DB11T 1806-2020 實驗動物 寄生蟲檢測

DB11北京市市場監(jiān)督管理局發(fā)布 驗動物寄生蟲檢測與評價第5部分:實驗用長爪沙鼠》，除結構調(diào)整和編輯性改本文件起草單位：中國農(nóng)業(yè)大學、中國食品藥品檢定研究院、國家衛(wèi)生健康委科學中國科學院水生生物研究所、中國動物疫病預防控制中心、首都醫(yī)科大學、浙江省醫(yī)學科學醫(yī)學科學院醫(yī)學實驗動物研究所、北京康藍生物技術有限公司、北京市實驗動物管理辦公室驗動物行業(yè)協(xié)會、北京市標準化研究院、中國農(nóng)業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所、北京華阜康生王錫樂、劉文菊、齊靜、劉云波、魏強、向志光、劉先菊、黃瀾、李長龍、付瑞、岳秉飛、薩曉嬰、實驗動物寄生蟲檢測本文件規(guī)定了實驗動物的寄生蟲學等級分類、檢測要求本文件適用于實驗小型豬、實驗豬、實驗牛、實驗羊、實驗貓、實驗雞、實驗鴨、實驗鵝、實驗鴿、實驗下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修不攜帶所規(guī)定的人獸共患病病原、動物烈性傳染病病原和對科學實驗有重大干普通級實驗動物中未免疫特定的疫苗，且經(jīng)檢測不攜帶實驗要求排除的特定病原微生物除普通級實驗動物應排除的病原外，不攜帶主要潛在感染根據(jù)對微生物和寄生蟲控制的程度，實驗動物分為普通級實驗動物、無特定病原體級對待檢實驗動物的精神狀態(tài)、行為、被毛、天然孔分泌物進行外觀普通級●●●●無特定病原體●●●●●●●●●●●普通級●●●●●●無特定病原體級●●●●●●●●●●●○●●●○●●●○●●普通級●●無特定病原體級●●●●●●●普通級●●無特定病原體級●●●●●●●●普通級●●無特定病原體級●●●●●●普通級●●●無特定病原體級●●●●●●●●●表7實驗雞、實驗鴨、實驗鵝和實驗鴿各●●●●普通級無特定病原體級●●●●●●●●●●●●●○●○●○○○●●○○●○○○●●●●○○●○○○○●●●●●普通級●●●●無特定病原體級●●●●●●●●●●●●●●物的耐受劑量，可采用吸入性麻醉或注射麻醉，麻醉過程中應隨時注意實驗動物的反應。6.1.3釆血方法以及毛發(fā)、羽毛或皮屑、新鮮糞便的采樣方法參照NY/T541進行。>500樣品和送檢單一同送達具備檢測能力的實驗室，送檢單應寫明檢品名稱、品系、等級、血清樣品經(jīng)間接血凝實驗（IndirectHemagglutinationAssay，IHA）、酶聯(lián)免疫吸附測定（Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay，ELISA）或間接免疫熒光（Indirect固定液，乙醇，二甲苯，蘇木素，鹽酸，伊紅，中性樹脂，石蠟，姬姆薩染液，動物組織從精神狀態(tài)、行為、被毛和天然孔分泌物對實驗雞剖檢實驗雞，進行病理學大體觀察。觀察肝臟是否腫大，表面是否有黃褐色壞死灶——取剖檢的實驗雞盲腸，除去內(nèi)容物后取盲腸粘膜表面的刮取物于載玻片上，鹽水稀釋，顯微鏡下觀察是否有活動的組織滴蟲——取剖檢的實驗雞的肝組織涂片進行姬氏染色，顯微鏡下觀察是否有組織滴蟲蟲體存——取剖檢的實驗雞的肝臟和盲腸組織制作組織切片并進行H.E.染色，顯微鏡下觀察是否有組織CTCGTCGGCATAGTTTAAGGTAGG-3’）進行PCR檢測，擴增產(chǎn)物進行凝膠電泳并測序分若有火雞組織滴蟲感染，典型病理變化為肝臟腫大，呈深紫褐色，表面有大小不一灶，壞死灶中央稍有下陷，有的壞死灶周圍有出血帶；盲腸外觀明顯腫大，觸之堅硬，細不均，腸腔內(nèi)有干酪樣物充塞，可懷疑為陽性，需通過下列任意一種——若有火雞組織滴蟲感染，盲腸粘膜刮取物或肝臟抹片在顯微鏡油鏡下可見單個或成簇成直徑0.8cm～1cm大小圓形厚血膜。在同一玻片的另一區(qū)域，取約1μL～1.5μL的血量，使血滴與平置的載玻片接觸，并形成25°~35°夾角，待血液向兩側擴展約2cm～2.5cm寬時，均在鏡下看到占據(jù)紅細胞的細胞核以外空間的蟲體，后者依據(jù)其發(fā)育階段不同呈現(xiàn)不同的D.1.1.1將待檢魚麻醉后放在解剖盤加一滴清水或生理鹽水，用鑷子將組織分散，加上蓋玻片，在然后將鰓小片逐片剪開，在體視顯微鏡下用兩根解剖針，把鰓絲逐條分開，仔細檢查，將每片鰓片的鰓上所有內(nèi)含物完全刮下，放在培養(yǎng)皿里，用清水稀釋、攪勻后，在解剖D.2.2眼球:采用水浸法，即將魚體的眼球取下，放在盛有生理鹽水的培養(yǎng)皿中，待寄生蟲游離D.2.3體腔、臟器、生殖腺和鰾:首先采用肉眼觀察，看組織表面有沒有肉眼可見的白色包囊和寄生蟲；然后將體腔用生理鹽水沖洗，并盛在培養(yǎng)皿中，其他組織用生理鹽D.2.4腸道:先用肉眼檢查，看腸外壁有無白點，這些白點通常是微孢子蟲或粘孢子蟲的孢囊。腸道內(nèi)的寄生蟲檢測采用壓片法，先把腸外壁上的脂肪組織盡量除干凈，否則脂肪會混