第二講 農(nóng)藥殘留分析良好實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范

第二講農(nóng)藥殘留分析良好實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范

（GUIDELINESONGOODLABORATORYPRACTICEINRESIDUEANALYSIS,GLPCAC/GL40-1993,Rev.1-2003）本講內(nèi)容2.1

前言2.2分析人員2.3基本資源2.4分析工作2.5農(nóng)藥殘留分析實(shí)驗(yàn)室裝備

2.1前言本準(zhǔn)則旨在確保國際食品貿(mào)易檢驗(yàn)獲得的農(nóng)藥殘留最大限量結(jié)果的可靠性。因?yàn)榭煽康臏y定數(shù)據(jù)對(duì)于保護(hù)消費(fèi)者健康、促進(jìn)貿(mào)易公平進(jìn)行至關(guān)重要。除本準(zhǔn)則外，由國際食品法典農(nóng)藥殘留分析委員會(huì)CCPR制定現(xiàn)行有效的與農(nóng)藥最大殘留限量有關(guān)的其他準(zhǔn)則如下：會(huì)在第八講中提及。2.2分析人員殘留分析由一系列的操作步驟組成，由于被測物濃度一般在mg/kg或

g/kg水平，且被測物可能比較復(fù)雜并存在于各種各樣的基質(zhì)中，因此一定要注意很多細(xì)節(jié)問題。分析人員應(yīng)具有一定的專業(yè)水平，并且在殘留分析方面有豐富的經(jīng)驗(yàn)并熟練掌握相應(yīng)分析技術(shù)。分析人員在使用儀器、實(shí)驗(yàn)室技能、處理和評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)等方面要經(jīng)過嚴(yán)格的培訓(xùn)。

國際貿(mào)易的公平進(jìn)行主要依賴于可靠的分析數(shù)據(jù)。在農(nóng)藥殘留分析中,不僅依賴于可靠有效的分析方法，還與工作人員在農(nóng)藥殘留分析方面的經(jīng)驗(yàn)及是否遵循農(nóng)藥殘留分析實(shí)驗(yàn)室良好操作規(guī)范有關(guān)。保護(hù)消費(fèi)者的健康和確保食品貿(mào)易的公平進(jìn)行PROTECTINGTHEHEALTHOFTHECONSUMERSANDENSURINGFAIRPRACTICESINTHEFOODTRADE分析人員要了解農(nóng)藥殘留分析準(zhǔn)則和分析質(zhì)量保證(AQA)體系。了解分析方法中各步驟的目的、嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)分析，特別要注意所有可能產(chǎn)生誤差的地方。同時(shí)做好實(shí)驗(yàn)記錄。殘留分析實(shí)驗(yàn)室建好后，分析人員應(yīng)在儀器完備、具備指導(dǎo)經(jīng)驗(yàn)和練兵條件的實(shí)驗(yàn)室培訓(xùn)一段時(shí)間。如果建立的實(shí)驗(yàn)室檢測農(nóng)藥殘留范圍很廣，分析人員需要到多個(gè)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行考察并培訓(xùn)。

2.3基本資源

2.3.1實(shí)驗(yàn)室

2.3.2設(shè)備和供給

2.3.1

實(shí)驗(yàn)室

實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)必須保證分析工作在安全環(huán)境下進(jìn)行，同時(shí)要求該環(huán)境下樣品被污染的可能性最小。樣品的接收和儲(chǔ)存、樣品制備、樣品提取和凈化、檢測所用儀器最好在相互獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)室中。用于提取和凈化的溶劑、試劑必須要符合殘留分析要求。樣品的接收、儲(chǔ)存和制備必須在專用于殘留分析的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行。

