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臨床常用免疫學(xué)檢查
2021/6/271臨床常用免疫學(xué)檢查血清免疫球蛋白(immunglobulin,Ig)測(cè)定血清補(bǔ)體測(cè)定細(xì)胞免疫檢測(cè)感染免疫檢測(cè)自身免疫檢查肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)2021/6/272血清免疫球蛋白分類Ig通常是指具有抗體活性和(或)抗體樣結(jié)構(gòu)的球蛋白。應(yīng)用免疫電泳與超速離心分析可將Ig分5類:IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。IgG:含量最多或最主要的Ig(75%),唯一能夠通過胎盤的Ig。主要由脾臟和淋巴結(jié)中的漿細(xì)胞合成與分泌。IgA:約占10%,SIgA在局部免疫中起重要作用。主要由腸系淋巴組織中的漿細(xì)胞產(chǎn)生。2021/6/273血清免疫球蛋白IgM:分子量最大,由5個(gè)IgM單體通過J鏈連接。是最早出現(xiàn)的Ig,是抗原刺激后最早出現(xiàn)的抗體,其殺菌、溶菌、溶血、促吞噬以及凝集作用比IgG高500~1000倍。測(cè)定方法:?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法(RID)或免疫比濁法。2021/6/274血清免疫球蛋白
測(cè)定參考值參考值:
IgG:7.6~16.6g/L
(RID法)IgA:710~3350mg/LIgM:0.48~2.12g/L
2021/6/275.臨床意義免疫球蛋白增高多克隆增高:常見于各種慢性感染、慢性肝病、肝硬化、淋巴瘤和某些自身免疫性疾病,如SLE、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等。單克隆增高:主要見于免疫增殖性疾病,如多發(fā)性骨隋瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥等。
2021/6/276
免疫球蛋白降低:常見于各類先天性免疫缺陷病、獲得性免疫缺陷病、聯(lián)合免疫缺陷病及長(zhǎng)期使用免疫抑制劑的病人。血清IgD測(cè)定免疫擴(kuò)散法:0~62mg/L
已發(fā)現(xiàn)有些抗核抗體、抗基底膜抗體、抗甲狀腺抗體和抗“O”抗體等均屬IgD,但活性甚低。
2021/6/277
血清IgE:主要由鼻咽部、支氣管、胃腸道等粘膜固有層的漿細(xì)胞分泌,為親細(xì)胞抗體,能與肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞膜上的FceR結(jié)合,產(chǎn)生I型變態(tài)反應(yīng)。
ELASA:0.1~0.9mg/L
臨床意義:
1.I型變態(tài)反應(yīng)
2.IgE型骨髓瘤、寄生蟲感染等
3.慢性肝炎、SLE、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。2021/6/278
是一種單克隆B淋巴細(xì)胞異常增殖時(shí)產(chǎn)生的IgG分子或片段,一般不具有抗體活性。參考值:蛋白電泳法,免疫電泳法:陰性意義:1.多發(fā)性骨髓瘤(MM),占35%~65%,其中IgG型占60%左右;IgA型占20%左右;輕鏈型占15%左右;IgD、IgE型罕見。2.巨球蛋白血癥。3.重鏈?。℉CDs)。4.半分子病。5.惡性淋巴瘤。6.良性M蛋白血癥。血清M蛋白測(cè)定
(Mprotein,monoclonalimmunoglobulins)2021/6/279血清補(bǔ)體測(cè)定補(bǔ)體是具有酶活性的一種不耐熱球蛋白,分3組:9種補(bǔ)體成分(C1~C9);B、D、P、H、I因子;補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白,如C1抑制物、C4結(jié)合蛋白、促衰變因子等??傃a(bǔ)體溶血活性(CH50)測(cè)定參考值試管法:50000~100000U/L
意義:增高見于急性炎癥、急性組織損傷、惡性腫瘤及妊娠。降低見于急性腎小球腎炎、自身免疫性疾病、亞急性感染性心內(nèi)膜炎、慢性肝病、肝硬化、AIDS、嚴(yán)重?zé)齻取?021/6/2710
