《茶青中30種農(nóng)藥殘留量測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》

ICS65.100

CCSX4

FQIA

團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)

T/FQIA012—2023

茶青中30種農(nóng)藥殘留的測(cè)定

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

Determinationof30PesticideResiduesinTeaLeaves-

LiquidChromatography-tandemMassSpectrometryMethod

（征求意見稿）

（本草案完成時(shí)間：）

在提交反饋意見時(shí)，請(qǐng)將您知道的相關(guān)專利連同支持性文件一并附上。

2023-12-XX發(fā)布2023-12-XX實(shí)施

福建省質(zhì)量檢驗(yàn)協(xié)會(huì)??發(fā)布

T/FQIA012—2023

茶青中30種農(nóng)藥殘留的測(cè)定

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

1范圍

本文件規(guī)定了茶青中30種農(nóng)藥殘留量的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定方法。

本文件適用于茶青中30種農(nóng)藥殘留量的測(cè)定。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用

文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）

適用于本文件。

GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

NY/T2102-2011茶葉抽樣技術(shù)規(guī)范

3術(shù)語(yǔ)和定義

本文件沒有需要界定的術(shù)語(yǔ)和定義。

4原理

試樣采用乙腈-乙酸溶液提取，提取液經(jīng)分散固相萃取凈化，用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定，外

標(biāo)法定量。

5試劑和材料

試劑

5.1.1乙腈（CH3CN，CAS號(hào)：75-05-8）。

5.1.2乙腈（CH3CN，CAS號(hào)：75-05-8）：色譜純。

5.1.3乙酸（CH3COOH，CSA號(hào)：64-19-7）。

5.1.4乙酸鈉（CH3COONa，CSA號(hào)：127-09-3）。

5.1.5無(wú)水硫酸鎂（MgSO4，CAS號(hào)：7487-88-9）。

5.1.6甲酸（HCOOH，CSA號(hào)：64-18-6）：色譜純。

5.1.7甲酸銨（HCOONH4，CSA號(hào)：540-69-2）。

5.1.8氯化鈉：(NaCl，CAS號(hào)：7647-14-5)。

5.1.9除另有規(guī)定外，所有試劑均為分析純，水為符合GB/T6682中規(guī)定的一級(jí)水。

溶液配制

5.2.1乙腈-乙酸溶液(99+1)：量取10mL乙酸和990mL乙腈中，混勻。

5.2.2甲酸銨-甲酸水溶液（5mmol/L）：稱取0.3153g甲酸銨，用0.2%甲酸水溶液溶解并稀釋

至1000mL，搖勻。

標(biāo)準(zhǔn)品

30種農(nóng)藥及其代謝物標(biāo)準(zhǔn)品，純度≥95%，參見附錄A。

標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

1

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5.4.1標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（1000mg/L）：準(zhǔn)確稱取約10mg（精確至0.1mg）各農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，用乙

腈溶解并定容至10mL，避光-18℃及以下保存，有效期1年。

5.4.2混合標(biāo)準(zhǔn)溶液：吸取一定量的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液于250mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度。