實(shí)驗(yàn)室安全要根據(jù)本國、本實(shí)驗(yàn)室的情況制定，必須認(rèn)識(shí)到世界上某些殘留實(shí)驗(yàn)室苛刻的工作條件在其他實(shí)驗(yàn)室是不切合實(shí)際的。只有少量的溶劑可以放在工作區(qū)域，大批量的溶劑要單獨(dú)儲(chǔ)存，且遠(yuǎn)離主要工作區(qū)域。盡可能少地使用具有高毒或慢性毒害的溶劑和試劑。廢棄溶劑要安全儲(chǔ)存，并按照國家法規(guī)處理，不能對(duì)環(huán)境造成污染。提取、凈化和濃縮應(yīng)在通風(fēng)良好的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行，最好在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行。禁止在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)吸煙、吃東西、喝水或可能產(chǎn)生污染的化妝。

玻璃器具在真空或高壓下使用時(shí)，必須使用安全遮板，采取防爆措施。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有突發(fā)事件處理裝置，有足夠的可用滅火器。有些農(nóng)藥劇毒或慢性毒害，因此，在處理標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)要十分小心。進(jìn)口色譜純正己烷濃縮100倍對(duì)比圖進(jìn)口色譜純丙酮濃縮100倍對(duì)比圖國產(chǎn)重蒸2.3.2設(shè)備和供給

細(xì)微的變化可能會(huì)顯著地影響測定數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確度。因此，色譜儀、天平、分光光度計(jì)等儀器要定期的維修、校準(zhǔn)和檢定，同時(shí)做好每種儀器的使用、維護(hù)、維修保養(yǎng)記錄。冰箱和超低溫冰箱溫度要經(jīng)常監(jiān)控，或在一定時(shí)間間隔下檢查。所有的記錄都必須隨時(shí)更新，同時(shí)要保管好記錄。要有穩(wěn)定的水源、電源和氣源。各種耗材的及時(shí)供給和質(zhì)量保證。

實(shí)驗(yàn)室要有已知含量、高純度的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。樣品中殘留的母體化合物和最大殘留限量中包括的該化合物的代謝物都應(yīng)有標(biāo)準(zhǔn)品。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、儲(chǔ)備液、試劑要貼上標(biāo)簽。標(biāo)簽上應(yīng)包括日期、定值、溶劑、儲(chǔ)存條件等信息。易降解農(nóng)藥要注明有效期。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)儲(chǔ)存在使其降解速率最小的條件下。要避免貯備液在光和熱作用下分解，或因溶劑揮發(fā)而濃縮。

2.4分析工作

2.4.1樣品的接收與儲(chǔ)存

2.4.2標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOPs)2.4.3分析方法確認(rèn)

2.4.4儀器性能檢驗(yàn)

2.4.5確證試驗(yàn)

2.4.6質(zhì)譜分析

2.4.7衍生化

2.4.8最低校準(zhǔn)濃度(LCL)

農(nóng)藥殘留檢測與常量分析顯著不同的是容易受到污染影響。用于檢測的待測樣被痕量污染就可能會(huì)產(chǎn)生很大的誤差，或者使靈敏度降低導(dǎo)致殘留不能檢出。玻璃器具、試劑、有機(jī)溶劑和水在使用前必須通過空白實(shí)驗(yàn)檢測并證實(shí)其可能存在的干擾污染物。試劑和吸附劑必須純化，最好使用重蒸餾溶劑、二次蒸餾水。

用于痕量分析的玻璃器皿要單獨(dú)放置，且不可用于其他用途。農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)要儲(chǔ)存在與主要?dú)埩舴治鰧?shí)驗(yàn)室分開的室內(nèi)。儲(chǔ)備液和樣品提取液也不能儲(chǔ)存在同一區(qū)域。農(nóng)藥殘留分析和制劑分析必須有相互獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)儀器。為避免交叉污染，樣品制備與殘留檢測應(yīng)在不同的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行。

污染影響大小因所用檢測技術(shù)和測定的殘留農(nóng)藥的水平而不同。GC和HPLC方法中有嚴(yán)重影響的污染在分光光度法中卻不明顯，反之亦然。對(duì)于較高濃度的殘留，來自溶劑和其他材料的背景干擾與殘留含量相比可能就可以忽略。許多問題可以通過使用替代檢測器消除。如果污染不干擾殘留測定，其存在是可以接受的。