血清補(bǔ)體測(cè)定血清C3:主要由巨噬細(xì)胞和肝臟合成,在經(jīng)典激活途徑與旁路激活途徑中發(fā)揮重要作用。
參考值:免疫比濁法0.85~1.70g/L
增高作為急性時(shí)相蛋白,在急性炎癥、傳染病早期、急性組織損傷、惡性腫瘤、抑制物排斥反應(yīng)時(shí)增高。降低補(bǔ)體合成能力降低;合成原料不足;消耗或丟失太多;先天性補(bǔ)體缺乏。2021/6/2711
血清補(bǔ)體測(cè)定血清C4測(cè)定:由肝臟、吞噬細(xì)胞合成,參與補(bǔ)體的經(jīng)典激活途徑。參考值:?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法:0.197+/-0.109/L。臨床意義基本與C3相似,降低還見于多發(fā)性骨髓瘤、IgA腎病、遺傳性C4缺乏癥等。2021/6/2712血清補(bǔ)體測(cè)定補(bǔ)體C1q測(cè)定參考值:0.179±0.04g/L臨床意義:與C3相似,降低還見于活動(dòng)性混合性結(jié)締組織病、重度營(yíng)養(yǎng)不良、腎病綜合征、重度聯(lián)合免疫缺陷病等。B因子測(cè)定-C3激活劑前體2021/6/2713細(xì)胞免疫檢查淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測(cè)㈠T淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測(cè):E玫瑰花形成試驗(yàn)、免疫熒光法(IFA)、熒光激活細(xì)胞分類法(FACS)、免疫金銀法以及免疫酶染色法等。E玫瑰花形成試驗(yàn)SRBC+CD2參考值Et64.4%±6.7%免疫熒光法2021/6/2714T淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測(cè)意義可用于T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù),T淋巴細(xì)胞亞群的分類以及判斷T淋巴細(xì)胞的活化程度。CD3
分子表達(dá)于所有成熟T淋巴細(xì)胞的表面,是總T淋巴細(xì)胞的重要標(biāo)志,CD3+常見于甲狀腺功能亢進(jìn)、淋巴細(xì)胞性甲狀腺炎、重癥肌無(wú)力以及器官移植后排斥反應(yīng)。CD3+主要見于免疫缺陷病,如AIDS、先天性胸腺發(fā)育不全綜合征以及聯(lián)合免疫缺陷病等。亦可見于惡性腫瘤、SLE、免疫抑制劑治療等。2021/6/2715T細(xì)胞分化抗原測(cè)定白細(xì)胞分化抗原(clusterdifferentiation,CD)CD3代表總T淋巴細(xì)胞,CD4是輔助、誘導(dǎo)T細(xì)胞的標(biāo)志,CD8是抑制、殺傷性T細(xì)胞的標(biāo)志。應(yīng)用單抗和熒光標(biāo)記二抗反應(yīng)在熒光顯微鏡下或流式細(xì)胞儀中計(jì)數(shù)CD的百分率。參考值:免疫熒光法(IFA):CD3為63.1%±10.8%;CD4
為42.8%±9.5%;CD819.6%±5.9%;CD4/CD8為(2.2±0.7)/1。流式細(xì)胞術(shù):CD3
61%~85%;CD428%~58%;CD819%~48%;CD4/CD80.9~2.0/1。2021/6/2716T細(xì)胞分化抗原測(cè)定臨床意義CD3CD4+T細(xì)胞下降常見于某些病毒感染性疾病,如AIDS、MCV、嚴(yán)重創(chuàng)傷、全身麻醉、大手術(shù)、應(yīng)用免疫抑制劑等;升高見于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎活動(dòng)期。CD8+T細(xì)胞下降
