2024年北師大新版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2024年北師大新版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷257考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、通過動物細胞核移植技術獲得的新個體稱為克隆動物。下列克隆動物的描述，錯誤的是（）A.由于卵母細胞體積大、易操作、營養(yǎng)物質(zhì)多，其細胞質(zhì)中含有促進細胞核全能性表達的物質(zhì)等，所以常用作受體細胞B.克隆動物的性狀由細胞核供體、細胞質(zhì)供體和代孕母體共同決定C.克隆動物的獲得充分證明了動物細胞核具有全能性D.生物膜的流動性是核移植技術的原理之一2、限制酶BamHⅠ和BglⅡ是兩種常見的工具酶，它們的識別序列及切割位點依次為G↓GATCC和A↓GATCT．研究中用BamHⅠ切割DNA獲得目的基因，用BglⅡ切割質(zhì)粒，并連接得到重組質(zhì)粒。相關敘述正確的是（）A.限制酶切開的是磷酸二酯鍵，DNA連接酶催化氫鍵的形成B.目的基因經(jīng)BamHI切割后形成的黏性末端是-CTAGGC.分別用不同種限制酶切割，保證了目的基因定向插入質(zhì)粒D.經(jīng)兩種限制酶處理并連接得到的重組質(zhì)粒不能再被這兩種酶所識別3、犬細小病毒(CPV)單克隆抗體(CpvMcAb)可抑制病毒對宿主細胞的侵染及病毒的復制，進而殺滅幼犬體內(nèi)病毒。下列相關敘述，錯誤的是A.在CpvMcAb的制備過程中用到了動物細胞培養(yǎng)和動物細胞融合技術B.給幼犬注射CPV后，CPV抗體檢測呈陽性，說明發(fā)生了體液免疫反應C.經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出來的雜交瘤細胞即可直接生產(chǎn)CpvMcAbD.對雜交細胞培養(yǎng)時，需要無菌無毒環(huán)境，且溫度、氣體環(huán)境等要適宜4、下圖是研究人員從紅棕壤中篩選高效分解尿素細菌的過程示意圖；有關敘述錯誤的是（）

A.在配制步驟②③的培養(yǎng)基時，應先調(diào)pH再高壓蒸汽滅菌B.步驟③純化分解尿素細菌的原理是將聚集的細菌分散，獲得單菌落C.步驟③采用涂布平板法接種，并需向牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入尿素D.步驟④挑取③中不同種的菌落分別接種，比較細菌分解尿素的能力5、某課題組為得到青蒿素產(chǎn)量高的新品系，將青蒿素合成過程的某－－關鍵酶基因fps在野生青蒿中過量表達，其過程如下圖所示。有關敘述錯誤的是（）

A.經(jīng)圖示過程得到的fps基因不含啟動子和終止子B.酶1、酶2和酶3作用的化學鍵都是磷酸二酯鍵C.圖中含fps基因的DNA片段中有酶2的識別序列D.導入fps基因的青蒿植株中該基因都能過量表達6、如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，簡捷地分析出已知序列兩側(cè)的序列，具體流程如圖1（以EcoRI酶切為例），其中已知堿基序列如圖2．現(xiàn)對PCR產(chǎn)物測序，經(jīng)分析得到了片段F的完整序列，下列DNA單鏈序列中（虛線處省略了部分核苷酸序列），結(jié)果正確的是（）

A.5'-AACTATGCG——AGCCCTT-3'B.5'-AATTCCATG——CTGAATT-3'C.5'-GCAATGCGT——TCGGGAA-3'D.5'-TTGATACGC——CGAGTAC-3'7、下列關于制作傳統(tǒng)發(fā)酵食品的敘述，錯誤的是（）A.制作腐乳利用了毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶B.發(fā)酵溫度過低可能會導致制泡菜“咸而不酸”C.制作果酒時，需每隔一定時間打開瓶蓋放氣D.制作果醋時，醋酸桿菌能以乙醇作為碳源和能源8、下表為常用的限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）及其識別序列和切割位點，由此推斷的以下說法中，正確的是（）。限制酶名稱識別序列和切割位點|限制酶名稱識別序列和切割位點BarmHIG↓GATCCKpnIGGTAC↓CEcoRIG↓AATTCSau3AI↓GATCHindIGTY↓RACSmaICCC↓GGG

（注：Y＝C或T，R＝A或G）A.一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列B.限制酶切割后一定形成黏性末端C.不同的限制酶切割DNA分子后可以形成相同的黏性末端D.限制酶的切割位點在識別序列內(nèi)部9、RNA干擾是指通過RNA的介導，特異性降解相應mRNA，從而導致的基因沉默現(xiàn)象。miRNA能介導RNA干擾。篩選來源于伊蚊的負向調(diào)節(jié)自身免疫的miRNA，構(gòu)建表達伊蚊miRNA的工程菌株，可防治伊蚊。下列敘述錯誤的是（）A.RNA干擾導致基因沉默使相關基因雖能轉(zhuǎn)錄但無法翻譯B.使用伊蚊來源的miRNA進行菌株改良容易使伊蚊產(chǎn)生抗性C.使用伊蚊特異miRNA可提高工程菌的寄主靶向性和特異性D.伊蚊存在能負向調(diào)節(jié)自身免疫的miRNA說明免疫具有穩(wěn)態(tài)評卷人得分二、多選題(共8題，共16分)10、植株甲金花菜是一種多年生開花植物，具有多種優(yōu)良性狀，另一種遠緣植株乙青花菜存在抗除草劑基因，欲將植株乙細胞中抗除草劑基因引入植株甲中，進行了如下操作。下列相關敘述，正確的是（）

