云南衡水實驗中學(xué)2025屆高二生物第一學(xué)期期末質(zhì)量檢測試題含解析

云南衡水實驗中學(xué)2025屆高二生物第一學(xué)期期末質(zhì)量檢測試題注意事項1．考試結(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回．2．答題前，請務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號用0．5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置．3．請認(rèn)真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準(zhǔn)考證號與本人是否相符．4．作答選擇題，必須用2B鉛筆將答題卡上對應(yīng)選項的方框涂滿、涂黑；如需改動，請用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案．作答非選擇題，必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律無效．5．如需作圖，須用2B鉛筆繪、寫清楚，線條、符號等須加黑、加粗．一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．HIV感染某個輔助性T細(xì)胞后，會強(qiáng)迫輔助性T細(xì)胞表面的細(xì)胞膜形成小囊膜，作為自己的藏身之所，囊膜會經(jīng)歷一個被稱為“出芽繁殖”的過程，從這個輔助性T細(xì)胞斷開感染其他輔助性T細(xì)胞，該過程涉及一種名叫Gag的HIV復(fù)合蛋白。下列敘述錯誤的是（）A.HIV有兩條單鏈RNA，為逆轉(zhuǎn)錄病毒B.若能阻止Gag蛋白在體內(nèi)的積累可能會抑制HIV的傳播繁殖C.人感染HIV后，體內(nèi)輔助性T細(xì)胞數(shù)量持續(xù)減少，機(jī)體免疫能力下降D.在HIV潛伏期，機(jī)體可檢測到抗HIV的抗體2．下圖表示小腸部分上皮細(xì)胞附近內(nèi)環(huán)境的各種結(jié)構(gòu)及成分轉(zhuǎn)化過程，字母表示物質(zhì)轉(zhuǎn)移途徑。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.小腸上皮細(xì)胞生活的內(nèi)環(huán)境是組織液和腸液B.a、b途徑可表示血漿與組織液之間的物質(zhì)交換，說明血漿與組織液的成分是一樣的C.一般來說，c途徑的物質(zhì)含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于b途徑的D.毛細(xì)淋巴管中的大分子物質(zhì)通常不能穿過毛細(xì)淋巴管壁細(xì)胞進(jìn)入組織液3．下列有關(guān)生物變異和育種的敘述，正確的是（）A.貓叫綜合征是由于染色體中增加某一片段引起的B.高莖豌豆自交后代中出現(xiàn)矮莖豌豆是基因重組的結(jié)果C.三倍體無子西瓜的無子性狀為不可遺傳變異D.誘變育種依據(jù)的主要遺傳學(xué)原理是基因突變4．下列關(guān)于英國曼斯特地區(qū)受工業(yè)污染后，樺尺蠖黑化現(xiàn)象的敘述，正確的是（）A.由于工業(yè)發(fā)展，工業(yè)污染誘導(dǎo)樺尺蠖種群產(chǎn)生了黑色變異B.樺尺蠖變異的不定向性決定了該種群朝著不同的方向進(jìn)化C.污染區(qū)樺尺蠖黑色個體與淺色個體之間出現(xiàn)生殖隔離D.自然選擇會使樺尺蠖種群的基因頻率發(fā)生定向改變5．下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說法，正確的是（）A.蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對蛋白質(zhì)分子直接進(jìn)行操作B.蛋白質(zhì)工程能生產(chǎn)出自然界中不存在的新型蛋白質(zhì)分子C.對蛋白質(zhì)的改造是通過直接改造相應(yīng)mRNA來實現(xiàn)的D.蛋白質(zhì)工程的流程和天然蛋白質(zhì)合成的過程是相同的6．興奮在神經(jīng)元之間傳遞時，信號的轉(zhuǎn)換模式為（）A.電信號→電信號→電信號 B.電信號→化學(xué)信號→電信號C.化學(xué)信號→電信號→化學(xué)信號 D.