常見于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、Sjogren綜合征、重癥肌無(wú)力、DM(II型)以及膜型腎小球腎炎等;升高見于傳染性單核細(xì)胞增多癥急性期、MCV以及慢性乙肝。CD4+/CD8+比值下降,常見于AIDS、瘤型麻風(fēng)病、惡性腫瘤進(jìn)行期和復(fù)發(fā)時(shí)。也見于部分感染性疾病如傳染性單核細(xì)胞增多癥、MCV、血吸蟲病等;增高見于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎活動(dòng)期、SLE、Sjogren綜合征、重癥肌無(wú)力、膜型腎小球腎炎以及器官移植后排斥反應(yīng)等。2021/6/2717淋巴細(xì)胞功能檢測(cè)T細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)形態(tài)學(xué)法:T細(xì)胞轉(zhuǎn)化率60.1%±7.6%3H-TdR摻入法:培養(yǎng)淋巴細(xì)胞用液體閃樂爍儀測(cè)量,記錄每分鐘脈沖數(shù)(cpm)。SI(刺激指數(shù))=PHA刺激管cpm均值/對(duì)照管cpm均值SI>2為有意義,<2為淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率降低。2021/6/2718T細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)臨床意義判斷機(jī)體細(xì)胞免疫功能水平,降低常見于細(xì)胞免疫缺陷或細(xì)胞免疫功能低下者,如惡性腫瘤、淋巴瘤、重癥結(jié)核、肝硬化等。增高常見于Down綜合征。估計(jì)疾病的療效與預(yù)后2021/6/2719B淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測(cè)
表面抗原:CD19、CD20、CD21、CD22和CD40等表面受體:B細(xì)胞抗原受體(BCR)、細(xì)胞因子受體(CKR)、補(bǔ)體受體(CR)與Fc受體等。B細(xì)胞表面免疫球蛋白(BCR,SmIg)是B細(xì)胞的特征性表面標(biāo)志。將熒光標(biāo)記的抗不同類型Ig的單克隆抗體進(jìn)行檢測(cè),可將B細(xì)胞分為SmIgG、SmIgM、SmIgA、SmIgD、SmIgE。2021/6/2720B淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測(cè)
參考值:免疫熒光法(羊抗人)(以攜帶該標(biāo)志的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)表示)SmIg+細(xì)胞總數(shù):均值21%(16%~28%)SmIgG+細(xì)胞:均值7.1%(4%~13%)SmIgM+細(xì)胞:均值8.9%(7%~13%)SmIgA+細(xì)胞:均值2.2%(1%~4%)SmIgD+細(xì)胞:均值6.2%(5%~8%)SmIgE+細(xì)胞:均值0.9%(0%~1.5%)2021/6/2721B淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測(cè)
臨床意義SmIg+細(xì)胞增高
:常與B細(xì)胞惡性增殖有關(guān),主要見于慢淋、毛細(xì)胞白血病以及巨球蛋白血癥等。SmIg+細(xì)胞減低:主要與體液免疫缺陷有關(guān),常見于性聯(lián)丙種球蛋白缺乏癥、嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷病等。2021/6/2722B淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測(cè)B細(xì)胞分化抗原CD19、CD20、CD21、CD22測(cè)定參考值:FACS:CD19+細(xì)胞11.74%±3.73%臨床意義CD19為全部B細(xì)胞共有的表面標(biāo)志,增高見于B細(xì)胞系統(tǒng)的惡性種瘤,減低見于體液免疫缺陷病。2021/6/2723NK細(xì)胞活性測(cè)定NK細(xì)胞能直接殺傷效應(yīng)細(xì)胞,具有抗腫瘤、抗感染和和免疫調(diào)節(jié)等功能,亦參與移植物排斥反應(yīng)、自身免疫病和超敏反應(yīng)的發(fā)生。LDH釋放法
參考值
細(xì)胞毒指數(shù):27.5%~52.5%51Cr釋放法參考值NK細(xì)胞活性(自然殺傷率):47.6%~76.8%2021/6/2724NK細(xì)胞活性測(cè)定臨床意義活性升高常見于病毒感染的早期,Down綜合征,接受器官移植、骨髓移植的患者等及免疫增強(qiáng)劑治療患者?;钚越档统R娪趷盒阅[瘤、重癥聯(lián)合免疫缺陷病,AIDS和免疫抑制劑治療者等。腫瘤療效觀察及預(yù)后評(píng)價(jià)免疫調(diào)節(jié)功能