混合標(biāo)準(zhǔn)溶液避光0℃～4℃保存，有效期3個(gè)月。

材料

5.5.1乙二胺-N-丙基硅烷化硅膠（PSA）：40μm～60μm。

5.5.2十八烷基硅烷鍵合硅膠（C18）：40μm～60μm。

5.5.3石墨化炭黑（GCB）：40μm～120μm。

5.5.4陶瓷均質(zhì)子：2cm（長(zhǎng)）×1cm（外徑），或相當(dāng)者。

5.5.5微孔濾膜（有機(jī)相）：13mm×0.22μm，或相當(dāng)者。

6儀器和設(shè)備

液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀：配有電噴霧離子源（ESI）。

分析天平：感量0.1mg和感量0.01g。

離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于4000r/min。

氮吹儀。

渦旋混合器。

7試樣的制備與保存

按NY/T2102-2011抽取茶青樣品，將樣品粉碎，混勻，密封，作為試樣；在抽樣和制樣的操作

過(guò)程中，應(yīng)防止樣品受到污染或發(fā)生殘留物含量的變化；將試樣于-18℃及以下冷凍保存。

8分析步驟

前處理

稱取5.0g試樣（精確至0.01g）于50mL塑料離心管中，加入20mL乙腈-乙酸溶液（5.2.1），

加入4g無(wú)水硫酸鎂、1g氯化鈉、1.5g乙酸鈉及1顆陶瓷均質(zhì)子（5.5.4），劇烈震蕩5min后，4000

r/min離心5min，定量吸取上清液至內(nèi)含除水劑和凈化材料的塑料離心管中（每毫升提取液使用150

mg無(wú)水硫酸鎂、55mgPSA、50mgC18和5mgGCB），渦旋混勻1min。4000r/min離心5min，

取上清液1mL經(jīng)0.22μm微孔濾膜（5.5.5）過(guò)濾后，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定。

測(cè)定

8.2.1液相色譜參考條件

a)色譜柱：C18柱（5μm，150mm×2mm），或相當(dāng)者；

b)流動(dòng)相：A相為甲酸銨-甲酸水溶液（5.2.2），B相為乙腈（5.1.2），流動(dòng)相梯度條件見

表1；

c)流速：0.30mL/min；

d)柱溫：40℃；

e)進(jìn)樣量：5μL。

8.2.2質(zhì)譜參考條件

a)離子源類型：電噴霧離子源；

b)掃描方式：正離子和負(fù)離子同時(shí)掃描；

c)電噴霧電壓：正離子3500V，負(fù)離子-3500V；

d)離子源溫度：325℃；

e)霧化氣：45psi；

2

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f)檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)：每種農(nóng)藥分別選擇一對(duì)定量離子、一對(duì)定性離子。每組所有需要

檢測(cè)離子對(duì)按照出峰順序，分時(shí)段分別檢測(cè)。每種農(nóng)藥的保留時(shí)間、定量離子對(duì)、定性離

子對(duì)和離子對(duì)質(zhì)譜參數(shù)，參見附錄B.1。

表1流動(dòng)相及其梯度條件

步驟總時(shí)間/min流動(dòng)相A/％流動(dòng)相B/％

00.0973

11.0973

23.08515

313.05050

415.0298

518.0298

618.1973

721.0973

8.2.3基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作曲線

選擇與被測(cè)樣品性質(zhì)相同或相似的空白樣品8.1部分進(jìn)行前處理，得到空白基質(zhì)溶液。精確吸取

一定量混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，用空白基質(zhì)溶液稀釋成質(zhì)量濃度為0.002mg/L、0.005mg/L、0.01mg/L、

0.02mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L和0.5mg/L的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，根據(jù)儀器性

能和檢測(cè)需要選擇不少于5個(gè)濃度點(diǎn)，供液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測(cè)定。以農(nóng)藥定量離子的質(zhì)量色譜圖

峰面積為縱坐標(biāo)，相對(duì)應(yīng)的基質(zhì)匹配工作溶液質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，繪制基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作溶液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配。

8.2.4定性及定量

8.2.4.1保留時(shí)間

被測(cè)試樣中目標(biāo)農(nóng)藥色譜峰的保留時(shí)間與相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)色譜峰的保留時(shí)間相比較，相對(duì)誤差應(yīng)在

±2.5%之內(nèi)。

8.2.4.2離子豐度比

在相同實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行樣品測(cè)定時(shí)，如果檢出的色譜峰的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)樣品相一致，并且在

扣除背景后的樣品質(zhì)譜圖中，目標(biāo)化合物的質(zhì)譜定量和定性離子均出現(xiàn)，而且同一檢測(cè)批次，對(duì)同

一化合物，樣品中目標(biāo)化合物的定性離子和定量離子的相對(duì)豐度比與質(zhì)量濃度相當(dāng)?shù)幕|(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液

相比，其允許偏差不超過(guò)表2規(guī)定的范圍，則可判斷樣品中存在目標(biāo)農(nóng)藥。

表2定性時(shí)離子豐度比的最大允許偏差

相對(duì)離子豐度＞50%＞20%～50%＞10%～20%≤10%

允許相對(duì)偏差±20%±25%±30%±50%

本方法的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)多反應(yīng)監(jiān)測(cè)LC-MS/MS圖參見附錄C。

8.2.4.3定量

外標(biāo)法定量。

試樣溶液的測(cè)定

將基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和試樣溶液依次注入液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀中，保留時(shí)間和定性離子定