2.4.1樣品的接收與儲(chǔ)存

樣品的接收：接收的樣品應(yīng)提供樣品來源、分析要求、潛在毒性等信息。接收樣品時(shí)，應(yīng)同時(shí)給樣品指定唯一標(biāo)識(shí)，這個(gè)標(biāo)識(shí)跟隨樣品分析的所有步驟直至發(fā)出檢驗(yàn)報(bào)告。同時(shí)做好樣品接收記錄。樣品處理和副樣提取應(yīng)按照說明提供代表性分析部分或部位且被測物濃度不發(fā)生變化。

樣品的儲(chǔ)存：樣品不能立即分析，但能夠盡快分析時(shí)，應(yīng)將其儲(chǔ)存在1~5℃下,遠(yuǎn)離日光直射。接收的樣品如果在冷凍狀態(tài)下，在分析前要保持在＜-16℃環(huán)境下。樣品需要儲(chǔ)存較長時(shí)間，儲(chǔ)存溫度應(yīng)在-20℃左右。必須進(jìn)行長時(shí)間儲(chǔ)存時(shí)或懷疑被測物可能分解，要使用添加樣品考察其影響水平。2.4.2標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOPs)

標(biāo)準(zhǔn)操作程序應(yīng)用于所有的操作步驟。標(biāo)準(zhǔn)操作程序除了包含系統(tǒng)適用性、預(yù)期效果、內(nèi)部質(zhì)量控制（性能測試）條件以及結(jié)果的計(jì)算信息外，還應(yīng)包括所有的操作說明。同時(shí)包括來自分析方法、標(biāo)樣和試劑的所有潛在問題。

與標(biāo)準(zhǔn)操作程序有關(guān)的所有誤差都要記錄，且誤差要通過實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人的認(rèn)可。（類似實(shí)施細(xì)則）2.4.3分析方法確認(rèn)

本準(zhǔn)則規(guī)定了不同目的分析方法的確認(rèn)程序。分析人員要確定某方法適用于預(yù)定目的的程度，還要提供必要的方法確認(rèn)數(shù)據(jù)。分析方法包括從接收樣品至獲得最后測定結(jié)果的一系列程序。方法確認(rèn)是確定某方法適用于預(yù)期目的的程序。分析方法可能是本實(shí)驗(yàn)室獲得的，也可能是從文獻(xiàn)或其它途徑獲得的。

為了與實(shí)驗(yàn)室的要求和能力以及測定目的相匹配，選擇的分析方法可能需要修正。方法的確認(rèn)要伴隨方法修正的整個(gè)過程。方法確認(rèn)和應(yīng)用要在所用檢測系統(tǒng)的測定范圍內(nèi)進(jìn)行。通常，方法確認(rèn)在方法應(yīng)用到樣品測定前完成，但在隨后的方法使用中各項(xiàng)分析參數(shù)檢驗(yàn)也相當(dāng)重要。分析參數(shù)檢驗(yàn)是方法確認(rèn)的一部分。

重復(fù)性測試（或?qū)嶒?yàn)室協(xié)同研究）是檢驗(yàn)?zāi)撤椒ńY(jié)果總體準(zhǔn)確度一個(gè)很重要的方法，同時(shí)還可提供實(shí)驗(yàn)室間結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。但是，重復(fù)性測定不能說明被測物的穩(wěn)定性、均勻性和提取效率。需要提供不確定度數(shù)據(jù)時(shí)，應(yīng)包括分析參數(shù)數(shù)據(jù)，而不能僅僅依賴于方法確認(rèn)的數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)室采用了某分析方法或修正方法后，要確定分析參數(shù)對(duì)測定的影響，嚴(yán)格控制方法中影響測定結(jié)果的所有方面。如：樣品大小、凈化系統(tǒng)性能變化、試劑或制備衍生物的穩(wěn)定性。溶劑、進(jìn)樣器、分析柱、流動(dòng)相性質(zhì)(組成和流速)、溫度、檢測系統(tǒng)、共提取物等對(duì)測定系統(tǒng)的影響。準(zhǔn)確的建立響應(yīng)值與被測物之間的定性、定量關(guān)系非常重要。

