滅菌技術(shù)入門知識課件

滅菌：用物理或化學(xué)方法殺滅或除去所有致病和非致病微生物繁殖體和芽孢的手段。滅菌法：殺滅或除去所有致病和非致病微生物繁殖體和芽孢的方法或技術(shù)。無菌：指在任一指定物體、介質(zhì)或環(huán)境中，不存在活的微生物。無菌操作法：整個(gè)操作過程中利用或控制一定的條件，使產(chǎn)生避免被微生物污染的一種操作方法或技術(shù)。防腐：指用物理或化學(xué)的方法抑制微生物生長與繁殖的手段，亦稱抑菌。消毒：指用物理或化學(xué)方法殺滅或除去病源微生物的手段。滅菌的相關(guān)概念滅菌技術(shù)入門知識1射線滅菌法濾過滅菌法氣體滅菌法物理滅菌法濕熱滅菌法滅菌法干熱滅菌法化學(xué)滅菌法藥液滅菌法熱壓滅菌法煮沸滅菌法微波滅菌法流通蒸氣滅菌法紫外線滅菌法低溫間歇滅菌法干熱空氣滅菌法火焰滅菌法輻射滅菌法滅菌方法的分類滅菌技術(shù)入門知識1利用蛋白質(zhì)和核酸具有遇熱、射線不穩(wěn)定的特性，采用加熱、射線和過濾方法，殺滅或除去微生物的技術(shù)?；鹧鏈缇ǜ蔁釡缇蔁峥諝鉁缇釡缇釅簻缇?/p>

流通蒸氣滅菌法濕熱滅菌煮沸滅菌法低溫間歇滅菌法物理滅菌技術(shù)適于耐火焰材質(zhì)（金屬、玻璃及陶器等）適于耐高溫的玻璃和金屬制品適于消毒及不耐高熱的物品的滅菌，但不能保證殺滅芽孢用于注射器等的滅菌，必要時(shí)加入抑菌劑適于不耐熱、熱敏物料的滅菌滅菌技術(shù)入門知識1干熱滅菌法:是指在干燥環(huán)境（如火焰或干熱空氣）進(jìn)行滅菌的技術(shù)。一般有火焰滅菌法和干熱空氣滅菌法。

—原理：高熱使蛋白質(zhì)凝固變性；水分缺失使微生物原漿電解質(zhì)濃縮死亡。

—火焰滅菌法是指用火焰直接燒灼的滅菌方法。該方法滅菌迅速、可靠、簡便，適合于耐火焰材料（如金屬、玻璃及瓷器等）物品與用具的滅菌

—干熱空氣滅菌法是指用高溫干熱空氣滅菌的方法。該法適用于耐高溫的玻璃和金屬制品的滅菌，不適合橡膠、塑料及的滅菌。

—在干熱狀態(tài)下，由于熱穿透力較差，微生物的耐熱性較強(qiáng)，必須長時(shí)間受高溫的作用才能達(dá)到滅菌的目的。因此。干熱空氣滅菌法采用的溫度一般比濕熱滅菌法高。為了保證滅菌效果，一般規(guī)定：135-140℃滅菌3-5h；160-170℃滅菌2-4h；180-200℃滅菌0.5-1h。

干熱滅菌法滅菌技術(shù)入門知識1濕熱滅菌法是指用飽和水蒸氣、沸水或流通蒸汽進(jìn)行滅菌的方法，由于蒸汽潛熱大，穿透力強(qiáng)，容易使蛋白質(zhì)變性或凝固，所以該法的滅菌效率比干熱滅菌法高，是藥物制劑生產(chǎn)過程中最常用的滅菌方法。濕熱滅菌法可分為：熱壓滅菌法、煮沸滅菌法、流通蒸汽滅菌法、和間歇蒸汽滅菌法、巴氏消毒法。濕熱滅菌法滅菌技術(shù)入門知識1—用高壓飽和水蒸氣加熱殺滅微生物的方法?！軞缢形⑸锖脱挎??！m于耐高熱和耐高壓蒸氣的所有玻璃容器，金屬器械，瓷器和橡膠塞?！?16℃（67kPa）：40min；121℃（97kPa）：30min；126℃（139kPa）：15min影響濕熱滅菌的因素：—微生物的種類和數(shù)量：各細(xì)菌對熱的抵抗力相差很大，處于不同發(fā)育階段，所需滅菌的濕度與時(shí)間也不相同，繁殖期的微生物對高溫比衰老時(shí)期的抵抗力小得多—蒸氣性質(zhì)—滅菌器物的性質(zhì)和滅菌時(shí)間—溫度，壓力熱壓滅菌法滅菌技術(shù)入門知識1必須用飽和蒸氣必須排盡滅菌柜內(nèi)的空氣全部器物的溫度達(dá)到所要求的溫度時(shí)開始計(jì)時(shí)滅菌結(jié)束后必須先停止加熱保證滅菌效率應(yīng)注意的事項(xiàng)滅菌技術(shù)入門知識1煮沸滅菌法是指將待滅菌物置于沸水中滅菌的方法。煮沸時(shí)間通常為30-60分鐘。。流動(dòng)蒸汽滅菌法系指在常壓下，于不密閉的滅菌箱內(nèi)，用100℃流通蒸汽30-60分鐘來殺滅微生物的方法。低溫間歇滅菌法此法是將待滅菌的制劑或藥品，用60－80℃加熱1小時(shí)，將其中的細(xì)菌繁殖體殺死，然后在室溫或孵卵箱中放置24小時(shí)，讓其中的芽胞發(fā)育成為繁殖體，再二次加熱將其消滅為止。加熱和放置需連續(xù)操作三次以上，至全部芽胞消滅為止。煮沸滅菌法◆流動(dòng)蒸汽滅菌法◆低溫間歇滅菌法滅菌技術(shù)入門知識1輻射滅菌法微波滅菌法紫外線滅菌法射線滅菌法■Υ射線■穿透力強(qiáng)，滅菌效率高，但設(shè)備費(fèi)用較高?！鲞m用于熱敏性器物