化學(xué)信號→化學(xué)信號→化學(xué)信號7．果蠅的紅眼基因（R）對白眼基因（r）為顯性，位于X染色體上；長翅基因（B）對殘翅基因（b）為顯性，位于常染色體上?，F(xiàn)有一只紅眼長翅果蠅與一只白眼長翅果蠅交配，F(xiàn)1雄蠅中有1/8為白眼殘翅。則F1雌蠅中表現(xiàn)母本性狀的概率是（）A.1/8 B.3/8 C.1/16 D.3/168．（10分）下列與神經(jīng)調(diào)節(jié)有關(guān)的敘述正確的是（）A.興奮在人體內(nèi)的神經(jīng)纖維上具有雙向傳導(dǎo)的特點B.若突觸間隙的神經(jīng)遞質(zhì)分解受抑制，則導(dǎo)致突觸后神經(jīng)元持續(xù)興奮C.神經(jīng)遞質(zhì)作用的靶細(xì)胞可能是神經(jīng)細(xì)胞、腺體細(xì)胞或肌肉細(xì)胞D.膝跳反射由兩個神經(jīng)元構(gòu)成，因此無神經(jīng)中樞二、非選擇題9．（10分）某研究所對某紅樹林生態(tài)系統(tǒng)進(jìn)行了跟蹤調(diào)查，請根據(jù)相關(guān)調(diào)查材料回答問題。（1）調(diào)查紅樹林中主要植物的種群數(shù)量時，常用_____法。該紅樹林曾發(fā)生過火災(zāi)，但此后又慢慢恢復(fù)，這屬于群落的_____演替。（2）下圖A表示某種魚遷入此生態(tài)系統(tǒng)后的種群數(shù)量增長速率隨時間變化的曲線，B、C圖是反映該魚種群數(shù)量的變化。那么B、C圖中能反映該魚種群數(shù)量的變化曲線是_____。在t1時該種群的年齡組成可能為_____。若在t2時種群數(shù)量為N，為保持這種魚類資源的可持續(xù)增長，應(yīng)使這種魚捕撈后的種群數(shù)量保持在_____水平。若該魚是雜食魚類，以水草和植食性魚類為食，且其食物中水草和植食性魚類各占一半，該魚體重增加1公斤，最多需水草_____公斤。10．（14分）如圖表示某真核生物基因表達(dá)的部分過程，請回答下列問題：（1）圖中表示遺傳信息的_____過程，發(fā)生的場所是_____。（2）圖中③表示_____，合成的主要場所是_____。（3）圖中方框內(nèi)的堿基應(yīng)為_____，對應(yīng)的aa5應(yīng)為_____（賴氨酸的密碼子為AAA，苯丙氨酸的密碼子為UUU）。（4）圖中的氨基酸共對應(yīng)_____個密碼子。11．（14分）2020年兩位女科學(xué)家?，敿~埃爾·卡彭蒂娜和詹妮弗·杜德娜因發(fā)現(xiàn)“CRISPR/Cas9基因剪刀”而獲得2020年諾貝爾化學(xué)獎。CRISPR/Cas9系統(tǒng)可對基因組進(jìn)行定點編輯，其工作原理如圖1所示。該系統(tǒng)主要包含單鏈向?qū)NA和Cas9蛋白兩個部分，能特異性識別并結(jié)合特定的DNA序列，從而引導(dǎo)Cas9蛋白到相應(yīng)位置并剪切DNA，最終實現(xiàn)對靶基因序列的編輯。請回答下列問題：（1）圖1為CRISPR/Cas9系統(tǒng)作用示意圖，該系統(tǒng)能精準(zhǔn)識別相關(guān)基因的原理是sgRNA與目標(biāo)DNA發(fā)生______，Cas9蛋白可催化_____(化學(xué)鍵名稱)水解，剪切特定DNA片段。（2）LMNA基因編碼的核纖層蛋白與維持細(xì)胞核正常形態(tài)有關(guān)。科研人員利用CRISPR/Cas9技術(shù)對體外培養(yǎng)的HepG2(人源肺癌細(xì)胞)細(xì)胞株進(jìn)行基因編輯，獲得了LMNA基因敲除的穩(wěn)定細(xì)胞系。①HepG2細(xì)胞中沒有編碼Cas9的基因，需將Cas9基因及sgRNA基因拼接形成拼接基因并與質(zhì)粒結(jié)合導(dǎo)入HepG2細(xì)胞，sgRNA的合成需要______催化。②用下圖2中的質(zhì)粒以及含Cas9-sgRNA拼接基因的DNA片段構(gòu)建表達(dá)載體時，應(yīng)選用_______進(jìn)行酶切。將構(gòu)建好的表達(dá)載體與用______處理的細(xì)菌置于適宜反應(yīng)體系中培養(yǎng)。然后將培養(yǎng)的細(xì)菌涂布于含______的平板培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)，24h后挑取菌落，提取質(zhì)粒作為模板，選擇圖3中引物組合________和______，通過PCR和電泳技術(shù)鑒定是否重組成功。