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【MOOC】分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)-蘭州大學(xué)中國大學(xué)慕課MOOC答案綜合實(shí)驗(yàn)一單元測驗(yàn)1、【單選題】有助于去除細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)中多糖物質(zhì)的試劑為:本題答案:【CTAB】2、【單選題】不能使DNA變性的有:本題答案:【TE溶液】3、【單選題】1.在提取基因組DNA過程中,苯酚-氯仿抽提過的上清液中加入2倍體積乙醇的目的是:本題答案:【沉淀DNA】4、【單選題】最終沉淀DNA時(shí),加入3mol/LNaAc溶液的作用是:本題答案:【Na+中和DNA鏈上PO4-的負(fù)電荷,使DNA易于聚集】5、【單選題】苯酚/氯仿/異戊醇混合液中,異戊醇的作用是:本題答案:【減少蛋白質(zhì)變性時(shí)產(chǎn)生的氣泡】6、【單選題】擴(kuò)增一段目的DNA片段,請?jiān)谙旅娴囊镏羞x出合適的一對(duì)引物:目的DNA片段:5’-CCGGATGCGATAG—————CAGCTGATCTGGA-3’3’-GGCCTACGCTATC—————GTCGACTAGACCT-5’引物:(1)5’-CCGGATGCGATAG-3’;(4)5’-GTCGACTAGACCT-3’;(2)5’-CTATCGCATCCGG-3’;(5)5’-TCCAGATCAGCTG-3’;(3)5’-CAGCTGATCTGGA-3’;(6)5’-GGCCTACGCTATC-3’本題答案:【(1)和(5)】7、【單選題】怎樣減少PCR反應(yīng)中的非特異性擴(kuò)增?本題答案:【提高退火溫度】8、【單選題】有關(guān)PCR中使用的Taq酶,下列說法正確的是:本題答案:【是一種依賴于DNA的DNA聚合酶】9、【單選題】經(jīng)PCR擴(kuò)增的DNA大小取決于:本題答案:【引物】10、【單選題】加PCR體系時(shí),最后加的一種物質(zhì)是:本題答案:【TaqE】11、【單選題】關(guān)于瓊脂糖凝膠的性質(zhì)說法錯(cuò)誤的是:本題答案:【瓊脂糖凝膠可以分離核酸和蛋白質(zhì)】12、【單選題】質(zhì)粒DNA的三種構(gòu)象在瓊脂糖凝膠電泳中泳動(dòng)快慢的順序是:本題答案:【超螺旋線性松弛狀】13、【單選題】瓊脂糖凝膠電泳分離PCR產(chǎn)物時(shí),在小于200bp處出現(xiàn)的一條帶有可能是:本題答案:【引物二聚體】14、【單選題】DNA樣品緩沖液描述正確的是:本題答案:【又叫l(wèi)oadingbuffer】15、【單選題】關(guān)于普通Taq酶,下列說法正確的是:本題答案:【在PCR過程中,在合成的DNA的3’端加入一個(gè)非模板依賴的A】16、【單選題】基因克隆所需DNA載體的最基本性質(zhì)是:本題答案:【自我復(fù)制能力】17、【單選題】重組DNA技術(shù)中實(shí)現(xiàn)目的基因與載體DNA拼接的酶是:本題答案:【DNA連接酶】18、【單選題】載體和外源DNA的連接反應(yīng)中,DNA兩端不同粘性末端的連接優(yōu)于相同粘性末端的連接,因?yàn)椋罕绢}答案:【前者可以定向克隆】19、【單選題】關(guān)于DNA連接酶的說法,下列錯(cuò)誤的是:本題答案:【反應(yīng)不需要耗能】20、【單選題】質(zhì)粒DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞的過程稱為:本題答案:【轉(zhuǎn)化】21、【單選題】克隆10kb以下的目的DNA,一般用什么載體?