氯胺酮頭發(fā)檢測試劑盒（熒光免疫層析法）（CSZ2200345）

一、申請人名稱杭州萊和生物技術有限公司浙江省杭州市濱江區(qū)西興街道廟后王路425號1號樓1層、401-406室杭州市濱江區(qū)西興街道廟后王路425號1號樓1-3層、401-404室一、產(chǎn)品概述（一）產(chǎn)品主要組成成分試劑盒包含測試卡、毛發(fā)處理液，還包含ID卡、一次性滴管、干燥劑。（具體內(nèi)容詳見產(chǎn)品說明書）說明：不同批次試劑中ID卡、測試卡和毛發(fā)處理液不能夠互換使用，以免產(chǎn)生錯誤結(jié)果。（二）產(chǎn)品預期用途本產(chǎn)品用于體外定性檢測人體頭發(fā)樣本中最低檢出限為0.2ng/mg的氯胺酮。用于在有資質(zhì)的醫(yī)療機構(gòu)中對6個月內(nèi)是否有氯胺酮藥物濫用的初篩檢測。需要進一步確認及評價的樣本應采用靈敏度和特異性更高的檢測方法進行。（三）產(chǎn)品包裝規(guī)格卡型：20人份/盒，25人份/盒，40人份/盒，50人份/盒，（四）產(chǎn)品檢驗原理采用特異性的抗體抗原反應及免疫層析分析技術，通過抗體競爭結(jié)合特異性抗原和頭發(fā)中可能含有的被檢測物的原理。試紙條含有被事先固定于膜上測試區(qū)（KET）的特異性氯胺酮合成抗原，毛發(fā)處理液中含有抗特異性小鼠抗氯胺酮IgG單克隆抗體熒光標記物和兔IgG多克隆抗體熒光標記物。測試時，將待測樣本用毛發(fā)處理液充分裂解后加入試劑盒加樣孔（S）內(nèi)，隨之在毛細效應下向上層析。如樣本中的藥物濃度低于臨界值或者沒有待測藥物時，熒光標記的特異性抗體不能被樣本中的藥物全部結(jié)合，熒光標記的特異性抗體在層析過程中會被固定在測試區(qū)（T）上的特異性抗原結(jié)合，則在測試區(qū)(T)內(nèi)出現(xiàn)較強的熒光信號。如樣本中的藥物濃度高于臨界值時，熒光標記的特異性抗體被樣本中的藥物結(jié)合，在測試區(qū)內(nèi)（T）上的特異性抗原結(jié)合部分或沒有可以結(jié)合的特異性抗體，則測試區(qū)內(nèi)（T）出現(xiàn)微弱的熒光信號或者沒有熒光信號。無論待測樣本中是否存在待測藥物，層析過程都會將毛發(fā)處理液中的兔IgG多克隆抗體熒光標記物帶到質(zhì)控區(qū)內(nèi)（C）與山羊抗兔IgG多克隆抗體結(jié)合。通過干式熒光免疫分析儀讀數(shù)，可檢測出樣本中是否存在待檢測藥物。二、臨床前研究概述（一）主要原材料1.主要原材料的選擇本產(chǎn)品的主要原材料包括包被用氯胺酮抗原(KET-BSA)、熒光標記氯胺酮抗原單克隆抗體、羊抗兔IgG、熒光標記兔IgG、硝酸纖維素膜等。主要原材料均為外購。申請人對主要原材料進行了供應商的選擇，通過功能性試驗，篩選出合格供應商，制定了主要原材料的質(zhì)量標準并經(jīng)檢驗合格。2.企業(yè)參考品的設置情況申請人設計了完整的企業(yè)參考品，包括陽性參考品、陰性參考品、重復性參考品和最低檢出限參考品。企業(yè)參考品由未吸毒人員頭發(fā)、標準品制備而成。陽性參考品P1、P2均使用陰性頭發(fā)萃取液作為基質(zhì)，添加相應國家標準品制備而成；陰性參考品N1～N19、N21、N22涵蓋未吸毒人員頭發(fā)及使用陰性頭發(fā)萃取液作為基質(zhì)、添加相應標準品制備成的樣本，其中包含易引起干擾的結(jié)構(gòu)類似物、常見濫用藥物等的樣本；重復性參考品R1、R2均使用陰性頭發(fā)萃取液作為基質(zhì)，添加相應標準品制備而成；最低檢出限參考品C1～C3均使用陰性頭發(fā)萃取液作為基質(zhì)，添加相應標準品制備而成，（二）生產(chǎn)工藝及反應體系研究申請人對試劑盒反應體系的研究包括加樣體積的研究、毛發(fā)樣本量的研究、萃取時間的研究、反應時間的研究、毛發(fā)處理液體積的研究等。