NK細(xì)胞可釋放INF-γ、INF-β和GM-CSF等細(xì)胞因子。2021/6/2725
病毒性肝炎的實(shí)驗(yàn)診斷
我國(guó)屬病毒性肝炎高發(fā)區(qū),全國(guó)有肝炎病人2700萬(wàn)人,每年新發(fā)病例900萬(wàn)人,HBsAg攜帶者達(dá)一億二千萬(wàn)人。慢性肝炎中有50~70%有活性性病毒復(fù)制,30%發(fā)展為肝硬化,5~10%發(fā)展為肝癌,故我國(guó)又是原發(fā)性肝細(xì)胞癌的高發(fā)國(guó)家,慢性HBV攜帶者患肝癌危險(xiǎn)性較非攜帶者高100倍。2021/6/2726HBV的形態(tài)結(jié)構(gòu)形態(tài):球形顆粒,直徑約42nm外膜:厚約7nm,HBsAg+脂類內(nèi)核(核衣殼):直徑27nm,HBcAg、DNAP、病毒DNA、少量來源于宿主的磷酸激酶2021/6/2727
HBV在血清中的存在形式完整的病毒顆粒(Dane顆粒),如前述,能復(fù)制,有傳染性;②乙肝表面抗原顆粒,為22nm的小球型顆粒,由HBsAg和脂類組成,不含DNA,不能復(fù)制,不具有傳染性*,數(shù)量最多;③管型顆粒,長(zhǎng)30-40nm的,由HBsAg和脂類組成,不含DNA,不能復(fù)制,不具有傳染性*,血清中數(shù)量最少。2021/6/2728
HBV的基因結(jié)構(gòu)
HBV基因組由一個(gè)雙鏈缺口環(huán)型DNA組成,約有3,200個(gè)核苷酸,含有4個(gè)開放讀碼框(ORF),分別為ORFS/PreS、ORFC、ORFP、和ORFX,分別編碼外膜蛋白(根據(jù)起始位點(diǎn)不同分別為HBsAg、前S1、前S2)、核殼蛋白(HBcAg、HBeAg)、DNA聚合酶和X蛋白(X抗原,HBxAg)。
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基因型1979年第一個(gè)HBVDNA全序列1988年日本學(xué)者將HBV分為A、B、C、D四個(gè)基因型。
(OkamotoH,etal.JGenVirol,1988;69:2575)1992年增加E、F兩型
(NorderH,etal.Virol,1992;73:3141)臨床意義不同的基因型可能致病性不同,我國(guó)以B、C型為主,臺(tái)灣發(fā)現(xiàn):50歲以上的肝硬化和肝細(xì)胞癌的患者C型較多,而50歲以下的肝細(xì)胞癌患者B型較多(KaoJH,etal.Gastroenterology,2000;118:554)。2021/6/2730
目前實(shí)驗(yàn)室常用的至少有四對(duì)抗原抗體系統(tǒng):
HBsAg和抗-HBs
HBcAg和抗-HBc
HBeAg和抗-HBe
Pre-S2和抗Pre-S2。2021/6/2731HBsAg陽(yáng)性的意義
(1)HBV感染的潛伏期; (2)乙型肝炎急性期; (3)慢性或遷延性乙型肝炎活動(dòng)期; (4)肝炎后肝硬化或原發(fā)性肝癌; (5)無(wú)癥狀HBsAg長(zhǎng)期攜帶者。
(6)HbsAg陰性不能完全排除慢性乙型肝炎。2021/6/2732注意!一、血清分離不佳或用肝素抗凝血常導(dǎo)致HBsAg假陽(yáng)性;二、HBsAg假陰性常見的原因?yàn)椋孩?%的急性感染者肝炎癥狀出現(xiàn)后仍陰性,極少數(shù)的慢性感染者也為HBsAg陰性,這種情況需要檢測(cè)抗HBc-IgM及HBVDNA;②S基因突變導(dǎo)致HBsAg的氨基酸結(jié)構(gòu)改變,由于多數(shù)商用試劑盒檢測(cè)系統(tǒng)采用的為多克隆抗體檢測(cè)HBsAg的a決定簇,這一區(qū)域的點(diǎn)突變即可導(dǎo)致臨界測(cè)定值或陰性結(jié)果;③由于慢性病毒攜帶者(低水平HBsAg攜帶者)或HBV感染潛伏期,HBsAg濃度低于檢測(cè)水平的下限。2021/6/2733
