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PAGE9-第36講微生物的培育與應(yīng)用及微生物的純化技術(shù)1.下列關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的理解,錯(cuò)誤的是(

)A.將牛肉膏連同稱量紙一起放在燒杯中加熱溶化是因?yàn)榕H飧啾容^黏稠

B.在稱量牛肉膏和蛋白胨時(shí)動(dòng)作要快速,稱后要?jiǎng)偤蒙w上瓶蓋

C.因?yàn)闇缇哪康南嗤?故對(duì)培育基和培育皿的滅菌方法也相同

D.在加熱熔化瓊脂過(guò)程中要不斷攪拌以防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯裂開(kāi)2.現(xiàn)有兩種固體培育基,已知其配制時(shí)所加的成分如下表,用這兩種培育基分別去分別土壤中的兩種微生物,它們適于分別的是()成分NaCl葡萄糖淀粉甲培育基含量0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%0.5%2%乙培育基含量0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%——A.甲培育基適于分別酵母菌;乙培育基適于分別真菌B.甲培育基適于分別異養(yǎng)型自生固氮菌;乙培育基適于分別自養(yǎng)型自生固氮菌C.甲培育基適于分別自養(yǎng)型自生固氮菌;乙培育基適于分別異養(yǎng)型自生固氮菌D.甲培育基適于分別異養(yǎng)型共生細(xì)菌;乙培育基適于分別異養(yǎng)型共生固氮菌3.下列對(duì)滅菌和消毒的理解不正確的是() A.滅菌是指殺滅環(huán)境中一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子B.消毒和滅菌都是采納物理方法殺滅微生物C.接種環(huán)一般用灼燒法滅菌D.常用滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌等4.如圖是平板劃線示意圖,劃線的依次為1→2→3→4→5,則下列說(shuō)法正確的是()A.操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B.劃線操作要在火焰上進(jìn)行C.在5區(qū)域中才可以得到所需菌落D.在1,2,3,4,5區(qū)域中劃線前后都要灼燒接種環(huán)5.下圖是劃線分別法接種微生物的示意圖,下列敘述錯(cuò)誤的是()A.該接種過(guò)程一般需灼燒接種環(huán)5次B.劃線結(jié)束可看到劃線末端出現(xiàn)不連續(xù)單菌落C.若培育的是尿素分解菌,可加入酚紅指示劑D.該接種方法不能精確計(jì)數(shù)培育液中微生物數(shù)量6.為了保持菌種的純凈須要進(jìn)行菌種的保藏,下列有關(guān)敘述不正確的是()A.對(duì)于頻繁運(yùn)用的菌種,可以采納臨時(shí)保藏的方法,放入-4℃的冰箱保藏

B.臨時(shí)保藏的菌種一般是接種到試管的固體斜面培育基上

C.臨時(shí)保藏的菌種簡(jiǎn)單被污染或產(chǎn)生變異

D.對(duì)于須要長(zhǎng)期保存的菌種,可以采納甘油管藏的方法7.下列關(guān)于分別并檢測(cè)土壤中尿素分解菌的試驗(yàn)操作,不正確的是()A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培育基,并用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌B.用稀釋涂布平板法接種,接種操作要在酒精燈火焰旁邊進(jìn)行C.將試驗(yàn)組和比照組的平板倒置,以免污染D.選擇菌落數(shù)在30~300之間的試驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)8.下列能選擇出分解尿素的細(xì)菌的培育基是()A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂、水

B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、瓊脂、水

C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、尿素、瓊脂、水

D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水9.如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別和計(jì)數(shù)”試驗(yàn)示意圖。據(jù)圖分析下列敘述正確的是(

)A.3號(hào)試管中樣品的稀釋倍數(shù)為103倍

B.用4號(hào)試管中稀釋液進(jìn)行平板培育得到的菌落平均數(shù)約為5號(hào)試管的10倍

C.5號(hào)試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×108個(gè)

