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DBS江蘇省衛(wèi)生和計劃生育委員會發(fā)布I1食品安全地方標準嬰幼兒配方乳粉中α-乳白蛋白的測定凝膠色譜法本標準規(guī)定了用凝膠色譜法測定嬰幼兒配方乳粉中α-乳白蛋白2.1α-乳白蛋白(α-Lac2.2β-乳球蛋白(β-Lactoglobulin)是指乳以鹽酸胍為變性劑,以2-巰基乙醇為還原劑,斷開蛋白質(zhì)中的硫-硫(S-S)4.2.1磷酸二氫鈉(NaH2PO4)。4.2.2磷酸氫二鈉(Na2HPO4)。4.2.3乙二胺四乙酸(EDTA,C10H16N2O84.2.6鹽酸胍(CH6ClN3)。4.3試劑配制4.3.1緩沖溶液有必要,用氫氧化鈉(4.2.4)或鹽酸(4.2.5)將pH調(diào)節(jié)到7.5±0.1。將溶液轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶,用4.3.2流動相稱取573g鹽酸胍,置于1000mL廣口錐形瓶中,添加100mL緩沖溶液(4.3.1),再用水將該溶液稀釋到約900mL,同時不停攪拌,用氫氧化鈉溶液(4.2.4將pH調(diào)節(jié)到7.5±0.1。將溶液轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中,并用水定容至刻度。過0.45μm濾4.3.3標準溶液配制準確稱取25mg(精確到0.1mg)α-乳白蛋白標準品和25mg(精確到0.1mg)β-乳球蛋白標準品,置分別移取混合標準儲備液0.05mL、0.1mL、0.5mL、1mL、2mL至10m至刻度,配成濃度為0.0125、0.025、0.125、注2:標準溶液中加入β-乳球蛋白是為確保β-乳球蛋白和α-乳5.1高效液相色譜儀(配泵頭清洗裝置、紫外檢測器或二極管矩陣根據(jù)樣品的蛋白質(zhì)含量,稱取含有10mg蛋白質(zhì)的乳粉樣品(精確到0.1mg),置于10mL刻度試管中,加入8mL流動相,使樣品完全溶解,如需超聲應(yīng)保持樣品溫度不高于30℃,G3000SWXL(7.8mm×300mm)或相當者;使用時將236.2.4檢測器:紫外檢測器或二極管矩陣檢測器,檢測X——試樣中α-乳白蛋白(以牛α-乳白蛋白計)的含量m——試樣質(zhì)量,g。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的
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