應(yīng)優(yōu)先選用多殘留分析方法。使用代表性的樣品在方法確認(rèn)中非常重要。因此，樣品的篩分要充分。一般地，某產(chǎn)品的某一品種可以代表該產(chǎn)品的其它品種。但是，水果或蔬菜類的單個(gè)產(chǎn)品不能代表整體。已知某產(chǎn)品的某一品種與其它品種對(duì)于同一分析方法響應(yīng)不同時(shí)，這些品種就要進(jìn)行單獨(dú)分析。不同品種之間的方法準(zhǔn)確度和精密度可能會(huì)有很大差異。經(jīng)驗(yàn)表明，相似的樣品在提取和凈化上相類似時(shí)，可以采用簡化方法進(jìn)行方法確認(rèn)。某產(chǎn)品的方法確認(rèn)數(shù)據(jù)可以應(yīng)用至其它產(chǎn)品舉例：谷物：用于谷物的方法確認(rèn)數(shù)據(jù)不能用于糠及糧食，但用于小麥的方法確認(rèn)數(shù)據(jù)可用于大麥和小麥粉。水果和蔬菜：用于新鮮產(chǎn)品的方法確認(rèn)數(shù)據(jù)不可用于干果，但是用于甘藍(lán)的方法確認(rèn)數(shù)據(jù)可用于抱子甘藍(lán)。

代表性樣品可用于方法性能的評(píng)價(jià)。需要選擇具有與待測樣品相同物化性質(zhì)的樣品。代表性樣品的選擇要基于以下幾點(diǎn)：（a）選擇的代表性產(chǎn)品要：

Ⅰ.包含待測樣品的所有物化特性。

Ⅱ.必須是在常規(guī)條件下可測，或者是鑒定結(jié)果以測定結(jié)果為基礎(chǔ)的樣品。（b）用于最初方法確認(rèn)程序的所有分析樣品應(yīng)是常規(guī)條件下可測的，同時(shí)所有樣品必須能夠同時(shí)測定。（c）用于表征某一方法的分析樣品濃度應(yīng)當(dāng)包括樣品中全部待測樣品的允許限（AL）。因此，選擇的代表性分析樣品應(yīng)包括分別含有最高允許限和最低允許限的樣品。從而，性能測試中代表性分析樣品的添加水平可以不與真實(shí)的允許限值一致。

如果有合適的數(shù)據(jù)可以利用，分析者就不必進(jìn)行全部的測試項(xiàng)目。但是，方法確認(rèn)記錄中必須包括或提及所有必需的信息。要評(píng)價(jià)的參數(shù)限定在對(duì)方法和特定方法應(yīng)用目的都適用的范圍內(nèi)。很多情況下，與多個(gè)參數(shù)相關(guān)的性能特征可以在同一實(shí)驗(yàn)中獲得。幾個(gè)因素同時(shí)改變的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)）可以減少原料的消耗。

單殘留分析方法：使用待測的所有被測物或用于實(shí)驗(yàn)室檢測的具有代表性的樣品進(jìn)行方法確認(rèn)試驗(yàn)。組分析方法：使用一個(gè)或多個(gè)代表性樣品和從總體中選取的兩種以上代表性被測物質(zhì)進(jìn)行方法確認(rèn)試驗(yàn)。多殘留分析方法：使用代表性樣品進(jìn)行方法確認(rèn)試驗(yàn)。2.4.4儀器性能檢驗(yàn)性能檢驗(yàn)的主要目的有：分析方法使用時(shí)，在真實(shí)操作條件下監(jiān)控方法性能?？紤]不可避免的因素，如樣品組成、儀器性能、化合物純度、工作人員和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境條件的變化對(duì)檢測的影響。說明方法檢驗(yàn)中儀器等性能大致類同于確認(rèn)方法中確定的性能、該方法在統(tǒng)計(jì)控制狀態(tài)下、方法的準(zhǔn)確度和不確定度滿足要求。方法在應(yīng)用時(shí)，方法確認(rèn)獲得的數(shù)據(jù)可能要根據(jù)性能檢驗(yàn)所得數(shù)據(jù)修正。

