第二章可見紫外分光光法(春)

第二章光譜分析法概論主講教師高金波當前1頁，共111頁，星期日。第一頁，共一百一十一頁。本章主要介紹:光學分析法定義光學分析的三個主要過程電磁輻射和電磁波譜電磁輻射與物質的相互作用光學分析法的分類當前2頁，共111頁，星期日。第二頁，共一百一十一頁。

基于物質發(fā)射的電磁輻射或物質與電磁輻射相互作用后產(chǎn)生的輻射信號或發(fā)生的信號變化來測定物質的性質、含量和結構的一類儀器分析法。一、定義（光學分析法）當前3頁，共111頁，星期日。第三頁，共一百一十一頁。1.

能源（光源）提供能量2.能量與物質相互作用3.產(chǎn)生被檢測的信號二、光學分析的三個主要過程當前4頁，共111頁，星期日。第四頁，共一百一十一頁。1.電磁輻射—電磁波（光是其中的一部分）

它是一種以極高的速度傳播的光子流在傳播過程中不需要任何的物質作為傳播媒介

它具有波動性和粒子性。三、電磁輻射和電磁波譜當前5頁，共111頁，星期日。第五頁，共一百一十一頁。(1)波動性表現(xiàn)在:

每種電磁輻射都有確定不變的頻率(2)粒子性表現(xiàn)在:

每個粒子都具有能量E當前6頁，共111頁，星期日。第六頁，共一百一十一頁。2.電磁波譜:電磁輻射按波長順序排列而成γ射線→x射線→紫外光→可見光→紅外光→微波→無線電波

高能輻射區(qū)γ射線能量最高，可以引起核能級躍遷χ射線可以引起內層電子能級的躍遷光學光譜區(qū)紫外光可以引起原子和分子外層可見光電子能級的躍遷紅外光可以引起分子振動和轉動能級的躍遷波譜區(qū)微波分子轉動能級及電子自旋能級躍遷無線電波以引起原子核自旋能級的躍遷五、光學分析法分類當前7頁，共111頁，星期日。第七頁，共一百一十一頁。四、電磁輻射與物質的相互作用五、光學分析法分類當前8頁，共111頁，星期日。第八頁，共一百一十一頁。光學分析法光譜分析法非光譜分析法原子光譜分析法分子光譜分析法原子吸收光譜原子發(fā)射光譜原子熒光光譜X射線熒光光譜折射法圓二色性法X射線衍射法干涉法旋光法紫外光譜法紅外光譜法分子熒光光譜法分子磷光光譜法核磁共振波譜法當前9頁，共111頁，星期日。第九頁，共一百一十一頁。光譜分析法吸收光譜法發(fā)射光譜法原子光譜法分子光譜法原子發(fā)射原子吸收原子熒光X射線熒光原子吸收紫外可見紅外可見核磁共振紫外可見紅外可見分子熒光分子磷光核磁共振化學發(fā)光原子發(fā)射原子熒光分子熒光分子磷光X射線熒光化學發(fā)光當前10頁，共111頁，星期日。第十頁，共一百一十一頁。第十章可見-紫外吸收光度法可見光區(qū)和紫外光區(qū)的劃分:200~400nm為紫外光區(qū)400~760nm為可見光區(qū)可見紫外分光光度法的定義根據(jù)物質的分子對200~760nm這一光區(qū)電磁輻射的吸收特性進行的物質成分分析與分子結構分析的方法當前11頁，共111頁，星期日。第十一頁，共一百一十一頁。第一節(jié)紫外-可見分光光度法

的基本原理和概念轉動能級差0.005~0.05V振動能級差0.05~1eV外層價電子能級差1~20eV電子光譜250~25m25000~1250nm1250~60nm吸收光譜分子光譜當前12頁，共111頁，星期日。第十二頁，共一百一十一頁。一、電子躍遷類型預備知識：價電子：σ電子→飽和的化合物或基團

