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水產(chǎn)微生態(tài)制劑解淀粉芽胞桿菌生產(chǎn)技術(shù)天津市市場監(jiān)督管理委員會發(fā)布I本標準依據(jù)GB/T1.1—2009《標準化工作導(dǎo)則第1部分:標準的結(jié)構(gòu)和編寫》的要求起草。本標準由天津市農(nóng)業(yè)科學(xué)院提出并歸口。本標準起草單位:天津市農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究中心。本標準主要起草人:謝鳳行、張峰峰、周可、趙瓊、趙玉潔、孫海波、高寶山。1水產(chǎn)微生態(tài)制劑解淀粉芽胞桿菌生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB3095環(huán)境空氣質(zhì)量標準GB3838地表水環(huán)境質(zhì)量標準GB20287農(nóng)用微生物菌劑GB/T26428飼用微生物制劑中枯草芽孢桿菌的檢測4.1生產(chǎn)環(huán)境4.1.1廠區(qū)空氣質(zhì)量符合大氣環(huán)境質(zhì)量標準GB3095中Ⅱ類要求。4.1.2發(fā)酵用水符合地表水環(huán)境質(zhì)量標準GB3838中Ⅲ類水質(zhì)要求,冷卻水及其他用水符合該標準中4.1.3生產(chǎn)車間配備消毒滅菌設(shè)施,菌種儲藏室和無菌操作間與生產(chǎn)車間分開。2生產(chǎn)設(shè)備需為不銹鋼發(fā)酵罐,體積根據(jù)生產(chǎn)規(guī)模自定。生產(chǎn)技術(shù)流程見附錄A級以上。滅菌,滅菌條件為121℃~125℃,0.1MPa~0.15MPa,滅菌20min~30min。5.4.2固體物料含水率50%~60%,121℃~130℃,滅菌1.0h~2.0h。復(fù)5.3的工作。搖瓶種子到發(fā)酵罐種子接種量為1%~5%,種子罐到發(fā)酵罐接種量為5%~7%。接種保證無菌操作,調(diào)節(jié)進、排氣閥,使接種口有氣體排出。5.6.1芽胞桿菌的發(fā)酵溫度為25℃~37℃。5.7發(fā)酵后處理發(fā)酵后的液體菌劑直接分裝,或用沸石粉、凹凸棒土等載體吸附,載體的雜菌率≤1.0×10?CFU/g,固體發(fā)酵菌劑直接風(fēng)干。包裝容器應(yīng)滅菌處理。36質(zhì)量檢測6.2感官檢測6.2.1取液體菌劑約250mL(固體菌劑約250g)于無色玻璃杯中,采用目測、鼻嗅的方法進行檢驗。6.2.2液體菌劑為淡黃色或棕黃色,存放過程中可能出現(xiàn)沉淀,具清淡的腥味;固體菌劑棕色或淺棕6.3.2涂平板有效活菌測定直接用2~3個梯度稀釋液(10?、10”、10?)在含淀粉的培養(yǎng)基(參見附錄B)上涂平板,每個梯度涂3個平板,芽胞數(shù)則將2~3個梯度稀釋液80℃處理10min后在含淀粉的培養(yǎng)基(參見附將涂好的平板在室溫中放置15min,使接種物完全被瓊脂吸收,倒置于培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)48h。6.3.4計數(shù)選取菌落數(shù)在30~300個之間的平板計數(shù),典型的解淀粉芽胞桿菌菌落表面粗6.4雜菌率的測定(好氧或兼性厭氧雜菌)從用來測定有效活菌數(shù)且已經(jīng)過10倍系列稀釋的樣品中,選取10?、10?、1073個稀釋度進行雜菌7儲運7.1應(yīng)貯存在通風(fēng)、干燥、清潔的倉庫,倉庫內(nèi)無有害氣體、易燃易爆物品及7.2長途運輸時,防止日曬、雨淋,避免長期受壓和機械損傷。產(chǎn)品不應(yīng)和易燃、易爆、易腐蝕的物品同車(或其他運輸工具)裝運。4滅菌一級菌種接種發(fā)酵不合格合格不合格5含淀粉培養(yǎng)基成分(每升培養(yǎng)基含量):——可溶性淀粉:10g;——
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