畜禽屠宰加工環(huán)境微生物采樣技術(shù)規(guī)范

1畜禽屠宰加工環(huán)境微生物采樣技術(shù)規(guī)范本文件規(guī)定了畜禽屠宰和加工場(chǎng)所中空氣、水、物體表面等環(huán)境樣品的微生物采樣技術(shù)要求。本文件適用于畜禽屠宰和加工場(chǎng)所環(huán)境微生物采樣活動(dòng)。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T5750.2—2023生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法第2部分：水樣的采集和保存GB/T18204.3—2013公共場(chǎng)所衛(wèi)生檢驗(yàn)方法第3部分：空氣微生物3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1瞬時(shí)水樣instantaneouswatersample從畜禽屠宰、加工等場(chǎng)所設(shè)施設(shè)備中某個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)采集的單一水樣。4通用要求4.1采樣對(duì)象的選擇4.1.1應(yīng)根據(jù)現(xiàn)場(chǎng)條件，選取具有代表性且能真實(shí)反映場(chǎng)所環(huán)境衛(wèi)生情況的采樣對(duì)象，包括但不限于空氣、水、物體表面涂抹樣品。4.1.2應(yīng)根據(jù)不同的采樣目的，確定采樣對(duì)象。當(dāng)采樣目的為生產(chǎn)過(guò)程控制，應(yīng)采集不同生產(chǎn)工藝階段的樣品；當(dāng)采樣目的為消毒效果評(píng)估，應(yīng)采集消毒前、后的樣品。4.2采樣人員的要求4.2.1采樣人員應(yīng)具備微生物、生物安全相關(guān)專業(yè)知識(shí)，應(yīng)接受培訓(xùn)并經(jīng)考核合格后上崗。人員上崗后要對(duì)其能力進(jìn)行持續(xù)監(jiān)控。4.2.2采樣人員應(yīng)熟悉無(wú)菌操作，了解不改變樣品固有微生物菌群的措施，能識(shí)別采樣過(guò)程中涉及的風(fēng)險(xiǎn)因素。4.2.3采樣人員應(yīng)不少于2人。進(jìn)入采樣區(qū)域前，應(yīng)穿戴隔離衣或防護(hù)服、無(wú)菌手套、醫(yī)用防護(hù)口罩、帽子和鞋套。采樣結(jié)束后，應(yīng)按照生物安全要求脫去防護(hù)服等個(gè)人防護(hù)裝備，清理廢棄物后離場(chǎng)。4.3采樣設(shè)備材料的要求4.3.1采樣設(shè)備材料應(yīng)根據(jù)樣品類型、采樣量、目標(biāo)微生物的培養(yǎng)需求等要求選取。4.3.2采樣所用到的設(shè)備、材料應(yīng)提前滅菌消毒，或使用一次性無(wú)菌耗材。4.3.3消毒后的設(shè)備、無(wú)菌材料應(yīng)保持密封、干燥，采樣使用前不應(yīng)打開(kāi)。24.4采樣時(shí)機(jī)和頻率4.4.1采樣時(shí)機(jī)應(yīng)根據(jù)采樣目的確定，或者在消毒方式、空間布局等發(fā)生變更時(shí)進(jìn)行。4.4.2生產(chǎn)過(guò)程控制樣品應(yīng)在場(chǎng)所工作時(shí)間段采集，避開(kāi)極端天氣。4.4.3采樣頻率應(yīng)根據(jù)污染風(fēng)險(xiǎn)的變化及時(shí)調(diào)整。可參考相關(guān)文獻(xiàn)資料、專業(yè)知識(shí)、相關(guān)經(jīng)驗(yàn)或者積累的歷史監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)。4.4.4開(kāi)展微生物動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，應(yīng)在一個(gè)工作周期內(nèi)在同一采樣點(diǎn)多次采樣。4.4.5應(yīng)制作衛(wèi)生監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)趨勢(shì)圖，定期研判采樣時(shí)機(jī)和頻率的科學(xué)性。5空氣樣品采樣技術(shù)要求5.1采樣位點(diǎn)的要求5.1.1應(yīng)按照GB/T18204.3—2013附錄A要求設(shè)置采樣位點(diǎn)數(shù)量。5.1.2應(yīng)按照均勻布點(diǎn)原則布置采樣位點(diǎn)。室內(nèi)1個(gè)采樣點(diǎn)的應(yīng)設(shè)置在中央，2個(gè)采樣點(diǎn)的應(yīng)設(shè)置在室內(nèi)對(duì)稱點(diǎn)上，3個(gè)采樣點(diǎn)的應(yīng)設(shè)置在室內(nèi)對(duì)角線四等分的3個(gè)等分點(diǎn)上，5個(gè)采樣點(diǎn)的應(yīng)按梅花布點(diǎn)。