π電子→不飽和的化合物或基團n電子→含有雜質原子的基團軌道：電子圍繞原子或分子運動的幾率

軌道不同，電子所具有能量不同當前13頁，共111頁，星期日。第十三頁，共一百一十一頁。圖示b1SH1SH*

成鍵軌道與反鍵軌道：當前14頁，共111頁，星期日。第十四頁，共一百一十一頁。一、電子躍遷類型：1.σ→σ*躍遷：飽和烴（甲烷，乙烷）E很高，λ<150nm（遠紫外區(qū)）2.π→π*躍遷：不飽和基團（C＝C，C＝O）E較小，λ~200nm體系共軛，E更小，λ更大當前15頁，共111頁，星期日。第十五頁，共一百一十一頁。一、電子躍遷類型：3.n→π*躍遷：含雜原子不飽和基團（C≡NC＝O）E最小，λ200~400nm（近紫外區(qū)）4.n→σ*躍遷：含雜原子飽和基團（—OH，—NH2，—X，—S）E較大，λ150~250nm按能量大?。害摇?>n→σ*>π→π*>n→π*當前16頁，共111頁，星期日。第十六頁，共一百一十一頁。續(xù)前結論：紫外光譜電子躍遷類型：n→π*躍遷π→π*躍遷飽和化合物無紫外吸收電子躍遷類型與分子結構及存在基團有密切聯(lián)系根據(jù)分子結構→推測可能產(chǎn)生的電子躍遷類型；根據(jù)吸收譜帶波長和電子躍遷類型→推測分子中可能存在的基團（分子結構鑒定）當前17頁，共111頁，星期日。第十七頁，共一百一十一頁。二、紫外-可見法相關的基本概念1．吸收光譜（吸收曲線）：不同波長光對樣品作用不同，吸收強度不同

以波長λ—吸光度A作圖，所描繪的曲線為~2．吸收光譜特征：定性依據(jù)吸收峰→λ最大吸收谷→λ最小肩峰→λsh末端吸收→靠近200nm的呈現(xiàn)當前18頁，共111頁，星期日。第十八頁，共一百一十一頁。當前7頁，共111頁，星期日。C=1/2C0，T=T01/2=；C與T的關系(指數(shù)關系)選定的兩個波長下干擾組分具有等吸收點當前59頁，共111頁，星期日。第十頁，共一百一十一頁。3．在同一波長下，各組分吸光度具有加和性光學分析的三個主要過程第七頁，共一百一十一頁。溶劑極性↑，苯環(huán)精細結構消失第七十二頁，共一百一十一頁。第八十九頁，共一百一十一頁。軌道不同，電子所具有能量不同非單色光是指含有二種或兩種以上波長的光第七十頁，共一百一十一頁。圖示當前19頁，共111頁，星期日。第十九頁，共一百一十一頁。3．生色團（發(fā)色團）：

能吸收紫外-可見光的基團有機化合物：具有不飽和鍵和未成對電子的基團具n電子和π電子的基團產(chǎn)生n→π*躍遷和π→π*躍遷E較低例：C＝C；C＝O；C＝N；—N＝N—，—NO2等當前20頁，共111頁，星期日。第二十頁，共一百一十一頁。續(xù)前本身無紫外吸收，但可以使生色團吸收峰加強，同時使吸收峰長移的基團有機物：連有雜原子的飽和基團例：—OH，—OR，—NH2，—SR，—X4．助色團當前21頁，共111頁，星期日。第二十一頁，共一百一十一頁。續(xù)前5．紅移和藍移：

由于化合物結構變化（共軛、引入助色團取代基）或采用不同溶劑后吸收峰位置向長波方向的移動，叫紅移（長移）吸收峰位置向短波方向移動，叫藍移（紫移，短移）當前22頁，共111頁，星期日。第二十二頁，共一百一十一頁。續(xù)前6．增色效應和減色效應

