實(shí)驗(yàn)DNA和RNA在細(xì)胞中的分布

實(shí)驗(yàn)DNA和RNA在細(xì)胞中的分布

觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布2011-10-8實(shí)驗(yàn)2011-10-8實(shí)驗(yàn)原理：DNA主要分布在

內(nèi)，RNA大部分存在于

中。甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對(duì)DNA和RNA的

不同，甲基綠使

呈現(xiàn)綠色，

使

呈現(xiàn)紅色。利用

染色劑將細(xì)胞染色，可以顯示DNA和RNA在細(xì)胞中的分布。鹽酸①能改變

→加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞②能使染色質(zhì)中的

分離→有利于

結(jié)合細(xì)胞膜的通透性DNA和蛋白質(zhì)DNA和染色劑細(xì)胞核細(xì)胞質(zhì)親和力DNA吡羅紅RNA甲基綠吡羅紅混合目的要求：初步掌握觀察DNA和RNA在細(xì)胞中分布的方法實(shí)驗(yàn)材料：人的口腔上皮細(xì)胞；

洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮細(xì)胞；1、能否用哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞？

2、能否用紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞？?無(wú)細(xì)胞核避免顏色干擾盡量避免材料上帶葉肉組織細(xì)胞方法步驟：一、制片2、用消毒牙簽刮漱凈的口腔內(nèi)側(cè)壁取口腔上皮細(xì)胞后涂NaCl液滴上

3、將涂有口腔上皮細(xì)胞的載玻片在酒精燈上烘干

1、在載玻片上滴一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液（生理鹽水）

目的：維持口腔上皮細(xì)胞的正常形態(tài)

思考：如果用植物細(xì)胞的話，需要滴加生理鹽水嗎？目的：將細(xì)胞固定在載玻片上注意事項(xiàng)：1、烘烤時(shí)要來(lái)回移動(dòng)玻片，以免受熱不均炸裂；2、烘烤后，等玻片冷卻后再放入盛HCl的燒杯中，以免炸裂。二、水解1、在小燒杯中加入30ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的HCl，將烘干的載玻片放入小燒杯中；2、再將小燒杯放入盛有30℃溫水大燒杯中保溫5min。目的：殺死細(xì)胞，改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞；使染色質(zhì)中DNA與蛋白質(zhì)分離，有利于DNA與染色劑的結(jié)合注意事項(xiàng)：時(shí)間長(zhǎng)，會(huì)嚴(yán)重破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，干擾DNA和RNA的觀察；時(shí)間短，水解不徹底，染液不易進(jìn)入細(xì)胞，染色不充分。三、沖洗取出載玻片，用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10秒注意事項(xiàng)：沖洗時(shí)一定要用緩流，防止細(xì)胞被沖走目的：防止HCl與染色劑發(fā)生中和作用而影響觀察效果四、染色1、將吡羅紅甲基綠染色劑滴2滴于擦干的載玻片上，染色5min2、吸去多余的染色劑，蓋上蓋玻片（1）先用低倍鏡觀察，選擇染色均勻、顏色淺的區(qū)域進(jìn)行觀察（2）換用高倍鏡觀察，觀察細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)的染色情況五、觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象:綠色部分主要集中在細(xì)胞核內(nèi)，紅色部分主要集中在細(xì)胞質(zhì)中。實(shí)驗(yàn)結(jié)論:DNA主要分布在細(xì)胞核中,RNA大部分存在于細(xì)胞質(zhì)中.實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象及結(jié)論課堂鞏固1、在“觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布”實(shí)驗(yàn)中，將口腔上皮細(xì)胞置入8﹪的鹽酸溶液中水解的主要目的是A．使細(xì)胞中的DNA水解成脫氧核苷酸B．使細(xì)胞中物質(zhì)全部水解C．利用鹽酸改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞D．使染色體中的DNA與蛋白質(zhì)分離，有利于蛋白質(zhì)與染色劑結(jié)合2、觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布實(shí)驗(yàn)中，水解步驟需要的條件是①5％的鹽酸②8％的鹽酸③10％的鹽酸④20℃溫水⑤30℃溫水⑥40℃溫水⑦保溫5min⑧保溫10minA．①④⑦B．②④⑧C．①⑤⑧D．②⑤⑦3、利用甲基綠和吡羅紅對(duì)細(xì)胞中的DNA、RNA染色時(shí)，試劑的正確使用方法是A．先加甲基綠，再加吡羅紅B．先加吡羅紅，再加甲基綠C．混合在一起同時(shí)使用D．將兩種試劑分開(kāi)單獨(dú)使用4、“觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布”的實(shí)驗(yàn)中，沒(méi)有用的試劑（