人類血液來(lái)源免疫細(xì)胞庫(kù)建設(shè)與管理規(guī)范

1人類血液來(lái)源免疫細(xì)胞庫(kù)建設(shè)與管理規(guī)范下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本GB2894-2008安全標(biāo)志及GB7000.2-2008燈具第2-22部分：特殊要求應(yīng)AQ3013-2008危險(xiǎn)化學(xué)品從業(yè)單位安全標(biāo)準(zhǔn)化通用規(guī)范CNAS-CL05:2009實(shí)驗(yàn)室生物WHOThirdEdition實(shí)驗(yàn)室生物安全免疫細(xì)胞immunecell2指參與免疫應(yīng)答或與免疫應(yīng)答相關(guān)的所有細(xì)胞，主要包括T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞、單外周血單個(gè)核細(xì)胞peripheralbloodmononucle指人外周血中具有單個(gè)核的細(xì)胞群體，包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。單核細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞因指實(shí)驗(yàn)室的生物安全條件和狀態(tài)不低于允許水平，并符合相關(guān)法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)對(duì)實(shí)驗(yàn)室生物安全責(zé)任的要求，避免實(shí)驗(yàn)室人員、來(lái)訪人員、社區(qū)及環(huán)境受到不可接受的損害。3指使用化學(xué)物品時(shí)遵守一定的規(guī)范并有相應(yīng)的緊急預(yù)案應(yīng)對(duì)事故,防止危險(xiǎn)化學(xué)品事故指具有完全民事行為能力的自然人，在充分獲取信息并準(zhǔn)確理解其內(nèi)容后，作出參與生物安全評(píng)審委員會(huì)biosafetyreview4縮略詞NIH:美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院（NationalInstitutesofHealth）HIV:人類免疫缺陷病毒（HumanImmunoTP:梅毒螺旋體（TreponemaPalliduALT:谷丙轉(zhuǎn)氨酶(AlanineAminotransferase)WHO:世界衛(wèi)生組織（WorldHealthOrganization）GMP:藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（GoodManufacturingPraPBMC:外周血單個(gè)核細(xì)胞（PeripheralBloodMononuclearCells）DC:樹(shù)突狀細(xì)胞(DendriticCell)CIK:細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞(Cytokine-inducedKillAABB:美國(guó)血庫(kù)協(xié)會(huì)(AmericanAssociationofBloodBanks)ATCC:美國(guó)菌種保藏中心（AmericanTypeCultu5.1倫理審查委員會(huì)5.1.1細(xì)胞庫(kù)應(yīng)設(shè)有倫理審查委員會(huì)。倫理審查委員會(huì)由醫(yī)藥學(xué)、倫理學(xué)、法學(xué)等專家以5.1.2倫理審查委員會(huì)應(yīng)負(fù)責(zé)建立細(xì)胞庫(kù)的倫理準(zhǔn)則和相應(yīng)的倫理操作規(guī)范，對(duì)相關(guān)倫理5.1.3倫理審查委員會(huì)應(yīng)在樣本相關(guān)研究項(xiàng)目開(kāi)始前進(jìn)行倫理審查及對(duì)已通過(guò)審查或正在5.2科學(xué)審查委員會(huì)45.2.1細(xì)胞庫(kù)應(yīng)設(shè)有科學(xué)審查委員會(huì)。