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高三模擬試題PAGEPAGE11.腎內(nèi)集合管細(xì)胞膜上具有AQP2、AQP3、AQP4等多種水通道蛋白??估蚣に兀ˋDH)會(huì)通過(guò)調(diào)控AQP2的數(shù)量來(lái)調(diào)節(jié)水的重吸收,有關(guān)過(guò)程如下圖所示,其中①~③表示體液成分,a、b表示囊泡的不同轉(zhuǎn)運(yùn)途徑。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題。(1)圖中①~③中屬于內(nèi)環(huán)境的有_______________;集合管細(xì)胞之間通過(guò)封閉小帶緊密連接,有效防止了_______________。(2)若圖中“某種刺激”引起尿量減少,則該刺激可能為_(kāi)______________,此時(shí)ADH的釋放量將_______________,并與集合管細(xì)胞膜上的X特異性結(jié)合,引發(fā)細(xì)胞內(nèi)一系列反應(yīng),據(jù)此推測(cè)X的化學(xué)本質(zhì)是_______________。(3)水分子通過(guò)AQP快速通過(guò)細(xì)胞膜的運(yùn)輸方式是_______________。集合管細(xì)胞中,AQP2與分泌蛋白都能通過(guò)囊泡進(jìn)行轉(zhuǎn)運(yùn),它們?cè)谀遗莸奈恢脜^(qū)別是_______________。若正常人一次性快速飲用1000mL純凈水,b過(guò)程將會(huì)_______________(填“增強(qiáng)”、“減弱”或“基本不變”)。(4)若人體在正常飲水情況下尿量超過(guò)3L/d,則可能患有尿崩癥。下列有關(guān)引發(fā)人體尿崩原因的分析,合理的有_______________。①下丘腦的損傷導(dǎo)致垂體合成和分泌的抗利尿激素量不足②自身產(chǎn)生的抗體與ADH受體特異性結(jié)合,導(dǎo)致集合管細(xì)胞對(duì)ADH不敏感③控制合成AQP2的基因過(guò)量表達(dá),導(dǎo)致集合管細(xì)胞膜上的AQP2增多④通過(guò)ADH的調(diào)控,導(dǎo)致集合管細(xì)胞膜上AQP3和AQP4的數(shù)量過(guò)少⑤含AQP2的囊泡上缺乏某些蛋白,導(dǎo)致AQP2無(wú)法定位到集合管細(xì)胞的特定位置〖答案〗(1)①.②③②.組織液(②)與(集合管內(nèi)的)原尿的混合(2)①.細(xì)胞外液滲透壓升高(或血量減少動(dòng)脈血的降低等)②.增加③.糖蛋白(蛋白質(zhì))(3)①.協(xié)助擴(kuò)散②.分泌蛋白是被囊泡包裹著的,而水通道蛋白則位于囊泡膜上③.增強(qiáng)(4)②⑤〖解析〗〖祥解〗分析題圖:血漿中的ADH會(huì)與集合管細(xì)胞上的X載體結(jié)合,腎集合管腔壁細(xì)胞基質(zhì)中的AQP2小泡向管腔膜遷移并與之融合,通過(guò)出泡作用,小泡膜上的AQP2嵌入管腔膜,使管腔膜AQP2的數(shù)量增加,從而使水滲透通透性相應(yīng)增加。圖中①屬于細(xì)胞內(nèi)液,②是組織液,③是血漿?!夹?wèn)1詳析〗內(nèi)環(huán)境是由血漿、組織液和淋巴液等組成的,圖中①~③中屬于內(nèi)環(huán)境的有②組織液和③血漿;據(jù)圖可知,集合管細(xì)胞之間通過(guò)封閉小帶緊密連接,有效防止了組織液(②)與(集合管內(nèi)的)原尿的混合?!夹?wèn)2詳析〗若圖中“某種刺激”引起尿量減少,則該刺激可能為細(xì)胞外液滲透壓升高,細(xì)胞外液滲透壓升高,會(huì)刺激下丘腦的滲透壓感受器,抗利尿激素(ADH)的釋放量將增加;激素需要與受體結(jié)合才能起作用,由于X能與ADH結(jié)合,故推測(cè)X的化學(xué)本質(zhì)是糖蛋白?!夹?wèn)3詳析〗分析題意可知,AQP是水通道蛋白,故水分子通過(guò)AQP快速通過(guò)細(xì)胞膜的運(yùn)輸方式是協(xié)助擴(kuò)散;AQP2是水通道蛋白,其與分泌蛋白的區(qū)別在于:分泌蛋白是被囊泡包裹著的,而水通道蛋白則位于囊泡膜上;正常人一次性快速飲用1000mL純凈水,重吸收水減少,所以b將受體蛋白運(yùn)回細(xì)胞,減少對(duì)水的重吸收,b過(guò)程將會(huì)增強(qiáng),并導(dǎo)致細(xì)胞外液的滲透壓降低?!夹?wèn)4詳析〗①抗利尿激素是由下丘腦分泌,垂體釋放的,①錯(cuò)誤;②ADH可促進(jìn)腎小管和集合管對(duì)水的重吸收,從而減少尿量,若自身產(chǎn)生的抗體與ADH受體特異性結(jié)合,導(dǎo)致集合管細(xì)胞對(duì)ADH不敏感,則會(huì)導(dǎo)致尿崩,②正確;③⑤據(jù)圖可知,若集合管細(xì)胞膜上的AQP2增多,從而使水滲透通透性相應(yīng)增加,促進(jìn)對(duì)水分的吸收,不會(huì)引起尿崩;若含AQP2的囊泡上缺乏某些蛋白,導(dǎo)致AQP2無(wú)法定位到集合管細(xì)胞的特定位置,則會(huì)導(dǎo)致重吸收作用減弱,可能引起尿崩,③錯(cuò)誤,⑤正確;④據(jù)圖可知,集合管細(xì)胞膜上AQP3和AQP4可將集合管中協(xié)助擴(kuò)散至組織液中,若集合管細(xì)胞膜上AQP3和AQP4的數(shù)量過(guò)少,不會(huì)引起尿崩,④錯(cuò)誤。故選②⑤?!肌狐c(diǎn)石成金』〗本題結(jié)合抗利尿激素促進(jìn)腎小管細(xì)胞重吸收水分的調(diào)節(jié)機(jī)制圖解,考查內(nèi)環(huán)境的組成、細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、水平衡調(diào)節(jié),要求考生識(shí)記內(nèi)環(huán)境的組成;識(shí)記細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)特點(diǎn);識(shí)記水平衡調(diào)節(jié)的過(guò)程,能結(jié)合圖中信息答題。2.抗利尿激素是一種多肽化合物,可作用于腎小管,激活腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)一系列反應(yīng),促進(jìn)水通道蛋白插入腎小管上皮細(xì)胞膜(管腔面)(如下圖所示)?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)當(dāng)人吃的食物過(guò)咸或飲水過(guò)少的情況下,____________感受器興奮,__________釋放的抗利尿激素增多。該激素的合成部位在____________(填器官)。(2)腎小管上皮細(xì)胞中水通道蛋白的合成及加工過(guò)程與分泌蛋白相似,只是不分泌到細(xì)胞外,而是轉(zhuǎn)移至細(xì)胞膜上,與水通道蛋白的合成及加工過(guò)程直接相關(guān)的細(xì)胞器有____________________。(3)據(jù)圖分析,抗利尿激素促進(jìn)腎小管細(xì)胞對(duì)水的重吸收的機(jī)制:一方面改變細(xì)胞中某些酶的活性,促進(jìn)______________的合成,另一方面促進(jìn)儲(chǔ)存水通道蛋白的囊泡與細(xì)胞膜______________,從而增加細(xì)胞膜上水通道蛋白的數(shù)量。(4)尿量超過(guò)3L/d稱尿崩。假設(shè)尿崩癥僅與抗利尿激素有關(guān),說(shuō)出引起尿崩的兩個(gè)原因:①________________________;②_______________________________?!即鸢浮舰?下丘腦滲透壓②.垂體③.下丘腦④.核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體⑤.水通道蛋白⑥.融合⑦.抗利尿激素分泌量不足⑧.腎小管上皮細(xì)胞表面缺乏抗利尿激素受體從而使抗利尿激素不能發(fā)揮作用〖解析〗〖祥解〗分析圖示:圖示表示抗利尿激素促進(jìn)腎小管細(xì)胞重吸收水分的調(diào)節(jié)機(jī)制,抗利尿激素作用于腎小管細(xì)胞,改變了細(xì)胞中某些酶的活性,從而促進(jìn)水通道蛋白的合成,促進(jìn)儲(chǔ)存水通道蛋白的囊泡與細(xì)胞膜融合,從而增加細(xì)胞膜上水通道蛋白的數(shù)量,最終促進(jìn)了對(duì)水的重吸收〖詳析〗(1)當(dāng)人吃的食物過(guò)咸或飲水過(guò)少時(shí),細(xì)胞外液滲透壓升高,下丘腦滲透壓感受器興奮,下丘腦合成分泌、垂體釋放的抗利尿激素增多。(2)水通道蛋白的合成及加工過(guò)程與分泌蛋白相似,腎小管上皮細(xì)胞中水通道蛋白在核糖體上合成,經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體加工、包裝并轉(zhuǎn)移至細(xì)胞膜上,因此,與水通道蛋白合成及加工過(guò)程直接相關(guān)的細(xì)胞器有核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體。(3)結(jié)合題圖分析可知,抗利尿激素作用于腎小管細(xì)胞,通過(guò)對(duì)細(xì)胞中某些酶的影響,促進(jìn)水通道蛋白的合成;同時(shí)促進(jìn)儲(chǔ)存水通道蛋白的囊泡與細(xì)胞膜融合,從而增加細(xì)胞膜上水通道蛋白的數(shù)量,最終促進(jìn)腎小管上皮細(xì)胞對(duì)水的重吸收。(4)抗利尿激素可以促進(jìn)腎小管和集合管對(duì)水分的重吸收,若尿崩癥僅與抗利尿激素有關(guān),則其原因可能是:抗利尿激素分泌量不足,導(dǎo)致腎小管和集合管對(duì)水的重吸收減弱;或腎小管細(xì)胞表面缺乏抗利尿激素受體而使抗利尿激素不能發(fā)揮作用?!肌狐c(diǎn)石成金』〗本題結(jié)合抗利尿激素促進(jìn)腎小管細(xì)胞重吸收水分的調(diào)節(jié)機(jī)制圖解,考查水平衡調(diào)節(jié)等知識(shí),要求考生識(shí)記水平衡調(diào)節(jié)的過(guò)程,能結(jié)合圖中信息答題。3.下圖是人體穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)機(jī)制的示意圖,①~④表示相關(guān)的激素。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題:(1)某同學(xué)長(zhǎng)跑時(shí)心跳加速,血壓升高,壓力感受器激活心血管中樞,傳出神經(jīng)釋放神經(jīng)遞質(zhì),遞質(zhì)作用于心臟及血管細(xì)胞膜上的__________,從而降低血壓,該調(diào)節(jié)方式屬于__________調(diào)節(jié)。(2)該同學(xué)因運(yùn)動(dòng)大量出汗,血漿滲透壓升高,激活位于__________的神經(jīng)元A,促使其合成和分泌__________(填①的名稱),進(jìn)而促進(jìn)腎臟對(duì)水的重吸收,使尿液_________(增加或減少)該調(diào)節(jié)方式屬于__________調(diào)節(jié)。(3)如果人體中甲狀腺受損,導(dǎo)致④的合成減少,則②、③合成_______(變多或變少),這種調(diào)節(jié)機(jī)制稱為_(kāi)____________調(diào)節(jié)(4)該同學(xué)因運(yùn)動(dòng)體溫升高,達(dá)到37度并保持穩(wěn)定,此時(shí)人體產(chǎn)熱______(大于、等于、小于)散熱。激素②的名稱是__________,其生理作用是__________________________?!即鸢浮剑?)①.特異性受體②.神經(jīng)(2)①.下丘腦②.抗利尿激素③.減少④.神經(jīng)—體液(3)①.變多②.負(fù)反饋(反饋)(4)①.等于②.促甲狀腺激素釋放激素③.促進(jìn)垂體釋放促甲狀腺激素〖解析〗〖祥解〗體溫調(diào)節(jié)的機(jī)理;寒冷環(huán)境→皮膚冷覺(jué)感受器→下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞→傳出神經(jīng)→骨骼?。ú蛔灾魇湛s)增加產(chǎn)熱。