專題5課題3血紅蛋白的提取和分離練習(xí)

專題5課題3血紅蛋白的提取和分離練習(xí)專題5課題3血紅蛋白的提取和分離練習(xí)高中生物試卷第=page22頁，共=sectionpages33頁高中生物試卷第=page11頁，共=sectionpages33頁專題5課題3血紅蛋白的提取和分離練習(xí)專題5課題3血紅蛋白的提取和分離1.使用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)實驗中，相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)在凝膠中的行進過程，可表示為圖中（）。A。

B。

C。

D。

2。分離血紅蛋白溶液時,離心后試管中的溶液分四層,血紅蛋白在第__________層（）A.

一B。

二C。

三D.

四3.血紅蛋白由____________個肽鏈組成（)A。2B.4C.3D。54。紅細胞含有大量血紅蛋白，紅細胞的機能主要是由血紅蛋白完成的,血紅蛋白的主要功能是攜帶O2或CO2，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進行實驗，來提取和分離血紅蛋白，請完成下列有關(guān)問題：(1)

血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步:______、______、______和______。（2)

實驗前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉,取血回來，馬上進行離心，收集血紅蛋白溶液。

①加入檸檬酸鈉的目的是________________________。

②以上所述的過程即是樣品處理,它包括、______、______收集血紅蛋白溶液。（3)

收集的血紅蛋白溶液在透析袋中可以經(jīng)過透析，這就是樣品的粗分離.

①透析的目的是______________________________。

②透析的原理是______________________________。(4)

然后通過凝膠色譜法將樣品進一步純化，最后經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定.

①樣品純化的目的是__________________。

②血紅蛋白有什么特點？

.這一特點對進行蛋白質(zhì)的分離有什么意義？。5。隨著人類基因組計劃的進展以及多種生物基因測序工作的完成，人類跨入了蛋白質(zhì)時代。對蛋白質(zhì)的研究和應(yīng)用，首先需要獲得高純度的蛋白質(zhì)。請回答下列問題。(1）

蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步:__________、__________、__________和純度鑒定。(2）

如果要從紅細胞中分離出血紅蛋白，實驗前取新鮮血液要在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，這樣做的目的是___________________________________________.(3)

血紅蛋白的提取又可以細分為：紅細胞的洗滌、__________、分離血紅蛋白溶液和__________。其中分離血紅蛋白溶液時需要用到__________（儀器)分出下層的紅色透明液體。6.

凝膠色譜技術(shù)是20世紀60年代初發(fā)展起來的一種快速而又簡單的分離技術(shù)，由于設(shè)備簡單、操作方便、不需要有機溶劑、對高分子物質(zhì)有很高的分離效果，目前已經(jīng)被生物化學(xué)、分子生物學(xué)、生物工程學(xué)、分子免疫學(xué)以及醫(yī)學(xué)等有關(guān)領(lǐng)域廣泛采用，不但應(yīng)用于科學(xué)實驗研究,而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn)。

參照上圖，完成問題:（1）

a、b均為蛋白質(zhì)分子，其中先從層析柱中洗脫出來的是________,原因是。（2）

自己制作凝膠色譜柱時，在色譜柱底部d位置相當于多孔板的結(jié)構(gòu)可由______替代。(3）

裝填凝膠色譜柱時，色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，原因是_________________。(4）

若選用SephadexG100，則“G”表示，100表示__________________。(5）

洗脫用的液體應(yīng)盡量與浸泡凝膠所用的液體______（相同/不同）,洗脫時,對洗脫液的流速要求是______。7.對血紅蛋白的研究結(jié)果表明,血紅蛋白實際上是由珠蛋白、原卟啉和二價鐵離子(Fe2+）所組成的結(jié)合蛋白質(zhì).有4條肽鏈各結(jié)合一個輔基即血紅素，O2結(jié)合于Fe2+上,血紅蛋白與氧疏松結(jié)合形成氧合血紅蛋白（HbO2），這種氧合作用于氧分壓高時容易進行，于氧分壓低時易于解離。紅細胞結(jié)合和攜帶O2的過程并不影響二價鐵離子,也就是說不使之氧化為三價鐵離子（Fe3+無攜帶O2的能力）。CO與Hb的親和力大于O2，結(jié)合成HbCO后不能重新分離,致使Hb喪失運輸O2和CO2的機能，此稱一氧化碳中毒即煤氣中毒。(1)

用凝膠色譜法分離出血紅蛋白時，待_________接近色譜柱底端時，才用試管收集。血紅蛋白因含_______而呈現(xiàn)紅色。（2）

要使血紅蛋白從紅細胞中釋放出來，可選用______________________的方法.（3)

