酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)思考

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)思考酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)是廣泛應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)診斷的免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)，實(shí)驗(yàn)教學(xué)中采用該技術(shù)檢測(cè)“乙肝兩對(duì)半"。為適應(yīng)中職生教育人才培養(yǎng)模式的教學(xué)，使學(xué)生符合具有“理論知識(shí)適度、技術(shù)應(yīng)用能力強(qiáng)”的要求，我們對(duì)實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容和方法進(jìn)行，從適用性角度選題，通過(guò)實(shí)驗(yàn)操作考核,采取以考促學(xué)的手段，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的訓(xùn)練力度，提高學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作能力,培養(yǎng)學(xué)生工作的能力。

?酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn);免疫學(xué)檢驗(yàn)；實(shí)驗(yàn);考核??酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)是廣泛應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)診斷的免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)。該技術(shù)集基本理論、基本技能為一體,能使學(xué)生能對(duì)前期所學(xué)的理論知識(shí)及技能進(jìn)一步和提高,是一個(gè)能為學(xué)生進(jìn)人臨床實(shí)習(xí)打好基礎(chǔ)的系統(tǒng)實(shí)訓(xùn)。目前該技術(shù)的臨床檢測(cè)多采用商品化的ＥＬISA試劑盒，實(shí)驗(yàn)步驟較少，操作簡(jiǎn)單。然而，參與反應(yīng)的成分很多,如抗原抗體濃度、酶結(jié)合物濃度以及試劑的質(zhì)量控制等等,影響因素眾多。傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，實(shí)驗(yàn)材料的準(zhǔn)備、儀器的準(zhǔn)備及調(diào)試、標(biāo)本及試劑的處理等工作基本上是由教師包辦。實(shí)驗(yàn)的許多環(huán)節(jié)學(xué)生沒(méi)有親自做,因而在實(shí)驗(yàn)完成后，部分學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)還是一知半解,更談不上能力的鍛煉和培養(yǎng)[1］。為適應(yīng)中職生教育人才培養(yǎng)模式的教學(xué)，使學(xué)生符合具有“理論知識(shí)適度、技術(shù)應(yīng)用能力強(qiáng)”的要求，對(duì)免疫學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容和方法進(jìn)行勢(shì)在必行。為此我們通過(guò)實(shí)驗(yàn)技能操作考核，采取以考促學(xué)的手段，了酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)內(nèi)容的訓(xùn)練力度,也收到了一定的效果，以下談?wù)勎覀兊淖龇靶Ч?

1精選考核內(nèi)容，以適應(yīng)臨床的需要

?考核內(nèi)容的選擇上以圍繞臨床實(shí)際進(jìn)行選擇，真正使學(xué)生做到學(xué)以致用。不但要讓學(xué)生了解、掌握先進(jìn)的免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)和操作方法，還必須著重培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)造性思維和綜合分析問(wèn)題的能力，從而全面提高學(xué)生素質(zhì)[2].ＥＬISA由于操作簡(jiǎn)單、靈敏度高、可定性定量，在臨床檢驗(yàn)診斷中應(yīng)用最為廣泛。常用于如病毒性肝炎、艾滋病、皰疹等傳染性疾病的檢測(cè)診斷，還常用于補(bǔ)體、免疫球蛋白和腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè).要想在有限的課時(shí)里完成諸多的內(nèi)容訓(xùn)練,顯然是不現(xiàn)實(shí)的。因此我們僅選擇了最具有代表性的“乙肝兩對(duì)半"檢測(cè)作為該技術(shù)的訓(xùn)練及考核內(nèi)容。“乙肝兩對(duì)半”共有五項(xiàng)檢測(cè)項(xiàng)目，即HBsAg、ＨBsAb、HＢｅAg、HBeAｂ、HBｃAb,實(shí)驗(yàn)中所需要的實(shí)驗(yàn)器材均能由檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室提供,易于準(zhǔn)備,給學(xué)生提供了選擇和發(fā)揮的空間。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所需要的待測(cè)血清標(biāo)本為陽(yáng)性或陰性標(biāo)準(zhǔn)物，不具傳染性,保證了學(xué)生實(shí)驗(yàn)的安全性。學(xué)生只要掌握了“乙肝兩對(duì)半"的檢驗(yàn)程序和檢驗(yàn)方法,其他在臨床上需要用ELIＳA技術(shù)檢測(cè)的常見(jiàn)項(xiàng)目則觸類旁通,能起到事半功倍的效果,至于少見(jiàn)的、較為復(fù)雜的檢測(cè)項(xiàng)目可以在日后的實(shí)習(xí)及工作中繼續(xù)學(xué)習(xí)。??2調(diào)整考核內(nèi)容,可行性及針對(duì)性強(qiáng)