同時(shí)通過(guò)激素調(diào)節(jié)作用于甲狀腺,使甲狀腺激素分泌增多,新陳代謝活動(dòng)加強(qiáng),從而產(chǎn)生更多的熱量;在炎熱環(huán)境汗腺分泌活動(dòng)加強(qiáng),反射弧為:炎熱環(huán)境→皮膚溫覺(jué)感受器→下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞→傳出神經(jīng)→汗腺分泌活動(dòng)加強(qiáng),散熱增多?!夹?wèn)1詳析〗據(jù)題圖所示可知,如果血壓升高,壓力感受器激活心血管中樞,作出綜合分析,發(fā)出指令,通過(guò)傳出神經(jīng)釋放神經(jīng)遞質(zhì),遞質(zhì)作用于心臟及血管細(xì)胞膜上的特異性受體,使心率減慢,血管緊張度下降,從而降低血壓,該調(diào)節(jié)方式屬于神經(jīng)調(diào)節(jié)?!夹?wèn)2詳析〗如果大量出汗,水分失去較多,血漿滲透壓升高,下丘腦的滲透壓感受器受到刺激,激活位于下丘腦的神經(jīng)元A,促使其合成和分泌抗利尿激素,并由垂體釋放進(jìn)入血液,作用到腎小管和集合管,促進(jìn)腎臟對(duì)水的重吸收,導(dǎo)致尿量減少,該調(diào)節(jié)過(guò)程既有神經(jīng)調(diào)節(jié),也有激素調(diào)節(jié),屬于神經(jīng)-體液調(diào)節(jié)?!夹?wèn)3詳析〗如果人體中甲狀腺受損,導(dǎo)致④甲狀腺激素的合成減少,反饋抑制減弱,導(dǎo)致②促甲狀腺激素釋放激素和③促甲狀腺激素分泌變多,故這種調(diào)節(jié)機(jī)制稱為負(fù)反饋(反饋)調(diào)節(jié)?!夹?wèn)4詳析〗某同學(xué)體溫穩(wěn)定在37℃,此時(shí)人體產(chǎn)熱等于散熱。激素②的名稱是促甲狀腺激素釋放激素,其生理作用是促進(jìn)垂體釋放促甲狀腺激素。〖『點(diǎn)石成金』〗本題的知識(shí)點(diǎn)是水鹽平衡的調(diào)節(jié),體溫調(diào)節(jié),主要考查學(xué)生的識(shí)圖能力并利用題圖信息解決問(wèn)題的能力和對(duì)神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)關(guān)系的理解與運(yùn)用能力,難度適中。4.人體生命活動(dòng)的正常進(jìn)行是在機(jī)體調(diào)節(jié)作用下,各器官、系統(tǒng)協(xié)調(diào)參與的結(jié)果,也是多種信息分子參與的結(jié)果。下圖是人體內(nèi)部分信息分子的作用示意圖,字母A-F表示信息分子,①②表示相關(guān)生理變化。請(qǐng)據(jù)圖回答:(1)地方性甲狀腺腫(大脖子?。┰俏覈?guó)缺碘地區(qū)的一種常見(jiàn)疾病,隨著加碘鹽的普遍使用這種患者已極少見(jiàn)到。導(dǎo)致大脖子病最直接的信息分子是_____(名稱)。(2)據(jù)圖可知人體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的主要調(diào)節(jié)方式是_____,維持圖中各種信息分子含量處于動(dòng)態(tài)平衡的調(diào)節(jié)機(jī)制是_____。(3)圖中分子C表示_____,該分子作用于腎小管細(xì)胞,使細(xì)胞膜上的_____蛋白增加,進(jìn)而加強(qiáng)①過(guò)程的進(jìn)行。(4)人體血糖平衡是神經(jīng)-體液共同調(diào)節(jié)的結(jié)果,參與血糖下降過(guò)程調(diào)節(jié)的信息分子有_____(至少寫(xiě)2個(gè))。(5)人體處于寒冷環(huán)境下,機(jī)體除圖中涉及的部分產(chǎn)熱途徑外,還會(huì)通過(guò)_____減少散熱,調(diào)節(jié)后機(jī)體散熱量_____(填“大于”“等于”或“小于”)炎熱環(huán)境中的散熱量。人在寒冷環(huán)境中比在炎熱環(huán)境精力更集中、興奮性更高的主要原因是_____?!即鸢浮剑?)促甲狀腺激素(2)①.神經(jīng)-體液-免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)②.負(fù)反饋(3)①.抗利尿激素②.水通道(4)神經(jīng)遞質(zhì)、胰島素、血糖濃度、胰高血糖素等(5)①.皮膚毛細(xì)血管收縮、汗腺分泌汗液減少②.大于③.寒冷環(huán)境中甲狀腺激素分泌量增加,提高了神經(jīng)系統(tǒng)興奮性〖解析〗〖祥解〗1、信息分子種類有神經(jīng)遞質(zhì)、激素和細(xì)胞因子。神經(jīng)系統(tǒng)分泌神經(jīng)遞質(zhì),內(nèi)分泌系統(tǒng)分泌激素,免疫系統(tǒng)分泌細(xì)胞因子等。2、圖中A對(duì)應(yīng)過(guò)程是神經(jīng)調(diào)節(jié),B對(duì)應(yīng)過(guò)程是甲狀腺激素調(diào)節(jié)促進(jìn)新陳代謝,C對(duì)應(yīng)過(guò)程是水平衡調(diào)節(jié),D對(duì)應(yīng)過(guò)程是免疫調(diào)節(jié),E對(duì)應(yīng)過(guò)程是血糖調(diào)節(jié)?!夹?wèn)1詳析〗碘是甲狀腺激素合成的原料,缺碘不能合成甲狀腺激素,分級(jí)調(diào)節(jié)加強(qiáng),促甲狀腺激素增加,導(dǎo)致大脖子病,故導(dǎo)致大脖子病最直接的信息分子是促甲狀腺激素?!夹?wèn)2詳析〗據(jù)圖可知人體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的主要調(diào)節(jié)方式是神經(jīng)-體液-免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò),維持各種信息分子含量處于動(dòng)態(tài)平衡的調(diào)節(jié)機(jī)制是負(fù)反饋調(diào)節(jié)?!夹?wèn)3詳析〗C是抗利尿激素,可促進(jìn)腎小管和集合管對(duì)水分的重吸收,該分子作用于腎小管和集合管細(xì)胞,使細(xì)胞膜上的水通道蛋白增加,進(jìn)而加強(qiáng)①過(guò)程的進(jìn)行,從而使細(xì)胞外液滲透壓降低?!夹?wèn)4詳析〗人體血糖平衡是神經(jīng)-體液共同調(diào)節(jié)的結(jié)果,胰島素降低血糖、胰高血糖素和腎上腺素升高血糖,含有神經(jīng)遞質(zhì)作用于下丘腦等,故參與血糖下降過(guò)程調(diào)節(jié)的信息分子有神經(jīng)遞質(zhì)、胰島素、血糖濃度、胰高血糖素等?!夹?wèn)5詳析〗人體處于寒冷環(huán)境下,機(jī)體除圖中涉及的部分產(chǎn)熱途徑外,還會(huì)通過(guò)皮膚毛細(xì)血管收縮、汗腺分泌汗液減少散熱,調(diào)節(jié)后機(jī)體散熱量大于炎熱環(huán)境中的散熱量。人在寒冷環(huán)境中比在炎熱環(huán)境精力更集中、興奮性更高的主要原因是寒冷環(huán)境中甲狀腺激素分泌量增加,提高了神經(jīng)系統(tǒng)的興奮性?!肌狐c(diǎn)石成金』〗本題考查了神經(jīng)調(diào)節(jié)、體液調(diào)節(jié)和免疫調(diào)節(jié)中信息分子的作用,對(duì)于甲狀腺激素的分級(jí)調(diào)節(jié)、血糖平衡調(diào)節(jié)、水平衡調(diào)節(jié)、免疫調(diào)節(jié)、神經(jīng)調(diào)節(jié)的理解把握知識(shí)點(diǎn)之間的內(nèi)在聯(lián)系是解題的關(guān)鍵。5.如圖是人體穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)機(jī)制的相關(guān)示意圖,①~④表示相關(guān)激素,⑤~⑦代表相關(guān)的過(guò)程或生理效應(yīng),A、B、C代表相關(guān)的器官或細(xì)胞。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)某同學(xué)長(zhǎng)跑時(shí)心跳加速,血壓升高,壓力感受器激活心血管,傳出神經(jīng)釋放神經(jīng)遞質(zhì),遞質(zhì)作用于心臟及血管細(xì)胞膜上________,從而降低血壓,該調(diào)節(jié)方式屬于________調(diào)節(jié)。(2)該同學(xué)因運(yùn)動(dòng)大量出汗,血漿滲透壓升高,激活位于________(填器官或腺體的名稱)的神經(jīng)元A,促使其合成和分泌激素①______________,進(jìn)而促進(jìn)______________,該調(diào)節(jié)方式屬于______________調(diào)節(jié)。(3)該同學(xué)運(yùn)動(dòng)后會(huì)及時(shí)補(bǔ)充食物,補(bǔ)充食物半小時(shí)后,⑤→⑥→⑦的活動(dòng)會(huì)增強(qiáng),該過(guò)程的調(diào)節(jié)方式屬于________調(diào)節(jié),其中⑦代表的生理效應(yīng)為_(kāi)_______________________________________。圖中葡萄糖與Ca2+進(jìn)入細(xì)胞的方式分別為_(kāi)_______、________。(4)除Ⅰ型糖尿病人外,尿液中出現(xiàn)葡萄糖的原因可能還有________(填字母)。A.低血糖患者 B.一次性攝糖過(guò)多C.有自身免疫病的患者 D.腎小管重吸收功能障礙〖答案〗(1)①.(特異性)受體②.神經(jīng)(2)①.下丘腦②.抗利尿激素③.腎小管和集合管對(duì)水分的重吸收④.神經(jīng)—體液(負(fù)反饋)(3)①.神經(jīng)—體液②.促進(jìn)組織細(xì)胞加速攝取、利用和儲(chǔ)存葡萄糖,使血糖含量下降③.協(xié)助擴(kuò)散④.協(xié)助擴(kuò)散(4)BCD〖解析〗〖祥解〗1、神經(jīng)—體液調(diào)節(jié)嚴(yán)格來(lái)說(shuō)可分為兩部分,一部分是神經(jīng)調(diào)節(jié),另一部分是體液調(diào)節(jié)。神經(jīng)調(diào)節(jié)指的是通過(guò)神經(jīng)進(jìn)行調(diào)節(jié)生命活動(dòng)的方式,調(diào)節(jié)過(guò)程是反射弧。體液調(diào)節(jié)指的是激素、二氧化碳等化學(xué)物質(zhì),通過(guò)體液傳送的方式對(duì)生命活動(dòng)進(jìn)行調(diào)節(jié)。而神經(jīng)—體液調(diào)節(jié)指上述兩種調(diào)節(jié)方式共同協(xié)調(diào)、相輔相成,在整個(gè)調(diào)節(jié)過(guò)程中雙方都參與,一般在調(diào)節(jié)過(guò)程中以神經(jīng)調(diào)節(jié)為主,體液調(diào)節(jié)會(huì)直接或間接地受到神經(jīng)系統(tǒng)的控制。2、滲透壓調(diào)節(jié)的機(jī)理:細(xì)胞外液滲透壓上升刺激下丘腦滲中的透壓感受器,使下丘腦分泌、由垂體釋放的抗利尿激素增多,作用于腎小管和集合管,增強(qiáng)對(duì)水的重吸收,導(dǎo)致尿量減少,重吸收的水分進(jìn)入周圍的毛細(xì)血管,使得細(xì)胞外液滲透壓下降;另→方面,滲透壓感受器產(chǎn)生的興奮作用于大腦皮層,產(chǎn)生渴覺(jué),主動(dòng)喝水,也使細(xì)胞外液滲透壓下降?!夹?wèn)1詳析〗據(jù)題圖所示可知,如果血壓升高,相應(yīng)的感受器興奮,傳入神經(jīng)將興奮傳到心血管中樞,心血管中樞作出綜合分析,發(fā)出指令,通過(guò)傳出神經(jīng)釋放神經(jīng)遞質(zhì),遞質(zhì)作用于心臟及血管細(xì)胞膜上的特異性受體,使心率減慢,血管緊張度下降,從而降低血壓,該調(diào)節(jié)過(guò)程只有神經(jīng)系統(tǒng)參與,故調(diào)節(jié)方式屬于神經(jīng)調(diào)節(jié)?!夹?wèn)2詳析〗該同學(xué)因運(yùn)動(dòng)大量出汗,丟失大量水分,血漿滲透壓升高,使大腦皮層產(chǎn)生渴覺(jué),并激活位于下丘腦的神經(jīng)元A,即會(huì)使位于下丘腦的滲透壓感受器興奮,從而促進(jìn)下丘腦合成抗利尿激素,垂體釋放抗利尿激素也增多,進(jìn)而促進(jìn)腎小管和集合管對(duì)水的重吸收,該調(diào)節(jié)過(guò)程既有神經(jīng)參與,也有激素參與,故該調(diào)節(jié)方式屬于神經(jīng)﹣體液調(diào)節(jié)?!