通過功能性試驗，最終確定了最佳的反應申請人根據(jù)試劑盒中試劑及組件的主要生產(chǎn)工藝的研究結(jié)果，確定了最佳的生產(chǎn)工藝。（三）分析性能評估本產(chǎn)品分析性能評估內(nèi)容主要包括：適用的樣本類型、與參考方法的比對、精密度、最低檢出限、分析特異性、高劑量鉤狀效應研究等。申請人提交了有效運行的質(zhì)量管理體系下生產(chǎn)的三批產(chǎn)品在適用機型上的性能評估資料。在適用的樣本類型研究中，申請人對氯胺酮陽性頭發(fā)樣本和陰性頭發(fā)樣本進行檢測，通過與參考方法的檢測結(jié)果進行比對，表明頭發(fā)樣本適用于本產(chǎn)品的檢測。在與參考方法的比對中，申請人采用三批成品試劑盒，對臨床陰性和陽性樣本進行檢測，同時還檢測了添加易引起交叉的類似物的樣本，結(jié)果與對比方法的符合率均大于90%，表明萊和試劑檢測結(jié)果與對比方法LC-MS/MS的一致性好。精密度研究是通過使用三批產(chǎn)品對企業(yè)陽性參考品（P1）、企業(yè)最低檢出限參考品（C1-C3）、企業(yè)陰性參考品（N1、N2、臨床樣本每份重復3次，以及由三位操作者在不同的試驗地點用不同批次的試劑分別對上述樣品進行連續(xù)20天的檢測。結(jié)果表明：本產(chǎn)品的重復性、再現(xiàn)性滿足CV≤15％的要求。在最低檢出限研究中，申請人采用三批成品試劑盒，檢測陰性頭發(fā)樣本和不同濃度梯度的氯胺酮標準品，分別重復檢測20次，將檢測結(jié)果均為陽性的最低濃度定為本產(chǎn)品的最低檢出限，并使用臨床樣本進行最低檢出限驗證。最終確定該產(chǎn)品的最低檢出限為0.2ng/mg氯胺酮。在分析特異性中，申請人采用三批成品試劑盒，對企業(yè)陰性參考品、陽性參考品進行檢測，每份樣本檢測10次，所有在干擾試驗中，分別使用陰性和陽性頭發(fā)樣本，對市面上主流的28種洗護美發(fā)產(chǎn)品、染發(fā)、燙發(fā)、漂發(fā)劑的干擾、內(nèi)源性物質(zhì)（如：頭皮屑、油脂）的干擾以及36種常見心血管治療藥物、降糖藥、抗生素、抗病毒和解熱鎮(zhèn)痛藥物的干擾進行研究。結(jié)果表明：國內(nèi)常見洗發(fā)美發(fā)用品，如潘婷、海飛絲、蜂花等洗發(fā)乳、護發(fā)素、發(fā)膠、發(fā)蠟、染發(fā)劑、燙發(fā)劑、漂發(fā)劑等對產(chǎn)品檢測結(jié)果均無影響，迷浪彈力素濃度大于3mg/ml時可能會導致結(jié)果陽性，染發(fā)、燙發(fā)、漂發(fā)劑、內(nèi)源性物質(zhì)及常見藥物對試劑盒的檢測無影響。在交叉反應研究中，申請人采用三批成品試劑盒，對常見的地西泮、苯巴比妥、曲馬多、美沙酮、普魯卡因、雷尼替丁、甲基安非他明、嗎啡、偽麻黃堿、苯甲酰愛康寧、加替沙星、四氫大麻酚酸、丁丙諾啡、納洛酮、苯丙胺、麻黃堿無交叉。在高劑量鉤狀效應研究中，申請人采用三批成品試劑盒，對一系列濃度的氯胺酮標準品進行檢測，每個濃度點檢測3次，結(jié)果表明：直至標準品濃度為1mg/mL，試劑檢測結(jié)果仍正常，未出現(xiàn)鉤狀效應。（四）陽性判斷值研究本研究分為陽性判斷值建立和驗證兩部分。陽性判斷值的建立是根據(jù)55例氯胺酮陽性頭發(fā)樣本、200例陰性頭發(fā)樣本的檢測結(jié)果，通過建立ROC曲線，來確定試劑盒的陽性判斷值。