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容在學(xué)時(shí)安排上有6課時(shí)，理論與實(shí)驗(yàn)課課時(shí)之比為１。1.以往的教學(xué)形式為先理論授課,教師講解實(shí)驗(yàn)的原理及檢驗(yàn)程序，實(shí)驗(yàn)教學(xué)中教師講解后進(jìn)行示范教學(xué),學(xué)生照葫蘆畫(huà)瓢的再做實(shí)驗(yàn)；實(shí)驗(yàn)操作考核只設(shè)HBsAg項(xiàng)目的考核，考核項(xiàng)目單一、形式單一。學(xué)生只需完成實(shí)驗(yàn)操作,報(bào)告結(jié)果即可。而現(xiàn)行的考核內(nèi)容是“乙肝兩對(duì)半"的共五項(xiàng)檢測(cè)項(xiàng)目，各個(gè)項(xiàng)目的檢驗(yàn)過(guò)程如標(biāo)本的稀釋、試劑選擇、加樣順序有所不一。從限制考核時(shí)間的角度考慮，學(xué)生在考核時(shí)隨機(jī)抽考其中的一個(gè)項(xiàng)目，由考生自主選擇所需物品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，這樣增加了考試的隨機(jī)性和靈活性。雖然抽考使得考核難度增加,但能強(qiáng)化學(xué)生對(duì)ELISA檢測(cè)乙肝兩對(duì)半操作步驟的理解。當(dāng)學(xué)生抽到題目后，在熟悉操作步驟的基礎(chǔ)上，只要懂得該項(xiàng)目檢測(cè)時(shí)需注意的細(xì)節(jié)，如檢測(cè)ＨBcAb需將血清稀釋５０倍，HＢeＡb的檢測(cè)需加入中和試劑，學(xué)生在對(duì)離心機(jī)、水浴箱及微量移液器的使用相當(dāng)熟悉的基礎(chǔ)上,不難將標(biāo)本中的結(jié)果如實(shí)地檢測(cè)出來(lái)。

?3考核的形式?

學(xué)生重理論、輕實(shí)驗(yàn)的現(xiàn)象普遍存在,有的學(xué)生每操作一步就看一下筆記，或者是詢問(wèn)其他同學(xué)，有的學(xué)生甚至希望教師能一步步的教,因而學(xué)生對(duì)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)缺乏系統(tǒng)的認(rèn)知。我們將考核的形式設(shè)計(jì)有理論測(cè)試和操作考核。通過(guò)調(diào)整考核內(nèi)容，將能力培養(yǎng)貫穿于整個(gè)訓(xùn)練過(guò)程，將單純理論教學(xué)融合于實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，能把理論知識(shí)激活，也強(qiáng)化了學(xué)生的實(shí)驗(yàn)操作能力及解決問(wèn)題、分析問(wèn)題能力。理論測(cè)試采用本教研室的計(jì)算機(jī)交互平臺(tái)進(jìn)行,根據(jù)教學(xué)內(nèi)容特點(diǎn)，理論測(cè)試我們進(jìn)行這樣的設(shè)計(jì),首先收集乙肝兩對(duì)半檢測(cè)相關(guān)試題，建立題庫(kù),內(nèi)容涉及實(shí)驗(yàn)原理、操作、材料、結(jié)果觀察及臨床意義。如乙肝兩對(duì)半檢測(cè)涉及ELISA的哪些原理?分別檢測(cè)什么項(xiàng)目?通過(guò)各反應(yīng)孔顯色，疫苗接種者、病毒攜帶者、“大三陽(yáng)”、“小三陽(yáng)”;手工洗滌有何要求;加終止液的目的是什么；ＥLＩSＡ常用的酶是哪種？其底物是什么。共組1０套試題，學(xué)生抽簽后通過(guò)計(jì)算機(jī)交互平臺(tái)指向性地發(fā)布試題、進(jìn)行考試?？紤]到學(xué)生對(duì)理論考試容易產(chǎn)生畏難情緒，在題型的設(shè)計(jì)上,設(shè)有填充題，標(biāo)示題、連線題及填空題等，內(nèi)容直觀、清晰，學(xué)生“寓考于樂(lè)”，在輕松愉快的心理環(huán)境下地完成理論測(cè)試。??4考試評(píng)分嚴(yán)謹(jǐn)，設(shè)計(jì)合理??理論考核從試題集中抽取出６道題組卷，每題5分，共３0分。操作考核的評(píng)分項(xiàng)目包括:專業(yè)素質(zhì)5分；實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備5分；實(shí)驗(yàn)步驟3５分,結(jié)果觀察10分；操作后清場(chǎng)5分，綜合評(píng)價(jià)10分，共7０分。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)于考試前告知學(xué)生，給學(xué)生能充分地復(fù)習(xí)和準(zhǔn)備，注意操作細(xì)節(jié),提高考試質(zhì)量?？荚嚂r(shí)每個(gè)學(xué)生完成試驗(yàn)，教師全程監(jiān)考,及時(shí)對(duì)出錯(cuò)環(huán)節(jié)分,評(píng)出總分。