A.過程A取頂芽細胞的操作有利于獲得脫毒苗B.過程B中常用PEG誘導原生質(zhì)體融合C.兩個細胞融合完成的標志是再生出細胞壁D.該雜種植株的獲得利用了植物細胞的全能性11、轉(zhuǎn)基因作物的推廣種植，大幅度提高了糧食產(chǎn)量，取得了巨大的經(jīng)濟效益和生態(tài)效益碩果累累的轉(zhuǎn)基因成果在帶給人們喜悅的同時，也促使人們關注轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題。下列有關轉(zhuǎn)基因作物的安全性的敘述，正確的是（）A.轉(zhuǎn)入抗性基因的植物可能成為“入侵物種”，影響生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性B.抗性基因可能會隨花粉傳播到田間近緣野生植物體內(nèi)，造成基因污染C.若目的基因來自自然界，則培育出的轉(zhuǎn)基因植物不會有安全性問題D.大面積種植抗蟲棉，有可能會導致棉鈴蟲群體中相關抗性基因頻率增大12、基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（）

A.若某基因是從人的細胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動子序列B.擴增目的基因時，利用耐高溫的DNA連接酶從引物a、b的3'-端進行子鏈合成C.導入人血清白蛋白基因的綿羊受體細胞是乳腺細胞D.利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將含有目的基因的重組質(zhì)粒整合到植物受體細胞的染色體DNA上13、如圖是單克隆抗體制備過程示意圖，1～3代表相關過程，a～e代表相關細胞，其中c是兩兩融合的細胞。以下敘述錯誤的是（）

A.過程1是給小鼠注射特定抗原蛋白，可刺激小鼠產(chǎn)生特異性免疫反應B.過程2的促融方法可采用電融合技術，該技術能擊穿核膜促使核融合C.c細胞有三種，每種細胞染色體組數(shù)不相等，e細胞是雜交瘤細胞D.過程3是進行抗體檢測，并克隆產(chǎn)生陽性細胞的過程14、利用枯草芽孢桿菌的發(fā)酵可以生產(chǎn)亮氨酸脫氫酶。在啟動子和亮氨酸脫氫酶基因之間插入信號肽（SPN）基因并將重組質(zhì)粒導人枯草芽孢桿菌構(gòu)建工程菌，可提高亮氨酸脫氫酶的生產(chǎn)水平。重組質(zhì)粒的構(gòu)建如圖所示，KmR為卡那霉素抗性基因，ApR為氨芐青霉素抗性基因，圖中各限制酶切割產(chǎn)生的黏性末端不同。下列敘述正確的是（）

A.重組質(zhì)粒pMA5-SPN-leudh除圖中標注外還應具有終止子、復制原點等結(jié)構(gòu)B.構(gòu)建重組質(zhì)粒用NdeI和BamHI兩種酶有助于正確插入目的基因C.圖中KmR和ApR存在于質(zhì)粒中的作用是便于重組DNA分子的篩選D.圖中各限制酶切開的是氫鍵和磷酸二酯鍵，切下的DNA片段拼接需依靠DNA連接酶15、為了獲得抗蚜蟲棉花新品種，研究人員將雪花蓮凝集素基因（GNA）和尾穗莧凝集素基因（ACA）與載體（pBI121）結(jié)合，然后導入棉花細胞（如下圖所示）。下列操作與實驗目的相符的是（）

A.用限制酶BsaBⅠ和DNA連接酶處理兩種基因可獲得GNA-ACA融合基因B.用KpnⅠ和XhoⅠ兩種酶處理融合基因和載體可保證基因轉(zhuǎn)錄方向正確C.將棉花細胞接種在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上可篩選出轉(zhuǎn)基因細胞D.用PCR技術可檢測GNA和ACA基因是否導入棉花細胞中16、抗菌肽又名多肽抗生素，廣泛存在于昆蟲以及兩棲類動物、哺乳動物體內(nèi)，具有廣譜抗菌活性。其作用原理是在細菌細胞膜上形成跨膜的離子通道，造成細胞內(nèi)容物泄漏，最終導致細菌死亡。最新研究表明，某些抗菌肽對癌細胞甚至感染了病毒的宿主細胞均具有殺傷作用。下列相關敘述正確的是（）A.從免疫調(diào)節(jié)的方式分析，抗菌肽參與特異性免疫過程B.抗菌肽改變了細胞膜的通透性，使細胞不能保持正常滲透壓而死亡C.利用轉(zhuǎn)基因技術生產(chǎn)抗菌肽時，常選用大腸桿菌作為受體菌D.對抗菌肽的研究可為治療癌癥、新型冠狀病毒肺炎等提供新思路17、淀粉經(jīng)淀粉酶水解后得到的產(chǎn)物是重要的工業(yè)原料；但工業(yè)化生產(chǎn)常需在高溫條件下進行，而現(xiàn)有的淀粉酶耐熱性不強，科研人員發(fā)現(xiàn)將淀粉酶（AmyS1）第27位的亮氨酸替換為天冬氨酸能產(chǎn)生耐熱性高的淀粉酶（AmyS2），由此科研人員根據(jù)AmyS2的氨基酸序列設計并人工合成了AmyS2基因，將其導入芽孢桿菌內(nèi)，具體過程如下圖所示。最終結(jié)果表明，與導入質(zhì)粒B相比，導入質(zhì)粒C的芽孢桿菌培養(yǎng)液中更易獲得并提純AmyS2．下列說法錯誤的是（）