③用鑒定成功的工程菌對HepG2細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染，培養(yǎng)三天后收集HepG2細(xì)胞，提取基因組，對其______序列進(jìn)行檢測，判斷Cas9-sgRNA拼接基因是否導(dǎo)入成功。若從細(xì)胞水平進(jìn)行檢測，可以檢測HepG2細(xì)胞數(shù)目增長量或______。（3）華人科學(xué)家張鋒是首個將CRISPR基因編輯技術(shù)應(yīng)用于哺乳動物和人類細(xì)胞的科學(xué)家，為此項技術(shù)廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域做出了不可磨滅的貢獻(xiàn)。但是更多的學(xué)者提出了CRISRP/Cas9基因編輯技術(shù)有時存在編輯對象出錯而造成“脫靶”，實驗發(fā)現(xiàn)sgRNA的序列長短影響成功率，越短脫靶率越______，脫靶最可能的原因是______。12．內(nèi)皮素（ET）是一種多肽，主要通過與靶細(xì)胞膜上的ET受體（ETA）結(jié)合而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。科研人員通過構(gòu)建表達(dá)載體，實現(xiàn)ETA基因在大腸桿菌細(xì)胞中的高效表達(dá)，其過程如下圖所示，圖中SNAP基因是一種熒光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的識別序列為，限制酶XhoⅠ的識別序列為。請據(jù)圖分析回答：（1）進(jìn)行過程①時，需要加入緩沖液、引物、dNTP和_____酶等。完成過程①②③的目的是_____。④過程需要的工具是_____。（2）過程③和⑤中，限制酶XhoⅠ切割DNA，使_____鍵斷開，形成的黏性末端是_____。（3）構(gòu)建的重組表達(dá)載體，目的基因上游的啟動子是_____的部位，進(jìn)而可驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄。除圖中已標(biāo)出的結(jié)構(gòu)外，基因表達(dá)載體還應(yīng)具有的結(jié)構(gòu)是_____。（4）過程⑥要用_____預(yù)先處理大腸桿菌，使其成為容易吸收外界DNA的_____細(xì)胞。（5）將SNAP基因與ETA基因結(jié)合構(gòu)成融合基因，其目的是有利于檢測_____。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解析】HIV最初侵入人體時，免疫系統(tǒng)可以摧毀大多數(shù)病毒，隨著HIV濃度增加，T細(xì)胞逐漸減少，并伴有一些癥狀出現(xiàn)，如淋巴結(jié)腫大，T細(xì)胞數(shù)量減少，免疫系統(tǒng)被破壞，各種感染機(jī)會增加，人體免疫能力幾乎全部喪失。淋巴細(xì)胞包括T細(xì)胞和B細(xì)胞，T細(xì)胞遷移到胸腺中成熟，B細(xì)胞在骨髓中成熟?！驹斀狻緼、HIV有兩條單鏈RNA，為逆轉(zhuǎn)錄病毒，A正確；B、因包裹HIV囊膜從這個輔助性T細(xì)胞斷開感染其他輔助性T細(xì)胞，該過程涉及一種名叫Gag的HIV復(fù)合蛋白，所以若能阻止Gag蛋白在體內(nèi)的積累可能會抑制HIV的傳播繁殖，B正確；C、人感染HIV后，感染初期機(jī)體通過免疫殺死了大部分病毒，T細(xì)胞數(shù)量在該時期增加，C錯誤；D、在HIV潛伏期，HIV刺激機(jī)體產(chǎn)生抗HIV的抗體，故可檢測到，D正確。故選C。2、D【解析】體液是由細(xì)胞內(nèi)液和細(xì)胞外液組成,細(xì)胞內(nèi)液是指細(xì)胞內(nèi)的液體,而細(xì)胞外液即細(xì)胞的生存環(huán)境,它包括血漿、組織液、淋巴等,也稱為內(nèi)環(huán)境。