性，測(cè)得定量離子峰面積，待測(cè)樣液中農(nóng)藥的響應(yīng)值應(yīng)在儀器檢測(cè)的定量測(cè)定線性范圍之內(nèi)，超過(guò)

線性范圍時(shí)應(yīng)根據(jù)測(cè)定濃度進(jìn)行適當(dāng)倍數(shù)稀釋后再進(jìn)行分析。

平行試驗(yàn)

按8.1～8.3的規(guī)定對(duì)同一試樣進(jìn)行平行試驗(yàn)測(cè)定。

空白試驗(yàn)

3

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除不加試樣外，按8.1～8.3的規(guī)定進(jìn)行平行操作。

9結(jié)果計(jì)算和表述

試樣中各農(nóng)藥殘留量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)X計(jì)，單位為毫克每千克（mg/kg），按式（1）計(jì)算。

………………(1)

?×?1000

?1000

式中：X——樣品中待測(cè)組分殘留量，?單位=為毫克每×千克(mg/kg)；

c——樣液中待測(cè)組分的濃度，單位為微克每毫升(mg/L)；

V——定容體積，單位為毫升(mL)；

m——稱取試樣量，單位為克（g）。

計(jì)算結(jié)果應(yīng)扣除空白值，計(jì)算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的2次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，

保留2位有效數(shù)字。含量超過(guò)1mg/kg時(shí)，保留3位有效數(shù)字。

10靈敏度、準(zhǔn)確度和精密度

靈敏度

本方法各項(xiàng)目定量限為0.01mg/kg。

準(zhǔn)確度

本方法各項(xiàng)目回收率為60%~120%。

精密度

在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的15%。

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A

A

附錄A

（資料性）

30種農(nóng)藥及其代謝物英文中文名稱對(duì)照索引

30種農(nóng)藥及其代謝物英文中文名稱對(duì)照索引見表A.1。

表A.130種農(nóng)藥及其代謝物英文中文名稱對(duì)照索引表

序號(hào)農(nóng)藥中文名農(nóng)藥英文名CAS號(hào)分子式

1吡蟲啉Imidacloprid138261-41-3C9H10ClN5O2

2辛硫磷Phoxim14816-18-3C12H15N2O3PS

3噻蟲胺Clothianidin210880-92-5C6H8ClN5O2S

4呋蟲胺Dinotefuran165252-70-0C7H14N4O3

5噻螨酮Hexythiazox78587-05-0C17H21ClN2O2S

6莠去津Atrazine102029-43-6C8H14ClN5

7滅多威Methomyl16752-77-5C5H10N2O2S

8啶氧菌酯Picoxystrobin117428-22-5C18H17F3NO4

9硫環(huán)磷Phosfolan947-02-4C7H14NO3PS2

10甲基硫環(huán)磷Phosfolanmethyl5120-23-0C5H10NO3PS2

11氯噻啉Imidaclothiz105843-36-5C7H8ClN5O2S

12內(nèi)吸磷Demeton8065-48-3C16H38O6P2S4

克百威Carbofuran1563-66-2C12H15NO3

13

3-羥基克百威3-hydroxyCarbofuran16655-82-6C12H15NO4

14仲丁威Fenobucarb3766-81-2C12H17NO2

15氯唑磷Isazofos42509-80-8C9H17ClN3O3PS

16甲氨基阿維菌素Emamectinbenzoate155569-91-8C49H77NO13

17噻蟲嗪Thiamethxoam153719-23-4C8H10ClN5O3S

18吡唑醚菌酯Pyraclostrobine175013-18-0C19H18ClN3O4

19氧樂(lè)果Omethoate1113-02-6C5H12NO4PS

20甲萘威Methylcarbamate63-25-2C12H11NO2

21噻蟲啉Thiacloprid111988-49-9C10H9ClN4S

22除蟲脲Diflubenzuron35367-38-5C14H9ClF2N2O2

23多菌靈Carbendazim10605-21-7C9H9N3O2

24啶蟲脒Acetamiprid160430-64-8C10H11ClN4

25茚蟲威Indoxacarb144171-61-9C22H17ClF3N3O7

26敵百蟲Metrifonate52-68-6C4H8Cl3O4P

27氟蟲脲Flufenoxuron101463-69-8C21H11ClF6N2O3

28庚烯磷Diflubenzuron23560-59-0C9H12ClO4P

29烯啶蟲胺Nitenpyram150824-47-8C11H15ClN4O2

30印楝素Azadirachtin11141-17-6C35H44O16

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B

B

附錄B

（資料性）

30種農(nóng)藥及其代謝物的保留時(shí)間、母離子、子離子及離子對(duì)質(zhì)譜參數(shù)