夹?wèn)3詳析〗該同學(xué)運(yùn)動(dòng)后會(huì)及時(shí)補(bǔ)充食物,補(bǔ)充食物半小時(shí)后,通過(guò)消化吸收的過(guò)程,使血糖上升,血糖升高可直接刺激胰島B細(xì)胞。使其分泌胰島素,屬于體液調(diào)節(jié);同時(shí)血糖升高也會(huì)通過(guò)神經(jīng)傳導(dǎo),使下丘腦中的血糖調(diào)節(jié)中樞興奮,通過(guò)神經(jīng)調(diào)節(jié)促進(jìn)胰島素的分泌,這個(gè)過(guò)程屬于神經(jīng)調(diào)節(jié),所以通過(guò)⑤→⑥→①調(diào)節(jié)血糖的方式屬于神經(jīng)—體液(負(fù)反饋)調(diào)節(jié);其中⑦代表在胰島素的作用下,使血糖下降,胰島素作用的生理效應(yīng)是:可使組織細(xì)胞加速攝取、利用和儲(chǔ)存葡萄糖,從而使血糖含量下降。圖中葡萄糖進(jìn)入細(xì)胞是順濃度梯度運(yùn)輸,需要轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(載體蛋白)的協(xié)助,不消耗能量,屬于協(xié)助擴(kuò)散;Ca2+進(jìn)入細(xì)胞需要轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(載體蛋白)的協(xié)助,不消耗能量,屬于協(xié)助擴(kuò)散?!夹?wèn)4詳析〗A、低血糖患者的血糖偏低,不會(huì)出現(xiàn)尿糖,A錯(cuò)誤;B、一次性攝糖過(guò)多,使原尿中葡萄糖濃度過(guò)高,超過(guò)腎小管和集合管的重吸收能力,會(huì)導(dǎo)致糖尿,B正確;C、自身免疫病的患者,自身免疫系統(tǒng)持續(xù)殺傷胰島細(xì)胞,則會(huì)導(dǎo)致胰島素分泌不足,血糖含量過(guò)高,會(huì)導(dǎo)致糖尿,C正確;D、腎小管重吸收功能障礙,原尿中的葡萄糖不能被完全重吸收,會(huì)導(dǎo)致糖尿,D正確。故選BCD?!肌狐c(diǎn)石成金』〗本題考查水鹽平衡的調(diào)節(jié)、神經(jīng)調(diào)節(jié)、體液調(diào)節(jié)等知識(shí),要求學(xué)生有良好的識(shí)圖能力,并能利用題圖信息解決問(wèn)題,對(duì)神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)關(guān)系的理解與運(yùn)用能力是解答本題的關(guān)鍵。6.人體水鹽平衡的調(diào)節(jié)離不開(kāi)抗利尿激素(ADH)和醛固酮的作用。下左圖為ADH的作用機(jī)理示意圖。醛固酮能促進(jìn)腎小管和集合管對(duì)鈉離子的重吸收以及對(duì)鉀離子的排出。腎素(也稱血管緊張素原酶)一血管緊張素一醛固酮系統(tǒng)是體內(nèi)腎臟所產(chǎn)生的一種升壓調(diào)節(jié)體系,能引起血管平滑肌收縮產(chǎn)生升高血壓的作用,其調(diào)節(jié)過(guò)程如下如圖所示。(1)血漿滲透壓是指______。(2)抗利尿激素的受體位于______(填“細(xì)胞膜上”或“細(xì)胞內(nèi)”),原因是______。分析左圖,抗利尿激素與受體結(jié)合后,通過(guò)M蛋白促進(jìn)______,導(dǎo)致尿量減少。(3)腎素的作用機(jī)理是______。(4)當(dāng)______時(shí),腎上腺______分泌的醛固酮增加,也能促進(jìn)抗利尿激素分泌,最終產(chǎn)生升壓作用。但過(guò)度激活腎素一血管緊張素一醛固酮系統(tǒng)容易導(dǎo)致高血壓,請(qǐng)根據(jù)題圖提供一種開(kāi)發(fā)降血壓藥物的思路:______。(5)當(dāng)腎小管中葡萄糖濃度過(guò)高時(shí),抗利尿激素分泌量______。機(jī)體需源源不斷地合成分泌醛固酮、抗利尿激素等激素,原因是______?!即鸢浮剑?)血漿中溶質(zhì)微粒對(duì)水的吸引力(2)①.細(xì)胞膜上②.抗利尿激素是蛋白質(zhì),其受體位于腎小管集合管的細(xì)胞膜上?③.水通道蛋白合成促進(jìn)對(duì)水重吸收(3)降低化學(xué)反應(yīng)的活化能(4)①.細(xì)胞外液含量下降?②.皮質(zhì)③.開(kāi)發(fā)出的藥物能夠抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶的活性,進(jìn)而抑制血管緊張素Ⅱ的生成量,從而減少腎上腺分泌醛固酮的量,達(dá)到降低血壓的目的(5)①.增加?②.激素一經(jīng)與靶細(xì)胞結(jié)合并發(fā)揮作用的就會(huì)滅活〖解析〗〖祥解〗左圖中,ADH與特異性受體結(jié)合后會(huì)導(dǎo)致含水通道蛋白的囊泡與管腔細(xì)胞膜融合,細(xì)胞表面水通道蛋白數(shù)量增加,促進(jìn)水的運(yùn)輸從而增加水的重吸收。右圖中,血管緊張素原在腎素作用下水解為血管緊張素Ⅰ,血管緊張素Ⅰ在血管緊張素轉(zhuǎn)化酶的作用下,被水解為血管緊張素Ⅱ,血管緊張素Ⅱ再轉(zhuǎn)化為血管緊張素Ⅲ,二者作用于腎上腺,使腎上腺皮質(zhì)分泌醛固酮?!夹?wèn)1詳析〗血漿滲透壓是指血漿中溶質(zhì)微粒對(duì)水的吸引力?!夹?wèn)2詳析〗由于抗利尿激素是蛋白質(zhì),其作用是促進(jìn)腎小管和集合管對(duì)原尿中的水進(jìn)行重吸收,受體位于腎小管集合管的細(xì)胞膜上。由左圖可知,抗利尿激素與受體結(jié)合后,通過(guò)M蛋白促進(jìn)水通道蛋白合成從而促進(jìn)對(duì)水重吸收,導(dǎo)致尿量減少?!夹?wèn)3詳析〗腎素是一種蛋白水解酶,酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì),酶作用的機(jī)理是降低化學(xué)反應(yīng)的活化能?!夹?wèn)4詳析〗細(xì)胞外液含量下降時(shí)會(huì)刺激腎小球旁細(xì)胞分泌腎素,激活腎素—血管緊張素原—醛固酮系統(tǒng),腎上腺皮質(zhì)分泌醛固酮增加,使腎臟重吸收鈉離子增加,腎素分泌增加也能促進(jìn)抗利尿激素分泌,從而引起腎小管和集合管對(duì)水重吸收增加,最終使細(xì)胞外液含量增加,產(chǎn)生升壓作用。開(kāi)發(fā)出的藥物能夠抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶的活性,進(jìn)而抑制血管緊張素Ⅱ的生成量,從而減少腎上腺分泌醛固酮的量,達(dá)到降低血壓的目的。〖小問(wèn)5詳析〗當(dāng)腎小管中的葡萄糖濃度過(guò)高時(shí),說(shuō)明血漿的葡萄糖濃度也高于正常值,導(dǎo)致血漿的滲透壓也比正常情況下高,因此高滲透壓的血漿促進(jìn)抗利尿激素分泌量增加;激素隨血液運(yùn)輸?shù)桨屑?xì)胞,激素一經(jīng)與靶細(xì)胞結(jié)合并發(fā)揮作用的就會(huì)滅活,因此需要源源不斷地分泌各種激素才能維持機(jī)體激素含量的穩(wěn)定。7.下圖甲為人體神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)排尿的控制的示意圖,其中尿道內(nèi),外括約肌都是一種環(huán)形肌肉,逼尿肌分布于膀胱壁。請(qǐng)據(jù)圖回答:(1)圖1中尿道內(nèi)、外括約肌和膀胱逼尿肌屬于反射弧組成部分中的______。(2)當(dāng)膀胱充盈后,人會(huì)產(chǎn)生尿意,請(qǐng)用箭頭和圖中必要的文字、字母表示產(chǎn)生尿意的神經(jīng)傳導(dǎo)途徑:______。在整個(gè)神經(jīng)沖動(dòng)向右傳導(dǎo)的過(guò)程中,興奮只能______(填“單向”或“雙向”)傳導(dǎo)。(3)正常情況下,人的尿量和排尿時(shí)機(jī)依賴于神經(jīng)—體液調(diào)節(jié),但是由于各種原因有時(shí)會(huì)出現(xiàn)異常排尿現(xiàn)象,如:受到驚嚇后尿失禁,原因是______。(4)當(dāng)尿液進(jìn)入尿道后,尿道感受器興奮,興奮傳入初級(jí)排尿中樞,進(jìn)一步加強(qiáng)排尿中樞的活動(dòng),這是一種______(填“正反饋”或“負(fù)反饋”)調(diào)節(jié)。(5)人的尿量超過(guò)3L/d稱為尿崩,引起尿崩的常見(jiàn)疾病稱為尿崩癥,臨床表現(xiàn)為多尿、煩渴、多飲、低比重尿和低滲透壓尿。依據(jù)病變部位,尿崩癥可分為中樞性尿崩癥和腎性尿崩癥,前者是由______分泌抗利尿激素的量不足所致;腎性尿崩癥的病因是腎臟相應(yīng)細(xì)胞表面缺乏______,而使抗利尿激素不能發(fā)揮作用,檢測(cè)患者體內(nèi)抗利尿激素的含量與正常人相比______(填“偏低”“不變”或“偏高”)。(6)如圖2表示的是正常人和兩類尿崩癥患者禁水后尿液滲透壓的變化曲線,曲線Ⅱ可代表______的尿液滲透壓變化曲線?!即鸢浮剑?)效應(yīng)器(2)①.膀胱壁感受器→脊髓腰骶段(或初級(jí)排尿中樞)→大腦皮層②.單向(3)大腦皮層對(duì)脊髓反射活動(dòng)失去控制(或脊髓的反射活動(dòng)不受大腦皮層的控制)(4)正反饋(5)①.下丘腦②.相應(yīng)受體(特異性受體)③.偏高(6)中樞性尿崩患者〖解析〗〖祥解〗效應(yīng)器指?jìng)鞒錾窠?jīng)末梢和它所支配的肌肉或腺體等。負(fù)反饋調(diào)節(jié)的主要意義在于維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài),正反饋的意義在于使生理過(guò)程不斷加強(qiáng),直至最終完成生理功能。位于脊髓的低級(jí)中樞受腦中相應(yīng)的高級(jí)中樞的調(diào)控。抗利尿激素能促進(jìn)腎小管和集合管對(duì)水的重吸收?!夹?wèn)1詳析〗效應(yīng)器指?jìng)鞒錾窠?jīng)末梢和它所支配的肌肉或腺體等,所以尿道內(nèi)、膀胱逼尿肌屬于效應(yīng)器?!夹?wèn)2詳析〗當(dāng)膀胱充盈后,人會(huì)產(chǎn)生尿意,傳導(dǎo)途徑為膀胱壁感受器→脊髓腰骶段(或初級(jí)排尿中樞)→大腦皮層。結(jié)合圖中所示過(guò)程可知,在整個(gè)神經(jīng)沖動(dòng)向右傳導(dǎo)的過(guò)程中,興奮只能單向傳導(dǎo)?!夹?wèn)3詳析〗位于脊髓的低級(jí)中樞受腦中相應(yīng)的高級(jí)中樞的調(diào)控。所以受到驚嚇后尿失禁原因是脊髓的反射活動(dòng)受到高級(jí)中樞腦的控制?!夹?wèn)4詳析〗當(dāng)尿液進(jìn)入尿道后,尿道感受器興奮,進(jìn)一步增強(qiáng)排尿中樞的活動(dòng),屬于正反饋調(diào)節(jié)?!夹?wèn)5詳析〗尿崩癥臨床表現(xiàn)為多尿、煩渴、低比重尿和低滲透壓尿,中樞性尿崩癥是由于下丘腦分泌抗利尿激素的量不足所致,尿液滲透壓可提高。腎性尿崩癥是腎臟相應(yīng)細(xì)胞表面缺乏相應(yīng)受體,檢測(cè)患者體內(nèi)抗利尿激素的含量與正常人相比偏高?!夹?wèn)6詳析〗曲線Ⅱ注射抗利尿激素后尿液滲透壓升高,說(shuō)明是由于體內(nèi)抗利尿激素分泌不足造成的,代表中樞性尿崩患者的尿液滲透壓變化曲線。8.染色體核型分析是一種用于檢測(cè)人類染色體疾病的方法,通常利用人外周血淋巴細(xì)胞制備染色體標(biāo)本。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。(1)外周血淋巴細(xì)胞染色體標(biāo)本的制備過(guò)程如下表,請(qǐng)完善表中有關(guān)內(nèi)容。