它們之間的相互關(guān)系如下：【詳解】A、小腸上皮細(xì)胞生活的內(nèi)環(huán)境是組織液，腸液不屬于內(nèi)環(huán)境，A錯誤；B、a、b途徑可表示血漿與組織液之間的物質(zhì)交換，其中a主要指的是氧氣的進(jìn)入組織液中，b主要指的是營養(yǎng)和二氧化碳進(jìn)入到血漿中，因此，血漿與組織液的雖然可以進(jìn)行物質(zhì)交換，但交換的內(nèi)容是有差別的，因此血漿和組織液的成分是不一樣的，如血漿中含有較多的蛋白質(zhì)，B錯誤；C、一般來說，c途徑的物質(zhì)含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于b途徑的，c途徑主要指的是絕大多數(shù)的脂類物質(zhì)進(jìn)入內(nèi)環(huán)境中的途徑，C錯誤；D、毛細(xì)淋巴管中的大分子物質(zhì)通常不能穿過毛細(xì)淋巴管壁細(xì)胞進(jìn)入組織液，因此需要通過淋巴循環(huán)進(jìn)入到血液循環(huán)中，淋巴循環(huán)完成了血漿中蛋白從組織液中回收，D正確。故選D。3、D【解析】1、可遺傳的變異包括基因突變、基因重組和染色體變異：（1）基因突變是指基因中堿基對的增添、缺失或替換，這會導(dǎo)致基因結(jié)構(gòu)的改變，進(jìn)而產(chǎn)生新基因；（2）基因重組是指在生物體進(jìn)行有性生殖的過程中，控制不同性狀的非等位基因重新組合，包括兩種類型：①自由組合型：減數(shù)第一次分裂后期，隨著非同源染色體自由組合，非同源染色體上的非等位基因也自由組合。②交叉互換型：減數(shù)第一次分裂前期（四分體），基因隨著同源染色體的非等位基因的交叉互換而發(fā)生重組。此外，某些細(xì)菌（如肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗）和在人為作用（基因工程）下也能產(chǎn)生基因重組。（3）染色體變異包括染色體結(jié)構(gòu)變異（重復(fù)、缺失、易位、倒位）和染色體數(shù)目變異。2、種育種方法的原理：（1）雜交育種：基因重組；誘變育種:：基因突變；單倍體育種：染色體變異；多倍體育種：染色體變異?！驹斀狻緼、貓叫綜合征是由于5號染色體中缺失某一片段引起的，A錯誤；B、高莖豌豆自交，后代中出現(xiàn)矮莖豌豆是基因分離的結(jié)果，B錯誤；C、培育三倍體無子西瓜的原理為染色體數(shù)目變異，其無子性狀為可遺傳變異，C錯誤；D、誘變育種依據(jù)的主要遺傳學(xué)原理是基因突變，D正確。故選D。4、D【解析】現(xiàn)代生物進(jìn)化理論主要內(nèi)容：生物進(jìn)化的實質(zhì)是種群基因頻率的變化，突變和基因重組提供進(jìn)化的原材料，自然選擇決定進(jìn)化的方向，隔離導(dǎo)致物種的形成?！驹斀狻緼、樺尺蠖種群的變異是不定向的，A錯誤；BD、自然選擇決定進(jìn)化的方向，使樺尺蠖種群的基因頻率發(fā)生定向改變，B錯誤，D正確；C、污染區(qū)樺尺蠖黑色個體與淺色個體只是表型的不同，未出現(xiàn)生殖隔離，C錯誤；故選D。5、B【解析】蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活需求．蛋白質(zhì)工程能對現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)；而基因工程原則上能生產(chǎn)自然界原有的蛋白質(zhì)【詳解】蛋白質(zhì)工程指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。由概念可知：蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對現(xiàn)有蛋白質(zhì)的基因分子進(jìn)行操作，A錯誤；由概念可知：蛋白質(zhì)工程能產(chǎn)生出自然界中不曾存在過的新型蛋白質(zhì)分子，B正確；對蛋白質(zhì)的改造是通過直接改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)的基因來實現(xiàn)的，C錯誤；蛋白質(zhì)工程的流程和天然蛋白質(zhì)合成的過程是不完全相同的，D錯誤?！军c睛】本題考查蛋白質(zhì)工程的相關(guān)知識，蛋白質(zhì)工程的原理（實質(zhì)）是：改造基因．蛋白質(zhì)工程的過程：（1）根據(jù)中心法則逆推以確定目的基因的堿基序列：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有氨基酸序列→找到對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）；（2）進(jìn)行基因修飾或基因合成；（3）最終還是回到基因工程上來解決蛋白質(zhì)的合成．