D.該試驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目要高10.由于石油等不行再生資源供應(yīng)日趨驚慌,開(kāi)發(fā)各種再生纖維素纖維成為獲得新型紡織原料的主要渠道,而纖維素分解菌在轉(zhuǎn)化可再生纖維素方面具有巨大的應(yīng)用價(jià)值。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.富集纖維素分解菌時(shí),應(yīng)用固體培育基培育B.分別纖維素分解菌時(shí),培育基中應(yīng)加入適量的剛果紅C.可用平板劃線法對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行純化培育D.培育纖維素分解菌時(shí),接種后的培育基需倒置11.關(guān)于纖維素酶的敘述中,正確的是()A.牛、羊等草食動(dòng)物可以合成纖維素酶,從而利用纖維素B.纖維素酶是一種復(fù)合酶,至少包括C1酶、Cx酶和葡萄糖異構(gòu)酶三種組分C.纖維素可被纖維素酶水解成葡萄糖,為微生物供應(yīng)碳源、氮源等養(yǎng)分D.分解纖維素的細(xì)菌、真菌、放線菌,都是通過(guò)產(chǎn)生纖維素酶來(lái)分解纖維素的12.如圖為纖維單胞菌(能產(chǎn)生纖維素酶)的獲得過(guò)程。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()

A.①②③④培育基都應(yīng)以纖維素為唯一碳源

B.圖中所用培育基滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌法C.④所用的接種方法可對(duì)培育的微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)

D.可用剛果紅染料鑒定,看菌落四周是否出現(xiàn)透亮圈13.下列關(guān)于微生物的培育與應(yīng)用的敘述正確的是()A.用涂布分別法分別細(xì)菌時(shí),須要用接種環(huán)將菌液涂布到培育基平面上B.在尿素固體培育基上,產(chǎn)脲酶細(xì)菌菌落四周會(huì)出現(xiàn)白色的透亮環(huán)帶C.利用醋酸菌將果酒發(fā)酵成果醋,須要不斷向發(fā)酵裝置中通入無(wú)菌空氣D.利用微生物進(jìn)行發(fā)酵制成的泡菜美味可口,含有的成分對(duì)人體均有益14.為了減輕廢棄農(nóng)作物秸桿對(duì)農(nóng)村環(huán)境污染,某科研小組運(yùn)用如圖所示接種方法分別純化分解纖維素的微生物并將其用于生產(chǎn)。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題:(1)圖示接種方法是,所用接種工具的名稱是。制備培育微生物的培育基時(shí),滅菌與調(diào)pH的先后依次是。(2)步驟②中,將接種工具冷卻的緣由是。(3)為從富含纖維素的土壤中分別獲得分解纖維素的微生物的單個(gè)菌落,某同學(xué)配制了一個(gè)培育基(成分見(jiàn)表):成分酵母膏無(wú)機(jī)鹽淀粉纖維素粉瓊脂水培育基++++++注:“+”表示有據(jù)表分析,該培育基含有微生物所需的、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽四大類養(yǎng)分物質(zhì)。該培育基(填“能”或“不能”)用于分別纖維素分解菌,緣由是。(4)對(duì)該微生物的優(yōu)良菌種進(jìn)行長(zhǎng)期保存,可以采納的方法。15.纖維素酶在生物燃料制作、布料處理中起重要作用。目前,利用微生物提高纖維素酶產(chǎn)量是主要發(fā)展方向。如圖1為用紫外線照耀含有纖維素分解菌的土樣,分別、培育,再檢測(cè)各菌株的纖維素酶的產(chǎn)生量。請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題:1.從自然界獲得纖維素分解菌,采集土樣時(shí)應(yīng)選擇__________的環(huán)境。

2.紫外線照耀的目的是__________,A0組未經(jīng)紫外線處理,其作用是作為_(kāi)_________。3.上述培育皿中的培育基除含有水、無(wú)機(jī)鹽、酵母膏、水解酪素和瓊脂等外,還應(yīng)有__________,目的是篩選纖維素分解菌。4.上述檢測(cè)結(jié)果如圖2所示。由圖可知,__________組酶活力與A0組相同,最可能的緣由是__________。5.若用剛果紅染色法比較纖維素分解菌產(chǎn)生纖維素酶的量的多少,可通過(guò)視察平板培育基上以纖維素分解菌為中心的透亮圈(如圖3)的大小來(lái)比較,其中與A1組對(duì)應(yīng)的是圖中的__________。