實(shí)驗(yàn)步驟的目的簡(jiǎn)要操作過(guò)程供給淋巴細(xì)胞存活必需的營(yíng)養(yǎng)等條件,同時(shí)防止培養(yǎng)過(guò)程中①_______________用蒸餾水、無(wú)機(jī)鹽、葡萄糖、氨基酸及促生長(zhǎng)因子等制備合成培養(yǎng)基,還需添加適量的②_______________等天然成分、植物凝集素(PHA,可促使淋巴細(xì)胞分裂),同時(shí)要添加適量的青霉素、鏈霉素,無(wú)菌處理獲取淋巴細(xì)胞消毒、采集靜脈血,滴加到培養(yǎng)瓶中,輕輕搖勻?qū)⒘馨图?xì)胞培養(yǎng)至分裂高峰將培養(yǎng)瓶置于37℃恒溫CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí),水平晃動(dòng)培養(yǎng)瓶,使③_______________,再繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí)④_______________終止培養(yǎng)前2~3小時(shí),加入秋水仙素溶液3~4滴后混勻,繼續(xù)培養(yǎng)至結(jié)束⑤_______________將培養(yǎng)液離心后,棄去上清液,加入0.075mol/L的KCl溶液(濃度略低于細(xì)胞內(nèi)液),用吸管輕輕吹打細(xì)胞團(tuán)混勻觀察細(xì)胞染色體核型沉淀物中加入固定液處理,用Giemsa染色后,制片鏡檢(2)鏡檢發(fā)現(xiàn)某男孩的部分淋巴細(xì)胞染色體核型如圖1所示,表明圖示細(xì)胞出現(xiàn)了染色體數(shù)目倍增的異?,F(xiàn)象,形成該現(xiàn)象的原因是_______________;同時(shí),與淋巴細(xì)胞正常分裂的相同時(shí)期相比,圖示細(xì)胞還表現(xiàn)出的異常特征是_______________。(3)研究發(fā)現(xiàn),細(xì)胞周期蛋白依賴激酶(Cdk)在細(xì)胞周期調(diào)控中起關(guān)鍵作用,Cdk通常需要與細(xì)胞周期蛋白(cyclin)結(jié)合后才具有活性,兩者結(jié)合作用機(jī)理如下圖2所示。Cdk被完全激活,首先需要_______________,進(jìn)而引起T環(huán)空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,然后在Cdk激活激酶的作用下使T環(huán)上的特定位點(diǎn)發(fā)生_______________?!即鸢浮剑?)①.雜菌污染②.血清③.淋巴細(xì)胞與培養(yǎng)液充分混勻④.使細(xì)胞更多停滯于有絲分裂中期⑤.細(xì)胞適度吸水膨脹而使染色體分散(便于觀察染色體數(shù)目與形態(tài))(2)①.染色體復(fù)制2次,而細(xì)胞分裂1次②.染色體成對(duì)排列在一起(3)①.Cdk與cyclin結(jié)合②.磷酸化(或活化的磷酸)〖解析〗〖祥解〗1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件(1)充足的營(yíng)養(yǎng)供給--微量元素、無(wú)機(jī)鹽、糖類、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、血清等。(2)適宜的溫度:36.5℃±0.5℃;適宜的pH:7.2~7.4。(3)無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素,以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。此外,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。(4)氣體環(huán)境:95%空氣+5%CO2。2、觀察細(xì)胞有絲分裂時(shí)應(yīng)選擇處于分裂中期的細(xì)胞?!夹?wèn)1詳析〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中除需要提供適應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)條件外,還需防止①雜菌污染,故常在合成培養(yǎng)基中添加②血清等天然成分;將淋巴細(xì)胞培養(yǎng)至分裂高峰時(shí),需要在37℃恒溫CO2培養(yǎng)箱中晃動(dòng)培養(yǎng)瓶,使③淋巴細(xì)胞與培養(yǎng)液充分混勻,繼續(xù)培養(yǎng);由于有絲分裂中期時(shí)染色體形態(tài)穩(wěn)定、數(shù)目清晰,是觀察染色體的最佳時(shí)期,故④需要使細(xì)胞更多停滯于有絲分裂中期;加入0.075mol/L的KCl溶液,是低滲溶液,目的是⑤使細(xì)胞適度吸水膨脹而使染色體分散,便于觀察染色體數(shù)目與形態(tài)?!夹?wèn)2詳析〗正常人為二倍體生物,經(jīng)有絲分裂染色體復(fù)制1次、分裂次后,體內(nèi)染色體應(yīng)成對(duì)存在,而圖示個(gè)體的染色體出現(xiàn)了染色體數(shù)目倍增的異常現(xiàn)象,是染色體復(fù)制2次,而細(xì)胞分裂1次造成的;與淋巴細(xì)胞正常分裂的相同時(shí)期相比,圖示細(xì)胞還表現(xiàn)出的異常特征是染色體成對(duì)排列在一起?!夹?wèn)3詳析〗據(jù)圖可知,Cdk被完全激活,首先需要Cdk與cyclin結(jié)合,進(jìn)而引起T環(huán)空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,然后在Cdk激活激酶的作用下使T環(huán)上的特定位點(diǎn)發(fā)生磷酸化?!肌狐c(diǎn)石成金』〗本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和有絲分裂過(guò)程的相關(guān)知識(shí),能將題干信息有效提取并利用,再結(jié)合所學(xué)知識(shí)答題。9.圖甲是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程圖,圖乙是克隆羊培育過(guò)程示意圖,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題:(1)圖甲所示技術(shù)的原理為_(kāi)_______,容器A中的是動(dòng)物器官或組織,它一般取自_____。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,需要兩次使用___________處理,且都需要注意濃度和處理時(shí)間,以防對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)造成破環(huán)。圖甲中細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分與植物組織培養(yǎng)基成分最主要的區(qū)別在于前者含有____。為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的雜菌污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的____。細(xì)胞在____培養(yǎng)過(guò)程中,絕大部分會(huì)衰老死亡,只有極少數(shù)細(xì)胞存活,這是因?yàn)榇婊畹募?xì)胞發(fā)生了________。(3)圖乙中核移植時(shí)受體應(yīng)選用_______________期的卵母細(xì)胞,將供體的核注入去核的卵母細(xì)胞一般采用______________法,多莉面部的毛色為_(kāi)_____________。(4)在目前現(xiàn)有技術(shù)條件下,還不能將從動(dòng)物體內(nèi)分離出來(lái)的成熟的體細(xì)胞直接培養(yǎng)成一個(gè)新個(gè)體,而是必須將體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的卵母細(xì)胞中才能發(fā)育成新個(gè)體,你認(rèn)為原因可能是________(多選)。A.卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞核全能性得到表達(dá)B.卵母細(xì)胞含有的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)多C.卵母細(xì)胞大,便于操作D.重組細(xì)胞才具有全能性(5)克隆動(dòng)物培育成功有什么實(shí)際應(yīng)用意義?_____________?!即鸢浮剑?)①.細(xì)胞增殖②.動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物(2)①.胰蛋白(或膠原蛋白)②.動(dòng)物血清③.抗生素④.傳代⑤.基因突變(癌變)(3)①.減數(shù)分裂Ⅱ中(或MⅡ中)②.顯微操作③.白色(4)ABC(5)拯救瀕危物種、繁育優(yōu)良物種、醫(yī)學(xué)上克隆器官等〖解析〗〖祥解〗胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)。包括體外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。胚胎工程的許多技術(shù),實(shí)際是在體外條件下,對(duì)動(dòng)物自然受精和早期胚胎發(fā)育條件進(jìn)行的模擬操作?!夹?wèn)1詳析〗圖甲所示的技術(shù)為動(dòng)物細(xì)胞的原代及傳代培養(yǎng),依據(jù)的原理是細(xì)胞增殖;容器A中的是動(dòng)物器官或組織,它一般取自動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物,分裂能力強(qiáng),分化程度低?!夹?wèn)2詳析〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,需要兩次使用胰蛋白(或膠原蛋白)處理,一次是原代培養(yǎng)時(shí)對(duì)動(dòng)物組織進(jìn)行細(xì)胞的分離,第二次是傳代培養(yǎng)時(shí)處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞;圖甲為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),培養(yǎng)液中含有動(dòng)物血清,而植物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)不需要添加動(dòng)物血清;抗生素可以殺滅雜菌,防止動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的雜菌污染;細(xì)胞在傳代培養(yǎng)過(guò)程中絕大部分會(huì)衰老死亡,只有極少數(shù)細(xì)胞存活;存活的細(xì)胞可能發(fā)生基因突變或癌變,導(dǎo)致傳代過(guò)程中會(huì)死亡?!夹?wèn)3詳析〗圖乙中核移植時(shí)受體應(yīng)選用減數(shù)分裂Ⅱ中期的卵母細(xì)胞,此時(shí)的卵母細(xì)胞較成熟,有利于重組細(xì)胞的發(fā)育;一般采用顯微操作將供體的核注入去核的卵母細(xì)胞;多莉的性狀主要取決于細(xì)胞核的基因,細(xì)胞核來(lái)自于白面綿羊,因此多莉的面部為白色?!夹?wèn)4詳析〗A、卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞核全能性得到表達(dá),而其它細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)促進(jìn)全能性表達(dá)的作用較弱,A正確;B、卵母細(xì)胞含有的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)多,有利于核基因的表達(dá)和重組細(xì)胞的分裂,B正確;C、卵母細(xì)胞大,便于在顯微鏡下進(jìn)行核移植操作,C正確;D、動(dòng)物的受精卵以及受精卵卵裂形成的幾個(gè)細(xì)胞都具有全能性,生殖細(xì)胞也具有全能性,D錯(cuò)誤。故選ABC?!夹?wèn)5詳析〗克隆動(dòng)物是用體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞中,經(jīng)體外培養(yǎng)和胚胎移植而獲得的與核供體動(dòng)物遺傳性狀完全一致的一類動(dòng)物,可以拯救瀕危物種、繁育優(yōu)良物種、醫(yī)學(xué)上克隆器官等。〖『點(diǎn)石成金』〗本題主要考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)及胚胎工程,要求學(xué)生有一定的理解分析能力。