本題答案:【質(zhì)?!?2、【單選題】關(guān)于藍(lán)白斑篩選,下面描述錯(cuò)誤的是:本題答案:【白色菌落很可能含有空載體,藍(lán)色菌落很可能含有重組DNA】23、【單選題】轉(zhuǎn)化了重組DNA的菌株能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長是因?yàn)楸绢}答案:【載體含有氨芐青霉素抗性基因】24、【多選題】能影響DNA在瓊脂糖凝膠中泳動(dòng)的因素為:本題答案:【電泳緩沖液#DNA分子的構(gòu)象#瓊脂糖凝膠的濃度#瓊脂糖凝膠中所加的核酸染料】25、【多選題】PCR產(chǎn)物需要電泳檢測,然后切膠回收才能用于后續(xù)的實(shí)驗(yàn),是因?yàn)椋罕绢}答案:【切膠回收可以去除非特異性的雜帶,獲得目標(biāo)長度的片段#可以去除PCR引入的各種鹽、dNTP和TaqE酶等雜質(zhì),達(dá)到純化DNA的目的#電泳時(shí)加大樣品的上樣量,起到濃縮DNA樣品濃度的作用】26、【多選題】除了藍(lán)白斑篩選法,通常還可以用哪些方法來鑒定重組DNA?本題答案:【PCR法#酶切法#測序】綜合實(shí)驗(yàn)二單元測驗(yàn)1、【單選題】關(guān)于綠色熒光蛋白的說法,正確的是:本題答案:【全部都對(duì)】2、【單選題】關(guān)于質(zhì)粒DNA,說法錯(cuò)誤的是本題答案:【不可以自主復(fù)制】3、【單選題】關(guān)于配制的苯酚溶液上層的水相的作用的說法錯(cuò)誤的是:本題答案:【增加比重】4、【單選題】關(guān)于堿裂解法提取質(zhì)粒DNA,說法錯(cuò)誤的是:本題答案:【苯酚/氯仿/異戊醇抽提蛋白質(zhì)后,變性的蛋白質(zhì)留在水相中】5、【單選題】下面說法錯(cuò)誤的是:本題答案:【OD260/OD2302.0,說明核酸純度不高】6、【單選題】以下說法正確的是:本題答案:【DNA連接酶能連接雙鏈DNA,或者雙鏈DNA分子的一部分】7、【單選題】瓊脂糖凝膠電泳加樣緩沖液的作用是:本題答案:【使樣品呈現(xiàn)顏色,便于加樣】8、【單選題】影響連接效率的因素不包括:本題答案:【連接酶體系的體積】9、【單選題】表達(dá)載體與克隆載體的主要區(qū)別在于:本題答案:【表達(dá)載體有啟動(dòng)子序列】10、【單選題】關(guān)于T7啟動(dòng)子,下列說法正確的是:本題答案:【能與T7噬菌體RNA聚合酶結(jié)合】11、【單選題】pET表達(dá)系統(tǒng)的特點(diǎn)包括:本題答案:【全部都對(duì)】12、【單選題】經(jīng)過理化方法處理細(xì)胞,使其處于最適攝取和容納外來DNA的生理狀態(tài),處理過的細(xì)胞被稱為:本題答案:【感受態(tài)細(xì)胞】13、【單選題】關(guān)于E.coliBL21(DE3)說法錯(cuò)誤的是:本題答案:【能被E.coliDH5a取代】14、【單選題】SDS分離蛋白質(zhì)是根據(jù)蛋白質(zhì)的:本題答案:【分子量】15、【單選題】在制備蛋白質(zhì)樣品過程中,加巰基乙醇的目的是:本題答案:【打開二硫鍵】16、【單選題】聚丙烯酰胺凝膠的說法正確的是:本題答案:【分離分子量小的蛋白質(zhì)分子往往選擇濃度高的凝膠】17、【單選題】關(guān)于SDS中加入SDS和巰基乙醇的目的,說法錯(cuò)誤的是:本題答案:【增加比重】18、【單選題】配制聚丙烯酰胺凝膠時(shí),凝膠一直不發(fā)生交聯(lián)聚合,最不可能因?yàn)槁┘恿耍罕绢}答案:【10%SDS】19、【單選題】用Westernblotting檢測某種蛋白質(zhì)的存在,結(jié)果發(fā)現(xiàn)NC膜上背景很高,最可能原因是:本題答案:【封閉不好】20、【多選題】有關(guān)限制性內(nèi)切酶,下列說法正確的是:本題答案:【分為I、II、III型,實(shí)驗(yàn)室常用的是II型酶#I和III型都有限制和修飾的作用,II型只有限制作用】21、【多選題】載體的特點(diǎn)包括:本題答案:【有復(fù)制起點(diǎn)#有一個(gè)或幾個(gè)篩選標(biāo)記基因#有多克隆位點(diǎn)#一般載體本身較小】22、【多選題】標(biāo)簽蛋白的作用是:本題答案:【可用于檢測是否有目的蛋白的表達(dá)#可用于分離純化表達(dá)的目的蛋白】23、【多選題】灌制分離膠后加入一層水相的原因是:本題答案:【隔絕空氣,使分離膠交聯(lián)聚合的更完全#使分離膠的界面更齊整】24、【多選題】加入抗體檢測時(shí),采用間接檢測法比直接檢測法更優(yōu)越是因?yàn)椋罕绢}答案:【不用逐一標(biāo)記一抗#有信號(hào)放大作用,靈敏度高】25、【多選題】如果Westernblotting免疫印跡檢測沒有出現(xiàn)條帶,可能的原因是:本題答案:【沒有目標(biāo)蛋白表達(dá)#轉(zhuǎn)膜的時(shí)候電極插反了#抗體失效#轉(zhuǎn)膜時(shí)間太短】26、【判斷題】做一次同廠家同批號(hào)蛋白Marker的蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線,可以用于該Marker所有SDS的蛋白質(zhì)分子量的計(jì)算。