紅細胞具有運輸氧的功能，是因為具有__________________________的特性.(4）

亞硝酸鹽為強氧化劑，進入人體后，可使血紅蛋白失去運輸氧的功能，導(dǎo)致組織缺氧，其可能的原因是

。8.科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)，人的血液pH通常在7.35～7。45之間變化，其變化范圍很小，這是由于血液中含有許多對緩沖物質(zhì)，如H2CO3/NaHCO3、NaH2PO4/Na2HPO4等，其中H2CO3/NaHCO3在血液中濃度最高,緩沖能力最強，對維持血液正常最重要。(1）

當人體內(nèi)堿性物質(zhì)（如Na2CO3）增加時，H2CO3/NaHCO3緩沖液中的_______就與之作用，生成_______,過多的該物質(zhì)可由腎臟排出，從而維持pH基本不變.(2）

若人體內(nèi)酸性物質(zhì)（如無氧呼吸產(chǎn)物乳酸）增加時，則該緩沖對中的_______就會與乳酸作用，從而維持pH基本不變.9.凝膠色譜技術(shù)是20世紀60年代初發(fā)展起來的一種快速而又簡單的分離技術(shù),由于設(shè)備簡單、操作方便，不需要有機溶劑，對高分子物質(zhì)有很高的分離效果，目前已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于多個領(lǐng)域，請回答問題.（1)

若選用SephadexG100,則G表示_____________________________________.(2)

通過凝膠色譜法可將從紅細胞中分離出的血紅蛋白樣品進一步________,在血紅蛋白的提取和分離實驗中有以下操作，試回答:

①實驗時要對采集到的血液中的紅細胞進行洗滌，洗滌的目的是________。

②在________的作用下，紅細胞會破裂釋放出血紅蛋白。

③將釋放出的血紅蛋白收集到透析袋中透析，這是樣品的________，而透析的目的是_________________________________________________________________。

④實驗最后經(jīng)過SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進行________。（3)

裝填凝膠色譜柱時，要注意色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，一旦發(fā)現(xiàn)氣泡必須重裝。這是因為_________________________________________________________.專題5課題3血紅蛋白的提取和分離【答案】1.

B

2。

C

3.

B

4.（1）樣品處理粗分離純化純度鑒定

（2）①防止血液凝固②紅細胞的洗滌血紅蛋白的釋放

（3）①去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)②透析袋能使小分子自由進出，而大分子則保留在袋內(nèi)

（4)①通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去②血紅蛋白呈現(xiàn)紅色,在凝膠色譜分離時可以通過觀察顏色來判斷什么時候應(yīng)該收集洗脫液這使血紅蛋白的分離過程非常直觀，大大簡化了實驗操作

5。(1)樣品處理粗分離純化(2)防止血液凝固

(3）血紅蛋白的釋放透析分液漏斗

6。（1）aa相對分子質(zhì)量大，無法進入凝膠內(nèi)部的通道,只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快

（2）尼龍網(wǎng)和尼龍紗

（3）氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,降低分離效果

(4）凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍凝膠得水值，即每克凝膠膨脹時吸水10g

(5）相同保持穩(wěn)定

7。（1）紅色區(qū)帶血紅素

(2）將紅細胞置于蒸餾水中，加體積分數(shù)為40％的甲苯，并攪拌使之破裂

(3)紅細胞中的血紅蛋白與氧在氧分壓高時容易結(jié)合，在氧分壓低時又容易分離

（4）亞硝酸鹽可使血中低鐵血紅蛋白氧化成高鐵血紅蛋白

8。（1)H2CO3NaHCO3（2）NaHCO3

9。（1）凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍(2）純化①去除血漿蛋白②蒸餾水和甲苯③粗分離去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)④純度鑒定（3）氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果

【解析】1.本題考查對凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)原理的理解，相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)留在顆粒外面,相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)進入顆粒內(nèi)部；蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量大的通過凝膠間隙先被洗脫,蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量小的進入凝膠內(nèi)部而后被洗脫。2.分離血紅蛋白溶液：目的是從紅細胞破碎混合液中分離出血紅蛋白溶液.

將紅細胞破碎混合液進行高速離心處理后，離心管中從上到下依次是：無色透明的甲苯層、白色固體的脂溶性沉淀層、紅色透明的血紅蛋白溶液層和暗紅色的破碎物沉淀層。用濾紙過濾以除去脂溶性沉淀層，于分液漏斗中靜置后分離出血紅蛋白溶液.3.人的血紅蛋白由四條肽鏈組成人的血紅蛋白由四條肽鏈組成4。這是一道綜合題，考查的知識點包括:血紅蛋白提取和分離的程序、加入檸檬酸鈉的目的、樣品的處理、凝膠色譜法純化的目的、血紅蛋白的特點等知識.6.

考查凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理、色譜柱的制作材料、裝填色譜柱