10.下圖是我國(guó)科學(xué)家培養(yǎng)克隆猴的流程圖,回答下列問(wèn)題:(1)與誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合相比,誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合特有的方法是____________________。(2)體外培養(yǎng)成纖維細(xì)胞時(shí)需要提供_________________。適宜的氣體環(huán)境。在培養(yǎng)液中添加抗生素的目的是______________。(3)克隆獼猴的培育遵循的生物學(xué)原理是_________________。與克隆相比,試管動(dòng)物技術(shù)在細(xì)胞融合(受精)前要進(jìn)行的準(zhǔn)備是____________。試管獼猴在過(guò)程③進(jìn)行之前要對(duì)受體母猴進(jìn)行___處理,為胚胎移植做準(zhǔn)備。試管動(dòng)物的培育屬于________(填“有性生殖”或“無(wú)性生殖”)。(4)若培育能產(chǎn)生干擾素的轉(zhuǎn)基因克隆獼猴,常采用___________法將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,通常選擇的受體細(xì)胞是________。若要從克隆獼猴的尿液中分離到干擾素,則應(yīng)在基因表達(dá)載體中添加______,才能使干擾素基因在克隆獼猴的膀胱壁細(xì)胞中表達(dá)?!即鸢浮剑?)滅活的病毒誘導(dǎo)(2)①.無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),適宜的溫度和PH②.防止雜菌污染(3)①.動(dòng)物細(xì)胞核的全能性②.精子獲能和卵子的準(zhǔn)備③.同期發(fā)情④.有性生殖(4)①.顯微注射②.受精卵③.膀胱壁蛋白基因的啟動(dòng)子〖解析〗〖祥解〗據(jù)圖分析,圖中①是將成纖維細(xì)胞與去核卵細(xì)胞融合,②是早期胚胎培養(yǎng),③是胚胎移植?!夹?wèn)1詳析〗誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法等,其中與誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合相比,誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合特有的方法是滅活的病毒誘導(dǎo)?!夹?wèn)2詳析〗體外培養(yǎng)成纖維細(xì)胞時(shí)需要提供無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),適宜的溫度和PH以及適宜的氣體環(huán)境;在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,為防止雜菌污染,可在培養(yǎng)液中添加抗生素?!夹?wèn)3詳析〗克隆動(dòng)物是指動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體,克隆獼猴的培育遵循的生物學(xué)原理是動(dòng)物細(xì)胞核的全能性;與克?。ê艘浦玻┫啾?,試管動(dòng)物技術(shù)在細(xì)胞融合(受精)前要進(jìn)行精子獲能和卵子的準(zhǔn)備,要將卵子培養(yǎng)到MⅡ中期;③是胚胎移植,在胚胎移植之前,為使供體和受體處于相同的生理狀態(tài),需要對(duì)受體母猴進(jìn)行同期發(fā)情處理;試管動(dòng)物的培育涉及精子和卵子的結(jié)合過(guò)程,屬于有性生殖?!夹?wèn)4詳析〗基因工程中,將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的方法是顯微注射技術(shù);由于受精卵的全能性最高,故通常選擇的受體細(xì)胞是受精卵;若要從克隆獼猴的尿液中分離到干擾素,則應(yīng)在基因表達(dá)載體中添加膀胱壁蛋白基因的啟動(dòng)子構(gòu)建成基因表達(dá)載體,使干擾素基因在膀胱壁中表達(dá),通過(guò)回收尿液獲得干擾素。11.某研究所以馬尾藻巖藻聚糖(SF)為研究對(duì)象,體外培養(yǎng)小鼠肉瘤細(xì)胞S180,做抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)的研究。下列為部分實(shí)驗(yàn)步驟與結(jié)果。實(shí)驗(yàn)步驟:①將S-180腫瘤細(xì)胞以RPMI-1640為培養(yǎng)液(含小牛血清、青霉素和鏈霉素),在5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。②將上述培養(yǎng)過(guò)的S-180腫瘤細(xì)胞經(jīng)酶消化,按1×103~1×105個(gè)·mL-1接種到96孔培養(yǎng)板,適宜條件下培養(yǎng)24h、48h、72h、96h后,以MTT法(又稱比色法,一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法)于波長(zhǎng)490nm處測(cè)定OD值,結(jié)果如下(圖1)。③在適宜的培養(yǎng)條件和恰當(dāng)?shù)腟-180腫瘤細(xì)胞接種濃度下,研究不同濃度(0mg·mL-1、0.1mg·mL-1、0.5mg·mL-1、1mg·mL-1、2mg·mL-1、4mg·mL-1、8mg·mL-1、10mg·mL-1、15mg·mL-1、20mg·mL-1、25mg·mL-1、30mg·mL-1)的SF對(duì)S-180腫瘤細(xì)胞增殖的抑制情況,96h后以MTT法于波長(zhǎng)490nm處測(cè)定OD值,結(jié)果如下(圖2)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)步驟①中以RPMI-1640為培養(yǎng)液培養(yǎng)S-180腫瘤細(xì)胞的原理是________。添加一定量小牛血清的目的是____________________________。(2)步驟②中“消化”所使用的酶是________,為減少OD值測(cè)定的誤差,應(yīng)注意________________。(3)已知在一定細(xì)胞數(shù)目范圍內(nèi),MTT法測(cè)得的OD值與活細(xì)胞數(shù)量呈正相關(guān),由圖1可知步驟③中恰當(dāng)?shù)腟-180腫瘤細(xì)胞接種濃度為_(kāi)___________。(4)圖2實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在一定范圍內(nèi)SF濃度與細(xì)胞增殖的抑制作用呈________(選填正相關(guān)或負(fù)相關(guān)),當(dāng)SF濃度達(dá)到________時(shí)細(xì)胞增殖的抑制作用達(dá)到極限,繼續(xù)增加SF濃度對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用變化不明顯。(5)除SF濃度外,還有其他因素會(huì)影響SF抑制S-180腫瘤細(xì)胞的增殖,請(qǐng)你就此提出相關(guān)研究課題(只要求寫(xiě)出課題名稱):____________________________?!即鸢浮舰?細(xì)胞增殖②.其中含有一些促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)③.胰蛋白酶或膠原蛋白酶④.多次測(cè)量,算平均值⑤.5×103個(gè)·mL-1⑥.正相關(guān)⑦.25mg·mL-1⑧.探究SF處理時(shí)間與S-180腫瘤細(xì)胞的增殖抑制關(guān)系(或探究SF分子大小與S-180腫瘤細(xì)胞的增殖抑制關(guān)系)〖解析〗〖祥解〗(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),原理:細(xì)胞增殖;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程:取動(dòng)物組織塊(動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織)→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng);動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件:①無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素,以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。此外,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,以便清除代謝產(chǎn)物防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。②營(yíng)養(yǎng):合成培養(yǎng)基成分:糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。在使用合成培養(yǎng)基時(shí)通常需加入血清、血漿等一些天然成分。③溫度和PH④氣體環(huán)境:細(xì)胞所需的氣體主要是O2和CO2。(2)根據(jù)題干信息,在一定細(xì)胞數(shù)目范圍內(nèi),MTT法測(cè)得的OD值與活細(xì)胞數(shù)量呈正相關(guān),圖2表示S-180腫瘤細(xì)胞在不同濃度SF作用下生長(zhǎng)曲線,SF濃度越大OD值越小,腫瘤細(xì)胞的數(shù)量越少,說(shuō)明SF抑制腫瘤細(xì)胞的增殖?!荚斘觥剑?)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖。添加一定量血清的目的是補(bǔ)充動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。(2)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中,用胰蛋白酶或膠原蛋白酶將組織分散成單個(gè)細(xì)胞,步驟②中“消化”所使用的酶是胰蛋白酶或膠原蛋白酶,目的是為了獲得細(xì)胞懸液。在實(shí)驗(yàn)中求平均值可以減少實(shí)驗(yàn)誤差,所以為減少OD值測(cè)定的誤差,應(yīng)注意多次測(cè)量算平均值。(3)在一定細(xì)胞數(shù)目范圍內(nèi),MTT法測(cè)得的OD值與活細(xì)胞數(shù)量呈正相關(guān),所以由圖1可知步驟③中恰當(dāng)?shù)腟-180腫瘤細(xì)胞接種濃度為5×103個(gè)·mL-1。(4)圖2實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在定范圍內(nèi),SF濃度與細(xì)胞增殖的抑制作用呈正相關(guān),當(dāng)SF濃度達(dá)到25mg·mL-1時(shí)細(xì)胞增殖的抑制作用達(dá)到極限,繼續(xù)增加SF濃度對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用變化不明顯。(5)本小題考查的是學(xué)生對(duì)再探究的認(rèn)知程度,屬于開(kāi)放性試題,只要答得有道理即可給分,例如可以探究SF處理時(shí)間與S-180腫瘤細(xì)胞的增殖抑制關(guān)系(或探究SF分子大小與S-180腫瘤細(xì)胞的增殖抑制關(guān)系)?!肌狐c(diǎn)石成金』〗本題考查的是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí),考查學(xué)生的識(shí)圖和分析能力,能夠根據(jù)題干信息得出重要的結(jié)論,在結(jié)合問(wèn)題得出相關(guān)〖答案〗,這是解答問(wèn)題的關(guān)鍵。12.研究表明,胰島淀粉樣多肽(IAPP)基因過(guò)量表達(dá)并聚集是誘發(fā)Ⅱ型糖尿病的重要因素之一。為研究其機(jī)理,科研人員把人IAPP基因?qū)氪笫笠葝u素瘤細(xì)胞(hIAPP/INS-1),讓其過(guò)量表達(dá),并與普通大鼠胰島素瘤細(xì)胞(INS-1)進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)。檢測(cè)高糖刺激下兩種細(xì)胞產(chǎn)生的胰島素量和凋亡率,結(jié)果如下表所示。請(qǐng)分析回答:組別胰島素/(ng·mL-1)凋亡率/‰hIAPP/INS-11.8520.0INS-16.2311.7(1)健康機(jī)體內(nèi)能促使胰島B細(xì)胞分泌胰島素的信號(hào)分子有_______;胰島素分泌后經(jīng)體液運(yùn)輸,作用于靶細(xì)胞膜上的_______,激活細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路,促進(jìn)組織細(xì)胞_______,從而使血糖水平降低。(2)培養(yǎng)瘤細(xì)胞時(shí),應(yīng)在合成培養(yǎng)液中加入_______等天然成分,置于含5%CO2恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)的目的是_______。(3)由結(jié)果推測(cè),IAPP過(guò)量表達(dá)并聚集誘發(fā)Ⅱ型糖尿病的可能原因是_______。(4)為進(jìn)一步揭示IAPP作用的分子機(jī)制,研究者經(jīng)反轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)、電泳技術(shù)測(cè)定細(xì)胞內(nèi)抗凋亡基因Bcl2、促凋亡基因Bax及β-actin基因的表達(dá)情況,結(jié)果如下圖所示:①研究者應(yīng)從細(xì)胞中提取_______,經(jīng)RT-PCR獲得相關(guān)基因;β-actin是一種內(nèi)參基因,在檢測(cè)基因表達(dá)情況變化時(shí)常用其作為參照,原因是_______。