本題答案:【錯(cuò)誤】綜合實(shí)驗(yàn)三單元測驗(yàn)1、【單選題】人類性別鑒定實(shí)驗(yàn)的本質(zhì)是:本題答案:【基因檢測】2、【單選題】性別鑒定與新冠病毒(RNA病毒)核酸檢測相似的步驟可能是:本題答案:【PCR擴(kuò)增目的片段】期末考試1、【單選題】對(duì)于PCR中使用的Taq酶,下列說法正確的是:本題答案:【催化速度快,多個(gè)循環(huán)后仍保持活性】2、【單選題】關(guān)于瓊脂糖凝膠分離PCR產(chǎn)物說法錯(cuò)誤的是:本題答案:【分辨率高,可分辨幾個(gè)bp差別的PCR產(chǎn)物】3、【單選題】堿裂解法提取質(zhì)粒DNA時(shí)使用的溶液Ⅰ的成分為:本題答案:【50mmol/L葡萄糖、25mmol/LTris·HCl(pH8.0)、10mmol/LEDTA】4、【單選題】Westernblotting中封閉反應(yīng)起什么作用:本題答案:【與固相載體表面的空白位置結(jié)合】5、【單選題】提取的質(zhì)粒內(nèi)混雜有基因組DNA的污染,可能的原因有:本題答案:【在裂解時(shí)基因組DNA被機(jī)械外力打斷】6、【單選題】蛋白值經(jīng)SDS電泳分離后,下列描述正確的是:本題答案:【經(jīng)過SDS電泳分離后,蛋白質(zhì)是單個(gè)亞基】7、【單選題】制備感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)選擇哪個(gè)時(shí)期的細(xì)胞:本題答案:【對(duì)數(shù)期】8、【單選題】在Westernblotting實(shí)驗(yàn)中,某同學(xué)操作時(shí)將一抗和二抗的順序加反了,顯色后會(huì)出現(xiàn)什么情況:本題答案:【沒有任何條帶,背景干凈】9、【單選題】關(guān)于表達(dá)受體E.coliBL21(DE3)說法錯(cuò)誤的是:本題答案:【能被E.coliDH5a取代】10、【多選題】關(guān)于離心機(jī)的說法正確的是:本題答案:【樣品必須配平#轉(zhuǎn)速的單位為r/min】11、【多選題】在提取基因組DNA實(shí)驗(yàn)中會(huì)使用苯酚-氯仿-異戊醇混合液,其中氯仿和異戊醇的作用是:本題答案:【減少蛋白質(zhì)變性時(shí)產(chǎn)生的氣泡#使水相和有機(jī)相分層明顯】12、【多選題】PCR產(chǎn)物量過少的可能原因是:本題答案:【退火溫度不合適#DNA模板量太少#引物量不足#延伸時(shí)間太短】13、【多選題】電泳后產(chǎn)生DNA條帶彌散的原因可能是:本題答案:【DNA被部分降解#DNA純度差#電泳緩沖液重復(fù)使用了很多次】14、【多選題】理想的克隆載體應(yīng)具備的條件有:本題答案:【在宿主細(xì)胞中自主復(fù)制,大量擴(kuò)增#具有多克隆位點(diǎn)#具有篩選標(biāo)記基因#分子量不能太大】15、【多選題】關(guān)于限制性內(nèi)切酶說法正確的有:本題答案:【酶切反應(yīng)加樣時(shí),先加水,緩沖液,DNA各項(xiàng)試劑,最后加酶#酶的體積不能超過反應(yīng)總體積的10%,否則酶活性會(huì)受甘油抑制】16、【多選題】載體雙酶切產(chǎn)生兩個(gè)不同粘性末端的優(yōu)點(diǎn)有:本題答案:【可以定向克隆#防止載體自連】17、【多選題】T4DNA連接酶可連接:本題答案:【粘性末端#平末端#DNA-RNA
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