質(zhì)量控制結(jié)果可以提供方法的長期重現(xiàn)性和其它性能特征的重要信息。為了進(jìn)行有效的性能檢驗(yàn)，樣品應(yīng)與合適的質(zhì)控樣品（空白樣品、添加回收樣品、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)等）同時(shí)測定?？刂茍D可用于監(jiān)測方法性能的變化趨勢(shì)，并確保測定方法系統(tǒng)處于統(tǒng)計(jì)控制狀態(tài)下。控制圖是質(zhì)量評(píng)定技術(shù)的主要方法?？刂茍D的組成和使用控制圖對(duì)于說明方法的性能和方法參數(shù)的重現(xiàn)性是非常有用的。大量相同類型的樣品需要分析其活性成分時(shí)，控制圖根據(jù)方法使用時(shí)所得平均回收率和標(biāo)準(zhǔn)偏差的數(shù)值制定。使用多殘留分析方法對(duì)每一類樣品中的少量幾個(gè)進(jìn)行分析，以測定其中的多種組分時(shí)，初始控制圖由代表性樣品中的代表性被測物質(zhì)的平均回收率（Q）和實(shí)驗(yàn)室特征重現(xiàn)性系數(shù)（CVLtyp）組成。該控制圖的繪制如下所述：由方法確認(rèn)所得單個(gè)分析組分的平均回收率數(shù)據(jù)和變異系數(shù)沒有顯著差異時(shí)，每一個(gè)數(shù)值可認(rèn)為是方法的真實(shí)回收率和精密度的估計(jì)值，通過適當(dāng)?shù)慕M合得到方法的特征回收率（Qtyp）和變異系數(shù)（CVAtyp），并用于建立初始控制圖。警戒限和控制限分別為：

Qtyp±2хCVAtypхQQtyp±3хCVAtypхQ。

典型的控制圖有x和控制圖，有R控制圖或S控制圖（精密度控制圖）。常把（或x）控制圖與R（或S）控制圖上下并排畫在一起，如下圖，控制圖中有些點(diǎn)向上偏，甚至超出控制限，但在R控制圖中點(diǎn)分布是正常的，這說明測量系統(tǒng)的精度沒有什么變化，而是產(chǎn)生了某種爭得系統(tǒng)誤差。方法使用時(shí)所得重現(xiàn)性數(shù)值可略高于方法確認(rèn)中獲得的數(shù)值。因此，如果有部分回收率的數(shù)值在警戒限外或偶爾在控制限外，但均在指定的變異系數(shù)范圍內(nèi)，就不必進(jìn)行其他附加的測定。

方法應(yīng)用時(shí)，作為性能檢驗(yàn)的一部分，另外15~20個(gè)的回收率測定值的平均回收率或特征回收率和變異系數(shù)的數(shù)值重新計(jì)算以組成一個(gè)新的控制圖，這一控制圖反映方法應(yīng)用的長期重現(xiàn)性。在方法應(yīng)用中，如果測定的某組分最初10個(gè)以上的回收率平均值與代表性樣品所得平均回收率有顯著性差異（P=0.05），那么Qtyp和CVAtyp的數(shù)值是不合適的。重新計(jì)算特定被測物新的警戒限和控制限，以用于新的平均回收率和CV值的測定。

如果性能檢驗(yàn)的數(shù)據(jù)重復(fù)的落在警戒限外（1/20的測定結(jié)果落在警戒限外是可以接受的），需要檢查方法的條件，確定誤差的來源，在方法繼續(xù)使用前采取必要的校準(zhǔn)措施。

如果性能檢驗(yàn)的數(shù)據(jù)落在控制限外，所分析的樣品要重新測定。重復(fù)性測定是性能檢驗(yàn)的另一個(gè)有效措施，這一結(jié)果可用于計(jì)算方法的總體實(shí)驗(yàn)室重現(xiàn)性（CVAtyp）。這種情況下，總體實(shí)驗(yàn)室重現(xiàn)性也包括樣品測定中的不確定度，但是該測定不能說明被測物質(zhì)是否在測定過程中丟失。