②由結(jié)果推測(cè),IAPP能_______,從而發(fā)揮作用。(5)綜上研究,請(qǐng)為糖尿病的預(yù)防和治療提供思路:_______?!即鸢浮剑?)①.葡萄糖、神經(jīng)遞質(zhì)、胰高血糖素(答到兩點(diǎn)得分)②.特異性受體③.加速攝取、利用葡萄糖(2)①.動(dòng)物血清②.維持培養(yǎng)液pH的相對(duì)穩(wěn)定(3)促使胰島B細(xì)胞凋亡,無(wú)法產(chǎn)生足夠胰島素(4)①.總mRNA②.該基因在相應(yīng)組織和細(xì)胞中表達(dá)相對(duì)恒定③.抑制Bcl2的表達(dá),且促進(jìn)Bax的表達(dá)(5)控制糖類的攝入量,抑制IAPP基因的表達(dá)量或注射針對(duì)IAPP的單克隆抗體〖解析〗〖祥解〗1、與血糖調(diào)節(jié)相關(guān)的激素主要是胰島素和胰高血糖素,其中胰島素的作用是機(jī)體內(nèi)唯一降低血糖的激素,胰島素能促進(jìn)全身組織細(xì)胞加速攝取、利用和儲(chǔ)存葡萄糖,從而降低血糖濃度;胰高血糖素能促進(jìn)糖原分解,并促進(jìn)一些非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)化為葡萄糖,從而使血糖水平升高。2、分析表格:能過(guò)量表達(dá)人IAPP基因的大鼠胰島素瘤細(xì)胞(hIAPP/INS-1)與普通大鼠胰島素瘤細(xì)胞(INS-1)比較,胰島素水平較低,細(xì)胞凋亡率較高?!夹?wèn)1詳析〗正常人體內(nèi),胰島素的分泌具有神經(jīng)-激素調(diào)節(jié),所以引起胰島B細(xì)胞分泌胰島素的信號(hào)分子有神經(jīng)遞質(zhì)、血糖濃度和胰高血糖素等;胰島素的作用為促進(jìn)組織細(xì)胞加速攝取、利用和儲(chǔ)存葡萄糖,胰島素與靶細(xì)胞膜上的特異性受體結(jié)合后,激活細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路,促進(jìn)組織細(xì)胞加速攝取、利用葡萄糖,使血液中的葡萄糖進(jìn)入細(xì)胞,從而使血糖水平降低?!夹?wèn)2詳析〗將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類、數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基稱為合成培養(yǎng)基。動(dòng)物細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等,還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。故培養(yǎng)瘤細(xì)胞時(shí),應(yīng)在合成培養(yǎng)液中加入動(dòng)物血清等天然成分,細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%的CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行,CO2的主要作用是調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,維持培養(yǎng)液pH的相對(duì)穩(wěn)定?!夹?wèn)3詳析〗由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,Ⅱ型糖尿病患者胰島素下降,原因可能是IAPP促使胰島B細(xì)胞凋亡,無(wú)法產(chǎn)生足夠胰島素,故IAPP過(guò)量表達(dá)并聚集可誘發(fā)Ⅱ型糖尿病?!夹?wèn)4詳析〗①研究者提取了兩種細(xì)胞的總RNA,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄后加入2種凋亡相關(guān)基因:抗凋亡基因Bc12和促凋亡基因Bax及β-actin基因的引物,PCR擴(kuò)增后進(jìn)行電泳分析,分析結(jié)果間接反映相關(guān)基因的表達(dá)量。β-actin基因在相應(yīng)組織和細(xì)胞中表達(dá)相對(duì)恒定,是PCR中常見(jiàn)的內(nèi)參基因,在檢測(cè)基因表達(dá)情況變化時(shí)常用其作為參照,使結(jié)果真實(shí)可信。②根據(jù)研究結(jié)果推測(cè),IAPP能抑制Bcl2的表達(dá),且促進(jìn)Bax的表達(dá),從而發(fā)揮作用。〖小問(wèn)5詳析〗根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)論,糖尿病的預(yù)防和治療提供思路:控制糖類的攝入量,抑制IAPP基因的表達(dá)量或注射針對(duì)IAPP的單克隆抗體?!肌狐c(diǎn)石成金』〗本題通過(guò)實(shí)驗(yàn)主要考查學(xué)生血糖調(diào)節(jié)的知識(shí),意在考查學(xué)生對(duì)知識(shí)的理解能力以及識(shí)圖能力和綜合運(yùn)用知識(shí)解決實(shí)際問(wèn)題的能力。13.下列圖1是從動(dòng)物體內(nèi)獲得相關(guān)組織,分散成單個(gè)細(xì)胞后,模擬體內(nèi)環(huán)境,使其繼續(xù)生長(zhǎng)、增殖的技術(shù)過(guò)程圖解,圖2利用胚胎工程培育“試管?!钡幕具^(guò)程圖解。請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題:(1)動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)是_______________,此過(guò)程在無(wú)菌條件下,取出動(dòng)物組織塊剪碎,用培養(yǎng)液漂洗。然后用_______________酶等處理,形成分散的懸浮細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,要使細(xì)胞分散開(kāi)培養(yǎng)的原因:一是______________________________;二是能保證細(xì)胞內(nèi)有害代謝產(chǎn)物的及時(shí)排出。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的原理和目的不同:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是_______________,目的是獲得大量的細(xì)胞;植物組織培養(yǎng)的原理是______________________________,目的是獲得新個(gè)體。(3)受精卵是胚胎發(fā)育的開(kāi)端,圖中的卵細(xì)胞須達(dá)到_______________時(shí)期,才具備受精的能力,而精子需經(jīng)過(guò)_______________過(guò)程才能和卵細(xì)胞結(jié)合。(4)若要獲得遺傳物質(zhì)完全相同的兩個(gè)新個(gè)體,可對(duì)發(fā)育到_______________階段的早期胚胎進(jìn)行胚胎分割,在胚胎進(jìn)行分割時(shí),要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。圖2中過(guò)程A稱為_(kāi)______________,其實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。在操作前要對(duì)良種母牛和普通母牛用激素進(jìn)行_______________處理,早期胚胎能在受體內(nèi)正常存活的免疫學(xué)基礎(chǔ)是___________________。(5)胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物的胚胎進(jìn)行人為操作和處理以獲得目標(biāo)個(gè)體的技術(shù),下列關(guān)于利用胚胎工程培育優(yōu)質(zhì)奶牛的相關(guān)敘述正確的是()A.體外受精與體內(nèi)受精不同的是體外受精前精子需要獲能,而體內(nèi)受精前精子不需要獲能B.經(jīng)早期胚胎培養(yǎng),可移植的胚胎發(fā)育到原腸胚階段更好C.受精卵發(fā)育成早期胚胎所需營(yíng)養(yǎng)主要來(lái)源于營(yíng)養(yǎng)液D.胚胎移植能發(fā)揮優(yōu)良母畜的繁殖能力,迅速擴(kuò)大優(yōu)良畜種的數(shù)量,加速優(yōu)良畜種的推廣應(yīng)用〖答案〗(1)①.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)②.胰蛋白③.能保證細(xì)胞所需要的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)(2)①.細(xì)胞增殖②.細(xì)胞的全能性(3)①.減數(shù)第二次分裂中期②.獲能(4)①.桑椹胚或囊胚②.胚胎移植③.同期發(fā)情④.受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)(5)D〖解析〗〖祥解〗圖2是通過(guò)胚胎工程培育試管牛的過(guò)程,包括卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等過(guò)程,因此圖中A表示胚胎移植?!夹?wèn)1詳析〗動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶處理,使其分離成單個(gè)細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,細(xì)胞需要與培養(yǎng)液進(jìn)行物質(zhì)交換,為了保證細(xì)胞所需要的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)和細(xì)胞內(nèi)有害代謝產(chǎn)物的及時(shí)排出,因此要使細(xì)胞分散開(kāi)培養(yǎng)?!夹?wèn)2詳析〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖,目的是獲得大量的細(xì)胞;植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性,目的是獲得新個(gè)體。〖小問(wèn)3詳析〗體外受精時(shí),卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才具備受精能力。精子需經(jīng)過(guò)獲能處理過(guò)程才能和卵細(xì)胞結(jié)合?!