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動(dòng)圖剖析十六種儀器原理紫外分光光譜UV
分析原理:吸收紫外光能量,引起分子中電子能級(jí)的躍遷譜圖的表示方法:相對(duì)吸收光能量隨吸收光波長(zhǎng)的變化提供的信息:吸收峰的位置、強(qiáng)度和形狀,提供分子中不同電子結(jié)構(gòu)的信息物質(zhì)分子吸收一定的波長(zhǎng)的紫外光時(shí),分子中的價(jià)電子從低能級(jí)躍遷到高能級(jí)而產(chǎn)生的吸收光譜叫紫外光譜。紫光吸收光譜主要用于測(cè)定共軛分子、組分及平衡常數(shù)。光衍射光線傳輸探測(cè)數(shù)據(jù)輸出紅外吸收光譜法IR分析原理:吸收紅外光能量,引起具有偶極矩變化的分子的振動(dòng)、轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)躍遷譜圖的表示方法:相對(duì)透射光能量隨透射光頻率變化提供的信息:峰的位置、強(qiáng)度和形狀,提供功能團(tuán)或化學(xué)鍵的特征振動(dòng)頻率甲醇紅外光譜分析過程核磁共振波譜法NMR分析原理:在外磁場(chǎng)中,具有核磁矩的原子核,吸收射頻能量,產(chǎn)生核自旋能級(jí)的躍遷譜圖的表示方法:吸收光能量隨化學(xué)位移的變化提供的信息:峰的化學(xué)位移、強(qiáng)度、裂分?jǐn)?shù)和偶合常數(shù),提供核的數(shù)目、所處化學(xué)環(huán)境和幾何構(gòu)型的信息NMR結(jié)構(gòu)樣品在磁場(chǎng)中進(jìn)樣當(dāng)外加射頻場(chǎng)的頻率與原子核自旋進(jìn)動(dòng)的頻率相同時(shí),射頻場(chǎng)的能量才能被有效地吸收,因此對(duì)于給定的原子核,在給定的外加磁場(chǎng)中,只能吸收特定頻率射頻場(chǎng)提供的能量,由此形成核磁共振信號(hào)核磁共振及數(shù)據(jù)輸出質(zhì)譜分析法MS分析原理:分子在真空中被電子轟擊,形成離子,通過電磁場(chǎng)按不同m/e的變化提供的信息:分子離子及碎片離子的質(zhì)量數(shù)及其相對(duì)峰度,提供分子量,元素組成及結(jié)構(gòu)的信息離子產(chǎn)生離子收集離子傳輸FT-ICR質(zhì)譜的分析器是一個(gè)具有均勻(超導(dǎo))磁場(chǎng)的空腔,離子在垂直于磁場(chǎng)的圓形軌道上作回旋運(yùn)動(dòng),回旋頻率僅與磁場(chǎng)強(qiáng)度和離子的質(zhì)荷比有關(guān),因此可以分離不同質(zhì)荷比的離子,并得到質(zhì)荷比相關(guān)的圖譜。離子回旋運(yùn)動(dòng)傅立葉變換氣相色譜法GC分析原理:樣品中各組分在流動(dòng)相和固定相之間,由于分配系數(shù)不同而分離譜圖的表示方法:柱后流出物濃度隨保留值的變化提供的信息:峰的保留值與組分熱力學(xué)參數(shù)有關(guān),是定性依據(jù)氣相色譜儀檢測(cè)流程:氣相色譜儀,主要由三大部分構(gòu)成:載氣、色譜柱、檢測(cè)器。每一模塊具體工作流程如下。注射器色譜柱檢測(cè)器凝膠色譜法GPC分析原理:樣品通過凝膠柱時(shí),按分子的流體力學(xué)體積不同進(jìn)行分離,大分子先流出譜圖的表示方法:柱后流出物濃度隨保留值的變化提供的信息:高聚物的平均分子量及其分布只依據(jù)尺寸大小分離,大組分最先被洗提出色譜固定相是多孔性凝膠,只有直徑小于孔徑的組分可以進(jìn)入凝膠孔道。大組分不能進(jìn)入凝膠孔洞而被排阻,只能沿著凝膠粒子之間的空隙通過,因而最大的組分最先被洗提出來。直徑小于孔徑的組分進(jìn)入凝膠孔道小組分可進(jìn)入大部分凝膠孔洞,在色譜柱中滯留時(shí)間長(zhǎng),會(huì)更慢被洗提出來。溶劑分子因體積最小,可進(jìn)入所有凝膠孔洞,因而是最后從色譜柱中洗提出。這也是與其他色譜法最大的不同。依據(jù)尺寸差異,樣品組分分離體積排阻色譜法適用于對(duì)未知樣品的探索分離。凝膠過濾色譜適于分析水溶液中的多肽、蛋
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