2.4.5確證試驗(yàn)

分析以監(jiān)測或執(zhí)法為目的時(shí)，確證樣品中含有某種農(nóng)藥或是否超過最大殘留限量的工作特別重要。原因是樣品中含有的干擾物質(zhì)可能被作為農(nóng)藥造成誤判。例如，氣相色譜中電子捕獲檢測器對(duì)酞酸酯化合物的測定、選擇型性磷檢測器對(duì)含硫與氮化合物的響應(yīng)。

確證試驗(yàn)可能是定性分析，也可能是定量分析。但多數(shù)情況下，這兩方面的信息都需要。殘留檢測在檢出限或檢出限附近時(shí)，確證試驗(yàn)就非常困難。但是，仍需提供足夠的定性和定量信息。

確證實(shí)驗(yàn)的要求隨樣品類型和該樣品已知信息而定。對(duì)于相同來源的含有相同農(nóng)藥殘留的一系列樣品來說，隨機(jī)選取少量樣品就能夠?qū)r(nóng)藥進(jìn)行定性。同樣地，如果已知某特定的農(nóng)藥應(yīng)用到某種樣品中，盡管隨機(jī)選取得樣品的測定結(jié)果需要確證分析，也沒有必要對(duì)農(nóng)藥進(jìn)行定性確證實(shí)驗(yàn)?？瞻讟悠返姆治鍪潜匾?，它可用于檢測是否存在干擾物。

基于最初的測定方法，其他某種可替代的檢測方法對(duì)樣品的定量可能是必要的。對(duì)定性分析，可以使用質(zhì)譜或基于樣品物化特性的某種組合技術(shù)。取得可靠確證數(shù)據(jù)的關(guān)鍵是對(duì)分析部分的正確判斷，同時(shí)應(yīng)特別注意要選擇一種將干擾化合物的影響降至最低的方法。所選的技術(shù)應(yīng)以實(shí)驗(yàn)室具備的儀器和可用技術(shù)為基礎(chǔ)。2.4.6質(zhì)譜分析使用質(zhì)譜獲得的殘留數(shù)據(jù)是最可靠的。農(nóng)藥殘留質(zhì)譜測定通常與色譜分離技術(shù)聯(lián)用，以同時(shí)提供保留時(shí)間、質(zhì)荷比和離子豐度信息。特定的分離技術(shù)、質(zhì)譜技術(shù)、兩者的聯(lián)用、被分析農(nóng)藥的范圍是相關(guān)的。沒有一種組合可以分析所有的化合物。某種農(nóng)藥殘留存在最可靠的證據(jù)是獲得該農(nóng)藥的完整電子轟擊質(zhì)譜圖。提高靈敏度可以通過縮小掃描范圍或選擇離子掃描實(shí)現(xiàn)，但是離子數(shù)目越少，得到的數(shù)據(jù)結(jié)果就越不準(zhǔn)確。其它的確證信息可通過以下方式獲得：更換色譜柱；使用其它的離子源技術(shù)；通過使用串聯(lián)質(zhì)譜監(jiān)測選擇離子的進(jìn)一步降解產(chǎn)物；通過監(jiān)控選擇離子提高質(zhì)譜分辨率條件。對(duì)于定量分析，監(jiān)控離子應(yīng)是所分析化合物的特征離子，同時(shí)要求干擾最小并能產(chǎn)生良好的信噪比。

一般情況下，高效液相色譜檢測數(shù)據(jù)比氣相色譜可信度差，如果該農(nóng)藥有紫外吸收，完整的紫外光譜圖可以提供較充分的定性依據(jù)。然而，一些農(nóng)藥的紫外光譜圖很難判斷，因?yàn)槠涔庾V圖與許多具有相似官能團(tuán)或結(jié)構(gòu)的其他化合物產(chǎn)生的光譜圖相似。一般情況下，紫外吸收數(shù)據(jù)是不足以定性的。熒光檢測數(shù)據(jù)可用于確證紫外吸收獲得的數(shù)據(jù)。