A.獲得AmyS2基因并將其導入芽孢桿菌得到AmyS2的過程是通過基因工程實現(xiàn)的B.構(gòu)建質(zhì)粒C時需用限制酶Eco52I和BamHI同時切割質(zhì)粒B和信號肽基因C.信號肽基因表達的產(chǎn)物可幫助核糖體上合成的AmyS2進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體D.可用PCR技術檢測芽孢桿菌的DNA上是否插入了AmyS2基因評卷人得分三、填空題(共9題，共18分)18、微生物________________的方法很多，最常用的是_____________和__________________。19、在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？____________________________20、回答下列問題。

（1）目前人類對基因________及基因間的________________尚缺乏足夠的認識，要想通過基因檢測達到預防疾病的目的是困難的；況且人類的____________病，既與基因有關，又與環(huán)境和________________有關。

（2）生物武器種類包括__________、________、__________，以及經(jīng)過___________的致病菌等。

（3）1998年6月27日，中美兩國元首在關于《禁止生物武器公約》議定書的聯(lián)合聲明中，重申了在任何情況下_____________、_____________、______________生物武器，并反對生物武器及其技術和設備的擴散。21、纖維素酶是一種__________，一般認為它至少包括三種組分，即__________、___________和_______________，前兩種酶使纖維素分解成___________，第三種酶將纖維二糖分解成_____________。正是在這三種酶的協(xié)同作用下，纖維素最終被__________成葡萄糖，為微生物的生長提供營養(yǎng)，同樣，也可以為人類所利用。22、本課題對能分解尿素的細菌進行了初步的篩選。但是，這只是分離純化菌種的第一步。對分離的菌種作進一步的鑒定，還需要借助生物化學的方法。在細菌分解尿素的化學反應中，細菌合成的___________將尿素分解成了_____________。氨會使培養(yǎng)基的________________，pH______________。因此，我們可以通過檢測培養(yǎng)基______________來判斷該化學反應是否發(fā)生。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_____________，培養(yǎng)某種細菌后，如果pH升高，指示劑將變________________。23、第三步：將目的基因?qū)隷_____24、為了避免外源DNA等因素污染，PCR實驗中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進行_____________。而使用的緩沖液并在__________℃存儲。25、應用：______（微型繁殖、作物脫毒、神奇的人工種子）、______、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。26、首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了______，方法是采用______。評卷人得分四、判斷題(共1題，共2分)27、對微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最廣泛和取得實際應用成果最多的領域，是因為微生物具有生理結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡單、生長繁殖快、對環(huán)境因素敏感和容易進行遺傳物質(zhì)操作等優(yōu)點。（選擇性必修3P101）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共1題，共7分)28、研究表明生物制劑W對不同種類動物細胞的分裂均有促進作用。有同學設計相關實驗來驗證這個觀點。請根據(jù)以下提供的實驗材料；完善該實驗步驟，并預測實驗結(jié)果。

實驗材料：培養(yǎng)液；正常肝組織、肝癌組織、W、胰蛋白酶。

（要求與說明：答題時不考慮加入W后的體積變化等誤差。提供的細胞均具有分裂能力；只進行原代培養(yǎng)且培養(yǎng)條件適宜）

（1）實驗步驟：

①用_________分別處理正常肝組織和肝癌組織獲得分散的細胞。將兩種分散的細胞加入培養(yǎng)液中制成兩種細胞懸液。培養(yǎng)液需要中加入__________等營養(yǎng)物質(zhì)和__________用以滅菌。

②在顯微鏡下用_____________直接計數(shù)兩種細胞懸液中細胞的數(shù)量；并進行記錄。

③取滅菌后的培養(yǎng)瓶若干個均分為A、B兩組，A組加入正常肝細胞懸液；B組加入_________。從A、B組中各取出一半培養(yǎng)瓶作為C、D組，分別加入_________。放入動物細胞培養(yǎng)箱在適宜條件下培養(yǎng)。

④各組樣品在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段合適的時間后，每組取部分樣品，加入_____________后搖勻；在顯微鏡下計數(shù)并記錄細胞數(shù)量。

⑤重復④若干次。

⑥統(tǒng)計并分析所得數(shù)據(jù)。

（2）預測實驗結(jié)果（用坐標系和曲線示意圖表示）_____________評卷人得分六、綜合題(共4題，共24分)29、下面兩幅圖分別是單克隆抗體制備過程和克隆羊培育過程示意圖；據(jù)圖回答下列問題。

(1).圖甲和圖乙所示的過程中，都必須用到的動物細胞工程技術手段是____________。該過程要在培養(yǎng)液中加入的特殊物質(zhì)是__________，②不同于植物細胞的方法是_____________。經(jīng)兩次篩選獲得的雜交瘤細胞的特點是_______________；

(2).單克隆抗體能定向攻擊癌細胞，主要是利用其_________________________。

(3).克隆羊的成功體現(xiàn)了__________，其生殖方式為____________，若不考慮環(huán)境因素影響，克隆羊的性狀全部像白面綿羊嗎?_____________。原因是______________________。

(4).圖乙過程的技術具有多種用途，但是不能___________。A．有選擇地繁殖某一性別的家畜B．繁殖家畜中的優(yōu)良個體C．用于保存物種D．改變動物的核基因30、脫水素（DHN）是植物細胞中一種與抗?jié)澈δ芰γ芮邢嚓P的蛋白質(zhì)；由DHIN基因編碼。研究人員將牡丹的DHN基因轉(zhuǎn)移至擬南芥中，以研究脫水素對植物抗?jié)承阅艿挠绊?。請回答下列問題：

（1）從牡丹葉片細胞中提取總RNA，以此為模板進行逆轉(zhuǎn)錄，獲得__________文庫，此類基因文庫和基因組文庫中的基因在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是______________________________。

