DB32T 1599-2010 油菜菌核病菌對(duì)苯并咪唑類殺菌劑抗藥性檢測(cè)技術(shù)規(guī)程　　_第1頁(yè)
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DB32江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn)DB32/T1599—2010油菜菌核病菌對(duì)苯并咪唑類殺菌劑抗藥性檢測(cè)技術(shù)規(guī)程TechnicalSpecificationforDetectingResistanceofSclerotiniasclerotiorumtoBenzimidazoleFungicide2010-06-23發(fā)布2010-08-23實(shí)施江蘇省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布1NY/T1667.1～1667.8-2008農(nóng)藥登記所檢測(cè)菌株對(duì)苯并咪唑類殺菌劑的敏感性參數(shù)與其野生敏感菌株對(duì)同一殺有效中濃度MedianEffectiveConcen培養(yǎng)皿(Φ90mm），三角瓶，高壓滅菌鍋，超凈工作臺(tái)，高溫恒溫箱（50℃~300℃之間），恒溫培養(yǎng)箱（使溫度保持在15℃~35℃之間）、顯微鏡、高壓滅菌鍋、鋁鍋、量筒、試管、移液管、“L”24.2.1馬鈴薯蔗糖瓊脂培養(yǎng)基(PotatoSucroseAga15～20g，再煮沸至瓊脂完全溶解，再經(jīng)過(guò)雙層紗布過(guò)濾后用清水定溶至1000m4.2.2水瓊脂培養(yǎng)基(Water50mg/L，先用滅菌水分別將氯霉素和鏈霉素溶解成5000mg/L溶液，將PSA培養(yǎng)基加熱溶解后，在100mL培養(yǎng)基中加入多菌靈母液后，待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時(shí)，加入氯霉素和鏈霉素母液各1mL，充分搖勻在油菜成熟期，按不同檢測(cè)目的，在用藥田塊隨機(jī)采集油菜病株上的菌核，每株油菜病株重采集1個(gè)菌核，病株間距30m以上，每塊田采30～40個(gè)菌核，每個(gè)地點(diǎn)采集10～20塊油菜田，每塊田集中器制取4mm直徑的菌絲塊，分別移至含多菌靈濃度藥劑抑菌率（%）=對(duì)照菌落直徑-藥劑處理菌落直徑）/對(duì)照菌落直用上面方程計(jì)算出各菌株菌絲生長(zhǎng)抑制50%時(shí)的多菌靈濃度，朝上，每菌株重復(fù)3皿。在22℃下培養(yǎng)2d，觀察在各濃度平板上是否有新的菌絲體長(zhǎng)出。計(jì)算藥抑制菌絲生長(zhǎng)的最低抑制濃度（MIC值）。經(jīng)過(guò)多年研究，多菌靈完全抑制油菜菌核病菌菌絲生長(zhǎng)的最低抗菌株從田間

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