結構發(fā)生變化時

增色效應：吸收強度增強的效應

減色效應：吸收強度減小的效應7．強帶和弱帶：

ε>104→強帶ε<102→弱帶當前23頁，共111頁，星期日。第二十三頁，共一百一十一頁。三、吸收帶類型和分子結構的關系1．R帶：由含雜原子的不飽和基團的

n→π*躍遷產(chǎn)生C＝O；C＝N；—N＝N—，—NO,—NO2特點：E小，λmax250~400nm，ε最大<100溶劑極性↑，λ最大↓→藍移（短移）吸收峰的位置當前24頁，共111頁，星期日。第二十四頁，共一百一十一頁。三、吸收帶類型和分子結構的關系2．K帶：由共軛雙鍵的π→π*躍遷產(chǎn)生特點：λ最大>200nm，ε最大>104(—CH＝CH—)n，—CH＝C—CO—共軛體系增長，λ最大↑→紅移，ε最大↑溶劑極性↑，λ最大↑→紅移當前25頁，共111頁，星期日。第二十五頁，共一百一十一頁。續(xù)前3．B帶：由π→π*躍遷產(chǎn)生芳香族化合物的主要特征吸收帶λ最大=254nm，寬帶，具有精細結構；ε最大=200極性溶劑中，或苯環(huán)連有取代基，其精細結構消失三、吸收帶類型和分子結構的關系精細結構當前26頁，共111頁，星期日。第二十六頁，共一百一十一頁。圖示當前27頁，共111頁，星期日。第二十七頁，共一百一十一頁。續(xù)前4．E帶：由苯環(huán)的環(huán)形共軛系統(tǒng)中的π→π*躍遷產(chǎn)生的芳香族化合物的特征吸收帶

見圖E1180nmε最大>104（常觀察不到）E2200nmε最大=7000強吸收苯環(huán)有發(fā)色團取代且與苯環(huán)共軛時，E2帶與K帶合并一起紅移（長移）。三、吸收帶類型和分子結構的關系當前28頁，共111頁，星期日。第二十八頁，共一百一十一頁。圖示當前29頁，共111頁，星期日。第二十九頁，共一百一十一頁。圖示當前30頁，共111頁，星期日。第三十頁，共一百一十一頁。*下列化合物K帶的吸收波長最大的是：A：H2C=CH-CH=CH2；B：H2C=CH2；C：H2C=CH-CH=CH-CH=CH2；D：H2C=CH-C=OR帶是由_________躍遷引起，其特征是波長_______。K帶是由_________躍遷引起，其特征是波長_______。*丙酮能吸收280nm，187nm和154nm的紫外光，其中最長波長的吸收所對應的電子躍遷類型為___，該吸收帶為___帶。*符合比耳定律的有色溶液稀釋時，其吸收曲線的最大吸收峰A．上移；B．下移；C．左移；D．右移*在分光光度法中，吸收曲線指的是：A.A一c曲線；B.A一λ曲線；C.T一c曲線；D.A一T曲線練習：當前31頁，共111頁，星期日。第三十一頁，共一百一十一頁。續(xù)前1．溶劑效應：對λ最大影響：

n-π*躍遷：溶劑極性↑，λ最大↓藍移π-π*躍遷：溶劑極性↑，λ最大↑紅移見圖解對吸收光譜精細結構影響

溶劑極性↑，苯環(huán)精細結構消失溶劑的選擇——極性；純度高；截止波長<λ最大2．pH值的影響：影響物質存在型體，影響吸收波長四、影響吸收帶位置的因素：當前32頁，共111頁，星期日。第三十二頁，共一百一十一頁。圖示躍遷類型 正己烷氯仿 甲醇 水

→

*230 238 237 243n→

* 329 315 309 305當前33頁，共111頁，星期日。第三十三頁，共一百一十一頁。五、郎伯比爾定律假設一束平行單色光通過一個吸光物體（一）lambert-beer當前34頁，共111頁，星期日。第三十四頁，共一百一十一頁。1．Lamber-beer定律的適用條件（前提）

入射光為單色光溶液是稀溶液2．該定律適用于固體、液體和氣體樣品3．在同一波長下，各組分吸光度具有加和性

應用：多組分測定討論：當前35頁，共111頁，星期日。第三十五頁，共一百一十一頁。討論:4.C與A的關系(成正比關系)

C=C0，A=A0；C=2C0，A=2A0；C=1/2C0，A=1/2A0；5.C與T的關系(指數(shù)關系)C=C0，T=T0；C=2C0，T=T02；C=1/2C0，T=T01/2=；當前36頁，共111頁，星期日。第三十六頁，共一百一十一頁。(二)吸光系數(shù)****1.物理意義：