（2）利用PCR技術對目的基因進行擴增，擴增的前提是需要利用一段____________________，以便合成引物。以1個目的基因片段為模板進行擴增，經(jīng)過5次循環(huán)后，消耗的引物數(shù)量為__________。

（3）將獲得的基因插入質(zhì)粒，構(gòu)建基因表達載體，其目的是使目的基因____________________，并可以遺傳給下一代；基因表達載體中還要有標記基因，標記基因的作用是__________。

（4）用花粉管通道法將目的基因轉(zhuǎn)入擬南芥，此方法中，基因表達載體借助__________進入受體細胞；為觀察轉(zhuǎn)基因擬南芥的抗?jié)衬芰?，需要將______________________________植株進行澇害處理，觀察其生理狀態(tài)的變化。31、乳糖不耐癥是由于乳糖酶（LCT）分泌少；不能完全消化分解母乳或牛乳中的乳糖所引起的非感染性腹瀉?？蒲泄ぷ髡呃蒙锛夹g培育出轉(zhuǎn)基因低乳糖奶牛新品種，給患乳糖不耐癥患者帶來福音。下圖1為轉(zhuǎn)基因低乳糖奶牛培育流程，圖2是使用限制酶BamHⅠ切割DNA產(chǎn)生的結(jié)果。請分析回答問題：

（1）科學家在構(gòu)建重組質(zhì)粒T時；首先采用PCR技術對LCT基因進行擴增，在擴增目的基因的操作過程中，加入的物質(zhì)有：模板DNA；引物、4種脫氧核苷酸以及________________酶；若一個該DNA分子在PCR儀中經(jīng)過4次循環(huán)，需要________個引物，產(chǎn)物中共有________個等長的LCT基因片段。

（2）圖1中的培育轉(zhuǎn)基因低乳糖奶牛采用的技術有___________。

（3）據(jù)圖2分析；BamHⅠ的識別序列以及切割位點（用“↓”表示）是___________。

（4）圖1中，切割質(zhì)粒S用的酶是___________，切割后形成1.8kb和8.2kb（1kb＝1000對堿基）兩種片段。若用BamHⅠ和EcoRⅠ兩種酶切割重組質(zhì)粒T，獲得1.6kb和8.8kb兩種片段，則轉(zhuǎn)入的LCT基因長度為________kb。

（5）在轉(zhuǎn)基因低乳糖奶牛的乳腺細胞中；可檢測到的物質(zhì)有________（填字母）。

A.LCT基因B.LCTmRNAC.LCT32、2006年；世界上第一頭攜帶了抗瘋牛病基因的克隆牛在我國山東淄博誕生，其培育過程如右圖所示，據(jù)圖回答：

（1）從甲牛采集的細胞A在體外培養(yǎng)時一般不超______代。

（2）目前還不能將細胞A用類似植物組織培養(yǎng)的方法獲得完整動物個體，原因是______。

（3）細胞B常為乙牛卵巢中采集的______細胞，細胞C一般處于______期，因為此時細胞質(zhì)中的物質(zhì)有助于重組細胞分裂分化、恢復______的全能性。目前核移植中普遍使用的去核方法是______。

（4）過程①所用的培養(yǎng)液除了無機鹽、有機鹽、激素、氨基酸等營養(yǎng)成分外，還需加入______等天然成分。當胚胎發(fā)育到______期，可應用______技術；將其植入到丙牛子宮內(nèi)發(fā)育成健康小牛。

（5）胚胎分割技術可提高胚胎的利用率，在對囊胚階段的胚胎進行分割時，要注意______。參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、B【分析】【分析】

生物體通過無性繁殖所生成的群體或個體稱為克?。挥蓜游矬w內(nèi)一個細胞經(jīng)過無性生殖過程進而發(fā)育形成的動物個體為克隆動物。體細胞克隆即取出一個雙倍體細胞核移入一個去核的卵細胞，并在一定條件下進行核卵重組，再植入代孕母體中發(fā)育成新個體的過程。

【詳解】

A；選用卵母細胞作為受體的原因是：卵母細胞體積大、易操作、營養(yǎng)物質(zhì)多；其細胞質(zhì)中含有促進細胞核全能性表達的物質(zhì)等，A正確；

B；代孕母體的作用是在孕育過程中為克隆動物提供營養(yǎng)；不能決定生物的性狀，B錯誤；

C；克隆動物是利用了動物細胞核移植技術；且獲得個體，說明了動物細胞核具有全能性，C正確；

D；核移植過程中需要用電刺激促進細胞融合；運用了生物膜的流動性原理，D正確。

故選B。

【點睛】2、D【分析】【分析】

關于限制酶；考生可以從以下幾方面把握：

（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來。

（2）特異性：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。

（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端。

【詳解】

A；限制酶能使磷酸二酯鍵斷裂；DNA連接酶能夠使磷酸二酯鍵重新形成，即這兩種酶的作用部位均為磷酸二酯鍵，A錯誤；

B；根據(jù)題意可知；限制酶BamHⅠ的識別序列及切割位點為G↓GATCC，因此目的基因經(jīng)BamHI切割后形成的黏性末端是-GATC，B錯誤；

C；分別用兩種限制酶切割；由于形成的黏性末端相同，因此并不能保證目的基因定向插入質(zhì)粒，C錯誤；

D；根據(jù)題意可知；用BamHⅠ切割DNA獲得目的基因，用BglⅡ切割質(zhì)粒，即經(jīng)兩種限制酶處理并連接得到的重組質(zhì)粒不能再被這兩種酶所識別，D正確。

