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備案號：56317-2017DB22DB22/T2704—2017牛卵形巴貝斯蟲病檢測方法PCR法PCRassayfordetectionofbovineBabesiaovata2017-09-30發(fā)布2017-11-30實施吉林省質量技術監(jiān)督局發(fā)布I1GB/T6682—2008分析實驗室過人工合成的特異性寡核苷酸引物與單鏈DNA模板中的一段互補序列結合，形成部分雙鏈，再利用25’-GCCCGCAGGTCATCATAAAGT-3’5’-CATTTTGTGCCAGCGTTTTG-3’5.4.1PCR擴增儀,溫度范圍：4℃~100℃。3模板外其余組分及PCR反應條件與6.2相同。以未感染卵形巴貝斯蟲牛血液中提取的DNA作為標準陰性對將所有樣品、標準陽性對照、標準陰性對照及空白對照的PCR產物按編號加入到1%瓊脂凝膠板的各孔中，將凝膠的邊孔中加入標準分子量DNAMarker，將凝膠在150V恒定電壓下電泳30min后，凝膠成4A.1.2TAE緩沖液（50×)的配制見表A.2。表A.2TAE緩沖液（50×)配制5冷卻到50℃左右，加入10mg/m67標準對照見圖C
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