作的過(guò)程可能產(chǎn)生觸電、電擊、造成電氣故障等風(fēng)險(xiǎn)

(2)預(yù)防控制措施

①電氣設(shè)備的設(shè)計(jì)及制造符合相關(guān)安全標(biāo)準(zhǔn)的要求。實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)內(nèi)若有380V電源插座,則需明確標(biāo)識(shí),并由有資質(zhì)的專(zhuān)業(yè)人員進(jìn)行操作。

②新的、改裝過(guò)的或修理過(guò)的電氣設(shè)備在未經(jīng)專(zhuān)業(yè)人員(如有資質(zhì)的電工)完成電氣安全測(cè)試和設(shè)備符合安全使用要求之前,不允許使用

③電氣設(shè)備使用人員接受正確操作的培訓(xùn),操作方式不降低電氣安全性。電氣設(shè)備使用人員要定期檢查設(shè)備可能引起電氣故障的破損。只有專(zhuān)業(yè)人員才可從事電氣設(shè)備和電路工作。禁止未經(jīng)授權(quán)的工作。

④采取措施對(duì)設(shè)備去污染,以減少維護(hù)人員被病原菌感染的風(fēng)險(xiǎn)

3.實(shí)驗(yàn)室給排水設(shè)施設(shè)備

(1)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室含有給排水的設(shè)施設(shè)備,包括位于工作區(qū)和洗消區(qū)的高壓滅菌器和洗滌池。水管道意外破裂、排水管道阻塞可能導(dǎo)致感染性材料溢出,有污染實(shí)驗(yàn)人員和環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)。

(2)預(yù)防控制措施實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的所有染菌物及器具,必須先經(jīng)高壓滅菌或含氯消毒劑浸泡消毒后洗滌,洗消產(chǎn)生的污水集中排入中心污水池消毒處理,嚴(yán)禁直接排放。按照GB18466中6.1污水取樣與監(jiān)測(cè)的要求執(zhí)行。

4.實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備管道

(1)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備管道穿越維護(hù)結(jié)構(gòu)的部位可能造成密封不嚴(yán),當(dāng)感染性材料溢出時(shí),有污染環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)

(2)預(yù)防控制措施所有管道穿越維護(hù)結(jié)構(gòu)的部位嚴(yán)格密封,定期進(jìn)行檢查檢測(cè),避免感染性材料外溢從而污染環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)

5.主要檢測(cè)儀器設(shè)備

(1)細(xì)菌鑒定和藥敏測(cè)試儀(ATB儀)等設(shè)備

①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別對(duì)疑似銅綠假單胞菌鑒定時(shí)要用到ATB儀進(jìn)行生化鑒定及藥敏試驗(yàn),如果不按操作規(guī)程進(jìn)行規(guī)范操作,則會(huì)導(dǎo)致病原體濺出、滲漏而污染實(shí)驗(yàn)環(huán)境。

②風(fēng)險(xiǎn)控制措施嚴(yán)格按ATB儀等設(shè)備操作規(guī)程操作和維護(hù),每次使用完畢后對(duì)設(shè)備箱體及可能污染的實(shí)驗(yàn)環(huán)境進(jìn)行消毒。

(2)離心機(jī)①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別未正確配備密閉蓋離心機(jī)、密封頭的真空采血管、耐壓螺旋蓋離心管,高速離心時(shí)可產(chǎn)生氣溶膠擴(kuò)散;離心血樣時(shí)沒(méi)有做好平衡,可能會(huì)發(fā)生離心管破裂離心管蓋脫落。

②風(fēng)險(xiǎn)控制措施實(shí)驗(yàn)室配備密閉蓋離心機(jī)、密封頭的真空采血管、耐壓螺旋蓋離心管;離心前做好平衡,選擇正確的離心速度和離心力;規(guī)范正確操作;每次使用后做好清潔消毒和使用維護(hù)記錄,定期進(jìn)行功能檢查,確保離心機(jī)性能正常。

(3)微生物膜過(guò)濾系統(tǒng)

①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別未按照儀器使用要求規(guī)范操作,可能發(fā)生濾杯松動(dòng),導(dǎo)致待檢樣品濾液外流從而污染實(shí)驗(yàn)臺(tái)面和設(shè)備。

②預(yù)防控制措施實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格按照儀器使用說(shuō)明規(guī)范操作,儀器啟動(dòng)前,必須檢查濾杯與濾器接口的密封性,保證密閉狀態(tài),并做好個(gè)人生物安全防護(hù);每次使用后做好清潔消毒和使用維護(hù)記錄,定期進(jìn)行功能檢査,確保儀器機(jī)性能正常。

