DB22T 2623.3-2017 黑木耳菌種區(qū)別性及真實性鑒定 第3部分：SRAP法　　_第1頁
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備案號：56324-2017DB22DB22/T2623.3—2017黑木耳菌種區(qū)別性及真實性鑒定VerificationofdistinctnessandgenuinenessforBlackwoodearspawnPart3:SRAP2017-06-12發(fā)布2017-08-12實施吉林省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I——DB22/T2623.1黑木耳菌種區(qū)別性及真實性鑒定第1部分對峙培——DB22/T2623.2黑木耳菌種區(qū)別性及真實性鑒定第2部分酯酶——DB22/T2623.3黑木耳菌種區(qū)別性及真實性鑒定第3部分SRA14.91mol/LTris-HCl(pH8.24.13氯仿異戊醇（24:1見附錄B.5。4.14酚-氯仿異戊醇（25:24:）：4.210.1%硝酸銀（AgNO3）溶液：見附36.2.570%乙醇（附錄B.7）漂上述比例將反應(yīng)液依次加入0.2mL離4膠聚合后拔出梳齒，用雙蒸水沖洗點樣孔，沖掉碎膠，將凝膠板安裝到電預(yù)電泳結(jié)束后，用移液器輕輕吹打膠面，除去氣泡和雜質(zhì)，每個點樣孔加樣8μLPCR擴增產(chǎn)物，檢菌種與對照菌種為不同菌種；若供檢菌種與對照菌種的PCR產(chǎn)物一致，再增加引物個數(shù)，進(jìn)行檢測驗5培養(yǎng)基制備6試劑的制備B.20.5mol/L乙二胺四乙酸二鈉鹽(EDTA-2Na)溶液稱取37.22g二水乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-Na·2H2O)溶解于160mL水，磁力攪拌，用NaOH調(diào)節(jié)溶液B.32%CTAB提取緩沖液稱取16.364g氯化鈉溶解于70mL去離子水中，加入4g溴代十六7量取5×TBE緩沖液200mL，30%丙8上游引物序列5’-3’下

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