然后再使用三批成品試劑盒，檢測氯胺酮陽性頭發(fā)樣本和陰性頭發(fā)樣本，經(jīng)驗證，萊和試劑檢測結(jié)果與對比方法檢測結(jié)果具有高度一致性，本產(chǎn)品檢測氯胺酮的陽性判斷值為0.2ng/mg。（五）穩(wěn)定性研究申請人對產(chǎn)品的實時穩(wěn)定性、運輸穩(wěn)定性、開封穩(wěn)定性、及樣本穩(wěn)定性進行了研究。6、9、12、18、24、30、31個月，毛發(fā)處理液保存在2-8℃的條件下，每一時間節(jié)點使用陰、陽性對照品及陰、陽性頭發(fā)樣本，對試劑盒的性能進行檢測，結(jié)果表明產(chǎn)品測試卡和ID卡在4～30℃儲存的有效期為24個月，毛發(fā)處理液在2～8℃存放的有效期為24個月。此外，申請人對產(chǎn)品的運輸穩(wěn)定性、使用穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性分別進行了研究。結(jié)果顯示，產(chǎn)品的性能均能滿足產(chǎn)品說三、臨床評價概述申請人在武漢市精神衛(wèi)生中心、桂林市人民醫(yī)院、湖南省腦科醫(yī)院（湖南省第二人民醫(yī)院）共3家機構(gòu)完成了臨床試驗。采用試驗體外診斷試劑與液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）進行比較研究試驗，確認本產(chǎn)品的臨床性能。共納入病例709例，入組人群應為疑似藥物濫用人群，同時納入其他藥物濫用的交叉反應病例以及服用常見藥物的潛在干擾病例，樣本類型為頭發(fā)。其中，353例陽性樣本，356例陰性樣本。試驗結(jié)果顯示，試驗體外診斷試劑與對比方法對于氯胺酮檢測的陽性符合率為98.9%（95%CI：97.1%，99.7%），陰性符合率為98.3%99.3%）。以上結(jié)果顯示兩者檢測結(jié)果之間具有良好的一致性。綜上所述，申報產(chǎn)品的臨床試驗資料符合技術審評要求。四、產(chǎn)品受益風險判定根據(jù)YY/T0316-2016《醫(yī)療器械風險管理對醫(yī)療器械的應用》對氯胺酮頭發(fā)檢測試劑盒（熒光免疫層析法）進行產(chǎn)品受益風險分析。本產(chǎn)品用于體外定性檢測人體頭發(fā)樣本中最低檢出限為0.2ng/mg的氯胺酮，用于氯胺酮的初篩檢測，為臨床提供了一種更多的氯胺酮初篩檢測方法。（二）風險評估申請人對已知危險（源）進行風險評價，按照風險可接受準則判斷每個危險（源）的風險是否達到可接受水平，對合理可行降低的風險、不經(jīng)過風險/收益分析既判定為不可接受的風險采取控制措施，并對具體措施進行實施驗證，同時重新對采取措施后的風險進行估計，確認其風險水平是否可接受。為保證產(chǎn)品使用安全，基于對主要剩余風險的規(guī)避，需要在產(chǎn)品說明書中提示以下信息：（1）本產(chǎn)品僅用于在有資質(zhì)的醫(yī)療機構(gòu)中對6個月內(nèi)是否有氯胺酮藥物濫用的初篩檢測。需要進一步確認及評價的樣本應采用靈敏度和特異性更高的檢測方法進行。（2）產(chǎn)品說明書中介紹了該產(chǎn)品檢驗方法的局限性及使用本申報項目為境內(nèi)第三類體外診斷試劑產(chǎn)品注冊。申請人的注冊申報資料符合現(xiàn)行要求，依據(jù)《醫(yī)療器械監(jiān)督管理條例》（國務院令第739號）、《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》（國家市場監(jiān)督管理總局令第48號）等相關醫(yī)療器械法規(guī)與配套規(guī)章，經(jīng)系統(tǒng)評價后，建議準予注冊。