6.生物安全設(shè)施設(shè)備

(1)生物安全柜

①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別沒(méi)有按照設(shè)備操作規(guī)程或使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作、維護(hù),使生物安全柜的氣溶膠防護(hù)效果明顯降低或消失,失去安全防護(hù)效果。設(shè)備長(zhǎng)時(shí)間使用未及時(shí)更換HEPA過(guò)濾膜,可出現(xiàn)工作窗口氣流速度降低或流向紊亂等功能失常狀況。生物安全柜使用后未徹底消毒處理,對(duì)于清潔、維護(hù)人員將會(huì)產(chǎn)生污染。設(shè)備長(zhǎng)期關(guān)停,將會(huì)使部分電器元件老化從而失去正常功能。

②預(yù)防控制措施使用人員接受相關(guān)操作、維護(hù)培訓(xùn),做到規(guī)范使用和維護(hù)。每月進(jìn)行空氣沉降菌檢測(cè),每年請(qǐng)有資質(zhì)的服務(wù)機(jī)構(gòu)對(duì)生物安全柜風(fēng)速、氣流、塵埃粒子數(shù)、紫外線(xiàn)強(qiáng)度等主要性能指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè),確保其功能正常。

(2)高壓滅菌器

①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別沒(méi)有正確配備高壓滅菌器,存在氣溶膠污染環(huán)境的隱患;沒(méi)有按照設(shè)備操作規(guī)程或使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作、維護(hù),可能使高壓滅菌器效果明顯降低或失效,失去去污染與無(wú)害化的作用;壓力鍋長(zhǎng)時(shí)間使用又不定期監(jiān)測(cè)滅菌效果,對(duì)壓力容器的滅菌效果無(wú)從考證,存在滅菌不徹底從而引發(fā)污染的隱患。壓力鍋長(zhǎng)期關(guān)停期間,如果不及時(shí)排干鍋體水分,將會(huì)使內(nèi)部器件老化從而失去正常功能。

②預(yù)防控制措施持證上崗。選擇下排式高壓滅菌器,防止氣溶膠污染,正確規(guī)范操作,定期維護(hù),確保高壓滅菌器性能正常,做好使用記錄。對(duì)壓力滅菌器按照WS310.3《醫(yī)院消毒供應(yīng)中心第3部分:清洗消毒及滅菌效果監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定,每次監(jiān)測(cè)化學(xué)指示物,監(jiān)控記錄溫度、壓力、時(shí)間等滅菌參數(shù),每周進(jìn)行生物監(jiān)測(cè),以保證滅菌質(zhì)量。

(3)個(gè)人防護(hù)用品①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室不提供足夠數(shù)量的、符合質(zhì)量要求的防護(hù)服、防護(hù)眼罩、一次性乳膠手套、口罩和覆蓋足背的防滑鞋等,使用大小不合適的個(gè)人防護(hù)用品,個(gè)人防護(hù)用品穿戴、脫卸的程序、方法不符合要求,均可能造成人員感染或污染環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)。

②預(yù)防控制措施選擇正規(guī)、符合質(zhì)量要求的防護(hù)用品,使用前進(jìn)行必要的培訓(xùn)。

(4)應(yīng)急救治設(shè)施和用品①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室若沒(méi)有配備洗器、應(yīng)急藥箱等必要的應(yīng)急設(shè)施和物品,或配備的急救用品種類(lèi)不全、不合適或過(guò)期,導(dǎo)致急用時(shí)無(wú)法發(fā)揮作用。

②預(yù)防控制措施在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)正確配備洗眼器,確保功能正常。配備的75%乙醇碘附或其他消毒劑、創(chuàng)可貼等急救物品與實(shí)驗(yàn)活動(dòng)相適應(yīng)并在有效期內(nèi)使用,專(zhuān)人負(fù)責(zé)管理,定期維護(hù)、清理、更新。

(5)消毒滅菌劑

①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別消毒劑產(chǎn)品無(wú)生產(chǎn)許可證、過(guò)期、配制方法或濃度不正確、種類(lèi)選擇不合理,將會(huì)導(dǎo)致消毒效果降低、生物滅活能力降低或?qū)ξ锲犯g性增加、對(duì)皮膚造成刺激等問(wèn)題。