科學(xué)審查5.2.2科學(xué)審查委員會(huì)應(yīng)負(fù)責(zé)對(duì)生物樣本采集5.3生物安全評(píng)審委員會(huì)5.3.2生物安全評(píng)審委員會(huì)負(fù)責(zé)細(xì)胞庫(kù)的生物安全政策和安全操作規(guī)范的審查。6.2.1細(xì)胞庫(kù)場(chǎng)地要符合長(zhǎng)久儲(chǔ)存要求，避免頻繁更換儲(chǔ)存6.2.4細(xì)胞庫(kù)的建設(shè)應(yīng)由具有相應(yīng)資質(zhì)的施工單位進(jìn)室的核心工作區(qū)的照度不低于350lx，其它區(qū)域不少于30分鐘，需安裝后備電池或者與后備發(fā)電機(jī)相連，并符提供保護(hù)。液氮罐應(yīng)設(shè)有溫度報(bào)警和液面控制裝置。所有設(shè)備的選擇均應(yīng)符合通用要57.1.1血液樣本的采集應(yīng)符合《血站基本標(biāo)準(zhǔn)》中血液采集樣本提供者須做血液初、復(fù)檢，合格后方能采用。采集過(guò)程應(yīng)符合無(wú)菌操作規(guī)程，所使用的一次性注射器、采血袋等耗材必須采血人員采集時(shí)應(yīng)輕搖血液，防止凝WT/S400-2012血液運(yùn)輸要求的規(guī)定。血液樣本運(yùn)輸應(yīng)使用專門(mén)的血液運(yùn)輸箱，運(yùn)輸過(guò)程應(yīng)實(shí)時(shí)7.3.1樣本接收時(shí)，做好自我防護(hù)工作，應(yīng)戴好手套與口罩，確認(rèn)送達(dá)接收室的樣本7.3.2觀察樣本容器包裝的外觀，檢查有無(wú)破損并記錄，檢查信息記錄表上的信息免疫細(xì)胞的凍存需加入適當(dāng)?shù)睦鋬霰Ｗo(hù)液，按照標(biāo)準(zhǔn)密度進(jìn)行凍存7.6.1細(xì)胞入庫(kù)必須有嚴(yán)格的過(guò)程控制及完整的信息錄入、7.6.2將凍存好的細(xì)胞移至細(xì)胞暫存庫(kù)中儲(chǔ)存，儲(chǔ)存溫度為-196℃~-135℃,同時(shí)對(duì)細(xì)胞7.6.3將符合入庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞從細(xì)胞暫存庫(kù)轉(zhuǎn)移至細(xì)胞儲(chǔ)存庫(kù)中，在儲(chǔ)存溫度為-196℃~6細(xì)胞出庫(kù)基本程序：需要使用細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞庫(kù)出庫(kù)人員填寫(xiě)能夠記錄細(xì)胞置變更的相關(guān)記錄后，在質(zhì)量管理人員監(jiān)督并簽字復(fù)核下，由細(xì)胞庫(kù)出庫(kù)人員進(jìn)行出庫(kù)。臨床治療需使用細(xì)胞庫(kù)內(nèi)細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞庫(kù)出庫(kù)人員需核對(duì)庫(kù)存細(xì)胞信息和細(xì)胞使用者信息，制定嚴(yán)格的細(xì)胞發(fā)放計(jì)劃，再進(jìn)行出庫(kù)，并進(jìn)一步跟蹤科研用途使用細(xì)胞庫(kù)的細(xì)胞時(shí)，需保證樣本提供者在充分知情并簽訂知情細(xì)胞庫(kù)內(nèi)部因整改、擴(kuò)容或評(píng)估凍存細(xì)胞質(zhì)量細(xì)胞轉(zhuǎn)移操作應(yīng)確保細(xì)胞及其凍存容器的溫度在-135℃以下，轉(zhuǎn)移過(guò)當(dāng)樣本提供者提出撤銷知情同意書(shū)，要求銷毀所提供的樣本時(shí)，應(yīng)遵從樣樣本銷毀應(yīng)首先提出銷毀申請(qǐng)，通過(guò)倫理審查委員會(huì)和科學(xué)審查委員會(huì)的方可進(jìn)行，細(xì)胞庫(kù)應(yīng)建立銷毀的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范，并按照此規(guī)應(yīng)對(duì)樣本的銷毀進(jìn)行記錄，包括銷毀樣本的名稱與數(shù)量、銷毀的原因、批7.9.1當(dāng)樣本提供者需要使用細(xì)胞庫(kù)內(nèi)本人細(xì)胞時(shí)，由細(xì)胞庫(kù)出庫(kù)人員填寫(xiě)細(xì)胞出7.9.2將符合發(fā)放標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞發(fā)放，并填寫(xiě)發(fā)放記錄。