30種農(nóng)藥及其代謝物的保留時(shí)間、母離子、子離子及離子對(duì)質(zhì)譜參數(shù)見表B.1

表B.130種農(nóng)藥及其代謝物的保留時(shí)間、母離子、子離子及離子對(duì)質(zhì)譜參數(shù)表

電離方保留時(shí)間去簇電壓定量離子對(duì)定性離子對(duì)

序號(hào)農(nóng)藥名稱碰撞能量V碰撞能量V

式/minVm/zm/z

1吡蟲啉正9.82120256.0/209.09256.0/175.012

2辛硫磷正17.580299.0/77.020299.0/129.010

3噻蟲胺正9.4580250.2/169.05250.2/131.910

4呋蟲胺正6.3370203.1/129.05203.1/113.05

5噻螨酮正18.0120353.0/228.010353.0/168.020

6莠去津正14.7100216.0/173.912216.0/103.918

7滅多威正7.6758163.0/88.02163.0/106.05

8啶氧菌酯正17.380368.0/145.015368.0/205.05

9硫環(huán)磷正11.1100256.0/139.818256.0/227.84

10甲基硫環(huán)磷正8.15100227.9/167.95227.9/108.920

11氯噻啉正10.280262.0/181.010262.0/122.125

12內(nèi)吸磷正15.960259.0/88.93259.0/60.935

克百威正14.175222.1/165.15222.1/123.018

13

3-羥基克百威正9.6580238.1/162.910238.1/134.915

14仲丁威正16.560208.0/152.02208.0/95.010

15氯唑磷正17.280314.0/119.922314.0/161.98

16甲氨基阿維菌素正16.3160886.6/158.135886.6/82.095

17噻蟲嗪正8.4880291.9/210.95291.9/180.918

18吡唑醚菌酯正17.3100388.1/193.85388.1/162.920

19氧樂(lè)果正5.9385214.0/124.920214.0/182.815

20甲萘威正14.637202.0/145.14202.0/127.029

21噻蟲啉正11.8100253.0/125.920253.0/185.910

22除蟲脲負(fù)5.4385309.0/289.01309.0/156.02

23多菌靈正6.40100192.0/160.016192.0/132.033

24啶蟲脒正10.587223.1/125.817223.1/90.036

25茚蟲威正17.5120527.8/249.012527.8/293.18

26敵百蟲正9.06120257.0/109.025257.0/221.010

27氟蟲脲正17.7120489.0/157.915489.0/141.050

28庚烯磷正17.1120251.0/125.015251.0/126.915

29烯啶蟲胺正7.24100271.1/225.15271.1/237.015

30印楝素正14.4160743.3/725.230743.3/665.140

非商業(yè)性聲明：附錄表B.1所列參考質(zhì)譜條件是在Agilent1200-6460型液質(zhì)聯(lián)用儀上完成的，此處列出試驗(yàn)用儀器型

號(hào)僅為提供參考，并不涉及商業(yè)目的，鼓勵(lì)標(biāo)準(zhǔn)使用者嘗試不同廠家或型號(hào)的儀器。

6

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C

C

附錄C

（資料性）

30種農(nóng)藥的多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）色譜圖（20.0μg/L）

30種農(nóng)藥的多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）色譜圖見圖C.1

吡蟲啉

1.2.辛硫磷3.噻蟲胺

ImidaclopridPhoximClothianidin

4.呋蟲胺5.噻螨酮6.莠去津

DinotefuranHexythiazoxAtrazine

7.滅多威8.啶氧菌酯9.硫環(huán)磷

MethomylPicoxystrobinPhosfolan

10.甲基硫環(huán)磷11.氯噻啉12.內(nèi)吸磷

PhosfolanmethylImidaclothizDemeton

7