②預(yù)防控制措施選擇符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的正規(guī)廠家生產(chǎn)的產(chǎn)品,選擇合適的消毒劑按照規(guī)定的消毒方法、消毒時(shí)間、消毒濃度(劑量)進(jìn)行消毒,避免使用過(guò)期產(chǎn)品;消毒過(guò)程中消毒人員應(yīng)做好必要的個(gè)體防護(hù),防止發(fā)生意外。根據(jù)銅綠假單胞菌特點(diǎn),選用70%~75%酒精和稀釋10~25倍、50~100倍、200倍的施康消毒劑I(主要成分為次氯酸鈉)作為實(shí)驗(yàn)室常用消毒劑。

7.管理體系的風(fēng)險(xiǎn)

(1)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別管理體系(包括應(yīng)急預(yù)案)是否健全和完善,是否符合實(shí)際管理要求,程序文件、作業(yè)指導(dǎo)書(shū)和操作規(guī)程是否科學(xué)和具有可操作性,是能否確保生物安全的主要因素。如果組織結(jié)構(gòu)不健全、設(shè)置不合理,體系文件與實(shí)際工作不匹配,以及部門(mén)職責(zé)不清或銜接不當(dāng)?shù)?就都可能帶來(lái)安全風(fēng)險(xiǎn)。

(2)預(yù)防控制措施定期開(kāi)展對(duì)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范(SOP)和其他有關(guān)管理體系的評(píng)審,發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及時(shí)修訂、完善,以確保生物安全管理體系持續(xù)有效運(yùn)行。

(四)工作人員的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與預(yù)防控制措施

1.人員數(shù)量和素質(zhì)

(1)人員數(shù)量

①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別人員過(guò)少會(huì)因缺少相互提示監(jiān)督或因工作量增大而導(dǎo)致操作過(guò)程中工作失誤增加,風(fēng)險(xiǎn)增加。

②預(yù)防控制措施采樣和檢測(cè)人員數(shù)量應(yīng)與工作量相匹配,盡量有2名工作人員同時(shí)進(jìn)行采樣和檢測(cè)工作。

(2)人員結(jié)構(gòu)

①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)人員職稱(chēng)分布不合理,新進(jìn)人員沒(méi)有高資歷人員帶、教操作,不能很好應(yīng)對(duì)意外事件,風(fēng)險(xiǎn)增加。②預(yù)防控制措施實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)人員年齡和資歷結(jié)構(gòu)應(yīng)配備合理,新進(jìn)人員應(yīng)由高資人員帶教或監(jiān)督操作。(3)職業(yè)操守①主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別銅綠假單胞菌檢測(cè)存在一定的生物安全風(fēng)險(xiǎn),若責(zé)任心不強(qiáng)的人員參與該項(xiàng)工作,則產(chǎn)生生物危害而危及人員安全、環(huán)境安全與社會(huì)安定的可能性。

②預(yù)防控制措施加強(qiáng)職業(yè)道德教育,培養(yǎng)工作責(zé)任心。

2.健康管理主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別健康狀況主要包括生理、心理素質(zhì)與免疫狀態(tài)。當(dāng)手部皮膚有開(kāi)放性損傷、身體出現(xiàn)腹瀉等胃腸道癥狀、機(jī)體免疫力低下,或其他不適合工作的狀況,職業(yè)暴露風(fēng)險(xiǎn)增加。

(2)預(yù)防控制措施建立健康申報(bào)制度,遇有手部皮膚有開(kāi)放性傷口及其他不適合工作的情況,及時(shí)向科室負(fù)責(zé)人報(bào)告并暫停工作;裸露皮膚的微小傷口、擦傷、皸裂等應(yīng)用防水材料嚴(yán)密覆蓋。如接觸物的傳染性大,應(yīng)戴雙層手套。

3.人員資質(zhì)

(1)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別檢測(cè)人員不具備衛(wèi)生檢測(cè)相關(guān)學(xué)歷教育背景,不熟悉銅綠假單胞菌檢測(cè)方法及操作規(guī)范,無(wú)法保證工作質(zhì)量和安全。

(2)預(yù)防控制措施檢測(cè)人員必須是檢驗(yàn)或相關(guān)專(zhuān)業(yè)畢業(yè),經(jīng)過(guò)上崗培訓(xùn)和持證上崗。