質(zhì)量不合格的細(xì)胞需進(jìn)行記7細(xì)胞庫(kù)應(yīng)建立并實(shí)施質(zhì)量目標(biāo)、質(zhì)量方針，遵循相關(guān)法律法規(guī)要求。明確在整個(gè)樣本采集、制備、儲(chǔ)存的全過(guò)程中的質(zhì)量要求，包括全面質(zhì)量保證（QA）和質(zhì)量控制系統(tǒng)（QC并以完整的質(zhì)量體系文件形式明確規(guī)定及監(jiān)控其有效性。確保所制備的免疫細(xì)胞規(guī)范，以及員工健康管理制度，避免因人員因素產(chǎn)生生物安生產(chǎn)管理人員應(yīng)當(dāng)至少具有相關(guān)專業(yè)本科學(xué)歷，具有至少三年從事免疫細(xì)胞驗(yàn)室管理以及質(zhì)量管理的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，其中至少有一年的細(xì)胞庫(kù)管理經(jīng)驗(yàn)，接受相關(guān)的b)樣本提供者需提供近3個(gè)月內(nèi)醫(yī)院的健康體檢報(bào)告和血液檢測(cè)報(bào)告，血液檢測(cè)報(bào)形成報(bào)告。樣本提供者健康信息采集表見(jiàn)附錄B，各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)合格者，具備提供工作人員必須系統(tǒng)的接受相關(guān)生物安全知識(shí)、法規(guī)制度培訓(xùn)和業(yè)務(wù)崗位培訓(xùn)與考每年應(yīng)至少培訓(xùn)并考核一次?？己宋赐ㄟ^(guò)者，應(yīng)重新接受培訓(xùn)，成績(jī)合格后方可培訓(xùn)及考核結(jié)果應(yīng)有相關(guān)檔案記錄及查閱制度。如工作人員出現(xiàn)不宜從事實(shí)驗(yàn)室相關(guān)工作的身體狀況時(shí)，不得進(jìn)入相關(guān)區(qū)域工8細(xì)胞庫(kù)若發(fā)生生物安全暴露，相關(guān)人員應(yīng)接受必要救治并制于出現(xiàn)異常情況者，應(yīng)暫時(shí)調(diào)離工作崗位，或永久調(diào)離。若再次上崗需體檢合格應(yīng)定期對(duì)消防系統(tǒng)和消防裝置進(jìn)行檢應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員進(jìn)行防火安全訓(xùn)練，壓力容器指壓力氣瓶及高壓滅菌裝置。壓力容器應(yīng)由持有壓力容器操作資格證的專業(yè)人員操作。壓力容器使用應(yīng)建立使用記錄檔案，并應(yīng)按照相關(guān)規(guī)程定期檢驗(yàn)、調(diào)整和檢修、壓力容器安全應(yīng)符合《中華人民涉及到的有毒有害物質(zhì)，應(yīng)建立分類儲(chǔ)存、使用、登記等管理制度。購(gòu)進(jìn)可能有危害的化學(xué)物品都必須附有材料安全數(shù)據(jù)表。所有危險(xiǎn)化學(xué)品都需要以易于識(shí)別的形式進(jìn)行標(biāo)記，使專業(yè)和非專業(yè)人員很容易警覺(jué)其潛在的危險(xiǎn)應(yīng)建立危險(xiǎn)化學(xué)用品事故危險(xiǎn)評(píng)估和應(yīng)急預(yù)案相關(guān)工作人員應(yīng)接受處理危險(xiǎn)化學(xué)品濺溢的培訓(xùn)，以應(yīng)對(duì)突出事故。工作人員在操作中接觸到液氮時(shí)，需使用防護(hù)面罩和隔熱手套并做好其它防凍措應(yīng)確保維持正常使用至少3天的液氮供應(yīng)量。