血清抗-HBs檢測(cè)的意義(1)在乙型肝炎感染率調(diào)查時(shí),HBsAg、抗-HBs和抗-HBc均為感染率的指標(biāo)。在這三項(xiàng)指標(biāo)中,只要其中一項(xiàng)陽(yáng)性,表示受過HBV感染。(2)抗-HBs是對(duì)HBV免疫的指標(biāo),抗-HBs陽(yáng)性率和滴度表示人群的免疫狀況。(3)乙型肝炎的診斷和鑒別診斷,在HBV感染后3個(gè)月,血清中出現(xiàn)抗-HBs。采集雙份血清(急性期和恢復(fù)期)同時(shí)檢測(cè),抗-HBs陽(yáng)轉(zhuǎn),或恢復(fù)期與急性期比較,抗體滴度有4倍或4倍以上增長(zhǎng),表示這次感染為HBV感染。(4)乙型肝炎疫苗免疫效果考察。在疫苗免疫前后,采集血清檢測(cè)抗-HBs,如抗-HBs陽(yáng)轉(zhuǎn)或抗體滴度明顯提高,表示疫苗免疫效果良好。否則免疫效果不佳。(5)對(duì)乙型肝炎預(yù)后的判斷。抗-HBs的出現(xiàn)表示疾病處于恢復(fù)期,預(yù)后較佳。2021/6/2734同時(shí)可檢出抗HBs及HBsAg見于以下幾種情形:急性HBV感染時(shí)一過性存在,兩者濃度均很低(以免疫復(fù)合物的形式出現(xiàn)),以后再采血檢測(cè)僅有抗HBs;前后或同時(shí)感染兩種亞型HBV,HBsAg短暫或持續(xù)存在反映其中一種亞型感染,抗HBs及HBsAg同時(shí)檢出通常要持續(xù)很久,且濃度均很高;抗HBs假陽(yáng)性;編碼HBsAg的基因變異使得HBsAg抗原性改變,原型抗HBs不能將其清除。2021/6/2735抗-HBc檢測(cè)的意義
(1)
HBcAg是HBV感染和復(fù)制的標(biāo)志之一,高滴度的抗HBc表示HBV現(xiàn)癥感染,低滴度的抗HBc表示過去感染,常與抗HBs并存。
(2)
高滴度的抗HBc-IgM是診斷急性肝炎的金指標(biāo),低度的抗HBc-IgM表示慢性肝炎急性發(fā)作。
(3)
血中HBcIgA的滴度與病毒復(fù)制不相關(guān),與肝組織病變有明顯的相關(guān)性,隨病情恢復(fù),HBcIgA消失,持續(xù)不降提示慢性化和病情進(jìn)展。
(4)
在獻(xiàn)血員的篩選中是一項(xiàng)輔助指標(biāo)。從血源血中檢出高滴度的抗-HBc,表示有傳染性,此血源不能作輸血用。
2021/6/2736注意!A、臨界陽(yáng)性一般是假陽(yáng)性,是由于IgM型引起的交叉反應(yīng)。B、抗HBc陰性而HBsAg陽(yáng)性一般發(fā)生在免疫缺陷病例,這時(shí)存
HBV復(fù)制的其他標(biāo)志如HBeAg及高滴度的HBVDNA。C、對(duì)抗HBc單獨(dú)陽(yáng)性,排除假陽(yáng)性后,美國(guó)CDC有以下解釋:①急性感染后的恢復(fù)早期(窗期)在HBV急性感染消退時(shí),
HBsAg減少甚至消失,抗HBs尚未出現(xiàn),抗HBc是唯一能檢出的特異性指標(biāo),此時(shí)抗HBcIgM也為陽(yáng)性。②被動(dòng)轉(zhuǎn)移:HBsAg攜帶者母親所生的嬰兒可因母體抗體被動(dòng)轉(zhuǎn)移(抗HBc可通過胎盤)而呈現(xiàn)抗HBc單獨(dú)陽(yáng)性。③遠(yuǎn)期感染伴抗HBs消失,這種情況通常在感染后多年才會(huì)發(fā)生,且相當(dāng)少見(0.5%)。④遠(yuǎn)期感染伴有低水平HBsAg。⑤HDV重復(fù)感染繼發(fā)HBsAg產(chǎn)生下降2021/6/2737抗HBc始終不出現(xiàn)或延遲出現(xiàn)者占一定比例,可能系1.與抗原復(fù)合2.種族差異3.免疫缺陷,如化療后4.基因變異2021/6/2738HBeAg:
A.傳染性:HBeAg是臨床上表示病毒復(fù)制較為實(shí)用的指標(biāo),因此也反映了血清的感染性。慢性HBsAg攜帶者中,HBeAg及HBV-DNA檢測(cè)可以用來評(píng)估其傳染危險(xiǎn)性,特別是對(duì)醫(yī)務(wù)界的HBsAg攜帶者,非常有必要了解他是否會(huì)傳染給他的病人,90%HBeAg陽(yáng)性HBsAg攜帶者可以傳染給她們的新生兒,而HBeAg陰性或抗HBe陽(yáng)性的孕婦中只有10%會(huì)傳染給嬰兒。
B.預(yù)后:急性期HBeAg的消失通常伴隨ALT的降低,預(yù)示著疾病的好轉(zhuǎn);HBeAg持續(xù)陽(yáng)性超過12個(gè)星期提示HBV感染趨向慢性;HBeAg陽(yáng)性的無(wú)癥狀者很少見;如果在慢性感染期HBeAg陽(yáng)性,一般為慢性急性化或病人免疫缺陷,這種情況的病人如果又出現(xiàn)HBeAg的消失,則被認(rèn)為是預(yù)后好的信號(hào)。2021/6/2739注意!