故選D。3、C【分析】【分析】

由題文和選項的描述可知；該題考查學生對單克隆抗體的制備過程及動物細胞培養(yǎng)的相關知識的識記和理解能力。

【詳解】

在單克隆抗體的制備過程中，使用的動物細胞工程技術有動物細胞培養(yǎng)和動物細胞融合技術，A正確；給幼犬注射CPV后，會激發(fā)體液免疫，產(chǎn)生相應的抗體，因此若CPV抗體檢測呈陽性，說明發(fā)生了體液免疫反應，B正確；經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出來的雜交瘤細胞并不都符合人們需要，還需經(jīng)過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，篩選出能分泌CPVMcAb的雜交瘤細胞，C錯誤；對雜交細胞培養(yǎng)時，需要無菌無毒環(huán)境，且溫度、氣體環(huán)境等要適宜，D正確。4、C【分析】1；培養(yǎng)基的概念、種類及營養(yǎng)構(gòu)成：

（1）概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求；配制出的供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。

（2）種類：固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。

（3）營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水；碳源、氮源、無機鹽；此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。

2；微生物常見的接種的方法：

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種；劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

A；配制培養(yǎng)基時；應先調(diào)pH值后高壓蒸汽滅菌，防止雜菌污染，A正確；

B；步驟③純化分解尿素細菌的原理是將聚集的細菌通過涂布平板法分散；獲得單細胞菌落，B正確；

C；步驟③篩選分解尿素的細菌；培養(yǎng)基中應以尿素為唯一氮源，不能加入牛肉膏蛋白胨，C錯誤；

D；步驟④鑒定細菌分解尿素的能力時；挑?、壑胁煌N的菌落分別接種，比較細菌分解尿素的能力，D正確。

故選C。5、D【分析】【分析】

據(jù)圖分析；酶1可以催化逆轉(zhuǎn)錄過程，表示逆轉(zhuǎn)錄酶，酶2是限制酶，酶3是DNA連接酶，據(jù)此分析作答。

【詳解】

A；真核細胞的mRNA轉(zhuǎn)錄后通過加工剪切了啟動子和終止子；故反轉(zhuǎn)錄得到的基因不含啟動子和終止子，A正確；

B；酶1促進逆轉(zhuǎn)錄的過程；故為逆轉(zhuǎn)錄酶，酶2、酶3用于切割目的基因和質(zhì)粒，為限制酶和DNA連接酶，都能連接兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵，B正確；

C；酶2是限制酶；限制酶對于DNA序列的識別具有特異性，故圖中含fps基因的DNA片段中有酶2的識別序列，C正確；

D；導入fps基因的青蒿植株中基因不一定能過量表達；故必須檢測轉(zhuǎn)基因青蒿植株中的青蒿素產(chǎn)量，若產(chǎn)量增高，則說明達到了目的，D錯誤。

故選D。6、B【分析】【分析】

限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。EcoRI識別的序列是GAATTG且在G與A之間切割。

【詳解】

對PCR產(chǎn)物測序；得到了片段F的完整序列，由于片段F具有被限制酶EcoRI剪切的黏性末端，EcoRI識別的序列是GAATTG且在G與A之間切割，所以5'端應該是AATTC，3'端是GAATT，B正確，ACD錯誤。

故選B。7、C【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。

【詳解】

A；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；制作腐乳利用了毛霉等產(chǎn)生的蛋白酶、脂肪酶，A正確；

B；泡菜“咸而不酸”可能是食鹽濃度過高；發(fā)酵溫度過低抑制乳酸菌產(chǎn)生乳酸所致，B正確；

C；果酒發(fā)酵時；為了排出產(chǎn)生的氣體，需要將瓶蓋擰松放氣，但不能打開，否則會被雜菌污染，C錯誤；

D；制作果醋時；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?，該過程中醋酸桿菌能以乙醇作為碳源和能源，D正確。

故選C。8、C【分析】【分析】

限制酶的特點：識別特定的脫氧核苷酸序列；并在特定的位點進行切割，切割后可能形成黏性末端或平末端。

【詳解】

A；由圖可知；由于Y＝C或T，R＝A或G，因此HindⅠ可以識別多種核苷酸序列，A錯誤；

B；限制酶切割后可能形成黏性末端或平末端；B錯誤；

C；不同的限制酶切割DNA分子后可以形成相同的黏性末端；如BamHⅠ和Sau3AⅠ，C正確；

D；限制酶的切割位點在識別序列內(nèi)部或外部；如Sau3AⅠ，D錯誤。

故選C。9、B【分析】【分析】

RNA干擾是指通過RNA的介導；特異性降解相應mRNA，從而阻礙了表達的過程。

【詳解】

A；由題干可知；RNA干擾是指通過RNA的介導，特異性降解相應mRNA，mRNA是翻譯的模板，所以RNA干擾導致基因沉默使相關基因雖能轉(zhuǎn)錄但無法翻譯，A正確；

B；使用伊蚊來源的miRNA進行菌株改良；該菌株能表達伊蚊miRNA，所以不易使伊蚊產(chǎn)生抗性，B錯誤；

C；構(gòu)建表達伊蚊miRNA的工程菌株；該菌株能表達伊蚊miRNA，所以可提高工程菌的寄主靶向性和特異性，C正確；

D；伊蚊存在能負向調(diào)節(jié)自身免疫的miRNA；當伊蚊自身免疫強烈是可緩解自身免疫，說明免疫具有穩(wěn)態(tài)，D正確。

故選B。二、多選題(共8題，共16分)10、A:B:C:D【分析】【分析】

分析圖可知；該圖為植物體細胞雜交過程，其中A為去除細胞壁，制備原生質(zhì)體，可用酶解法；B為誘導原生質(zhì)體融合，可以用聚乙二醇（PEG）處理；C為培養(yǎng)篩選出所需的雜種細胞；D為照分化，據(jù)此答題即可。