細(xì)胞庫(kù)應(yīng)定期檢應(yīng)建立嚴(yán)格的生物安全及危害性評(píng)估方案、疾病傳播預(yù)防方案、生物安全審查制9細(xì)胞庫(kù)的生物安全制度應(yīng)通過(guò)生物安全委員會(huì)及生命倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)后方可實(shí)應(yīng)保證實(shí)驗(yàn)室的安全運(yùn)行，包括防止實(shí)驗(yàn)室工作人員的感染、防止實(shí)驗(yàn)室操作的實(shí)驗(yàn)室發(fā)生病原微生物感染時(shí)，實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)當(dāng)立即采取控制措施，防止擴(kuò)散。應(yīng)及時(shí)向相關(guān)領(lǐng)導(dǎo)報(bào)告事故情況，以對(duì)事故進(jìn)行及時(shí)處細(xì)胞庫(kù)的疾病傳播預(yù)防應(yīng)符合《中華人民共和國(guó)傳染病防治法》的規(guī)定。b)廢血要用容器封存，專用垃圾袋包裝，確認(rèn)無(wú)滲漏后再行處理。d)廢液的處理，應(yīng)符合國(guó)家的相關(guān)規(guī)定，根據(jù)廢液的性質(zhì)進(jìn)行正確處理。細(xì)胞庫(kù)所用物料耗材需從具有專業(yè)資質(zhì)并經(jīng)過(guò)驗(yàn)證核實(shí)的供應(yīng)商處采購(gòu)，且具備物料耗材包裝應(yīng)保證完整無(wú)破損，入庫(kù)時(shí)嚴(yán)格進(jìn)行分區(qū)，待抽檢結(jié)果合格后方可出庫(kù)使用。對(duì)于儲(chǔ)存條件和有效期，應(yīng)具有定期的審查制度和特殊情況下庫(kù)存管理應(yīng)符合細(xì)胞庫(kù)的工作實(shí)際，在具備一定量?jī)?chǔ)備的同時(shí)，避免長(zhǎng)期積壓導(dǎo)物料的使用應(yīng)具有嚴(yán)格的文件記錄制度，包括物料的標(biāo)識(shí)、使用范圍、使用時(shí)間建立設(shè)備管理程序及標(biāo)準(zhǔn)操作程序，操作人員在操作前進(jìn)行相應(yīng)理論教育與實(shí)際應(yīng)由專人進(jìn)行維護(hù)、管理，設(shè)備的運(yùn)行狀態(tài)應(yīng)進(jìn)行明確標(biāo)識(shí)當(dāng)設(shè)備出現(xiàn)故障或性能無(wú)法達(dá)到工藝要求時(shí)，需進(jìn)行維修、升級(jí)或報(bào)廢。8.6.1應(yīng)對(duì)樣本采集、細(xì)胞制備與凍存、入庫(kù)和出庫(kù)全過(guò)程進(jìn)行質(zhì)量控制。樣本入庫(kù)、出庫(kù)前，質(zhì)量控制負(fù)責(zé)人應(yīng)對(duì)樣本進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，保證樣本符合質(zhì)量a)樣本的質(zhì)量評(píng)價(jià)應(yīng)包括：主要制備生產(chǎn)工藝和質(zhì)量控制檢驗(yàn)方慮實(shí)際生產(chǎn)條件和保證生產(chǎn)質(zhì)量必需的檢查、檢驗(yàn)；所有必需的生產(chǎn)記錄和控制記錄填寫(xiě)的完整性及經(jīng)相關(guān)人員簽名及復(fù)核；對(duì)變更或偏差處理完成所要的取樣、檢查、檢驗(yàn)和審核；所有與該樣本有關(guān)的偏差均已有明確的解釋b)細(xì)胞樣本必須經(jīng)過(guò)質(zhì)量控制責(zé)任人審核，符合規(guī)定要求和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞方可入制訂、驗(yàn)證和實(shí)施所有質(zhì)量控制操作規(guī)程。嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行操作管理并做免疫細(xì)胞操作環(huán)境和儲(chǔ)存環(huán)境條件由專人進(jìn)行監(jiān)控和維護(hù)，并形成記錄。