4.生物安全培訓(xùn)要求

(1)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別檢測(cè)人員、輔助人員、后勤保障人員、進(jìn)修實(shí)習(xí)人員上崗前沒(méi)有接受?chē)?yán)格的生物安全,以及相關(guān)生物安全設(shè)備操作的技術(shù)培訓(xùn),易造成生物安全事故發(fā)生。

(2)預(yù)防控制措施檢測(cè)人員、輔助人員、后勤保障人員每年參加本中心組織的生物安全知識(shí)或生物安全操作技術(shù)培訓(xùn)、考核。上崗前熟練掌握生物安全儀器設(shè)備、設(shè)施操作技術(shù),具備相關(guān)的安全防護(hù)能力。進(jìn)修實(shí)習(xí)人員參與實(shí)驗(yàn)活動(dòng)前必須進(jìn)行生物安全知識(shí)的培訓(xùn),在帶教老師的監(jiān)督下工作。

5.應(yīng)急事件處理能力

(1)主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)人員上崗前沒(méi)有接受實(shí)驗(yàn)室意外事故處理、職業(yè)暴露后預(yù)防等突發(fā)事件處置的培訓(xùn),一旦發(fā)生意外事件,就不能有效地進(jìn)行早期處理和控制生物安全事件。

(2)預(yù)防控制措施實(shí)驗(yàn)室工作人員必須嚴(yán)格按照《實(shí)驗(yàn)室意外事故和職業(yè)性疾病報(bào)告制度》和《病原微生物生物安全應(yīng)急處置技術(shù)方案》中規(guī)定的要求進(jìn)行應(yīng)急事件的處置,規(guī)范工作中職業(yè)暴露后現(xiàn)場(chǎng)急救處理。

(五)實(shí)驗(yàn)室非常規(guī)活動(dòng)中的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與預(yù)防控制措施1.主要的實(shí)驗(yàn)室非常規(guī)活動(dòng)

(1)實(shí)驗(yàn)室外專(zhuān)業(yè)人員對(duì)實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備的維護(hù)、維修、檢定/校準(zhǔn)、檢測(cè)驗(yàn)證(如主要設(shè)施設(shè)備的檢測(cè)驗(yàn)證)和更換(如高效過(guò)濾器等的更換)等。

(2)實(shí)驗(yàn)室后勤保障人員對(duì)實(shí)驗(yàn)室及公共環(huán)境的保潔、實(shí)驗(yàn)器材的清洗消毒。

(3)實(shí)驗(yàn)室外人員參觀實(shí)驗(yàn)室和上級(jí)部門(mén)對(duì)實(shí)驗(yàn)室的檢查等。2.主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別

(1)上述人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室從事相關(guān)活動(dòng),特別是不慎打翻、打破標(biāo)本管或損壞儀器零部件等情況,可能會(huì)引起實(shí)驗(yàn)室感染的風(fēng)險(xiǎn)。

(2)實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行過(guò)程中某些人員需要進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室參觀,存在影響實(shí)驗(yàn)活動(dòng)正常運(yùn)行或者導(dǎo)致相關(guān)或不相關(guān)的設(shè)施設(shè)備損壞的風(fēng)險(xiǎn)。

3.預(yù)防控制措施

(1)實(shí)行人員準(zhǔn)入、登記制度。進(jìn)修實(shí)習(xí)人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室從事檢測(cè)活動(dòng)前,必須先進(jìn)行生物安全和實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度的培訓(xùn)。若中心實(shí)驗(yàn)室外專(zhuān)業(yè)人員和實(shí)驗(yàn)室后勤保障人員確需進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行相關(guān)活動(dòng),應(yīng)有中心實(shí)驗(yàn)室人員陪同。

(2)實(shí)驗(yàn)室外專(zhuān)業(yè)人員和實(shí)驗(yàn)室后勤保障人員必須要有相應(yīng)的專(zhuān)業(yè)知識(shí),應(yīng)對(duì)其進(jìn)行生物安全培訓(xùn),提供安全指南,實(shí)驗(yàn)室人員應(yīng)協(xié)助、指導(dǎo)和規(guī)范進(jìn)入人員在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的活動(dòng)并對(duì)其安全行為進(jìn)行監(jiān)督,進(jìn)入人員必須遵守實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)管理規(guī)定,以確保人員和環(huán)境安全。

(3)進(jìn)入人員未經(jīng)許可絕對(duì)不能私自動(dòng)用實(shí)驗(yàn)室內(nèi)有標(biāo)志的危險(xiǎn)品(除非經(jīng)過(guò)授權(quán))