夹?wèn)4詳析〗對(duì)早期胚胎進(jìn)行分割可獲得遺傳物質(zhì)完全相同的兩個(gè)新個(gè)體。胚胎分割的時(shí)期一般是桑椹胚或囊胚時(shí)期。對(duì)囊胚期進(jìn)行分割時(shí)需要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。過(guò)程A屬于胚胎移植,實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。為了提高移植的胚胎成活率,需要對(duì)良種母牛(供體)和普通母牛(受體)用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理。早期胚胎之所以能在受體內(nèi)正常存活,是因?yàn)槭荏w對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng),從而為胚胎移植的成功提供了理論依據(jù),這是胚胎移植成功的免疫學(xué)基礎(chǔ)?!夹?wèn)5詳析〗A、體外受精和體內(nèi)受精前精子都需要獲能,體內(nèi)受精時(shí)精子在雌性生殖道內(nèi)完成獲能過(guò)程,A錯(cuò)誤;B、可移植的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段,B錯(cuò)誤;C、受精卵發(fā)育成早期胚胎所需營(yíng)養(yǎng)主要來(lái)源于卵細(xì)胞中的卵黃,C錯(cuò)誤;D、通過(guò)胚胎移植技術(shù)可以充分發(fā)揮優(yōu)良母畜的繁殖能力,迅速擴(kuò)大優(yōu)良畜種的數(shù)量,加速優(yōu)良畜種的推廣應(yīng)用,D正確。故選D。14.我國(guó)宮頸癌發(fā)病率已高居世界第二位且發(fā)病年輕化趨勢(shì)明顯,宮頸癌與HPV(人乳頭瘤病毒,一種DNA病毒)的病毒感染密切相關(guān)。雷公藤紅素是一種具有良好的抗癌效果的新型抗癌藥物,水溶性差(必須用DMSO作為溶劑溶解)。請(qǐng)分析回答:(1)宮頸癌的早期檢查包括宮頸細(xì)胞學(xué)檢查(TCT)和HPV病毒感染檢查。TCT檢查的原理是由于癌細(xì)胞具有_________特點(diǎn),故可在顯微鏡下觀察是否出現(xiàn)角化細(xì)胞或凹空細(xì)胞,HPV病毒感染檢查即利用核酸分子雜交方法,觀察是否__________,確定是否感染HPV病毒。(2)為了探究雷公藤紅素的抗癌效果,研究人員進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn),將人宮頸癌HeLa細(xì)胞系接種于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液后置于____中進(jìn)行培養(yǎng),用_________處理,得到細(xì)胞懸浮液用于實(shí)驗(yàn)。用不同濃度的雷公藤紅素處理HeLa細(xì)胞,對(duì)照組添加等量的_________,其他條件相同且適宜。定期取樣并測(cè)定細(xì)胞數(shù)量的相對(duì)值,結(jié)果如下圖所示,由圖可知__________。(3)研究人員進(jìn)一步研究雷公藤紅素的作用機(jī)理,進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)。①由下圖可知,經(jīng)雷公藤紅素處理后,HeLa細(xì)胞處于_________期的含量明顯增多,說(shuō)明雷公藤紅素的作用可能是_________;②測(cè)定HeLa細(xì)胞在不同濃度雷公藤紅素處理后的凋亡情況,結(jié)果如下表:雷公藤濃度(μM)02.5510凋亡率(%)4.287.2237.334.8Bax蛋白含量+++++++++++Bcl-2蛋白含量++++++++由表格數(shù)據(jù)可知,雷公藤紅素可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,這種作用可能是通過(guò)_________實(shí)現(xiàn)?!即鸢浮舰?形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變②.出現(xiàn)雜交帶③.CO2培養(yǎng)箱④.胰蛋白酶⑤.DMSO⑥.雷公藤紅素對(duì)細(xì)胞增殖有抑制作用;隨雷公藤紅素濃度增加,抑制作用增強(qiáng);10μM的劑量對(duì)HeLa細(xì)胞的增殖抑制最為顯著⑦.S和G2⑧.能夠抑制DNA的復(fù)制和相關(guān)蛋白的合成(能夠抑制細(xì)胞分裂)⑨.促進(jìn)Bax蛋白表達(dá)量和抑制Bcl-2蛋白表達(dá)量〖解析〗〖祥解〗1、癌細(xì)胞的特點(diǎn):在適宜條件下能無(wú)限增殖;形態(tài)、結(jié)構(gòu)發(fā)生顯著變化;細(xì)胞膜表面發(fā)生變化,糖蛋白減少,細(xì)胞間的黏性降低。2、上圖曲線可以看出,和對(duì)照組相比,雷公藤紅素對(duì)細(xì)胞增殖有抑制作用;隨雷公藤紅素濃度增加,抑制作用增強(qiáng);10μM的劑量對(duì)HeLa細(xì)胞的增殖抑制最為顯著。3、下圖曲線可以看出,經(jīng)雷公藤紅素處理后,和對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組中HeLa細(xì)胞處于S和G2期的數(shù)量明顯增多?!荚斘觥剑?)宮頸細(xì)胞學(xué)檢查(TCT)檢查即在顯微鏡下觀察是否出現(xiàn)角化細(xì)胞或凹空細(xì)胞,因?yàn)榘┘?xì)胞具有形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變的特點(diǎn);HPV病毒感染檢查即利用核酸分子雜交方法,觀察是否出現(xiàn)雜交帶,確定是否感染HPV病毒。(2)將人宮頸癌HeLa細(xì)胞系接種于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液后置于CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng),用胰蛋白酶處理,得到細(xì)胞懸浮液用于實(shí)驗(yàn);用不同濃度的雷公藤紅素處理HeLa細(xì)胞,由于“雷公藤紅素水溶性差,必須用DMSO作為溶劑溶解”,因此對(duì)照組應(yīng)添加等量的DMSO,其他條件相同且適宜。定期取樣并測(cè)定細(xì)胞數(shù)量的相對(duì)值,由圖可知,雷公藤紅素對(duì)細(xì)胞增殖有抑制作用;隨雷公藤紅素濃度增加,抑制作用增強(qiáng);10μM的劑量對(duì)HeLa細(xì)胞的增殖抑制最為顯著。(3)①據(jù)圖分析已知,經(jīng)雷公藤紅素處理后,和對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組中HeLa細(xì)胞處于S和G2期的數(shù)量明顯增多,說(shuō)明雷公藤紅素能抑制DNA的復(fù)制和相關(guān)蛋白的合成(能抑制細(xì)胞分裂);②由表格數(shù)據(jù)可知,雷公藤紅素可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并且隨著雷公藤紅素濃度的升高,Bax蛋白含量升高,而B(niǎo)cl-2蛋白含量下降,因此這種作用可能是通過(guò)促進(jìn)Bax蛋白表達(dá)量和抑制Bcl-2蛋白表達(dá)量實(shí)現(xiàn)的?!肌狐c(diǎn)石成金』〗本題考查了癌細(xì)胞的特點(diǎn)以及腫瘤的防治等有關(guān)知識(shí),要求考生能夠識(shí)記癌細(xì)胞的特點(diǎn),掌握核酸分子雜交的原理,能夠結(jié)合題干和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的曲線圖、表格得出正確的實(shí)驗(yàn)結(jié)論,再結(jié)合所學(xué)知識(shí)準(zhǔn)確答題。15.科研人員通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出超量表達(dá)P蛋白的轉(zhuǎn)基因甜玉米。在超量表達(dá)P基因載體的構(gòu)建中,含P基因的DNA片段以及Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如下圖所示,其中強(qiáng)啟動(dòng)子能驅(qū)動(dòng)基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。限制酶識(shí)別序列ClaⅠ5′AT↓CGAT3′BamHⅠ5′G↓GATCC3′HindⅢ5′A↓AGCTT3′EcoRⅠ5′G↓AATTC3′KpnⅠ5′GGTAC↓C3′SacⅠ5′GAGCT↓C3′(1)以RNA為模板,通過(guò)RT-PCR技術(shù)可獲取P基因。進(jìn)行RT–PCR時(shí)一般要加入4種脫氧核糖核苷三磷酸(dNTP)而不是脫氧核苷酸,其原因是_______________,同時(shí)需加入的酶有_______________。為了特異性擴(kuò)增P基因序列,需根據(jù)_______________設(shè)計(jì)特異性引物。(2)在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),應(yīng)優(yōu)先選用的限制酶是_______________和_______________,這樣操作不僅使P基因在玉米植株中超量表達(dá),還可利用T-DNA的_______________特性,最終使P基因_______________。(3)將農(nóng)桿菌液浸泡過(guò)的玉米愈傷組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)基中需加入_______________,篩選出的愈傷組織經(jīng)再分化過(guò)程形成叢芽,最終獲得轉(zhuǎn)基因玉米植株。(4)對(duì)轉(zhuǎn)基因再生玉米植株進(jìn)行鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn),有些植株雖有P基因,但幾乎沒(méi)有P蛋白,造成該現(xiàn)象的原因可能有_______________?!即鸢浮剑?)①.dNTP能為子鏈延伸過(guò)程提供能量和原料(或脫氧核苷酸只能作為原料而不能提供能量)②.逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶③.P基因兩端的堿基序列(2)①.BamHI②.SacI③.可轉(zhuǎn)移④.整合到玉米細(xì)胞染色體上(3)潮霉素(4)基因轉(zhuǎn)化過(guò)程中強(qiáng)啟動(dòng)子可能丟失或斷裂,未能真正轉(zhuǎn)化成功;雖然轉(zhuǎn)化成功,但是P基因保持沉默,不能有效表達(dá)〖解析〗〖祥解〗1、PCR反應(yīng)進(jìn)行的條件:引物(PCR引物為DNA片段,細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制的引物為一段RNA鏈)、酶、dNTP、模板和緩沖液(其中需要Mg2+)。2、基因表達(dá)載體的組成:目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因。啟動(dòng)子是RNA聚合酶特異性識(shí)別和結(jié)合的DNA序列,是基因的一個(gè)組成部分,控制基因表達(dá)(轉(zhuǎn)錄)的起始時(shí)間和表達(dá)的程度。終止子是給予RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)的DNA序列。〖小問(wèn)1詳析〗多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)簡(jiǎn)稱PCR技術(shù),是一種在DNA聚合酶作用下體外擴(kuò)增特異DNA片段的技術(shù),需要能量和原料等,dNTP(dATP,dTTP,dGTP,dCTP)能為子鏈延伸過(guò)程提供能量和原料,因此進(jìn)行RT–PCR時(shí)一般要加入4種脫氧核糖核苷三磷酸(dNTP)。以RNA為模板獲取P基因?qū)儆谀孓D(zhuǎn)錄過(guò)程,需要逆轉(zhuǎn)錄酶,PCR技術(shù)需要耐高溫的DNA聚合酶,即Taq酶。