λ一定，單位濃度、單位厚度的吸光度討論：1）E=f（組分性質，溫度，溶劑，λ）當組分性質,溫度和溶劑一定，E=f（λ）2）不同物質在同一波長下E可能不同（選擇性吸收-）同一物質在不同波長下,E一定不同3）E↑，物質對光吸收能力↑,測定靈敏度↑4）定性、定量依據(jù)當前37頁，共111頁，星期日。第三十七頁，共一百一十一頁。續(xù)前2．兩種表示法：

1）摩爾吸光系數(shù)ε：在一定λ下，C=1mol/L，L=1cm時的吸光度2）百分含量吸光系數(shù)/比吸光系數(shù)：在一定λ下，C=1g/100ml，L=1cm時的吸光度3）兩者關系3.吸光系數(shù)能否直接測得？不能？？當前38頁，共111頁，星期日。第三十八頁，共一百一十一頁。六、偏離比爾定律的因素（一）化學因素（二）光學因素

1.非單色光2.非平行光3.雜散光4.散射和反射的影響當前39頁，共111頁，星期日。第三十九頁，共一百一十一頁。（一）化學因素Beer定律適用的另一個前提——稀溶液因濃度的改變使C與A關系偏離Beer定律離解、聚合（締合）、與溶劑作用當前40頁，共111頁，星期日。第四十頁，共一百一十一頁。（二）光學因素1．非單色光的影響非單色光是指含有二種或兩種以上波長的光當前41頁，共111頁，星期日。第四十一頁，共一百一十一頁。續(xù)前當前42頁，共111頁，星期日。第四十二頁，共一百一十一頁。續(xù)前討論：

入射光的譜帶寬度嚴重影響吸光系數(shù)和吸收光譜形狀為什么測定波長常選擇在吸收峰處？E1>E2，A值減少，產(chǎn)生負誤差;E2>E1，A值增大，產(chǎn)生誤差當前43頁，共111頁，星期日。第四十三頁，共一百一十一頁。續(xù)前2．雜散光的影響：雜散光是指從單色器分出的光不在入射光譜帶寬度范圍內，與所選波長相距較遠雜散光來源：儀器本身缺陷；光學元件污染造成雜散光可使吸收光譜變形，吸光度變值3．反射光和散色光的影響：一般可用空白對比校正消除4．非平行光的影響：比色池要垂直放置，不同儀器測定A值不同。當前44頁，共111頁，星期日。第四十四頁，共一百一十一頁。四、透光率的測量誤差——ΔT影響測定結果的相對誤差兩個因素：T和ΔTΔT影響因素：儀器噪音

1）暗噪音2）訊號噪音當前45頁，共111頁，星期日。第四十五頁，共一百一十一頁。續(xù)前1）暗噪音——與檢測器和放大電路不確切性有關與光訊號無關當前46頁，共111頁，星期日。第四十六頁，共一百一十一頁。續(xù)前2）訊號噪音——與光訊號有關表明測量誤差較小的范圍一直可延至較高吸光度區(qū)，對測定有利當前47頁，共111頁，星期日。第四十七頁，共一百一十一頁。第二節(jié)可見-紫外分光光度計分光光度計構成的主要部件分光光度計的類型：當前48頁，共111頁，星期日。第四十八頁，共一百一十一頁。第二節(jié)紫外-可見分光光度計光路示意圖0.575光源單色器吸收池檢測器放大顯示器當前49頁，共111頁，星期日。第四十九頁，共一百一十一頁。第二節(jié)紫外-可見分光光度計一、主要部件1.光源：用于提供足夠強度和穩(wěn)定的連續(xù)光譜。分光光度計中常用的光源有熱輻射光源(鎢燈)和氣體放電光源(氫燈)兩類。。（1）鎢燈或鹵鎢燈

在350nm~2500nm連續(xù)用于可見光區(qū)（2）氫燈或氘燈

在150nm~400nm連續(xù)用于紫外光區(qū)配穩(wěn)壓器配穩(wěn)流器當前50頁，共111頁，星期日。第五十頁，共一百一十一頁。第二節(jié)紫外-可見分光光度計2.單色器：單色器是把復合光分散后，能獲得單色光的裝置。