不能將未經(jīng)消毒處理的物品拿出實(shí)驗(yàn)區(qū)。

(4)在初篩實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行設(shè)施、設(shè)備維護(hù)維修過(guò)程中,若發(fā)生意外事件,應(yīng)立即報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人根據(jù)造成的事故進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估,采取應(yīng)對(duì)措施。按專(zhuān)業(yè)技術(shù)要求進(jìn)行設(shè)施、設(shè)備的維護(hù)維修時(shí),不能私自動(dòng)用其他設(shè)施設(shè)備,若導(dǎo)致相關(guān)或不相關(guān)的設(shè)施設(shè)備損壞時(shí)應(yīng)及時(shí)報(bào)告。

(5)當(dāng)需要更換HEPA過(guò)濾膜或高效過(guò)濾器時(shí),應(yīng)先對(duì)高效過(guò)濾器、HEPA過(guò)濾膜等作原位消毒后,專(zhuān)業(yè)人員才進(jìn)行更換。

(6)為確保自己和他人的安全,禁止未穿防護(hù)服的人員隨意進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室的防護(hù)區(qū)域同時(shí)也禁止穿防護(hù)服的人員走出實(shí)驗(yàn)室的防護(hù)區(qū)域。

(7)對(duì)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施、設(shè)備進(jìn)行維護(hù)工作時(shí)動(dòng)作輕柔,避免意外事故發(fā)生。

(8)在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行設(shè)施、設(shè)備檢驗(yàn)維修工作時(shí),至少有2人共同參加。

(9)檢驗(yàn)維修后,離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室前,必須洗手。

(六)被誤用和惡意使用的風(fēng)險(xiǎn)與預(yù)防控制措施

1.主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別陽(yáng)性標(biāo)本未明確標(biāo)識(shí)并未實(shí)行雙人雙鎖管理,實(shí)驗(yàn)活動(dòng)結(jié)束后不及時(shí)消毒操作場(chǎng)所,工作人員在不知情的情況下可能誤用標(biāo)本、實(shí)驗(yàn)材料和設(shè)施設(shè)備等,導(dǎo)致人員感染和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境污染、人員受傷或設(shè)施設(shè)備損壞等事故。2.預(yù)防控制措施

(1)實(shí)行嚴(yán)格的人員準(zhǔn)入和持證上崗制度。

(2)所有獲得批準(zhǔn)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作的人員,必須嚴(yán)格按規(guī)程操作實(shí)驗(yàn)材料和設(shè)施設(shè)備,以及其他一切實(shí)驗(yàn)活動(dòng),不得私自動(dòng)用實(shí)驗(yàn)室內(nèi)任何不熟悉物品。

(3)發(fā)生事故時(shí)必須及時(shí)報(bào)告并作必要的處理和記錄。

(4)實(shí)驗(yàn)所用的材料和試劑等必須有明確的標(biāo)識(shí)。

(5)陽(yáng)性標(biāo)本嚴(yán)格實(shí)施雙人雙鎖管理。(七)相關(guān)實(shí)驗(yàn)室已發(fā)生的事故分析和從中得到的啟示

實(shí)驗(yàn)室人員感染事件正在逐年增加,主要原因是實(shí)驗(yàn)室人員在進(jìn)行樣本采集、前處理、檢驗(yàn)、廢棄物處置等工作過(guò)程中,操作不規(guī)范、個(gè)人防護(hù)不到位引起的。銅綠假單胞菌可通過(guò)污染醫(yī)療器具及帶菌醫(yī)護(hù)人員引起醫(yī)源性感染。因此,應(yīng)嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室相關(guān)規(guī)定,做好個(gè)人防護(hù),規(guī)范操作。

三、實(shí)驗(yàn)室理化因素風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及安全防護(hù)措施

(一)紫外線(xiàn)

1.主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別潔凈實(shí)驗(yàn)室內(nèi)傳遞窗、生物安全柜、BSL-2實(shí)驗(yàn)室均使用紫外線(xiàn)燈進(jìn)行物體表面消毒。紫外線(xiàn)波長(zhǎng)為250~280nm,主要影響眼睛和皮膚,引起急性角膜炎和結(jié)膜炎、慢性白內(nèi)障等眼疾病,還可誘發(fā)皮膚癌。紫外線(xiàn)燈開(kāi)啟時(shí),人員在不知情的情況下進(jìn)入可造成傷害。