前C區(qū)基因變異(如1896位gua變?yōu)?arg導(dǎo)致終止密碼子的出現(xiàn)干擾了HBeAg的翻譯)導(dǎo)致不能生成和分泌HBeAg,血清中HBeAg陰性,但這種突變并不影響乙肝病毒的復(fù)制,仍可形成完整的病毒顆粒,該種情況下盡管檢測(cè)不到HBeAg,慢性HBV感染炎癥反應(yīng)也相當(dāng)強(qiáng)。2021/6/2740抗-HBe:
A、反映血清感染性:通常情況下HBsAg(+)、抗HBe(+)病例的傳染性較低,但有部分病例盡管抗HBe(+)也具有很高的傳染性,因此,要評(píng)價(jià)HBeAg陰性血清的傳染性,推薦用檢測(cè)HBVDNA,1/3的病例能達(dá)到大于106基因組/mL;
B、監(jiān)視急性和慢性HBV感染:血清HBeAg消失、抗HBe出現(xiàn)對(duì)監(jiān)視急慢性HBV感染很有診斷價(jià)值,特別是抗HBe出現(xiàn)更有預(yù)見價(jià)值,在干擾素治療中出現(xiàn)表明疾病狀況的改善;
C、預(yù)后:抗HBe陽(yáng)轉(zhuǎn)出現(xiàn)在HBeAg陰轉(zhuǎn)后早期(2周內(nèi)),可能預(yù)示急性肝炎恢復(fù)順利;如出現(xiàn)在晚期(HBeAg陰轉(zhuǎn)后6周以上)或不出現(xiàn)抗HBe,則提示病程遷延,可能發(fā)展為慢性遷延性肝炎或慢性活動(dòng)性肝炎。2021/6/2741注意!HBeAg(-)/抗HBe(-)的慢性HBV感染有不同的感染狀態(tài):有的表示復(fù)制病毒已清除,但無(wú)抗HBe應(yīng)答;有的復(fù)制病毒一時(shí)減少,HBeAg消失后可再現(xiàn);有的由于前C區(qū)變異不能編碼合成HBeAg。2021/6/2742前S2抗原及抗體
pre-S2抗原檢測(cè)可作為判斷HBV復(fù)制的一項(xiàng)指標(biāo),同時(shí)可對(duì)HBV復(fù)制作出定量的推斷,動(dòng)態(tài)測(cè)定pre-S2抗原的變化,有助于急、慢性乙型肝炎的治療預(yù)后的判斷??筽re-S2在急性乙型肝炎恢復(fù)早期出現(xiàn),并發(fā)揮其保護(hù)性抗體的作用,對(duì)觀察乙型肝炎病情進(jìn)展、預(yù)后及疫苗免疫效果均有一定的作用。2021/6/2743常規(guī)檢測(cè)HBV抗原抗體的基本解釋HBsAg急慢性HBV感染;可能具有傳染性;濃度降低表明感染恢復(fù)HBeAg反映HBV復(fù)制;有傳染性;其消失表明急慢性HBV感染正在恢復(fù)抗-HBs感染后免疫;對(duì)疫苗的免疫應(yīng)答抗-HBe表示HBV低復(fù)制或不復(fù)制抗-HBc低滴度表示過去感染,高滴度表示現(xiàn)行感染抗HBc-IgM高滴度是診斷急性HBV感染最好的指標(biāo),監(jiān)視慢性HBV感染。2021/6/2744
不同廠家和方法HBV標(biāo)志物測(cè)定的比較
HBsAg抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc
進(jìn)口 34 9 22 27 42A 34 9 12 18 37B 348 1314 37C 328 33 15 37
n=44PCR:+26-18
前S1:+20-24
抗前S1:+12-322021/6/2745
國(guó)產(chǎn)“兩對(duì)半”試劑與進(jìn)口試劑比較(陽(yáng)性符合率%)
ABCHBsAg100(34/34)100(34/34)94.1(32/34)抗-HBs100(9/9)88.9(8/9)88.9(8/9)HBeAg54.5(12/22)59.1(13/22)(33/22)抗-HBe66.7(18/27)51.9(14/27)55.6(15/27)抗-HBc88.1(37/42)88.1(37/42)88.1(37/42)2021/6/2746乙型肝炎病毒血清標(biāo)記物檢測(cè)HBeAg,Anti-HBe或抗HbeHBeAg,Anti-HBc或抗Hbc