質(zhì)量控制區(qū)應(yīng)當(dāng)與生產(chǎn)區(qū)分開(kāi)。實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)應(yīng)當(dāng)確保其適能夠避免混淆和交叉污染，應(yīng)當(dāng)有足夠的區(qū)域用于樣品處置、留樣和穩(wěn)定性考察樣品樣本編碼規(guī)范統(tǒng)一，格式規(guī)整，數(shù)據(jù)完整可溯源。應(yīng)對(duì)每一個(gè)錄入數(shù)據(jù)庫(kù)的樣本唯一的ID，對(duì)原始樣本ID和新增錄入ID進(jìn)行樣本容器都必須標(biāo)上含有樣本編碼的條形碼。細(xì)胞的編碼應(yīng)遵循唯一性的總原則。在應(yīng)有統(tǒng)一和完整的信息系統(tǒng)或數(shù)據(jù)庫(kù)用于樣本信息的記錄與儲(chǔ)存，并滿足樣本追所有樣本信息（采集、處理、儲(chǔ)存、使用信息、捐贈(zèng)者相關(guān)信息）和體檢及臨床所有記錄應(yīng)分別進(jìn)行紙質(zhì)和電子版歸檔。紙質(zhì)記錄應(yīng)用標(biāo)簽分類存放，電子版記錄應(yīng)匯編成表格類的形式存儲(chǔ)，以便快速的數(shù)據(jù)檢索和多屬性的組合查詢，獲取實(shí)應(yīng)根據(jù)實(shí)際需求制定備份周期，按周期對(duì)樣本信息與數(shù)據(jù)進(jìn)行備份，以應(yīng)對(duì)信息細(xì)胞庫(kù)的信息管理系統(tǒng)宜與其他相關(guān)的數(shù)據(jù)系統(tǒng)兼容或關(guān)聯(lián)，以便共享樣本信息免疫細(xì)胞（ImmuneCell）是白細(xì)胞的俗稱，包別抗原、產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答的淋巴細(xì)胞等。免疫細(xì)胞是人體內(nèi)清除各種細(xì)菌，病毒和血單個(gè)核細(xì)胞）并儲(chǔ)存，依據(jù)個(gè)人身體狀況采血量可能會(huì)心）；若決定退出，本中心將終止儲(chǔ)存您的樣本并對(duì)它進(jìn)行統(tǒng)一處理，此舉不會(huì)對(duì)您?存在樣本制備失敗的風(fēng)險(xiǎn)，屬一般技術(shù)性風(fēng)險(xiǎn)XXX生命倫理委員會(huì)，郵箱：XXX，地址為XXX。XXX細(xì)胞中心：電話XXX，郵箱XXX，網(wǎng)站XXX，地址為XXX?！魽.無(wú)償捐贈(zèng)予XXX；□B.按《醫(yī)療廢棄我已告知該樣本提供者可能的風(fēng)險(xiǎn)及獲益情況，給予他/她足夠的時(shí)間閱讀、與情同意書(shū)，并解答了其相關(guān)的問(wèn)題；我已告知該同意書(shū)一式兩份，他/她將得到簽名后的一份知情同意書(shū)，上面包含我和他/她的簽名。我已詳細(xì)閱讀了知情同意書(shū)，項(xiàng)目專員已向我作了詳盡的說(shuō)明，我完全了解參加我自愿參加本次樣本儲(chǔ)存，并同意按照本知情同意書(shū)的內(nèi)容配合細(xì)胞中心人員的真完成本次樣本儲(chǔ)存。本知情同意書(shū)一式兩份，我將得到簽名后的一份知情我已詳細(xì)閱讀了知情同意書(shū)，項(xiàng)目專員已向我作了詳盡的說(shuō)明，我完我自愿參加本次樣本采集，并同意按照本知情同意書(shū)的內(nèi)容配合細(xì)胞中心人員的操作，認(rèn)真完成本次樣本采集。本知情同意書(shū)一式兩份，我將得到簽名后的一份知情無(wú)聯(lián)系電話X109/L；HIV-Ab(I+II)(免疫缺陷病1)將血袋中的血轉(zhuǎn)移到離心管中，使用經(jīng)滅菌消毒的剪刀剪斷塑料管，小心把袋中3)離心完畢后分層，吸取上層血漿層到離心管中，貼上血漿編碼標(biāo)記暫于4℃保4)下層血細(xì)胞稀釋：用生理鹽水按5)鋪層加樣：將稀釋的血液樣本緩慢勻速的加入到盛有室溫的淋巴細(xì)胞分離液上的分界面。離心：2000rpm，20min，室溫6)提取單個(gè)核細(xì)胞:離心完畢后，離