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DB32江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn)DB32/T1599—2010油菜菌核病菌對苯并咪唑類殺菌劑抗藥性檢測技術(shù)規(guī)程TechnicalSpecificationforDetectingResistanceofSclerotiniasclerotiorumtoBenzimidazoleFungicide2010-06-23發(fā)布2010-08-23實施江蘇省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布1NY/T1667.1~1667.8-2008農(nóng)藥登記所檢測菌株對苯并咪唑類殺菌劑的敏感性參數(shù)與其野生敏感菌株對同一殺有效中濃度MedianEffectiveConcen培養(yǎng)皿(Φ90mm),三角瓶,高壓滅菌鍋,超凈工作臺,高溫恒溫箱(50℃~300℃之間),恒溫培養(yǎng)箱(使溫度保持在15℃~35℃之間)、顯微鏡、高壓滅菌鍋、鋁鍋、量筒、試管、移液管、“L”24.2.1馬鈴薯蔗糖瓊脂培養(yǎng)基(PotatoSucroseAga15~20g,再煮沸至瓊脂完全溶解,再經(jīng)過雙層紗布過濾后用清水定溶至1000m4.2.2水瓊脂培養(yǎng)基(Water50mg/L,先用滅菌水分別將氯霉素和鏈霉素溶解成5000mg/L溶液,將PSA培養(yǎng)基加熱溶解后,在100mL培養(yǎng)基中加入多菌靈母液后,待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時,加入氯霉素和鏈霉素母液各1mL,充分搖勻在油菜成熟期,按不同檢測目的,在用藥田塊隨機采集油菜病株上的菌核,每株油菜病株重采集1個菌核,病株間距30m以上,每塊田采30~40個菌核,每個地點采集10~20塊油菜田,每塊田集中器制取4mm直徑的菌絲塊,分別移至含多菌靈濃度藥劑抑菌率(%)=對照菌落直徑-藥劑處理菌落直徑)/對照菌落直用上面方程計算出各菌株菌絲生長抑制50%時的多菌靈濃度,朝上,每菌株重復(fù)3皿。在22℃下培養(yǎng)2d,觀察在各濃度平板上是否有新的菌絲體長出。計算藥抑制菌絲生長的最低抑制濃度(MIC值)。經(jīng)過多年研究,多菌靈完全抑制油菜菌核病菌菌絲生長的最低抗菌株從田間
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