6.若要保證圖3中透亮圈中均為單個(gè)細(xì)胞形成的菌落,操作要求是__________。

答案以及解析1.答案:C解析:牛肉膏比較黏稠,須要放在稱量紙上稱量,溶化時(shí)也須要連同稱量紙一起放入燒杯,A正確;由于牛肉膏和蛋白胨都簡(jiǎn)單吸潮,稱取時(shí)動(dòng)作要快速,稱后要?jiǎng)偤蒙w上瓶蓋,B正確;對(duì)培育基的滅菌常用高壓蒸汽滅菌法,對(duì)培育皿的滅菌常用干熱滅菌法,C錯(cuò)誤;加入瓊脂后須要熔化,此過(guò)程中要不斷用玻棒攪拌,防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯裂開(kāi),D正確。2.答案:B解析:(1)固氮菌中能獨(dú)立生存的是自生固氮菌,甲培育基中含有葡萄糖和淀粉,可以作為碳源和能源,由此推出該培育基適于分別異養(yǎng)型的自生固氮菌;

(2)乙培育基中不含有機(jī)碳源,所以可用來(lái)分別培育自養(yǎng)型的自生固氮菌。

故選:B。3.答案:B解析:A、滅菌是指運(yùn)用劇烈的理化因素殺死環(huán)境中的全部微生物(包括芽孢和孢子),A正確;

B、滅菌是將處理物體中的一切生物全部殺滅,在經(jīng)過(guò)滅菌后的物體中,不再存在任何活著的生命;消毒是將物體中的微生物削減到不再危害人體(或其他須要愛(ài)護(hù)的生物體)的程度,所采納的方法有物理的或化學(xué)的,B錯(cuò)誤;

C、金屬接種工具常用灼燒法滅菌,C正確;

D、微生物的培育過(guò)程中常用的滅菌方法有灼燒法、干熱滅菌法、高壓蒸氣滅菌法,D正確.

故選:B.4.答案:D解析:操作前要將接種環(huán)放在酒精燈的外焰進(jìn)行灼燒滅菌;整個(gè)操作過(guò)程要在酒精燈火焰旁進(jìn)行;1、2、3、4、5這五個(gè)區(qū)域都可能有所需菌落;在每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束時(shí)接種環(huán)上殘留的菌種,劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)是為了殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避開(kāi)細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。