2.安全防護(hù)措施在實(shí)驗(yàn)室工作應(yīng)避免紫外線(xiàn)直接照射人體,特別是眼部。生物安全柜表面固定紫外線(xiàn)危害的標(biāo)識(shí),提醒實(shí)驗(yàn)人員小心紫外線(xiàn)危害。在進(jìn)行紫外線(xiàn)消毒時(shí),實(shí)驗(yàn)人員盡量遠(yuǎn)離消毒區(qū)域,基本可以規(guī)避紫外線(xiàn)對(duì)人體的危害。

(二)輻射

1.主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別輻射源或輻射事故可以間接導(dǎo)致病原微生物屏障系統(tǒng)的破壞增加實(shí)驗(yàn)人員被病原微生物感染的風(fēng)險(xiǎn)。

2.預(yù)防控制措施實(shí)驗(yàn)室應(yīng)遠(yuǎn)離輻射源,如果無(wú)法避開(kāi),則應(yīng)采取物理隔離措施,防止輻射源對(duì)檢測(cè)工作和人員健康產(chǎn)生影響。本中心實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部和周邊建筑群均沒(méi)有輻射源,所以輻射風(fēng)險(xiǎn)基本不用考慮。

(三)施康清洗消毒劑

1.主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別施康清洗消毒劑Ⅰ屬于含氯消毒劑,有效氯的含量為4.55%~5.55%,次氯酸鈉為主要?dú)⒕蜃?。含氯的消毒液?huì)殘留在空氣中不揮發(fā),長(zhǎng)期使用會(huì)使人感到頭疼、惡心,刺激黏膜,對(duì)于有體質(zhì)過(guò)敏的人,還容易引發(fā)過(guò)敏、哮喘疾病等。高濃度的含氯消毒劑對(duì)人的呼吸道黏膜和皮膚有明顯的刺激作用,可使人流淚、咳嗽,并刺激皮膚和黏膜,嚴(yán)重者可發(fā)生氯氣中毒。急性中毒者出現(xiàn)躁動(dòng)、惡心、嘔吐、呼吸困難等癥狀,甚至因室息而死。

2.安全防護(hù)措施按照使用說(shuō)明,根據(jù)消毒對(duì)象不同而配制不同的稀釋倍數(shù),避免使用不必要的高濃度的消毒液,稀釋和使用時(shí)戴好手套,消毒后可及時(shí)開(kāi)窗通風(fēng),基本可規(guī)避消毒液對(duì)人體的危害。

(四)其他

1.主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的照明和聲音(生物安全柜等)有可能因強(qiáng)光和噪聲對(duì)人員造成損害

2.安全防護(hù)措施對(duì)實(shí)驗(yàn)室的照明和聲音等參數(shù)進(jìn)行檢測(cè),確保合格,避免強(qiáng)光和

噪聲對(duì)人員的損害

四、實(shí)驗(yàn)室火災(zāi)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與預(yù)防控制措施

1.主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)識(shí)別

(1)超負(fù)荷用電,電線(xiàn)過(guò)長(zhǎng)。(2)電器和電源老化、電器保養(yǎng)不良,例如電纜的絕緣層破舊或損壞。

(3)用火不當(dāng)?shù)纫l(fā)火災(zāi)。

(4)儀器設(shè)備在不使用時(shí)未關(guān)團(tuán)電源。(5)使用的儀器設(shè)備不是專(zhuān)為實(shí)驗(yàn)室環(huán)境設(shè)計(jì)。(6)易燃、易爆品處理、保存不當(dāng)。(7)不相容化學(xué)品沒(méi)有正確隔離。(8)在易燃物品和蒸氣附近有能產(chǎn)生火花的設(shè)備。(9)通風(fēng)系統(tǒng)不當(dāng)或不充分。

2.預(yù)防控制措施

實(shí)驗(yàn)室采取以下預(yù)防控制措施避免火災(zāi)發(fā)生,保證發(fā)生火災(zāi)后能夠全撤離實(shí)驗(yàn)室。

(1)定期檢查電器插座、電線(xiàn)絕緣是否完好,保證用電負(fù)荷,對(duì)易燃、易爆等危險(xiǎn)品進(jìn)行有效區(qū)域隔離。

(2)實(shí)驗(yàn)室配備火火器。放置在易取的地點(diǎn),擺放部位張貼滅火器標(biāo)識(shí),該滅火器用于撲火可控制的火災(zāi),幫助人員撤離火場(chǎng)；對(duì)滅火器進(jìn)行期檢查和維護(hù),確保其有效使用。