測(cè)定方法:ELASA,RIAHBsAg,Anti-HBs或抗HBs2021/6/2747乙型肝炎病毒血清標(biāo)記物檢測(cè)HBsAg(+)表示肝中有HBV見于:乙型肝炎潛伏期和急性期。慢性遷延性肝炎,慢性活動(dòng)性肝炎,肝硬化,肝癌。慢性HBsAg攜帶者。
Anti-HBs或抗HBs:中和抗體2021/6/2748乙型肝炎病毒血清標(biāo)記物檢測(cè)HBeAg:有乙型肝炎,是病毒復(fù)制活躍,傳染性強(qiáng)的指標(biāo);持續(xù)陽(yáng)性易轉(zhuǎn)變?yōu)槁愿窝?;HBeAg+和HBsAg+可垂直傳播。Anti-HBe或抗Hbe:出現(xiàn)于急性感染的恢復(fù)期,持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)。意味著HBV部分被清除或抑制,復(fù)制減少,傳染性降低。2021/6/2749
乙型肝炎病毒血清標(biāo)記物Anti-HBc或抗HBc:反映肝細(xì)胞受到HBV侵害的一種指標(biāo),主要包括IgM、IgG、IgA??笻BcIgM陽(yáng)性是最早出現(xiàn)的特異性抗體,是診斷急性乙型肝炎和判斷病毒復(fù)制活躍的指標(biāo),并提示病人的血液有強(qiáng)傳染性。也見于慢性活動(dòng)性肝炎??笻BcIgG其陽(yáng)性滴度高,表明患有乙型肝炎,指正在感染;低滴度為既往感染指標(biāo),體內(nèi)時(shí)間長(zhǎng)。2021/6/2750乙型肝炎病毒血清標(biāo)記物HBV-DNA定性和定量測(cè)定:目前定量測(cè)定范圍為102~108
拷貝/ml。與血清免疫學(xué)結(jié)果的綜合評(píng)價(jià)HBsAg和Anti-HBsHBeAg,Anti-HBe,Anti-HBc5項(xiàng)標(biāo)志物的變化和聯(lián)合檢測(cè)的臨床意義2021/6/2751丙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)抗-HCV(ELISA)抗-HCVIgM陽(yáng)性常見于急性HCV感染,是診斷丙肝的早期敏感指標(biāo);是HCV活動(dòng)的指標(biāo),是判斷HCV傳染性的指標(biāo)。
抗-HCVIgGHCV-RNA測(cè)定測(cè)定方法逆轉(zhuǎn)錄巢式PCR法,熒光定量PCR法(第三代試劑抗原包括C、NS3、NS4、NS5;丙肝病毒易發(fā)生變異,抗-HCV陽(yáng)轉(zhuǎn)時(shí)間差異較大)2021/6/2752血清抗鏈球菌溶血素“O”測(cè)定參考值:乳膠凝集法(LAT):<500U
意義:增高常見于A組溶血鏈球菌感染相關(guān)疾病,如扁桃腺炎、感染性心內(nèi)膜炎、風(fēng)濕熱、鏈球菌感染后腎小球腎炎等。ASO在A組溶血鏈球菌感染后1周開始升高,4~6周達(dá)高峰,可持續(xù)幾個(gè)月或幾年。假陽(yáng)性與假陰性2021/6/2753傷寒、副傷寒沙門菌免疫測(cè)定肥達(dá)(Widal)反應(yīng)參考值O凝集價(jià)<1:80傷寒H凝集價(jià)<1:160副傷寒A、B、C凝集價(jià)<1:80傷寒、副傷寒沙門菌抗體IgM測(cè)定參考值ELASA法:陰性或滴度<1:20。2021/6/2754傷寒、副傷寒沙門菌免疫測(cè)定臨床意義O升高,H正常H正常,O升高O升高,H升高O升高,A、B、C任何一項(xiàng)升高2021/6/2755
