DB21T 1861.2-2010 水產(chǎn)生物種質(zhì)檢驗技術(shù)規(guī)程 擴增片段長度多態(tài)性法　_第1頁
DB21T 1861.2-2010 水產(chǎn)生物種質(zhì)檢驗技術(shù)規(guī)程 擴增片段長度多態(tài)性法　_第2頁
DB21T 1861.2-2010 水產(chǎn)生物種質(zhì)檢驗技術(shù)規(guī)程 擴增片段長度多態(tài)性法　_第3頁
DB21T 1861.2-2010 水產(chǎn)生物種質(zhì)檢驗技術(shù)規(guī)程 擴增片段長度多態(tài)性法　_第4頁
DB21T 1861.2-2010 水產(chǎn)生物種質(zhì)檢驗技術(shù)規(guī)程 擴增片段長度多態(tài)性法　_第5頁
已閱讀5頁，還剩5頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

DB21DB21/T1861.2—2010水產(chǎn)生物種質(zhì)檢驗技術(shù)規(guī)程擴增片段長度多態(tài)性法AFLPproceduretodetectgermplasmforaquaculturespecies2010-12-31發(fā)布2011-02-01實施遼寧省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I1GB/T18654.15-2008養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗第15部分：2DNA酶切后經(jīng)PCR進行選擇性擴增，先將基因組DNA用兩種限制性內(nèi)切酶酶切成大小不等產(chǎn)物經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳將特異的限制性片段分離。由于不同來源DNA的酶切片段存在5.20乙二胺四乙酸（EDTA分析純。34空白對照管；在每個離心管中加入15μL配制好的毛囊裂解液。毛囊裂解液用1×PCR緩沖液(50用苯酚和氯仿方法抽提DNA；用50μLTE緩沖液（10mmol/LTris-HClpH8.0，lmmol/LEDT末狀；將研缽放入65℃水浴至樣品粉末剛開始融化，向研缽中加入DNA提取液(10mmol/L5吸取1~3μL提取的DNA，用濃度1~2％g/mL)=[A260／(0.020×L)]×本規(guī)程統(tǒng)一采用EcoRⅠ/MseⅠ雙酶切組合反應體系。按表1配體積(μL） ————體積(μL）627循環(huán)降低退火（1）模具處理與安裝：清洗用作模具的玻璃板并晾干，并分別涂上），（3）預電泳凝膠聚合后，將梳子正向插入膠頂空處，形成加樣孔，連接好電泳設(shè)備，添加TBE（9）將上述膠板置于凝膠成像儀中，利用相關(guān)圖像采集系8Shannon多樣性指數(shù)(Shannonindex，I)、遺傳距離（GeneticDistance，D）等遺傳參算。并用UPGMA做基于Nei’s遺傳距離的樹形圖，以及用鄰近法（Neighborjoiningmethod，NJ）構(gòu)建MseⅠ選擇擴增引物：5

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論