故選:D。5.答案:B解析:6.答案:A解析:A.對(duì)于頻繁運(yùn)用的菌種,可以采納臨時(shí)保藏的方法,放在4℃的冰箱中保藏,A錯(cuò)誤;B.臨時(shí)保藏的菌種一般就是接種到試管的固體斜面培育基上保存,B正確;C.臨時(shí)保藏的菌種簡(jiǎn)單被污染或產(chǎn)生變異,所以每3-6個(gè)月要重新將菌種從舊的培育基上轉(zhuǎn)移到新培育基上培育,C正確;D.對(duì)于須要長(zhǎng)期保存的菌種,用甘油管藏的方法,放在低溫-20℃的冷凍箱中保存,D正確。7.答案:A解析:本題考查分別土壤中尿素分解菌的試驗(yàn)。分別土壤中的尿素分解菌,所用培育基要以尿素為唯一氮源,不能用牛肉膏蛋白胨培育基,A錯(cuò)誤;稀釋涂布平板法接種時(shí),要在酒精燈火焰旁邊操作,因?yàn)榫凭珶艋鹧媾赃厽o(wú)菌,B正確;將試驗(yàn)組和比照組的平板倒置,可以避開(kāi)水滴入培育基中造成污染,C正確;計(jì)數(shù)時(shí)要選擇菌落數(shù)在30~300之間的試驗(yàn)組平板,D正確。8.答案:A解析:所用選擇培育基的基本要求是滿意分解尿素的細(xì)菌的生長(zhǎng)條件,抑制或阻擋其他微生物的生長(zhǎng),且尿素是唯一的氮源,葡萄糖可以作為碳源,因此A正確;B選項(xiàng)缺少尿素,錯(cuò)誤;C選項(xiàng)缺少葡萄糖作為碳源,錯(cuò)誤;D選項(xiàng)中缺少尿素,且牛肉膏、蛋白胨也可供應(yīng)氮源,錯(cuò)誤。綜上,A正確,B、C、D均錯(cuò)。9.答案:B解析:將10g土樣加入到90mL無(wú)菌水中后,土樣稀釋10倍,再經(jīng)3次10倍稀釋得到3號(hào)試管中的樣品,故3號(hào)試管中樣品的稀釋倍數(shù)是104倍,A錯(cuò)誤;4號(hào)試管中稀釋液進(jìn)行平板培育,其稀釋倍數(shù)為5號(hào)試管的10倍,假如稀釋倍數(shù)適當(dāng),操作等正確,其得到的菌落平均數(shù)可能是5號(hào)的10倍,B正確;5號(hào)試管進(jìn)行稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)的結(jié)果表明,每克土壤中的菌株數(shù)為(168+175+167)÷3÷0.1×106=1.7×109(個(gè)),),C錯(cuò)誤;稀釋涂布平板法得到的菌落可能存在兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌長(zhǎng)成一個(gè)菌落的狀況,因此該試驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目要低,D錯(cuò)誤。10.答案:A解析:在分別出纖維素分解菌之前,需對(duì)微生物進(jìn)行富集培育,此時(shí)應(yīng)用液體培育基,利于培育液與微生物充分接觸,加速微生物繁殖,A錯(cuò)誤;在分別纖維素分解菌時(shí),培育基以纖維素作為唯一碳源,且應(yīng)加入剛果紅染液,B正確;對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行純化培育時(shí),可采納平板劃線法或稀釋涂布平板法,C正確;接種后,為防止皿蓋上凝聚的水珠滴落在培育基上造成培育基污染,應(yīng)將培育基進(jìn)行倒置培育,D正確。11.答案:D解析:12.答案:C解析:培育基中以纖維素作為唯一碳源時(shí),只有能利用纖維素的微生物才能生長(zhǎng)繁殖,從而篩選出纖維素分解菌,A正確;對(duì)培育基滅菌常采納高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌,對(duì)接種環(huán)常采納火焰灼燒法進(jìn)行滅菌,B正確;④的接種方法是平板劃線法,利用平板劃線法可對(duì)微生物進(jìn)行接種、純化、分別,但是不能對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù),計(jì)數(shù)一般采納稀釋涂布平板法,C錯(cuò)誤;剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,紅色復(fù)合物無(wú)法形成,出現(xiàn)透亮圈,因此可通過(guò)是否產(chǎn)生透亮圈來(lái)鑒定纖維素分解菌,D正確。13.答案:C解析:用涂布分別法分別細(xì)菌時(shí),所用的涂布工具是玻璃刮刀,A錯(cuò)誤;在尿素固體培育基上,產(chǎn)脲酶細(xì)菌菌落四周會(huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶,因?yàn)榧?xì)菌產(chǎn)生的脲酶催化尿素分解產(chǎn)生了氨,導(dǎo)致培育基呈堿性,培育基中的酚紅指示劑遇堿性條件會(huì)變紅,B錯(cuò)誤;醋酸菌在有氧條件下才能將乙醇氧化成醋酸,所以利用醋酸菌將果酒發(fā)酵成果醋,須要不斷向發(fā)酵裝置中通入無(wú)菌空氣,C正確;利用微生物進(jìn)行發(fā)酵制成的泡菜中含有肯定量的亞硝酸鹽,其對(duì)人體是有害的,D錯(cuò)誤。14.答案:(1)平板劃線法;接種環(huán);先調(diào)pH再滅菌(2)避開(kāi)燙死接種菌種(3)碳源;不能;纖維素不是唯一碳源(4)甘油管藏解析:(1)圖中采納的接種方法是平板劃線法,其所用的接種工具是接種環(huán);制備培育微生物的培育基時(shí),應(yīng)先調(diào)pH再滅菌。(2)步驟②中,將接種工具冷卻的目的是避開(kāi)燙死接種菌種。(3)各種培育基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽,此外還要滿意微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特別養(yǎng)分物質(zhì)以及氧氣的要求。據(jù)表分析,該培育基含有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽。分別纖維素分解菌的培育基應(yīng)當(dāng)以纖維素為唯一碳源,而該培育基中的碳源除了纖維素粉還有酵母膏、淀粉,因此不能用于分別纖維素分解菌。(4)長(zhǎng)期保存菌種應(yīng)當(dāng)采納甘油管藏法。15.答案:1.富含纖維素;2.誘發(fā)基因突變,提高突變頻率,獲得高產(chǎn)纖維素酶的纖維素分解菌;比照組

3.纖維素;4.A5;沒(méi)有發(fā)生基因突變

5.④;

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