【詳解】

A；頂端分生組織幾乎不帶毒；因此，過程A中取頂芽細胞進行體細胞雜交有利于獲得脫毒苗，A正確；

B；B為誘導原生質(zhì)體融合；可使用聚乙二醇（PEG）促融，B正確；

C；兩個植物細胞融合完成的標志是再生出細胞壁；C正確；

D；植物體細胞雜交技術利用了細胞膜的流動性和植物細胞的全能性等原理；D正確。

故選ABCD。11、A:B:D【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題包括：食物安全（滯后效應；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

【詳解】

A；轉(zhuǎn)基因生物具有某些特殊性質(zhì)；他們在某地區(qū)的競爭能力較強，可能成為“外來入侵物種”，威脅生態(tài)系統(tǒng)中其他生物的存在，從而影響生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性，A正確；

B；轉(zhuǎn)基因作物的基因可以通過花粉傳播到田間近緣野生植物體內(nèi)；該近緣物種在通過授粉會造成基因進一步擴散和污染，B正確；

C；即使目的基因來自自然界；培自出的轉(zhuǎn)基因植物仍然可能會有潛在的安全性向題，C錯誤；

D；大面積種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉；有可能會導致棉鈴蟲群體中相關抗性基因頻率增加，D正確。

故選ABD。12、B:C:D【分析】【分析】

將目的基因?qū)胫参锛毎Ｓ棉r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可整合到受體細胞的染色體DNA上?；虮磉_載體常包括目的基因；啟動子、終止子、標記基因。標記基因是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。

【詳解】

A；mRNA是由基因啟動子后面的序列編碼而來的；若某基因是從人的細胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動子序列，A正確；

B、擴增目的基因時，利用耐高溫的DNA聚合酶從引物a、b的3'-端進行子鏈合成；B錯誤；

C；導入人血清白蛋白基因的綿羊受體細胞不是乳腺細胞；而是受精卵或早期胚胎細胞，C錯誤；

D；農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞；并且整合到受體細胞染色體的DNA上，根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點，將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上，將基因轉(zhuǎn)入動物細胞常用顯微注射法，D錯誤。

故選BCD。13、B:C【分析】【分析】

單克隆抗體的制備涉及細胞融合；細胞培養(yǎng)和細胞篩選；從題干信息圖可看出，過程1代表的是注射特異性抗原使小鼠免疫，從而獲得能產(chǎn)生相應抗體的B淋巴細胞；過程2是將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合的過程；過程3是克隆培養(yǎng)篩選后的陽性細胞，一共需要進行兩次，最終獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞，此后在培養(yǎng)基或小鼠腹腔中培養(yǎng)。

【詳解】

A；圖中過程1是通過注射抗原或抗原蛋白來獲得產(chǎn)生相應抗體的B淋巴細胞；A正確；

B；過程2是促進細胞融合的過程；其中電融合技術是用低壓電流擊穿細胞膜促使細胞融合，B錯誤；

C；c細胞為雜交瘤細胞；有三種，分別是骨髓瘤細胞-骨髓瘤細胞、骨髓瘤細胞-B淋巴細胞、B淋巴細胞-B淋巴細胞，其中骨髓瘤細胞和B淋巴細胞都有兩個染色體組，融合后的細胞都含有4個染色體組，其中e細胞是雜交瘤細胞，C錯誤；

D；過程3是專一抗體檢測及克隆培養(yǎng)篩選后獲得陽性細胞；該過程需要多次進行，D正確。

故選BC。14、A:B:C【分析】【分析】

限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種。

【詳解】

A；重組質(zhì)粒pM5-SPN-leudh中除圖中標注外；還應該具有終止子，復制原點等結(jié)構(gòu)，A正確；

B；NdeI和BamHI兩種酶切割形成的黏性末端不同；構(gòu)建重組質(zhì)粒用NdeI和BamHI兩種酶切有助于目的基因正確插入，B正確；

C；KmR和A_pR為標記基因；圖中KmR和A_pR存在于質(zhì)粒中的作用是便于重組DNA分子的篩選，C正確；

D；限制酶和DNA連接酶的作用部位為磷酸二酯鍵；D錯誤。

故選ABC。15、A:D【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ荂a2+處理法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)：抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；兩個基因中都有限制酶BsaBⅠ的一個識別位點；用該限制酶切割后再用DNA連接酶可拼接成GNA-ACA融合基因，A正確；

B；GNA-ACA融合基因的兩端有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位點；而質(zhì)粒上也有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位點，但方向不一致，用兩酶切割，正好是反向連接目的基因和運載體，B錯誤；

C；運載體上帶有卡那霉素的抗性基因；沒有氨芐青霉素的抗性基因，轉(zhuǎn)基因細胞在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上不能存活，C錯誤；

D；用PCR技術擴增GNA和ACA基因后；再通過分子雜交或電泳的方式，可檢測是否導入棉花細胞中，D正確。

故選AD。16、B:D【分析】【分析】

1；病毒同所有生物一樣；具有繁殖、遺傳、變異、進化的特點，病毒是一種體積非常微小，結(jié)構(gòu)極其簡單的生物，僅由蛋白質(zhì)外殼和內(nèi)部的遺傳物質(zhì)組成，沒有細胞結(jié)構(gòu)。不能獨立生活，只能寄生在活細胞內(nèi)，并在寄主細胞內(nèi)進行繁殖。一旦離開了活細胞，病毒就無法生存，就會變成結(jié)晶體。