血清C-反應(yīng)蛋白(CRP)測(cè)定C-反應(yīng)蛋白是一種由肝臟合成的,能與肺炎雙球菌C多糖體起反應(yīng)的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白,具有激活補(bǔ)體,促進(jìn)吞噬和免疫調(diào)理作用。參考值:<8.2mg/L(免疫比濁法)意義組織損傷,如大手術(shù),嚴(yán)重創(chuàng)傷,燒傷,心肌梗死等,發(fā)病后數(shù)小時(shí)迅速增高,病情好轉(zhuǎn)后又迅速下降。又復(fù)升高提示繼發(fā)感染或深部靜脈血栓形成。風(fēng)濕熱活動(dòng)期,可達(dá)200mg/L以上。細(xì)菌性感染常明顯升高,病毒性感染升高不明顯或輕度升高。惡性腫瘤,器官移植后排斥反應(yīng),妊娠等可見明顯升高可在發(fā)病后數(shù)小時(shí)迅速增高,病情好轉(zhuǎn)后又迅速下降至正常。2021/6/2756腎綜合征出血熱病毒抗體檢測(cè)參考值IFA,ELASA:陰性特異性IgM-感染后2~3天檢出,7~10天達(dá)高峰。特異性IgG感染后兩周出現(xiàn),可持續(xù)多年。2021/6/2757艾滋病血清學(xué)檢查檢測(cè)抗HIV(I型或II型)是AIDS診斷的一個(gè)主要指標(biāo)??乖瓰镠IV感染的T細(xì)胞株的病毒抗原(HLA-DR抗原污染可出現(xiàn)假陽(yáng)性)。方法:初篩試驗(yàn)ELASA,乳膠凝集法,免疫印跡法,斑點(diǎn)免疫滲透法。確認(rèn)試驗(yàn)可選用蛋白印跡試驗(yàn)(WB),
PCR法檢查HIV病毒DNA。HIV抗原檢測(cè)P24抗原(病毒衣殼蛋白,具群特異性)。
HIV核酸檢測(cè)DNA-PCR;RNA-PCR2021/6/2758
梅毒血清學(xué)檢查是由梅毒螺旋體梅毒亞種所致的一種性傳播疾病。梅毒螺旋體抗體檢測(cè):非密螺旋體抗原試驗(yàn)和密螺旋體抗原試驗(yàn),前者為篩選試驗(yàn)和治療效果監(jiān)測(cè),后者為確診診斷。暗視野顯微鏡檢查梅毒螺旋體PCR檢測(cè)2021/6/2759甲胎蛋白(AFP)測(cè)定參考值
CLIA,RIA,ELASA:血清<25μg/L臨床意義原發(fā)性肝癌明顯升高,AFP>300μg/L病毒性肝炎、肝硬化患者不同程度AFP升高但常<300μg/L。生殖腺胚胎性腫瘤血清AFP升高妊娠小扁豆凝集素(LCA)結(jié)合型AFP≥25%提示原發(fā)性肝癌。2021/6/2760自身抗體檢查自身免疫性疾?。ˋID)AID-器官特異性和非器官特異性(抗原為細(xì)胞核或胞漿成分)及中間型。抗核抗體(ANA):是以細(xì)胞的核成分為靶抗原的自身抗體的總稱。間接免疫熒光檢查有四種熒光圖譜:均質(zhì)型(抗dsDNA抗體和抗組蛋白抗體);周邊型(抗dsDNA抗體);斑點(diǎn)型或顆粒型(抗U1-RNP、抗Sm、抗Scl-70、抗SS-B/La、抗SS-A/Ro等);核仁型(核糖體、U3-RNP、RNA聚合酶)。2021/6/2761自身抗體檢查抗核抗體(ANA)檢查:抗各種細(xì)胞核成分(脫氧核糖核蛋白-DNP、DNA、可提取的核抗原-ENA和RNA等)。參考值:IFA法陰性,血清滴度>1:40為陽(yáng)性見于SLE(80%~100%)、MCTD(100%)、原發(fā)性膽汁性肝硬化95%~100%)、DM(30%~50%)、RA等。2021/6/2762自身抗體檢查抗DNA抗體分為:抗ds-DNA、抗ss-DNA、抗z-DNA
抗z-DNA對(duì)SLE有特異性,檢出率在90%以上??筪sDNA抗體測(cè)定的臨床意義見于SLE活動(dòng)期,陽(yáng)性率70%~90%。特異性教
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