五個部分作用：將光源發(fā)出的復色光按波長順序分離成單色光。組成：狹縫2、準直鏡2、色散元件(棱鏡、光柵)。當前51頁，共111頁，星期日。第五十一頁，共一百一十一頁。單色器光路示意圖入射狹縫準直透鏡棱鏡聚焦透鏡出射狹縫白光紅紫λ1λ2800600500400單色器的核心部分是色散元件，起分光的作用。當前52頁，共111頁，星期日。第五十二頁，共一百一十一頁。單色器光路示意圖當前53頁，共111頁，星期日。第五十三頁，共一百一十一頁。3．吸收池：玻璃——能吸收紫外線光，僅適用于可見光區(qū)石英——不能吸收紫外光，適用于紫外和可見光區(qū)要求：匹配性（對光的吸收和反射應一致）當前54頁，共111頁，星期日。第五十四頁，共一百一十一頁。4．檢測器：將光信號轉變?yōu)殡娦盘柕难b置光電池光電管光電倍增管二極管陣列檢測器5．記錄裝置：訊號處理和顯示系統(tǒng)當前55頁，共111頁，星期日。第五十五頁，共一百一十一頁。

1、光電池：用半導體材料制成的，用得最多的是硒光電池。其結構和作用原理為：硒光電池當前56頁，共111頁，星期日。第五十六頁，共一百一十一頁。光電管：它是在抽成真空或充有惰性氣體的玻璃或石英泡內裝上2個電極構成，其結構如圖：2.光電管1234當前57頁，共111頁，星期日。第五十七頁，共一百一十一頁。紅敏管625-1000nm藍敏管200-625nm光電管當前58頁，共111頁，星期日。第五十八頁，共一百一十一頁。光電倍增管：它是一個非常靈敏的光電器件，可以把微弱的光轉換成電流其靈敏度比前2種都要高得多。它是利用九次電子發(fā)射以放大光電流，3.光電倍增管：當前59頁，共111頁，星期日。第五十九頁，共一百一十一頁。光電倍增管1個光電子可產(chǎn)生106～107個電子當前60頁，共111頁，星期日。第六十頁，共一百一十一頁。訊號處理及顯示系統(tǒng)放大器表頭顯示熒屏顯示數(shù)字顯示當前61頁，共111頁，星期日。第六十一頁，共一百一十一頁。二、分光光度計的類型：當前62頁，共111頁，星期日。第六十二頁，共一百一十一頁。二、分光光度計的類型：（一）單光束分光光度計：0.575光源單色器吸收池檢測器顯示當前63頁，共111頁，星期日。第六十三頁，共一百一十一頁。特點：使用時來回拉動吸收池