2；真菌較細菌作為受體細胞的優(yōu)勢是真菌為真核微生物；含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體可對蛋白進行加工和修飾。

【詳解】

A；通過題干信息可知；抗菌肽具有廣譜抗菌活性，抗菌肽不參與特異性免疫過程，A錯誤；

B；根據(jù)題干信息；抗菌肽“在細菌細胞膜上形成跨膜的離子通道，造成細胞內(nèi)容物泄漏，最終導致細胞死亡”，即改變了細胞膜的通透性，使細胞不能保持正常滲透壓而死亡，B正確；

C；抗菌肽“是廣泛存在于昆蟲以及兩棲類動物、哺乳動物體內(nèi)的抗菌活性物質(zhì)”；即來源于真核細胞，如利用轉(zhuǎn)基因技術提高抗菌肽的產(chǎn)量，但最好選擇真菌作為受體菌，因為真菌是真核細胞，繁殖速度快，遺傳物質(zhì)少，C錯誤；

D；根據(jù)題干信息；“某些抗菌肽對癌細胞甚至病毒等均具有強有力的殺傷作用”，則對抗菌肽的研究可為治療癌癥、新型冠狀病毒肺炎等提供新思路，D正確。

故選BD。

【點睛】17、A:B:C【分析】【分析】

基因工程：目的基因的篩選與獲??；構(gòu)建基因表達載體、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。

分泌蛋白的合成：首先；在游離的核糖體中以氨基酸為原料開始多肽鏈的合成。當合成了一段肽鏈后，這段肽鏈會與核糖體一起轉(zhuǎn)移到粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上繼續(xù)合成過程，并且邊合成邊轉(zhuǎn)移到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)，再經(jīng)過加工；折疊，形成具有一定空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜鼓出形成囊泡，包裹著蛋白質(zhì)離開內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，到達高爾基體，與高爾基體融合，高爾基體對蛋白質(zhì)做進一步的加工，然后形成包裹著蛋白質(zhì)的囊泡轉(zhuǎn)運到細胞膜，與細胞膜融合。

【詳解】

A；科研人員根據(jù)AmyS2的氨基酸序列設計并人工合成了AmyS2基因；因此獲得AmyS2基因并將其導入芽孢桿菌得到AmyS2的過程是通過蛋白質(zhì)工程和基因工程實現(xiàn)的，A錯誤；

B；BamHI會破壞AmyS2基因；B錯誤；

C；在分泌蛋白的合成過程中；信號肽序列可幫助肽鏈進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)被切割，因此信號肽基因表達的產(chǎn)物可幫助核糖體上合成的AmyS2進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，但不能引導其進入高爾基體，C錯誤；

D；可用PCR技術檢測芽孢桿菌的DNA上是否插入了AmyS2基因；如果經(jīng)過PCR擴增，不出現(xiàn)擴增產(chǎn)物，說明沒有插入基因，反之，則成功插入，D正確。

故選ABC。三、填空題(共9題，共18分)18、略

【解析】①.接種②.平板劃線法③.稀釋涂布平板法19、略

【解析】避免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種20、略

【分析】【分析】

【詳解】

（1）人類對基因的結(jié)構(gòu)；基因間的相互作用尚缺乏足夠的認識；人類的多基因病，既與基因有關，又與環(huán)境和生活習慣有關。

（2）生物武器種類包括致病菌；病毒、生化毒劑、以及經(jīng)過基因重組的致病菌。

（3）1998年6月27日，中美兩國元首在關于《禁止生物武器公約》議定書的聯(lián)合聲明中，重申了在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器。【解析】①.結(jié)構(gòu)②.相互作用③.多基因④.生活習慣⑤.致病菌⑥.病毒⑦.生化毒劑⑧.基因重組⑨.不發(fā)展⑩.不生產(chǎn)?.不儲存21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】復合酶C1酶CX酶葡萄糖苷酶纖維二糖葡萄糖水解22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】脲酶氨堿性增強升高pH的變化酚紅指示劑紅23、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】受體細胞24、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】高壓滅菌—2025、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】植物繁殖的新途徑作物新品種的培育（單倍體育種、突變體利用）26、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因DNA分子雜交技術。四、判斷題(共1題，共2分)27、A【分析】【詳解】

微生物具有生理結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡單的優(yōu)點，便于研究，生長周期短，具有生長繁殖快的優(yōu)點，遺傳物質(zhì)簡單，具有容易進行遺傳物質(zhì)操作的優(yōu)點，對環(huán)境因素敏感，因此對微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最廣泛和取得實際應用成果最多的領域，這句話是正確的。五、實驗題(共1題，共7分)28、略

【分析】【分析】

1；動物細胞培養(yǎng)的條件：

（1）無菌；無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液；以清除代謝廢物；

（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖；氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等；還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)；

（3）適宜的溫度和pH；

（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）。

2；實驗操作步驟的安排一般如下：第一步：取材隨機均分為幾組；編號；第二步：不同組自變量的處理；第三步：把上述各組放在無關變量相同且適宜等條件下處理一段時間；第四步：觀察并記錄比較相應的因變量。根據(jù)題意可知，本實驗的目的是驗證生物制劑W對動物不同細胞的分裂具有促進作用，則該實驗的自變量是細胞的種類及是否加入生物制劑W，因變量是細胞懸液中細胞的數(shù)目，對細胞直接計數(shù)可以采用血球板計數(shù)法。