(3)實(shí)驗(yàn)室需裝設(shè)應(yīng)急燈,所有出口都有黑暗中可見(jiàn)的“緊急出口”標(biāo)識(shí)。當(dāng)出現(xiàn)緊急狀況時(shí),實(shí)驗(yàn)室所有出的鎖必項(xiàng)處于開(kāi)啟狀態(tài),出口設(shè)計(jì)保證在不經(jīng)過(guò)高危險(xiǎn)區(qū)域就能逃脫,所有出口都能通向一個(gè)開(kāi)放空間。

(4走廊、流通區(qū)城不得放置障礙物,不受人員流動(dòng)和滅火設(shè)備移動(dòng)的影響。

(5)在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)顯著位置張貼火警電話(huà)標(biāo)識(shí)。實(shí)驗(yàn)室每年對(duì)工作人員進(jìn)行消防知識(shí)培訓(xùn),包括消防器材的使用、火災(zāi)發(fā)生時(shí)的應(yīng)急行動(dòng)等。

五、自然災(zāi)害風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與安全防護(hù)措施

自然災(zāi)害可能導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)室緊急狀況主要包括水災(zāi)和地震等。

(一)水災(zāi)

1.風(fēng)險(xiǎn)識(shí)別水災(zāi)可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室維護(hù)結(jié)構(gòu)和設(shè)施損壞,實(shí)驗(yàn)內(nèi)感染性材料隨水外溢。

2.安全防護(hù)措施

(1)在因個(gè)手朋中制《實(shí)驗(yàn)室緊急事件應(yīng)急預(yù)案》，并對(duì)所有實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)行培訓(xùn)。

(2)實(shí)驗(yàn)室一旦發(fā)生水災(zāi)報(bào)警時(shí),應(yīng)立刻停止工作。首先，考慮實(shí)驗(yàn)室內(nèi)感染性物和人員的轉(zhuǎn)移。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人、中心主任根據(jù)條件及時(shí)采取對(duì)策,第一時(shí)間聯(lián)系相關(guān)消防人員。消防人員應(yīng)有防護(hù)措施,并在受過(guò)訓(xùn)練的實(shí)驗(yàn)室工作人員陪同下，進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室完成菌毒種和人員的安全轉(zhuǎn)移。

(二)地震

1.風(fēng)險(xiǎn)識(shí)別發(fā)生地震等自然災(zāi)害會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室維護(hù)結(jié)構(gòu)和設(shè)施損壞,導(dǎo)致人員傷害和實(shí)驗(yàn)室感染性材料外溢的風(fēng)險(xiǎn)。

2.安全防護(hù)措施實(shí)驗(yàn)室應(yīng)采取措施降低自然害帶來(lái)的險(xiǎn),保證火災(zāi)發(fā)生后能夠安全撤離實(shí)驗(yàn)室，減少對(duì)人員和環(huán)境的影響。發(fā)生地震后，首先設(shè)立實(shí)驗(yàn)室維護(hù)結(jié)構(gòu)20m范圍內(nèi)的封鎖區(qū)。其次,對(duì)封鎖區(qū)進(jìn)行消毒,然后由專(zhuān)業(yè)人員在做好個(gè)人防護(hù)的前提下對(duì)實(shí)驗(yàn)內(nèi)部環(huán)境邊消毒邊清理,清理到樣品保存地點(diǎn),如果保藏樣品的容器沒(méi)有被破壞,可把它安全轉(zhuǎn)移到其他安全的實(shí)驗(yàn)室存放,如果保藏樣品的容器已被破壞和發(fā)生外溢,應(yīng)立即用可靠方法進(jìn)行徹底消毒滅菌。處理現(xiàn)場(chǎng)的人需要由生物安全委員會(huì)評(píng)估暴露級(jí)別和暴露源級(jí)別,決定是否用藥及確定預(yù)防性用藥方案。

六、生物安全及其他緊急事件(事故)處理預(yù)案

(一)實(shí)驗(yàn)室生物安全事件(事故)處理措施

(1)離心過(guò)程中離心管破裂時(shí),應(yīng)馬上關(guān)閉電源,離心機(jī)停止工作,并靜止3min。然后緩慢打開(kāi)離心機(jī)蓋,將離心杯平穩(wěn)地拿到生物安全柜中。如果發(fā)生泄漏,用1%的次氯酸鈉消毒液灌入離心杯腔體中消毒30min,然后棄去消毒和離心片,將離心杯洗后擦干。