→移動誤差對光源要求高比色池配對單光束分光光度計（751）：當前64頁，共111頁，星期日。第六十四頁，共一百一十一頁。（二）單波長雙光束分光光度計比值光源單色器吸收池檢測器顯示光束分裂器當前65頁，共111頁，星期日。第六十五頁，共一百一十一頁。雙光束分光光度計：特點：不用拉動吸收池，可以減小移動誤差對光源要求不高可以自動掃描吸收光譜當前66頁，共111頁，星期日。第六十六頁，共一百一十一頁。光源單色器單色器檢測器切光器狹縫吸收池（三）雙光束雙波長分光光度計：當前67頁，共111頁，星期日。第六十七頁，共一百一十一頁。3．雙波長分光光度計特點：利用吸光度差值定量消除干擾和吸收池不匹配引起的誤差當前68頁，共111頁，星期日。第六十八頁，共一百一十一頁。第三節(jié)紫外-可見分光光度分析方法一、定性分析二、純度檢測三、單組份的定量分析****四、多組分的定量分析-同時測定法*五、結構分析六、比色分析法*當前69頁，共111頁，星期日。第六十九頁，共一百一十一頁。一、定性分析定性鑒別的依據(jù)→吸收光譜吸收光譜的形狀吸收峰的數(shù)目吸收峰的位置（波長）吸收峰的強度（相應的吸光系數(shù)）當前70頁，共111頁，星期日。第七十頁，共一百一十一頁。續(xù)前1．對比吸收光譜的特征值當前71頁，共111頁，星期日。第七十一頁，共一百一十一頁。續(xù)前2．對比吸光度或吸光系數(shù)的比值例：當前72頁，共111頁，星期日。第七十二頁，共一百一十一頁。續(xù)前3．對比吸收光譜的一致性同一測定條件下，與標準對照物譜圖或標準譜圖進行對照比較當前73頁，共111頁，星期日。第七十三頁，共一百一十一頁。續(xù)前（二）純度檢查和雜質限量測定1．純度檢查（雜質檢查）1）峰位不重疊：找λ→使主成分無吸收，雜質有吸收→直接考察雜質含量2）峰位重疊：主成分強吸收，雜質無吸收測定結果顯示為弱吸收→與純品比較，E↓雜質強吸收>>主成分吸收→與純品比較，E↑，光譜變形當前74頁，共111頁，星期日。第七十四頁，共一百一十一頁。續(xù)前2．雜質限量的測定：例：腎上腺素中微量雜質——腎上腺酮含量計算2mg/mL-0.05mol/L的HCL溶液，λ310nm下測定規(guī)定A310≤0.05即符合要求的雜質限量≤0.06%當前75頁，共111頁，星期日。第七十五頁，共一百一十一頁。二、吸收度的測量（補充內容）1.比色皿的選擇:1.玻璃;1)石英2.溶劑的選擇:極限波長3.波長的選擇:4.空白對比5.測定步驟1)本身調零;2)空白調零;3)測量樣品溶液的濃度

A=0.2~0.8當前76頁，共111頁，星期日。第七十六頁，共一百一十一頁。1．吸光系數(shù)法2．標準曲線法3．對照法：外標一點法4．增量法三、單組分的定量方法當前77頁，共111頁，星期日。第七十七頁，共一百一十一頁。續(xù)前1．吸光系數(shù)法（絕對法）當前78頁，共111頁，星期日。第七十八頁，共一百一十一頁。例：維生素B12的水溶液在361nm處的百分吸光系數(shù)為207，用1cm比色池測得某維生素B12溶液的吸光度是0.414，求該溶液的濃度解：當前79頁，共111頁，星期日。第七十九頁，共一百一十一頁。練習例：精密稱取B12樣品25.0mg，用水溶液配成100ml，精密吸取10.00ml，又置100ml容量瓶中，加水至刻度。取此溶液在1cm的吸收池中，于361nm處測定吸光度為0.507，求B12的百分含量？。解：補充系數(shù)法求含量當前80頁，共111頁，星期日。第八十頁，共一百一十一頁。續(xù)前2．標準曲線法過程：配制標準系列溶液測定各標準溶液的吸收度繪制工作曲線C~A曲線求出方程樣品溶液測定A值由方程求出濃度當前81頁，共111頁，星期日。第八十一頁，共一百一十一頁。

A200240280320360400440nm2.

標準曲線法

max當前82頁，共111頁，星期日。第八十二頁，共一百一十一頁。CxAxA0Concentration要求

1.r>0.9992.n=5-73.待測濃度盡量在標準曲線中間位置標準曲線(A=aC+b,r)當前83頁，共111頁，星期日。第八十三頁，共一百一十一頁。續(xù)前3．對照法(外標一點法)注：當樣品溶液與標準品溶液的稀釋倍數(shù)相同時當前84頁，共111頁，星期日。第八十四頁，共一百一十一頁。(三)對照法待測樣品(Unknownsample)標準樣品(Referencesample)當前85頁，共111頁，星期日。第八十五頁，共一百一十一頁。要求-標準溶液的濃度應盡量接近樣品濃度=A標A樣C標C樣C樣=C標·A樣A標當前86頁，共111頁，星期日。第八十六頁，共一百一十一頁。第二節(jié)紫外-可見分光光度計當前68頁，共111頁，星期日。π電子→不飽和的化合物或基團另一類是氧化還原反應。特點：λ最大>200nm，ε最大>104C=1/2C0，A=1/2A0；1．Lamber-beer定律的適用條件（前提）有些有色配合物易溶于有機溶劑，可進行萃取光度分析，提高了測定的靈敏度和選擇性。當前61頁，共111頁，星期日。分光光度計構成的主要部件四、電磁輻射與物質的相互作用4．非平行光的影響：比色池要垂直放置，不同儀器測定A值不同。第三十四頁，共一百一十一頁。D：H2C=CH-C=O練習例：維生素B12的含量測定精密吸取B12注射液2.50mL，加水稀釋至10.00mL；另配制對照液，精密稱定對照品25.00mg，加水稀釋至1000毫升在361nm處，用1cm吸收池，分別測定吸光度為0.508和0.518，求B12注射液的濃度以及標示量的百分含量（該B12注射液的標示量為100μg/毫升）。當前87頁，共111頁，星期日。第八十七頁，共一百一十一頁。解：