■波長200-300nm，最強(qiáng)為254nm■紫外線使核酸蛋白變性而殺滅微生物■適于物體表面和無菌室■能穿透介質(zhì)和器物的深部，低耗能、低溫、無污染、易操作■適于不耐熱器物的滅菌滅菌技術(shù)入門知識1適于對熱不穩(wěn)定的溶液、氣體、水等物品的滅菌濾器孔徑須小于芽孢體積（小于0.5微米）除菌濾膜分疏水和親水，孔徑一般不超過0.22微米過濾效率用LRV表示過濾滅菌法滅菌技術(shù)入門知識1氣體滅菌法：—環(huán)氧乙烷、氣態(tài)過氧化氫—用于環(huán)境消毒及不耐熱的醫(yī)療器械、設(shè)備和設(shè)施的滅菌藥液滅菌法：—用于物體表面：如皮膚、無菌器械和設(shè)備的滅菌—70%乙醇、1%聚維酮碘溶液、苯扎溴銨（新潔爾滅）、酚或煤酚皂等化學(xué)滅菌法滅菌技術(shù)入門知識1EO可以殺滅各種微生物,包括細(xì)菌繁殖體、芽胞、病毒和真菌孢子,是一種廣譜滅菌劑。一般認(rèn)為是由于它能與微生物的蛋白質(zhì)、DNA和RNA發(fā)生非特異性烷基化作用。水溶液中的EO能使蛋白質(zhì)上的基團(tuán)被烷基化,使蛋白質(zhì)失去了在基本代謝中需要的反應(yīng)基,阻礙了細(xì)菌蛋白質(zhì)正常的化學(xué)反應(yīng)和新陳代謝,從而導(dǎo)致微生物死亡。EO滅菌法滅菌技術(shù)入門知識1EO滅菌的優(yōu)點(diǎn)可用于不耐高溫、不耐濕物品的滅菌。(2)環(huán)氧乙烷被認(rèn)為是一種滅菌效果最好的化學(xué)滅菌劑,可殺滅所有微生物包括細(xì)菌芽胞。(3)穿透性強(qiáng),可用以各種難通透部位的滅菌。(4)對物品損壞小,對不耐熱精密儀器滅菌有著非常廣泛的用途。(5)滅菌時(shí),可以用各種包裹材料包裹,便于儲存、運(yùn)輸,打開包裹即可使用避免了交叉污染的危險(xiǎn)。(6)有標(biāo)準(zhǔn)的化學(xué)、生物監(jiān)測手段

(1)整個(gè)滅菌循環(huán)時(shí)間較長,其原因是需較長時(shí)間通風(fēng)以去除EO殘留。(2)EO有毒,是可疑的致癌物,必須控制室內(nèi)空氣中EO的濃度低于國家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)。(3)EO易燃易爆,儲存和滅菌時(shí)絕對不能泄露。必須選擇安全的滅菌器,進(jìn)行安全操作和儲存。EO滅菌法優(yōu)缺點(diǎn)滅菌技術(shù)入門知識1時(shí)間氣體滅菌不是一個(gè)快速過程,滅菌時(shí)間必須足夠殺滅微生物,其時(shí)間長短受以下因素影響:滅菌物品的潔凈程度;微生物的濕潤和含水量;所用包裝材料的種類和密度;包裹的大小和滅菌負(fù)荷的裝載情況;EO的濃度;滅菌時(shí)溫度;EO氣體類型等。溫度EO滅菌時(shí),溫度會(huì)影響微生物殺滅的速率,據(jù)測算,溫度每升高10℃,芽胞殺滅率提高1倍,溫度可增加EO的穿透力。醫(yī)院使用的滅菌器,一般設(shè)置的溫度在49～60℃之間,少量不能耐受此溫度物品,可選擇35～38℃之間但此時(shí)必須提高EO的濃度或延長滅菌時(shí)間。EO的濃度醫(yī)院滅菌器常用的濃度為450～750mg/L在一定的溫度和相對濕度水平下,EO濃度升高(從50～500mg/L),微生物殺滅率也顯著增加,滅菌時(shí)間也隨著EO濃度達(dá)到其最高點(diǎn)而相應(yīng)縮短。影響EO滅菌參數(shù)滅菌技術(shù)入門知識1H2O2等離子滅菌技術(shù)是在滅菌艙內(nèi)，充分利用活性極強(qiáng)的H2O2的等離子體，結(jié)合H2O2本身的強(qiáng)氧化性，作用于微生物膜脂，DNA和其他重要細(xì)胞結(jié)構(gòu)，破壞其生命力，同時(shí)將滅菌艙內(nèi)，器械表面及管腔內(nèi)剩余的H2O2分解成水和氧氣，從而達(dá)到快速，安全，環(huán)保的滅菌法H2O2低溫等離子技術(shù)