(2)發(fā)生污染物潑濺或溢出時(shí),立即用清潔布或吸水紙覆蓋污染處,并倒上10~25倍稀釋的施康消毒液,作用至少30min方可清理全部污染物,用消毒劑擦拭污染區(qū)域。所有這些操作過(guò)程中都應(yīng)戴手套。如發(fā)生大范圍污染物擴(kuò)放事故時(shí),應(yīng)通知主管領(lǐng)導(dǎo)和安全負(fù)責(zé)人到達(dá)事故現(xiàn)場(chǎng)。待其查清情況,確定消毒方案,組織對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行終末消毒。

(二)其他緊急事件(事故)處理措施

在制訂的應(yīng)急預(yù)案中應(yīng)包括消防人員和其他緊急救助人員。應(yīng)事先告知他們哪些實(shí)驗(yàn)室有潛在的感染性物質(zhì),讓他們熟悉實(shí)驗(yàn)室的布局和設(shè)備。實(shí)驗(yàn)室人員要熟悉緊急描離的情況及緊急撤離的路線(xiàn)標(biāo)識(shí),在實(shí)驗(yàn)室發(fā)生不可控制的火災(zāi)、水災(zāi),爆炸或其他危險(xiǎn)情況時(shí),為確保工作人員的安全,要進(jìn)行緊急撤離。所有實(shí)驗(yàn)室人員須了解緊急撤離的行動(dòng)計(jì)劃、撤離路線(xiàn)和緊急撤離的集合地點(diǎn)。

(三)生物安全及其他緊急事件(事故)報(bào)告和記錄

(1)發(fā)生生物安全及其他緊急事件時(shí),在緊急處理的同時(shí)必須向中心主管領(lǐng)導(dǎo)和生物安全委員會(huì)報(bào)告。

(2)對(duì)于生物安全事件必須進(jìn)行登記,記錄發(fā)生的時(shí)間、地點(diǎn)及詳細(xì)經(jīng)過(guò)、處理方法等。

七、生物安全和生物安全保障風(fēng)險(xiǎn)管理

(1)生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)

風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估所依據(jù)的數(shù)據(jù)及擬采取的風(fēng)險(xiǎn)控制措施、安全操作規(guī)程等均應(yīng)以國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)、世界衛(wèi)生組織、國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織等機(jī)構(gòu)或行業(yè)權(quán)威機(jī)構(gòu)發(fā)布的指南標(biāo)準(zhǔn)等為依據(jù)。

(二)危險(xiǎn)發(fā)生的概率評(píng)估(見(jiàn)表7-12)

表7-12銅綠假單胞菌實(shí)驗(yàn)活動(dòng)危險(xiǎn)發(fā)生的概率評(píng)估序號(hào)潛在危險(xiǎn)因素危害程度發(fā)生概率固有風(fēng)險(xiǎn)措施合理性殘留風(fēng)險(xiǎn)風(fēng)險(xiǎn)可控程度1樣品運(yùn)輸過(guò)程中容器意外側(cè)翻、泄漏、破裂造成污染中度可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控2樣品的接收、開(kāi)啟及加樣等常規(guī)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)中產(chǎn)生的氣溶膠中度較大可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控3離心、加樣等實(shí)驗(yàn)活動(dòng)中意外事故造成盛裝標(biāo)本容器破裂、溢出瞬間產(chǎn)生的氣溶膠中度可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控4檢測(cè)未經(jīng)滅活的樣品對(duì)儀器與環(huán)境造成的污染中度較大可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控5標(biāo)本、實(shí)驗(yàn)材料、設(shè)施設(shè)備等被誤用的風(fēng)險(xiǎn)中度可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控6陽(yáng)性標(biāo)本被惡意使用的風(fēng)險(xiǎn)高度較小可能高度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控7實(shí)驗(yàn)器材未經(jīng)規(guī)范消毒造成污染中度可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控8廢棄物處理不當(dāng)造成病原微生物擴(kuò)散中度較大可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控9滅菌裝置不符合要求，滅菌不徹底造成污染中度較小可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控10檢測(cè)人員和工勤人員被銳器誤傷造成職業(yè)暴露中度可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控11檢測(cè)人員個(gè)人防護(hù)不當(dāng)造成的病原微生物擴(kuò)散中度可能中度合理低風(fēng)險(xiǎn)可控12非檢測(cè)人員、進(jìn)修實(shí)習(xí)等外來(lái)人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的不當(dāng)