因此蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)合成的蛋白質(zhì)是自然界中不存在的新型蛋白質(zhì)分子6、B【解析】興奮在神經(jīng)元之間通過突觸傳遞，且在突觸間隙中需借助神經(jīng)遞質(zhì)（化學(xué)信號）進(jìn)行傳遞，因此突觸處的信息轉(zhuǎn)換模式為電信號→化學(xué)信號→電信號，據(jù)此答題?！驹斀狻颗d奮在神經(jīng)元之間通過突觸結(jié)構(gòu)傳遞，突觸包括突觸前膜、突觸間隙和突觸后膜，突觸前膜上完成的信息轉(zhuǎn)換模式為電信號→化學(xué)信號，而在突觸后膜完成化學(xué)信號→電信號的轉(zhuǎn)化，B正確，ACD錯誤。故選B?！军c睛】本題考查神經(jīng)沖動產(chǎn)生和傳導(dǎo)，要求考生識記突觸的結(jié)構(gòu)和類型，掌握神經(jīng)沖動在神經(jīng)纖維上的傳導(dǎo)過程及神經(jīng)沖動在神經(jīng)元之間的傳遞過程。7、B【解析】根據(jù)題意“一只紅眼長翅果蠅與一只白眼長翅果蠅交配，F(xiàn)1雄蠅中有1/8為白眼殘翅（1/8bbXrY）”可推出親本的基因型為：BbXrY、BbXRXr?！驹斀狻拷Y(jié)合分析，親本的基因型為BbXrY、BbXRXr，F(xiàn)1雌蠅中與母本表現(xiàn)性狀（紅眼長翅）相同的概率為1/2×3/4=3/8，故B正確，ACD錯誤。故選B。8、C【解析】突觸后膜會持續(xù)興奮或抑制的原因:若某種有毒有害物質(zhì)使分解神經(jīng)遞質(zhì)的相應(yīng)酶變性失活,則突觸后膜會持續(xù)興奮或抑制。【詳解】A、興奮在人體內(nèi)的傳導(dǎo)是沿著反射弧進(jìn)行的，因此人體內(nèi)的在神經(jīng)纖維上的傳導(dǎo)是單向的，A錯誤；B、神經(jīng)遞質(zhì)有興奮性遞質(zhì)和抑制性遞質(zhì)，若神經(jīng)遞質(zhì)分解受阻，則造成突觸后神經(jīng)元持續(xù)興奮或抑制，B錯誤；C、神經(jīng)遞質(zhì)作用的靶細(xì)胞可以是神經(jīng)細(xì)胞，某些特定情況下，也可以作用于腺體細(xì)胞或肌肉細(xì)胞，C正確；D、反射的完成需要完整的反射弧，膝跳反射的神經(jīng)中樞是脊髓，D錯誤。故選C。二、非選擇題9、(1).樣方(2).次生(3).C(4).增長型(5).N/2(6).55【解析】據(jù)A圖分析，t0-t1種群增長速率增加，t1-t2群增長速率減小為0，t1增長速率最大，表示S型曲線的種群增長速率。圖B的曲線為J型曲線，圖C的曲線為S型曲線。【詳解】（1）調(diào)查植物的種群密度常用樣方法，因此調(diào)查紅樹林中主要植物的種群數(shù)量時，常用樣方法。該紅樹林曾發(fā)生過火災(zāi)，其土壤和植被還保留，此后又慢慢恢復(fù)，這屬于群落的次生演替。（2）據(jù)A圖分析K可知，該種群的增長速率先增加后減慢，最后為0，種群數(shù)量先增加，最后穩(wěn)定，呈S型曲線增長，而B和C曲線，B為J型曲線，C為S型曲線，因此圖中能反映該魚種群數(shù)量的變化曲線是C。在t1時該種群增長速率最大，過后增長速率降低但大于0，種群數(shù)量還是在增加，故該點的年齡組成可能為增長型。若在t2時種群數(shù)量為N（即K值為N），S曲線中的種群數(shù)量為K/2值時，增長速率最大，故t2時種群數(shù)量為N/2，此時增長速率最大，應(yīng)使這種魚捕撈后的種群數(shù)量保持在N/2水平，種群數(shù)量能快速恢復(fù)。若該魚是雜食魚類，以水草為食時，該魚處于第二營養(yǎng)級，以植食性魚類為食時，該魚處于第三營養(yǎng)級。若其食物中水草和植食性魚類各占一半，該魚體重增加1公斤，則需要草的量為0.5÷10%+0.5÷10%÷10%=55公斤?！军c睛】本題難度中等，考查種群數(shù)量變化、群落結(jié)構(gòu)、群落演替的相關(guān)知識點，關(guān)鍵是理解種群增長速率和種群數(shù)量變化曲線的含義。10、（1）①.翻譯②.核糖體（2）①.mRNA②.細(xì)胞核（3）①.UUU②.賴氨酸（4）7【解析】分析題圖：圖示為翻譯過程，其中①是氨基酸，②為tRNA，③為mRNA，④為核糖體?！拘?詳解】圖示為mRNA與核糖體結(jié)合合成多肽的過程，是翻譯過程，場所是核糖體?！拘?