DB37T 3031-2017 化妝品中斑蝥素的測定 液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜法

化妝品中斑蝥素的測定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法2017-10-25發(fā)布2017-11-25實(shí)施山東省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由山東省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局提出。本標(biāo)準(zhǔn)由山東省化妝品標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：山東省產(chǎn)品質(zhì)量檢驗研究院、山東省食品藥品檢驗研究院。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：周莉莉、崔玉花、高勇、李麗、張卉、祝建華、鄒惠玲、許士明。1化妝品中斑蝥素的測定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了化妝品中斑蝥素的液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于化妝品中斑蝥素的檢測。本標(biāo)準(zhǔn)液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法的檢出限為0.05g/kg?；瘖y品中的斑蝥素用甲醇超聲提取，離心過濾，經(jīng)正己烷脫脂，液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法測定和確證，外標(biāo)法定量。3試劑與材料除非另有說明，所有試劑均為分析純，水為二次蒸餾水。3.2正己烷。3.3斑蝥素標(biāo)準(zhǔn)品(cantharidin,CAS號56-23.4斑蝥素標(biāo)準(zhǔn)儲備液：準(zhǔn)確稱取適量斑蝥素標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇(4.1)溶解并定容至刻度，配制成濃度為1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備液，冰箱冷藏保存。3.5標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：將標(biāo)準(zhǔn)儲備液用甲醇-水(1+9)溶液分別稀釋為0.5μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、25μg/mL的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。冰箱冷藏保存。4儀器和設(shè)備4.1高效液相色譜-質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源。4.2分析天平：感量分別為0.0001g和0.01g。4.3超聲波清洗器。4.4漩渦混合器。4.5離心機(jī)，大于6000r/min。4.6微孔濾膜：0.22μm有機(jī)相過濾膜。5.1樣品處理稱取化妝品試樣1.0g(精確至0.01g)于30mL離心管中，加入5mL甲醇旋渦1分鐘，超聲提取10min,6000r/min離心5分鐘后取上層清液。殘渣加入5mL甲醇重復(fù)提取一次，合并上清液。加入4mL正己烷，振蕩萃取20分鐘后棄去正己烷層，從下層清液中取1.0mL于10mL刻度管中，用水定容至10mL刻度，旋2渦混勻，過微孔濾膜(5.6),供液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀測定。對斑蝥素含量較高的樣品，適當(dāng)稀釋后進(jìn)樣。5.2.1液相色譜參考條件以下為液相參考條件：a)色譜柱：C?8柱，100mm×2.1b)流動相：甲醇-水，梯度洗脫程序見表1;表1流動相梯度洗脫程序時間/min甲醇/%01350608c)流速：0.3mL/min;d)柱溫：30℃;5.2.2質(zhì)譜參考條件以下為質(zhì)譜參考條件：a)離子源：電噴霧離子源；b)掃描方式：負(fù)離子掃描；c)毛細(xì)管電壓：3.0kV;d)錐孔電壓：35V;e)離子源溫度：110℃;f)脫溶劑氣溫度：450℃;g)脫溶劑氣(N?)流量：800L/h;h)錐孔氣(N?)流量：50L/h;i)碰撞室壓力：3.0×103mbar;j)掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測(MRM);m/z195/151(定量離子，碰撞能量12eV)、195/122(碰撞能量20eV)。5.2.3液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜測定根據(jù)試樣中被測樣液的含量情況，選取斑蝥素的響應(yīng)值在儀器線性響應(yīng)范圍內(nèi)的濃度進(jìn)行測定，如超出儀器線性響應(yīng)范圍應(yīng)進(jìn)行稀釋。在上述色譜條件下斑蝥素的參考保留時間為4.10min,標(biāo)準(zhǔn)溶液的多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)色譜圖參見附錄A中的圖A.1。5.2.4液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜確證3m——試樣質(zhì)量