５效果分析

?在酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，采用考核方式，取得了以下成效。

?5。1利于調(diào)動(dòng)學(xué)生的主觀能動(dòng)性，激發(fā)起學(xué)習(xí)的熱情

實(shí)驗(yàn)操作考核綜合反映出學(xué)生的實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)、實(shí)驗(yàn)過(guò)程和實(shí)驗(yàn)態(tài)度等各方面的表現(xiàn).考核成績(jī)占期末總成績(jī)的3０%，將學(xué)生實(shí)驗(yàn)考核計(jì)入課程總成績(jī)后,學(xué)生上實(shí)驗(yàn)課的目的性增強(qiáng)，課上都搶著做實(shí)驗(yàn)，從以往實(shí)驗(yàn)缺乏主動(dòng)性，不預(yù)習(xí)，不復(fù)習(xí)，變?yōu)榉e極思考,認(rèn)真準(zhǔn)備.實(shí)驗(yàn)報(bào)告抄襲現(xiàn)象也明顯減少，改變了重理論輕的現(xiàn)象［3］。從學(xué)生提出的問(wèn)題，如溶血標(biāo)本可以檢測(cè)“乙肝兩對(duì)半”嗎？如果用溶血標(biāo)本檢測(cè)，會(huì)有什么影響，會(huì)影響什么試劑?從這些問(wèn)題的提出可以看出，學(xué)生懂得對(duì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行思考,也懂得遇到問(wèn)題主動(dòng)和老師商量,學(xué)生不斷發(fā)現(xiàn)問(wèn)題、思考問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力得到提高。??5．2工作能力的培養(yǎng)

工作能力是一個(gè)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作者最基本素質(zhì)，中職生畢業(yè)后就業(yè)單位多是基層醫(yī)院，基層醫(yī)院的檢驗(yàn)科可能只有1至2名檢驗(yàn)員，每天的檢驗(yàn)工作任務(wù)都要完成.因而學(xué)生在就學(xué)期間即應(yīng)注重工作能力培養(yǎng).在實(shí)驗(yàn)考核過(guò)程中,實(shí)驗(yàn)物品的選擇、擺放，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后操作臺(tái)的清理等，是學(xué)生自己準(zhǔn)備和完成。學(xué)生在考核時(shí)需考慮到考核時(shí)間的限制，因此只有熟悉基本的理論知識(shí)、熟練基本操作,才能在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成實(shí)驗(yàn),得出正確的結(jié)果，考試前不做好準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)將無(wú)法順利完成。

?5．3實(shí)驗(yàn)基本技能的訓(xùn)練

?由于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)涉及環(huán)節(jié)多,通過(guò)考試能綜合考核學(xué)生的基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)，如移液管的準(zhǔn)確吸樣,血清等倍稀釋的方法；能考察學(xué)生對(duì)常用儀器設(shè)備如離心機(jī)、恒溫孵育箱、酶標(biāo)儀、洗板機(jī)的操作；在對(duì)血清標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)時(shí),使用過(guò)的物品如棉簽、試管、注射器的正確處置,能增強(qiáng)學(xué)生的無(wú)菌操作技術(shù)和觀念。

5．4學(xué)生的評(píng)價(jià)及反饋

此考核方案在２01３、2014兩屆學(xué)生進(jìn)行了實(shí)施,通過(guò)操作考核，學(xué)生們得到較為系統(tǒng)的訓(xùn)練，對(duì)ELISA檢測(cè)乙肝兩對(duì)半的整個(gè)流程有了較為深刻的認(rèn)識(shí).有必要開(kāi)展，通過(guò)考核能更好地將理論與相結(jié)合，學(xué)生能自如地、成功地檢測(cè)出標(biāo)準(zhǔn)物血清標(biāo)本的正確結(jié)果，同時(shí)也很有成就感，增強(qiáng)了對(duì)實(shí)習(xí)及將來(lái)的工作的。在對(duì)2０13級(jí)的學(xué)生進(jìn)行實(shí)習(xí)情況跟蹤、訪談中得知,學(xué)生普遍認(rèn)為，ELISA技術(shù)在臨床免疫檢驗(yàn)診斷中應(yīng)用廣泛，用此技術(shù)檢測(cè)的項(xiàng)目多,工作量較大.由于在操作考核強(qiáng)化了技能，在實(shí)習(xí)老師的指導(dǎo)下，能很快地進(jìn)入角色，增強(qiáng)了工作自。對(duì)學(xué)生進(jìn)行實(shí)