DB14-T 2846-2023 麗格海棠組培快繁技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.20CCSB0514IDB14/T2846—2023前言 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語(yǔ)和定義 4培養(yǎng)基配制 5外植體采集與處理 6不定芽誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng) 27生根培養(yǎng) 28組培苗煉苗和移栽 29移栽后管理 310檢驗(yàn)檢疫 311包裝運(yùn)輸 3附錄A（規(guī)范性）MS基本培養(yǎng)基成分 4DB14/T2846—2023本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由山西省林業(yè)和草原局提出、組織實(shí)施和監(jiān)督檢查。山西省市場(chǎng)監(jiān)督管理局對(duì)標(biāo)準(zhǔn)的組織實(shí)施情況進(jìn)行監(jiān)督檢查。本文件由山西省林業(yè)和草原標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（SXS/TC09）歸口。本文件起草單位：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)、山西梅芝園藝有限公司。本文件主要起草人：賈民隆、曹冬梅、宋卓琴、梁崢、段九菊、李志娟、張超、鄭梅梅。1DB14/T2846—2023麗格海棠組培快繁技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了麗格海棠(Begonia×elatior)組培快繁的培養(yǎng)基配制、外植體的采集與處理、不定芽的誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、組培苗煉苗和移栽、移栽后管理、檢疫檢驗(yàn)及包裝運(yùn)輸?shù)纫蟆１疚募m用于麗格海棠組培苗培育。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/TLY/TNY/T83212306農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則林業(yè)植物產(chǎn)地檢疫技術(shù)規(guī)程花卉種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程3術(shù)語(yǔ)和定義本文件沒(méi)有需要界定的術(shù)語(yǔ)和定義。4培養(yǎng)基配制4.1基本培養(yǎng)基選用MS為基本培養(yǎng)基，培養(yǎng)基成分按照附錄A的規(guī)定執(zhí)行。4.2功能性培養(yǎng)基功能性培養(yǎng)基配方如下：——不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為1/2MS+1mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+20g/L蔗糖+6g/L瓊脂，pH5.8；——增殖培養(yǎng)基為1/2MS+1mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+150mg/L肌醇+20g/L蔗糖+6g/L瓊脂，pH5.8；——生根培養(yǎng)基為1/2MS+0.5mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+150mg/L肌醇+20g/L蔗糖+6g/L瓊脂，pH5.8。5外植體采集與處理5.1采集5.1.1時(shí)間宜在晴天上午9～11時(shí)采集。2DB14/T2846—20235.1.2方法選取生長(zhǎng)健壯、無(wú)病害的植株，剪取新鮮葉片，用濕潤(rùn)的毛巾或?yàn)V紙包裹，置于0℃~4℃的冰壺或冷藏室中保存?zhèn)溆?，時(shí)間不超過(guò)24h。5.2處理5.2.1預(yù)處理將葉片用自來(lái)水沖洗干凈，剪切成約2.5cm×2.5cm的小片，放入燒杯中，用0.7g/L洗潔精水做表面活性劑，置于0.05%NaClO中浸泡10min，用流動(dòng)自來(lái)水沖洗30min后蒸餾水清洗3～4次。將材料取出放置于無(wú)菌干燥濾紙上，吸干表面水分置于超凈臺(tái)上。5.2.2滅菌消毒用75%的酒精消毒2min，無(wú)菌水沖洗1次，在質(zhì)量體積百分比為0.1%HgCl2溶液中滅菌8min，無(wú)菌水沖洗4次，每次5min，無(wú)菌濾紙吸干表面水分，將消毒處理后的小片除去邊緣，用消毒刀片切成約1cm×1cm的切片備用。6不定芽誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)6.1培養(yǎng)條件溫度23℃~25℃,光照強(qiáng)度3000Lx，光照時(shí)間16h/d。6.2不定芽誘導(dǎo)在超凈工作臺(tái)上，將備好的切片放入不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，10d后不定芽生成。6.3增殖培養(yǎng)在超凈工作臺(tái)上，將備好的切片放入不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，10d后不定芽生成。7生根培養(yǎng)在超凈工作臺(tái)上，將繼代培養(yǎng)的叢生芽接種到生根培養(yǎng)基中，培養(yǎng)20d～25d。培養(yǎng)條件同6.1。8組培苗煉苗和移栽8.1煉苗移栽前，將培養(yǎng)容器置于室溫自然散射光下，閉口煉苗3d后開(kāi)口再煉苗3d。8.2移栽8.2.1基質(zhì)選配宜選用泥炭、珍珠巖混合基質(zhì)，體積配比為4：1。8.2.2根部處理3DB14/T2846—2023將根部培養(yǎng)基清洗干凈，用50%多菌靈可濕性粉劑600倍液對(duì)組培苗進(jìn)行蘸根處理。8.2.3栽植將處理好的組培苗移植到裝好基質(zhì)的穴盤(pán)中，扶直幼苗，輕壓根部。9移栽后管理9.1溫濕度溫度20℃~30℃,空氣濕度≥70%。9.2水肥栽后澆透定根水，隔2d～3d再澆1次，其后根據(jù)基質(zhì)干濕度控制澆水量。20d左右噴施1/1000氮磷鉀復(fù)合肥。9.3病蟲(chóng)害防治按照GB/T8321的規(guī)定執(zhí)行。10檢驗(yàn)檢疫10.1檢驗(yàn)栽2個(gè)月進(jìn)行苗木質(zhì)量檢驗(yàn)，當(dāng)苗高≥8cm，基徑≥0.4cm，可以出圃。10.2檢疫按照LY/T1829的規(guī)定執(zhí)行。11包裝運(yùn)輸11.1包裝宜用帶有透氣孔的紙箱包裝。在包裝箱內(nèi)外粘貼或者懸掛標(biāo)簽，注明品種、數(shù)量、規(guī)格、生產(chǎn)單位和日期等。11.2運(yùn)輸運(yùn)輸中溫度不應(yīng)超過(guò)30℃,避免日曬雨淋。4DB14/T2846—2023（規(guī)范性）MS基本培養(yǎng)基成分表A.1規(guī)定了MS基本培養(yǎng)基成分。表A.1MS基本培養(yǎng)基成分母液化合物數(shù)量定容量（ml）配制1L培養(yǎng)基需母液量（ml）ANH4NO3KNO3KH2PO4MgSO4.7H2O3.7CaCl2。2H2O4.4BFeSO40.5575Na2-EDTA0.754CKI0.0831Na2MoO4.2H2O0.025CoCl2。6H2O0.0025CuSO4.5H2O