白細胞檢驗-白細胞計數(shù)（臨床檢驗技術(shù)）

白細胞計數(shù)檢測原理（顯微鏡計數(shù)法）用白細胞計數(shù)稀釋液(稀乙酸)，將血液稀釋一定倍數(shù)并破壞成熟紅細胞和固定白細胞充入改良牛鮑(Neubauer)計數(shù)板，在顯微鏡下計數(shù)一定范圍內(nèi)的白細胞數(shù)經(jīng)換算求得每升血液中各種白細胞的總數(shù)。白細胞數(shù)=N/4×10×20×106/L【質(zhì)量保證】1．計數(shù)誤差(1)技術(shù)誤差：規(guī)范、熟練的操作，儀器的校正、試劑的標準化和操作人責任心。1)器材：清潔、干燥，校準，合格試劑。2)標本要求：血液分析儀檢測的標本要求及質(zhì)量保證3)加蓋玻片影響：WHO推薦采用“推式”法，此法較“蓋式”法更能保證充液體積的高度為0.10mm。4)充池影響：①充池前充分混勻白細胞懸液，避免氣泡。②充池應(yīng)避免充液過多、過少、斷續(xù)，避免氣泡及充液后移動蓋玻片。技數(shù)誤差5)計數(shù)原則：計數(shù)壓線細胞時，數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右。6)計數(shù)室內(nèi)細胞分布要均勻：白細胞總數(shù)在正常范圍內(nèi)時，各大方格間的細胞數(shù)不得相差8個以上。2次重復(fù)計數(shù)誤差不超過l0％。7)有核紅細胞影響：外周血出現(xiàn)有核紅細胞，可使白細胞計數(shù)結(jié)果偏高，須校正。

2.固有誤差：主要是指計數(shù)域誤差(fielderror)。是由于每次充池后血細胞在計數(shù)室內(nèi)分布不同計數(shù)域誤差變異系數(shù)(CV)可隨計數(shù)的細胞數(shù)量增多而減小。

白細胞數(shù)量太少時(<3X109／L)8個大方格或縮小稀釋倍數(shù)白細胞數(shù)量太多時(>15X109／L)稀釋固有誤差還應(yīng)包括計數(shù)室和吸管的使用次數(shù)，即計數(shù)池誤差(chambererror)和吸管誤差

3)生理狀態(tài)影響：運動、勞動、冷熱水浴、酷熱、嚴寒等常出現(xiàn)一過性白細胞增高；一日之內(nèi)白細胞數(shù)最高值與最低值可相差1倍。另外，吸煙者白細胞總數(shù)平均較非吸煙者高30％。最好在固定檢查時間。血涂片上WBC密度與WBC數(shù)量關(guān)系血涂片上WBC數(shù)：／HPWBC(×109／L)

2~44~74~67~96~1010~1210~1213~18

①成人：(4～10)×109／L②新生兒：(15～20)×109／L③6月～2歲：(11～12)×109／L參考區(qū)間＞10×109／L稱白細胞增多(1eukocytosis)，＜4×109／L稱白細胞減低(1eukopenia)。白細胞數(shù)在生理或病理情況下均可有變異。由于中性粒細胞占白細胞總數(shù)的50％～70％，其增高和減低直接影響白細胞總數(shù)的變化，中性粒細胞增減的意義與白細胞總數(shù)的增減的意義基本上是一致的。有時兩者的數(shù)量關(guān)系也有不一致的情況，要具體情況具體分析?！薄芭R床意義白細胞計數(shù)實驗原理實驗器材實驗試劑操作步驟目

錄CONTENTS計算參考值注意事項思考題實驗原理用白細胞稀釋液將血液按一定倍數(shù)稀釋，同時破壞紅細胞，再充入計數(shù)池，在顯微鏡下計數(shù)范圍內(nèi)白細胞數(shù)，換算求出每升血液中白細胞的數(shù)量試驗器材、試劑顯微鏡、改良Neubauer血細胞計數(shù)板等試驗器材試劑白細胞稀釋液：2%冰乙酸溶液改良牛鮑氏計數(shù)板操作步驟01取試管1支，加白細胞稀釋液0.38ml。02用清潔干燥微量吸管取末梢血20μl，擦去管外余血后加至白細胞稀釋液底部，再輕吸上層清洗吸管2-3次立即混勻。03混勻后，用干凈微量吸管將白細胞懸液充入計數(shù)池，不得有空泡或外溢，充池后靜置2-3min后計數(shù)。04顯微鏡下依次計數(shù)四角大方格共4個方格內(nèi)的白細胞數(shù)目。對壓線細胞按"數(shù)上不數(shù)下、數(shù)左不數(shù)右"的原則進行計數(shù)。計數(shù)原則計算白細胞數(shù)/L=（N/4）×10×20×106式中：N

4個大方格內(nèi)白細胞數(shù)；×101個大方格容積為0.1μl，換算成1.0μl；×20血液的稀釋倍數(shù)為20倍；×106

由1μl換算成1L。成人：（4.0～10.0）×109/L新生兒：15～20×109/L參考區(qū)間注意事項玻片1采血時不能擠壓過甚，因此針刺深度必須適當。推片2稀釋液要過濾，試管、計數(shù)板均須清潔，以免雜質(zhì)、微粒等被誤認為白細胞