引物是一小段單鏈DNA或RNA,作為DNA復(fù)制的起始點(diǎn),為了特異性擴(kuò)增P基因序列,需根據(jù)P基因兩端的堿基序列設(shè)計(jì)特異性引物?!夹?wèn)2詳析〗在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),要想使P基因在玉米植株中超量表達(dá),切割目的基因時(shí)需要把強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因連在一起切割下來(lái),因此需要用到BamHI切割,另一種酶可以用KpnⅠ或者SacⅠ,在質(zhì)粒中,KpnⅠ識(shí)別序列在BamHI識(shí)別序列的左側(cè),終止子在右側(cè),如果用KpnⅠ切割,目的基因和質(zhì)粒連接后,目的基因不在啟動(dòng)子和終止子之間,將來(lái)無(wú)法轉(zhuǎn)錄,因此在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),應(yīng)優(yōu)先選用的限制酶是BamHI和SacI。T-DNA是Ti質(zhì)粒上的一個(gè)片段。利用農(nóng)桿菌等微生物可將人工合成的目的基因(P基因)片段通過(guò)T-DNA載體轉(zhuǎn)移到受體植物(玉米細(xì)胞)的基因組中,是基因工程的重要技術(shù)手段?!夹?wèn)3詳析〗據(jù)圖可知,利用Ti質(zhì)粒的T-DNA可將目的基因(P基因)轉(zhuǎn)移到玉米細(xì)胞,T-DNA中含有標(biāo)記基因潮霉素抗性基因,標(biāo)記基因的作用檢測(cè)受體細(xì)胞中是否含有目的基因,因此培養(yǎng)基中需加入潮霉素,能在此環(huán)境中生存的玉米即為轉(zhuǎn)基因玉米?!夹?wèn)4詳析〗基因能控制蛋白質(zhì)的合成,該過(guò)程包括轉(zhuǎn)錄和翻譯。些植株雖有P基因,但幾乎沒(méi)有P蛋白,造成該現(xiàn)象的原因可能有基因轉(zhuǎn)化過(guò)程中強(qiáng)啟動(dòng)子可能丟失或斷裂,未能真正轉(zhuǎn)化成功;雖然轉(zhuǎn)化成功,但是P基因保持沉默,不能有效表達(dá)等?!肌狐c(diǎn)石成金』〗本題考查PCR技術(shù)和基因工程的相關(guān)知識(shí),意在考查學(xué)生能從題圖中提取有效信息并結(jié)合這些信息,運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn),通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理,做出合理的判斷或得出正確結(jié)論的能力。16.圖1為培育轉(zhuǎn)AFPs基因(抗凍基因)番茄的示意圖,外源DNA和質(zhì)粒上均標(biāo)出了酶切位點(diǎn)及相關(guān)抗性基因,其中Ap為氨芐青霉素抗性基因,Tc為四環(huán)素抗性基因。請(qǐng)分析并回答下列問(wèn)題:(1)據(jù)圖分析,若需使用插入滅活法篩選并鑒定重組質(zhì)粒,應(yīng)優(yōu)先選用限制酶____________對(duì)目的基因和質(zhì)粒切割。在形成的重組質(zhì)粒上,能被RNA聚合酶識(shí)別且結(jié)合的部位稱為_(kāi)___________。(2)圖2中的A鏈和B鏈來(lái)自于AFPs基因。欲利用PCR技術(shù)對(duì)AFPs基因擴(kuò)增4次循環(huán),應(yīng)選取的引物是____________,需要的引物數(shù)量是___________個(gè)。在這個(gè)過(guò)程中,還需要添加___________酶。(3)為提高導(dǎo)入成功率,常利用____________處理農(nóng)桿菌,Ti質(zhì)粒含有的____________可將目的基因整合到番茄細(xì)胞的染色體DNA上,采用___________技術(shù)將番茄細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因番茄。若要獲得抗凍能力更強(qiáng)的抗凍番茄,可以對(duì)AFPs基因進(jìn)行改造,最終得到相應(yīng)的蛋白質(zhì),該過(guò)程需用到__________工程。檢測(cè)轉(zhuǎn)基因番茄是否產(chǎn)生抗凍蛋白,所用的方法是__________。(4)用插入滅活法篩選出的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌在含氨芐青霉素培養(yǎng)基和含四環(huán)素培養(yǎng)基上的存活情況分別是___________?!即鸢浮剑?)①.EcoRI、BamHI②.啟動(dòng)子(2)①.引物2、引物3②.30③.耐高溫的DNA聚合酶
(3)①.Ca2+②.T-DNA③.植物組織培養(yǎng)④.蛋白質(zhì)⑤.抗原-抗體雜交
(4)存活、不能存活〖解析〗〖祥解〗分析題圖可知,圖1中質(zhì)粒中含有Ap基因和Tc基因,可選用的限制酶有EcoRI、BamHI、HindⅢ。構(gòu)建重組質(zhì)粒后,利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入番茄細(xì)胞,通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因番茄?;蚬こ碳夹g(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是一般先用Ca2+處理大腸桿菌細(xì)胞,使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài),然后再將重組的基因表達(dá)載體導(dǎo)人其中。(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定:分子水平上的檢測(cè)有①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定有抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!夹?wèn)1詳析〗由題意可知,質(zhì)粒的Tc基因中含有BamHI切割位點(diǎn),若選用插入滅活法篩選并鑒定重組質(zhì)粒,選用的限制酶組合應(yīng)為EcoRI和BamHI。RNA聚合酶是轉(zhuǎn)錄的酶,能夠識(shí)別并結(jié)合基因上的啟動(dòng)子。〖小問(wèn)2詳析〗DNA復(fù)制時(shí)從3’端延伸,因此利用PCR技術(shù)擴(kuò)增AFPs基因選取的引物應(yīng)為引物2和引物3。PCR循環(huán)4次,合成的DNA分子數(shù)為24=16,每條子鏈的合成都需要引物,故需要的引物數(shù)量為16-2=14個(gè)。PCR技術(shù)的原理是DNA雙鏈的復(fù)制,因此在添加引物的同時(shí),需要添加耐高溫的DNA聚合酶?!夹?wèn)3詳析〗形成的重組質(zhì)粒需要導(dǎo)入到農(nóng)桿菌體內(nèi),利用農(nóng)桿菌將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入番茄細(xì)胞中,因此為提高導(dǎo)入成功率,常利用Ca2+處理農(nóng)桿菌。Ti質(zhì)粒上的T-DNA(可轉(zhuǎn)移的DNA)可轉(zhuǎn)移到被侵染的番茄細(xì)胞中,并且將其整合到該細(xì)胞的染色體DNA上。獲得轉(zhuǎn)基因的番茄細(xì)胞后,利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將該番茄細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因番茄。若要對(duì)AFPs基因改造獲得抗凍的番茄,需要利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)先設(shè)計(jì)出所需的蛋白質(zhì),再進(jìn)一步推導(dǎo)相應(yīng)的基因堿基排列順序,然后改造基因。檢測(cè)轉(zhuǎn)基因番茄是否產(chǎn)生抗凍蛋白,可采用抗原-抗體雜交?!夹?wèn)4詳析〗由題意可知,含重組質(zhì)粒農(nóng)桿菌由于其Tc基因被限制酶切割插入了目的基因,導(dǎo)致其對(duì)四環(huán)素?zé)o抗性,因此用插入滅活法篩選出的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌在含氨芐青霉素培養(yǎng)基不能正常存活,在含四環(huán)素培養(yǎng)基上不能存活?!肌狐c(diǎn)石成金』〗本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí),要求考生識(shí)記相關(guān)原理及操作步驟,掌握知識(shí)的細(xì)節(jié)問(wèn)題,能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)做出準(zhǔn)確判斷,正確解答問(wèn)題。17.干燥綜合征(SS)是臨床常見(jiàn)的一種自身免疫病,其血清中存在多種抗體,其中以SSB抗體異性最強(qiáng),影響最顯著。科研人員為建立抗SSB抗體全自動(dòng)定量檢測(cè)的磁微?;瘜W(xué)發(fā)光試劑,利用基因工程技術(shù)獲得重組SSB蛋白,流程如下,請(qǐng)分析回答:(1)利用RNA通過(guò)①過(guò)程獲得cDNA需要____________酶。通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增SSB基因的前提是要測(cè)定該基因兩端部分核苷酸序列,目的是____________。(2)為確保與PET41a質(zhì)粒定向連接,獲得的SSB基因兩端要含有____________酶切位點(diǎn)。在PCR過(guò)程中,第____________輪循環(huán)產(chǎn)物中出現(xiàn)含所需限制酶的片段A。(3)獲得含SSB基因的重組質(zhì)粒后,進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)切割原質(zhì)粒和重組質(zhì)粒,獲得片段大小如右表(1kb=1000堿基對(duì))(注意:DNA片段大小與圖中所畫(huà)比例一致)。SSB基因的長(zhǎng)度為_(kāi)___________。限制酶EcoRIBamHI和XhoI原質(zhì)粒8.1kb2.7kb、5.4kb重組質(zhì)粒3.4kb、5.0kb未做該處理(4)③過(guò)程目的是將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到大腸桿菌內(nèi),并接種于添加____________的培養(yǎng)基上,收集菌落進(jìn)行鑒定,將陽(yáng)性菌落進(jìn)一步純化后將菌體破碎處理,篩選得到重組SSB蛋白。(5)為檢測(cè)重組質(zhì)粒表達(dá)情況及重組蛋白與抗體結(jié)合能力,科研人員通過(guò)注射含純化的重組SSB蛋白的弗氏佐劑進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn),請(qǐng)完成下表:實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)操作分組取健康、生理狀態(tài)相同的小鼠隨機(jī)均分成兩組。實(shí)驗(yàn)處理實(shí)驗(yàn)組注射含純化的重組SSB蛋白的弗氏佐劑,對(duì)照組①____________,連續(xù)三次。飼養(yǎng)在相同且適宜環(huán)境中飼養(yǎng)。②___第三次免疫后第七天取小鼠血清并提取抗體進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果分析與對(duì)照組相比,若抗體檢測(cè)呈③____________,則表明重組SSB蛋白具有與相應(yīng)抗體高度結(jié)合的能力?!即鸢浮剑?)①.逆轉(zhuǎn)錄②.便于合成引物(2)①.BamHI和XhoⅠ②.三(3)3kb(4)卡那霉素(5)①.注射等量不含重組SSB蛋白的弗氏佐劑②.檢測(cè)(獲取實(shí)驗(yàn)結(jié)果)③.陽(yáng)性〖解析〗〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方
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