5.1.3采樣點(diǎn)距離地面高度應(yīng)為1.2m～1.5m，距離墻壁應(yīng)不小于1m。5.1.4采樣點(diǎn)應(yīng)避開(kāi)通風(fēng)口、通風(fēng)道等。5.1.5采樣點(diǎn)應(yīng)靠近屠宰加工區(qū)域，但應(yīng)避免屠宰加工作業(yè)對(duì)采樣設(shè)備的影響，防止生產(chǎn)過(guò)程中的固體或液體物質(zhì)飛濺進(jìn)入采樣設(shè)備。5.2采樣方法采樣方法應(yīng)選用撞擊法或自然沉降法，應(yīng)根據(jù)微生物檢測(cè)項(xiàng)目的不同選擇合適的采樣培養(yǎng)基，具體方法按照GB/T18204.3—2013進(jìn)行。6水樣品采樣技術(shù)要求6.1采樣位點(diǎn)的選擇6.1.1采集水池或水槽水樣品時(shí)，應(yīng)在對(duì)角線上選擇不少于2個(gè)采樣點(diǎn)，垂直水面下5cm～30cm處取樣。6.1.2采集噴淋頭或水龍頭水樣品時(shí)，應(yīng)根據(jù)場(chǎng)所噴淋頭或水龍頭總數(shù)量，隨機(jī)選擇1個(gè)～3個(gè)采樣點(diǎn)，采集瞬時(shí)水樣。6.1.3采集設(shè)施設(shè)備用水時(shí)，應(yīng)在最終出水口處取瞬時(shí)水樣。6.1.4采集污水時(shí)，應(yīng)按照排水系統(tǒng)管路分布情況，選擇2個(gè)～3個(gè)采樣點(diǎn)，重點(diǎn)為場(chǎng)內(nèi)污水排水口、內(nèi)部管網(wǎng)匯集處、水流方向的下游或與市政管網(wǎng)的連接處。6.2采樣方法6.2.1應(yīng)選擇符合GB/T5750.2—2023要求的玻璃材質(zhì)采樣器、一次性采樣袋或采樣瓶。玻璃采樣器采樣前應(yīng)洗滌和滅菌，干燥、密封備用。6.2.2采樣時(shí)應(yīng)直接采集，不應(yīng)用水樣涮洗已滅菌的采樣容器，并避免手指或其他物品對(duì)容器口的污6.2.3每個(gè)采樣點(diǎn)應(yīng)單獨(dú)采樣，每份樣品應(yīng)不少于500mL。6.2.4應(yīng)避免采集肉眼可見(jiàn)的固體雜質(zhì)，避免攪動(dòng)水底的沉積物。6.2.5對(duì)于含氯的水樣品，應(yīng)每升加入0.8mg硫代硫酸鈉去除殘氯。37物表涂抹樣品采樣技術(shù)要求7.1采樣位點(diǎn)的設(shè)置7.1.1物表涂抹樣品應(yīng)選擇與畜禽產(chǎn)品直接接觸的表面、與產(chǎn)品直接接觸表面鄰近的接觸表面以及可能對(duì)環(huán)境造成影響的表面。7.1.2與產(chǎn)品直接接觸的表面，應(yīng)包括但不限于工人手部、吊鉤、托盤、傳送帶、案板、刀具、與產(chǎn)品直接接觸的設(shè)備表面、包裝。7.1.3與產(chǎn)品直接接觸表面鄰近的接觸表面，應(yīng)包括但不限于設(shè)備外表面、支架表面、控制面板。7.1.4可能對(duì)環(huán)境造成影響的表面，應(yīng)包括但不限于墻面、地面、人員鞋底。7.2采樣方法7.2.1應(yīng)選擇無(wú)菌棉拭子涂抹法。棉拭子應(yīng)先在保存液中充分浸潤(rùn)，去除多余液體后使用。7.2.2根據(jù)采樣位點(diǎn)特點(diǎn)，微生物定量檢測(cè)應(yīng)選擇大小合適的規(guī)格板，每份樣品采樣總面積應(yīng)為50cm2。微生物定性檢測(cè)不必使用規(guī)格板，但棉拭子涂抹總面積應(yīng)不小于100cm2。7.2.3使用規(guī)格板時(shí)，應(yīng)使用棉拭子在規(guī)格板范圍內(nèi)來(lái)回均勻涂抹5次，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)拭子，使其與采樣點(diǎn)位充分接觸。7.2.4采集工人手部時(shí)，應(yīng)使用棉拭子在雙手指曲面從指根到指端來(lái)回涂抹各2次（每只手面積約30cm2并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)拭子。7.2.5涂抹完畢的拭子應(yīng)去除與手接觸部分，放入10mL無(wú)菌保存液中，保存液的成分根據(jù)微生物檢測(cè)項(xiàng)目所需而定。如物體表面有消毒劑殘留時(shí)，參照GB15982—2012要求在保存液中添加相應(yīng)中和劑。8樣品的保存和運(yùn)輸8.1每個(gè)裝有樣品的容器應(yīng)蓋好、標(biāo)記和密封。培養(yǎng)基平板等固體樣品應(yīng)裝入無(wú)菌密封袋，液體采樣瓶和采樣管應(yīng)豎立放置，運(yùn)輸過(guò)程中應(yīng)有防傾覆措施，保持樣品完整，避免樣品間交叉污染。8.2樣品包裝上應(yīng)標(biāo)明樣品編號(hào)、名稱、采樣點(diǎn)、采樣日期等必要信息。8.3樣品采集完畢后應(yīng)立即送檢。如不能及時(shí)送檢，應(yīng)置于2℃~8