(高清版)DB43∕T 1422-2018 漁業(yè)水體中孔雀石綠的測定 液相色譜-串聯(lián)質譜法

漁業(yè)水體中孔雀石綠的測定液相色譜-串聯(lián)質譜法Determinationofmalachi2018-04-04發(fā)布2018-07-04實施湖南省質量技術監(jiān)督局發(fā)布I前言 Ⅱ 12規(guī)范性引用文件 1 14試劑與材料 1 2 27測定步驟 28結果計算 3 4附錄A(資料性附錄)孔雀石綠、隱色孔雀石綠選擇反應監(jiān)測(SRM)色譜圖 5本標準按GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。請注意本標準某些內容可能涉及專利，本標準發(fā)布機構不承擔識別這些專利的責任。本標準由湖南省畜牧水產(chǎn)局提出并歸口。本標準起草單位：湖南省水產(chǎn)科學研究所、農(nóng)業(yè)部漁業(yè)產(chǎn)品質量監(jiān)督檢驗測試中心(長沙)、水產(chǎn)健康生產(chǎn)湖南省協(xié)同創(chuàng)新中心。本標準主要起草人：黃向榮、萬譯文、楊霄、何詠、陳湘藝、伍遠安、肖維、索紋紋、洪波、劉伶俐、黃華偉、曾春芳、李小玲、范葉。1漁業(yè)水體中孔雀石綠的測定液相色譜-串聯(lián)質譜法本標準規(guī)定了漁業(yè)水體中孔雀石綠的液相色譜-串聯(lián)質譜測定方法。本標準適用于我省漁業(yè)水體中孔雀石綠及其代謝物隱色孔雀石綠的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法SL187水質采樣技術規(guī)程3方法原理水樣中的目標物經(jīng)中性氧化鋁固相萃取柱富集和凈化后，用帶有電噴霧離子源的液相色譜一串聯(lián)質譜儀正離子模式測定，內標法定量。4試劑與材料本方法所用試劑除另有說明外，均為分析純；實驗用水應符合GB/T6682一級水的規(guī)定。4.1乙腈：色譜純。4.2甲酸：色譜純。4.3乙酸銨：色譜純。4.4乙酸銨溶液(2mmol/L):稱取0.075g乙酸銨，置于500mL容量瓶中，用水溶解定容至刻度。4.5標準品：孔雀石綠(MG)、隱色孔雀石綠(LMG)、同位素內標氘代孔雀石綠(D5-MG)、同位素內標氘代隱色孔雀石綠(D6-LMG),純度應大于99.0%4.6標準儲備溶液(100μg/mL):準確稱取適量的孔雀石綠、隱色孔雀石綠、氘代孔雀石綠、氘代隱色孔雀石綠標準品，用乙腈配制成濃度為100μg/mL的標準儲備溶液，-18℃避光保存。4.7混合標準溶液(100ng/mL):準確移取適量孔雀石綠和隱色孔雀石綠標準儲備溶液(4.6),用乙腈配制成100ng/mL混合標準溶液，-18℃避光保存。4.8混合內標標準溶液(100ng/mL):準確移取適量氘代孔雀石綠和氘代隱色孔雀石綠標準儲備溶液(4.6),用乙腈配制成100ng/mL混合內標標準溶液，-18℃避光保存。4.9混合標準工作溶液：根據(jù)需要，臨用時準確吸取一定量的混合標準溶液(4.7)和混合內標標準溶液(4.8),用乙腈+2mmol/L乙酸銨溶液(1+1)稀釋配制成氘代孔雀石綠和氘代隱色孔雀石綠濃度為2.00ng/mL以及孔雀石綠和隱色孔雀石綠濃度為0.05ng/mL、0.10ng/mL、0.50ng/mL、1.00ng/mL、5.00ng/mL的混合標準工作溶液。24.11中性氧化鋁柱：2g/6mL,使用前用5mL乙腈、5mL純水活化。5儀器與設備5.1液相色譜-串聯(lián)質譜聯(lián)用儀，配有電噴霧(ESI)離子源。5.2分析天平：感量0.00001g和0.001g。5.3旋轉蒸發(fā)儀。5.4渦旋混勻器。5.5固相萃取裝置。6采樣采樣按SL187的規(guī)定執(zhí)行。7測定步驟7.1樣品提取和凈化準確量取20mL水樣，置于50mL離心管中，用甲酸調節(jié)pH至3.0左右，加入混合內標標準溶液 (4.8)40μL,渦旋混合30s。將預處理的水樣在不抽真空的條件下全部轉移至已活化的中性氧化鋁固相萃取柱中，待水樣全部過完后，加入5mL純水進行淋洗并吹干，加入8mL乙腈進行洗脫，收集全部洗脫液，于45℃旋轉蒸發(fā)至近干，加入1mL乙腈和1mL乙酸銨溶液(4.4)后，漩渦混勻，過0.22μm微孔濾膜后，供液相色譜-串聯(lián)質譜測定。7.2測定7.2.1液相色譜參考條件流動相：A相：乙腈；B相：2mmol/L乙酸銨溶液(含體積分數(shù)為0.1%甲酸)。流動相梯度洗脫條件參見表1。表1流動相梯度洗脫條件時間(min)3離子的相對豐度比較，相對離子豐度的最大允許偏差參見表3。允許的相對偏差按7.2.1和7.2.2設置儀器條件，將混合標準工作溶液、樣品溶液、空白溶液、空石綠、隱色孔雀石綠混合標準溶液的選擇反應監(jiān)測(SRM)色譜圖參見附錄A中圖A.1,空白水樣的選擇反應監(jiān)測(SRM)色譜圖參見附錄A中圖A.2,空白水樣中添加孔雀石綠、隱色孔雀石綠標準溶液的8結果計算樣品中待測物含量按(1)計算，計算結果需扣除空白值，保留2位有效數(shù)字。5附錄A(資料性附錄)孔雀石綠、隱色孔雀石綠選擇反應監(jiān)測(SRM)色譜圖圖A.1孔雀石綠、隱色孔雀石綠混合標準溶液(0.10ng/mL)的選擇反應監(jiān)測(SRM)色譜圖上上6a圖A.2空白水樣的選擇反應監(jiān)測(SRM)色譜圖112231—孔雀石綠特征離子(m/z329>208)2—孔雀石綠特征離子(m/z