滅菌技術(shù)入門知識1滅菌優(yōu)點(diǎn)

對人體及環(huán)境安全，由于過氧化氫等離子低溫滅菌器的特殊滅菌原理，在滅菌循環(huán)結(jié)束后沒有危害物質(zhì)殘留，滅菌物品不必進(jìn)行通風(fēng)，取出后即可使用；而且由于其滅菌時(shí)間短，滅菌時(shí)間55min或72min使用的局限性

環(huán)氧乙烷由于其極強(qiáng)的穿透性，可用于各種難易部位的滅菌，而過氧化氫等離子低溫滅菌器則有其局限性，不可使用紙類及棉布類的包裝材料；滅菌物品中不可有任何含有木質(zhì)紙漿的物品，以及由含纖維素的材料制成的物品；油類、粉類會(huì)吸收H2O2的物質(zhì)，不能選用此滅菌方法處理；不完全干燥的物品也不能被處理；管腔直徑＜1mm及管道長度＞2m的物品，須使用增強(qiáng)劑。H2O2和EO的比較滅菌技術(shù)入門知識1常用的化學(xué)消毒劑

消毒劑名稱消毒效力殺菌作用原理使用范圍注意事項(xiàng)乙醇中效使菌體蛋白凝固變性，但對肝炎病毒及芽胞無效①以70%～75%溶液作為消毒劑，多用于消毒皮膚②95%溶液可用于燃燒滅菌①易揮發(fā)需加蓋保存并定期調(diào)整其濃度低于70%濃度則消毒作用差②有刺激性不宜用于粘膜及創(chuàng)面的消毒碘伏中效是碘與表面活性劑的不定型結(jié)合物，破壞細(xì)胞膜的通透性屏障，使蛋白質(zhì)漏出后與細(xì)菌酶蛋白起碘化反應(yīng)使之失活；能殺滅細(xì)菌病毒等①0.5%～1%有效碘溶液用于外科手術(shù)及注射部位皮膚消毒，涂擦2次②0.1%有效碘溶液用于體溫計(jì)消毒③0.05%有效碘溶液用于黏膜、燒傷、創(chuàng)傷涂擦或沖洗①碘伏稀釋后穩(wěn)定性差，宜現(xiàn)配現(xiàn)用。②避光密閉保存③皮膚消毒后留有色素，可用水洗清戊二醛高效與菌體蛋白質(zhì)反應(yīng)，使之滅活；能殺滅細(xì)菌、真菌、病毒和芽胞2%戊二醛溶液加入0、3%碳酸氫納，成為2%堿性戊二醛，用于浸泡器械、內(nèi)窺鏡等；消毒需10～30min,滅菌需7～10h①浸泡金屬類物品時(shí)，加入0.5%亞硝酸鈉防腐②滅菌后的物品，使用前用無菌蒸餾水沖洗③內(nèi)窺鏡連續(xù)使用需間隔消毒10min,每天使用前后各消毒30min，消毒后用冷開水沖洗④每周過濾1次，每2～3周更換消毒劑1次福爾馬林（37%～40%的甲醛溶液）高效菌體蛋白變性酶活性消失。能殺滅細(xì)菌真菌芽胞和病毒物品消毒氧化法，備福爾馬林消毒柜，取福爾馬林40～60ml/m3，加入高錳酸鉀20～40g/m3，柜內(nèi)熏蒸，密封6～12h①熏蒸穿透力弱，衣物最好掛起消毒②溫、濕度對消毒效果有明顯影響，要求室溫在l8℃以上，相對濕度在70～90%③對人有一定毒性和刺激性，使用時(shí)注意防護(hù)苯扎溴銨（新潔爾滅）低效是陽離子表面活性劑，能吸附帶陰電的細(xì)菌破壞細(xì)菌的細(xì)胞膜，最終導(dǎo)致菌體自溶死亡，又可使菌體蛋白變性而沉淀①0.01%～0.05%溶液用于粘膜消毒②0.1%～0.2%溶液用于皮膚消毒

③0.1%～0.2%溶液用于消毒金屬器械，浸泡15～30min（加入0.5%亞硝酸鈉以防銹）

①對肥皂碘高錳酸鉀等陰離子表面活性劑有拮抗作用②有吸附作用，會(huì)降低藥效，所以溶液內(nèi)不