附件：產(chǎn)品說明書【產(chǎn)品名稱】【包裝規(guī)格】場所濫用日趨嚴重，嚴重威脅健康。氯胺酮通常的使用方式為香煙吸服、鼻吸、靜脈注射或?qū)⒎勰┤芙怙嬘?，服用后會產(chǎn)生意識與感覺的分離狀態(tài)，導致神經(jīng)中毒反毒品進入人體后在血脂酶的作用下代謝，進入肝臟后進一步代謝，有相當量的液中的毒品基本代謝干凈，頭發(fā)相比體液分析有更多的優(yōu)點：樣本收集容易，不受【檢驗原理】采用高度特異性的抗體抗原反應及免疫層析分析技術，通過抗體競爭結(jié)合特異性抗原和頭發(fā)中可能含有的被檢測物的原理。試紙條含有被事先固定于膜上測試區(qū)（KET）的特異性氯胺酮合成抗原，毛發(fā)處理液中含有抗特異性小鼠抗氯胺酮IgG在毛細效應下向上層析。如樣本中的藥物濃度低于臨界值或者沒有待測藥物時，熒光標記的特異性抗體不能被樣本中的藥物全部結(jié)合，熒光標記的特異性抗體在層析過程中會被固定在測試區(qū)（T）上的特異性抗原結(jié)合，則在測試區(qū)(T)內(nèi)出現(xiàn)較強的熒光信號。如樣本中的藥物濃度高于臨界值時，熒光標記的特異性抗體被樣本中的【主要組成成分】吸水紙、塑料片材及其他試紙條支持物；硝酸纖維素膜上包被有合成氯【儲存條件及有效期】測試卡于4～30℃避光保存，禁止冷凍，有效期24個月；毛發(fā)處理液于2～8℃檢測前先將檢測試劑、冷藏的毛發(fā)處理液、ID卡和待測樣本恢復到室溫【適用儀器】【樣本要求】通風、潔凈的環(huán)境中保存，不得和易揮發(fā)的試劑和藥品在同一房間內(nèi)保存，保存時1.因枕部的頭發(fā)生長速率變化小，處于生長期的頭發(fā)多，且較少受到2.所采頭發(fā)平放于清潔紙上，標記發(fā)根位置及來源部位，以便對檢測結(jié)果進行3.采集不同人員頭發(fā)時，應當分別采集，獨立包裝，統(tǒng)一編號，并及時清理采【檢驗方法】使用前請仔細閱讀本使用說明書以及杭州萊和生物技術有限公司的干式熒光免①標準測試：試劑卡加樣后立即將插入儀器中，然后點擊“測試”按鈕，系統(tǒng)自注意：本產(chǎn)品只用于初篩檢測使用，檢測結(jié)果不能作為確診依據(jù)，必須使用第二種分析方法以確定結(jié)果，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）是目前較好的確認【陽性判斷值】檢驗方法》（SF/ZJD0107025-2018）的描述：非吸毒人群：毛發(fā)中氯胺酮的濃度<【檢驗結(jié)果的解釋】3.試劑及其組件僅適用于杭州萊和生物技術有限公司生產(chǎn)的干式熒光免疫分析儀，6.檢測結(jié)果為陰性不代表被測者沒有氯胺酮藥物濫用，可能因為被測者藥物濫用時【檢驗方法的局限性】2.本試劑只用于初篩檢測使用，檢測結(jié)果不能作為確認藥物濫用的依據(jù)。為確保結(jié)【產(chǎn)品性能指標】3、精密度：使用三批試劑，對陰、陽性及最低檢出限參考伐他汀、阿司匹林、尿激酶、維拉帕米、阿托品、去甲腎上腺素、瑞格列萘、胰島素、格列本脲、阿卡波糖、鹽酸二甲雙胍、羅格列酮、青霉素鈉、螺旋霉素、鏈霉素、頭孢菌素、阿奇霉素、林可霉素、兩性霉素B、放線菌素沙星、無環(huán)蔦苷、金剛烷胺、左旋咪唑、轉(zhuǎn)移因子、對乙酰氨基酚、吲哚美辛、布洛芬、美洛昔康、保泰松，這些常見心血管治療藥物、降糖藥、抗生素、抗病毒和國內(nèi)常見洗發(fā)美發(fā)用品，如潘婷、多芬、海飛絲、蜂花等洗發(fā)乳、護發(fā)素、發(fā)膠、發(fā)蠟等對產(chǎn)品檢測結(jié)果均無