【詳解】

（1）①動物細胞培養(yǎng)前需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶分別處理正常肝組織和肝癌組織獲得分散的細胞。將兩種分散的細胞加入培養(yǎng)液中制成兩種細胞懸液。動物細胞的培養(yǎng)液中需要加入葡萄糖；氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清；為了保證無菌的條件，一般在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素。

②在顯微鏡下可以采用血球計數(shù)板直接計數(shù)兩種細胞懸液中細胞的數(shù)量；并進行記錄。

③本實驗的目的是驗證生物制劑W對動物不同細胞的分裂具有促進作用；根據(jù)題干所給實驗材料可知，不同細胞是指正常肝細胞和癌細胞，因此該實驗應該設置四組，變量為細胞的種類及是否加入生物制劑W，具體如下：

A組：培養(yǎng)液中加入正常肝細胞懸液；B組：培養(yǎng)液中加入與之等量癌細胞懸液；從A；B組中各取出一半培養(yǎng)瓶作為C、D組；C、D兩組：培養(yǎng)液中加入等量的生物制劑W。放入動物細胞培養(yǎng)箱在適宜條件下培養(yǎng)。

④該實驗的因變量是計數(shù)細胞懸液中細胞的數(shù)量；因此各組樣品在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段合適的時間后，每組取部分樣品，加入胰蛋白酶或膠原蛋白酶搖勻，將細胞分散成單個，然后在顯微鏡下計數(shù)。

（2）預測實驗結(jié)果；若較長時間培養(yǎng)，因為正常細胞的增殖次數(shù)有限，故A組中細胞數(shù)量最少，由于W促進細胞增殖的作用，因此C組細胞數(shù)量多于A組；而癌細胞可以無限增殖，且由于其細胞膜上的糖蛋白減少，易于擴散和轉(zhuǎn)移，同時失去接觸抑制，可大量培養(yǎng)增殖，故B；D兩組中細胞數(shù)量明顯更多，且由于W的促進作用，D組多于B組；由于此實驗是驗證實驗，所以實驗結(jié)果是加入生物制劑W的實驗組比對照組細胞數(shù)多，同時癌細胞分裂能力比正常細胞高，故繪制坐標曲線具體如下:

【點睛】

本題考查驗證實驗，要求學生明確實驗的目的，正確區(qū)分實驗的變量，能夠根據(jù)題意判斷自變量和因變量，然后根據(jù)設計實驗的單一變量和等量原則，同時結(jié)合題干所給的實驗材料完善實驗設計，并能預測實驗結(jié)果和繪制相關曲線圖表示實驗的結(jié)果。【解析】胰蛋白酶（膠原蛋白酶）葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清抗生素血球計數(shù)板等量肝癌細胞懸液等量生物制劑W胰蛋白酶（膠原蛋白酶）六、綜合題(共4題，共24分)29、略

【分析】【分析】

分析甲圖：圖甲為單克隆抗體制備過程；圖中①表示給小鼠注射特定的抗原蛋白，②表示B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，③表示篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞，④表示雜交瘤細胞的體內(nèi)培養(yǎng)。

分析乙圖：圖乙表示克隆羊培育過程，圖中a表示細胞核移植，b表示胚胎移植技術。【小問1】

圖甲是單克隆抗體制備過程；圖乙是克隆羊培育過程，都必須用到動物細胞培養(yǎng)。動物細胞培養(yǎng)時，通常要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染；植物體細胞雜交可以采用物理（離心；振動、電刺激）和化學（聚乙二醇）的方法，動物細胞融合過程中，除了利用這兩種方法以外，還可以用滅活的病毒誘導。兩次篩選獲得的雜交瘤細胞的特點是既能無限增殖又可分泌特異性抗體?！拘?】

單克隆抗體能定向攻擊癌細胞；主要是利用其特異性。【小問3】

克隆羊的成功體現(xiàn)了動物細胞核具有全能性；其生殖方式為無性繁殖，若不考慮環(huán)境因素影響，克隆羊的性狀不是全部像白面綿羊，因為卵細胞細胞質(zhì)中的線粒體遺傳物質(zhì)也能控制某些性狀?！拘?】

動物體細胞核移植技術的應用：①加速家畜遺傳改良進程；促進良畜群繁育；②保護瀕危物種，增大存活數(shù)量；③生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白；④作為異種移植的供體；⑤用于組織器官的移植等，但是不能改變動物的核基因，只有通過可遺傳變異改變動物的核基因。故選D。

【點睛】

本題結(jié)合圖解，考查單克隆抗體的制備、核移植等知識，要求考生識記單克隆抗體制備的具體過程；識記核移植的具體過程，能結(jié)合所學的知識準確作答?！窘馕觥俊拘☆}1】①.動物細胞培養(yǎng)②.抗生素③.滅活的病毒④.既能無限增殖又可分泌特異性抗體。

【小題2】特異性。

【小題3】①.動物細胞核具有全能性②.無性繁殖③.不是④.卵細胞細胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)也能控制某些性狀。

【小題4】D30、略

【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@?。焕肞CR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）

利用RNA逆轉(zhuǎn)錄形成的基因文庫為cDNA文庫（部分基因文庫）；cDNA文庫中的基因不含啟動子；終止子和非編碼（或內(nèi)含子）序列。

（2）

引物需要根據(jù)一段已知目的基因的核苷酸序列來合成；經(jīng)過5次擴增后，DNA分子的數(shù)量由1個變?yōu)?5＝32個；新增2×（32－1）＝62條DNA鏈，故需要消耗62個引物。

（3）

將獲得的基因插入質(zhì)粒；構(gòu)建基因表達載體，其目的是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并可以遺傳給下一代；標記基因的作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。

（4）

花粉