單極液質(zhì)聯(lián)用可以提供較多的定性依據(jù)，但是由于產(chǎn)生的質(zhì)譜圖一般都比較簡單，只能得到很少的特征碎片，因此其結(jié)果可信度不大，LC/MS/MS聯(lián)用是更強(qiáng)有力的分析技術(shù)，可以提供足夠的定性依據(jù)。單極液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)易受基質(zhì)的影響，因此定量分析可能需要使用標(biāo)準(zhǔn)添加物質(zhì)或同位素標(biāo)記標(biāo)準(zhǔn)品。

某些情況下，氣相色譜法所被測物質(zhì)的定性可以通過薄層色譜法很容易地完成。定性確證主要依據(jù)兩個(gè)參數(shù)：比移值和顯色反應(yīng)?；谏锎呋瘎┑臋z測方法適用于某些特定類型農(nóng)藥的定性。然而，薄層色譜分析在定量方面的應(yīng)用還是有限的。薄層色譜法的優(yōu)點(diǎn)是快速、成本低、便于分析熱不穩(wěn)定農(nóng)藥，不足是與色譜檢測技術(shù)相比，靈敏度低、分離效果差，檢測依據(jù)化學(xué)顯色反應(yīng)要求更有效的凈化技術(shù)。2.4.7衍生化2.4.7.1化學(xué)反應(yīng)通過化學(xué)反應(yīng)使農(nóng)藥樣品發(fā)生降解、聚合或縮合，然后利用色譜技術(shù)對(duì)樣品進(jìn)行再測定。反應(yīng)使樣品具有與原化合物不同的保留時(shí)間或響應(yīng)。農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品要與可能含有殘留的樣品一起處理，以便于結(jié)果的直接對(duì)比。測定衍生物時(shí)，衍生化試劑的性質(zhì)可能會(huì)對(duì)測定產(chǎn)生干擾。該部分的確證實(shí)驗(yàn)可分為以下三類：2.4.7.2物理反應(yīng)

對(duì)農(nóng)藥殘留物發(fā)生光化學(xué)反應(yīng)以產(chǎn)生的一種或多種光解產(chǎn)物進(jìn)行色譜分析是一種可用的技術(shù)。農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品和添加樣品要用相同的方法處理。含有多種農(nóng)藥殘留的樣品可能會(huì)給結(jié)果的解釋帶來困難。這種情況下，在衍生化反應(yīng)前，可以事先通過薄層色譜法、高效液相色譜法、柱層析法對(duì)殘留物進(jìn)行分離。2.4.7.3其他方法

許多農(nóng)藥對(duì)酶敏感，可以被其降解或轉(zhuǎn)化。與通常的化學(xué)反應(yīng)不同，這些方法具有特異性，通常包括氧化反應(yīng)，水解反應(yīng)或去烷基化。轉(zhuǎn)化后的產(chǎn)物具有與農(nóng)藥親體不同的色譜特性，將農(nóng)藥標(biāo)樣與反應(yīng)產(chǎn)物對(duì)比即可用于確證試驗(yàn)。

2.4.8最低校準(zhǔn)濃度(LCL)

以監(jiān)控和檢驗(yàn)與是否符合最大殘留限量或其他允許限為分析目的時(shí)，檢測方法必須足夠靈敏以準(zhǔn)確地測定在農(nóng)作物或環(huán)境樣品中是否含有在MRL水平上的農(nóng)藥殘留。然而，使用靈敏到可以檢測比該水平低兩個(gè)或更多個(gè)數(shù)量級(jí)殘留的方法是沒有必要的?？梢詼y定很低水平殘留的分析方法成本非常昂貴，也很難應(yīng)用。最低校準(zhǔn)濃度的應(yīng)用可以降低獲得數(shù)據(jù)的技術(shù)難度，而且可以降低成本。

對(duì)于符合農(nóng)藥最大殘留限量的有效成分，最低校準(zhǔn)濃度可根據(jù)農(nóng)藥最大殘留限量指定。為了便于