詳解】③表示mRNA，是翻譯的模板，真核細(xì)胞中合成mRNA的主要場所是細(xì)胞核?！拘?詳解】根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則可知：圖中方框內(nèi)的堿基應(yīng)為UUU；tRNA上有反密碼子，與aa5對應(yīng)的密碼子在mRNA上，是AAA，編碼賴氨酸?！拘?詳解】圖中共有7個氨基酸，mRNA上決定氨基酸的三個相鄰的堿基是一個密碼子，所以決定7個氨基酸的是7個密碼子?！军c睛】本題結(jié)合圖解，考查遺傳信息的翻譯，要求考生識記翻譯的過程、場所、條件及產(chǎn)物等基礎(chǔ)知識，能正確分析題圖，再結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。11、①.堿基互補(bǔ)配對②.磷酸二酯鍵③.RNA聚合酶④.EcoRI⑤.Ca2+（CaCl2）⑥.嘌呤霉素⑦.Ⅱ⑧.Ⅲ（兩空位置可調(diào)換）⑨.堿基(或核苷酸)⑩.細(xì)胞核形態(tài)?.高?.sgRNA（向?qū)NA）越短越容易與DNA其他部位錯誤結(jié)合而脫靶【解析】1.基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的獲取，②基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③將目的基因?qū)耸荏w細(xì)胞，④目的基因的檢測與鑒定。

基因工程的三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體。

標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來?！驹斀狻浚?）圖1為CRISPR/Cas9系統(tǒng)作用示意圖，該系統(tǒng)能精準(zhǔn)識別相關(guān)基因的原理根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則實現(xiàn)的，即為sgRNA與目標(biāo)DNA發(fā)生堿基互補(bǔ)配對，同時Cas9蛋白可催化磷酸二酯鍵的水解，從而在特定的部位剪切特定DNA片段。（2）科研人員利用CRISPR/Cas9技術(shù)對體外培養(yǎng)的HepG2(人源肺癌細(xì)胞)細(xì)胞株進(jìn)行基因編輯，獲得了LMNA基因敲除的穩(wěn)定細(xì)胞系。①HepG2細(xì)胞中沒有編碼Cas9的基因，需將Cas9基因及sgRNA基因拼接形成拼接基因并與質(zhì)粒結(jié)合導(dǎo)入HepG2細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞中的RNA均來自轉(zhuǎn)錄過程推測sgRNA的合成需要RNA聚合酶的催化。②用下圖2中的質(zhì)粒以及含Cas9-sgRNA拼接基因的DNA片段構(gòu)建表達(dá)載體時，應(yīng)選用EcoRI進(jìn)行酶切，因為在質(zhì)粒和目的基因的兩端均含有該酶的切割位點，而BamHⅠ的酶切位點正好在標(biāo)記基因內(nèi)，因此該酶不能選擇。將構(gòu)建好的表達(dá)載體與用Ca2+（CaCl2）處理的細(xì)菌（增加細(xì)菌的通透性）置于適宜反應(yīng)體系中培養(yǎng)。然后將培養(yǎng)的細(xì)菌涂布于含嘌呤霉素的平板培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選，凡是能正常生長的菌落即為帶有目的基因的細(xì)菌，37℃培養(yǎng)，24h后挑取菌落，提取質(zhì)粒作為模板，根據(jù)圖中目的基因兩側(cè)的堿基序列以及引物的堿基順序，結(jié)合堿基互補(bǔ)配對原則可選擇圖3中引物組合Ⅱ和Ⅲ進(jìn)行體外DNA復(fù)制，通過PCR和電泳技術(shù)鑒定是否重組成功。③用鑒定成功的工程菌對HepG2細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染，培養(yǎng)三天后收集HepG2細(xì)胞，提取基因組，對其堿基(或核苷酸)序列進(jìn)行檢測，判斷Cas9-sgRNA拼接基因是否導(dǎo)入成功。若從細(xì)胞水平進(jìn)行檢測，可以檢測HepG2細(xì)胞數(shù)目增長量或細(xì)胞核形態(tài)是否變化來檢測。（3）但是更多的