1）對照法當前88頁，共111頁，星期日。第八十八頁，共一百一十一頁。練習2）吸光系數(shù)法當前89頁，共111頁，星期日。第八十九頁，共一百一十一頁。續(xù)前四、多組分的定量方法三種情況：1．兩組分吸收光譜不重疊（互不干擾）兩組分在各自λ最大下不重疊→分別按單組分定量當前90頁，共111頁，星期日。第九十頁，共一百一十一頁。續(xù)前2．兩組分吸收光譜部分重疊λ1→測A1→b組分不干擾→可按單組分定量測Caλ2→測A2→組分干擾→不能按單組分定量測Ca當前91頁，共111頁，星期日。第九十一頁，共一百一十一頁。續(xù)前3．兩組分吸收光譜完全重疊——混合樣品測定（1）解線性方程組法（2）等吸收點法（3）等吸收雙波長消去法（4）系數(shù)倍率法當前92頁，共111頁，星期日。第九十二頁，共一百一十一頁。（1）解線性方程組法步驟：當前93頁，共111頁，星期日。第九十三頁，共一百一十一頁。2.等吸收點法等吸收點：兩物質在某波長處的吸收系數(shù)相等，該波長為~Ca=Cb當前94頁，共111頁，星期日。第九十四頁，共一百一十一頁。3．等吸收雙波長法步驟：消除a的影響后測bab當前95頁，共111頁，星期日。第九十五頁，共一百一十一頁。續(xù)前消去b的影響，測定a組分注：須滿足兩個基本條件選定的兩個波長下干擾組分具有等吸收點選定的兩個波長下待測物的吸光度差值應足夠大ab當前96頁，共111頁，星期日。第九十六頁，共一百一十一頁。五、有色化合物的測定方法

——光電比色法（一）顯色反應和顯色劑：1.顯色反應：在光度分析中將試樣中的待測組分轉變成有色化合物的反應叫顯色反應。當前97頁，共111頁，星期日。第九十七頁，共一百一十一頁。顯色反應一般分為兩大類：一類是配位反應；另一類是氧化還原反應。Fe3＋＋SCN－=FeSCN2+；Mn2＋－5e＋4H2O=MnO4－＋8H＋在這兩類反應中，用得較多的是配位反應。當前98頁，共111頁，星期日。第九十八頁，共一百一十一頁。（2）有機顯色劑：1）有機顯色劑的優(yōu)點：A.具有鮮明的顏色，ε都很大（一般可達到104以上），所以測定的靈敏度很高；B.生成的一般為螯合物，穩(wěn)定性很好，一般離解常數(shù)都很小；2.顯色劑：

（1）無機顯色劑：當前99頁，共111頁，星期日。第九十九頁，共一百一十一頁。C.選擇性好D.有些有色配合物易溶于有機溶劑，可進行萃取光度分析，提高了測定的靈敏度和選擇性。當前100頁，共111頁，星期日。第一百頁，共一百一十一頁。（3）常見的有機顯色劑：1）磺基水楊酸：其結構式如下：它可用于測定三價鐵離子。當前101頁，共111頁，星期日。第一百零一頁，共一百一十一頁。作用：將光源發(fā)出的復色光按波長順序分離成單色光。雜散光可使吸收光譜變形，吸光度變值第二十三頁，共一百一十一頁。分光光度計中常用的光源有熱輻射光源(鎢燈)和氣體放電光源(氫燈)兩類。第五十