T-ZJATA 0024-2024 水質(zhì) 氨氮測定預(yù)制納氏試劑分光光度法

IICS13.060Z10ZJATA2024-07-08發(fā)布T/ZJATA0024—2024本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草?？紤]到生態(tài)環(huán)境監(jiān)測類標準的專業(yè)性和特殊要求，本文件主要內(nèi)容按HJ168-2020《環(huán)境監(jiān)測分析方法標準制修訂技術(shù)導(dǎo)則》的規(guī)定編制。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由浙江省分析測試協(xié)會提出并歸口。本文件起草單位：浙江省生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心、浙江迪特西科技有限公司。本文件驗證單位：浙江省海洋生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心、浙江省杭州生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心、浙江省臺州生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心、浙江省紹興生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心、浙江省金華生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心、浙江環(huán)境監(jiān)測工程有限公司和中科檢測技術(shù)服務(wù)（嘉興）有限公司。本文件主要起草人：王煒、俞慧萍、周藍、傅強、朱曉丹、王飛、曹柳燕、李婉容、屈藝、馬文姣、錢夢瑩、曲平、劉露、包偉方。1T/ZJATA0024—2024水質(zhì)氨氮的測定預(yù)制納氏試劑分光光度法警告：預(yù)制試劑含有二氯化汞或碘化汞。使用本文件的實驗人員應(yīng)注意安全防護，避免與試劑直接接觸，實驗過程中應(yīng)防止試劑泄露，殘渣殘液應(yīng)根據(jù)國家或地方的有關(guān)規(guī)定進行安全處理。本文件描述了測定水中氨氮的預(yù)制試劑分光光度法。本文件適用于地表水、地下水、生活污水和工業(yè)廢水中氨氮的測定。當采用低量程測定時，本文件的方法檢出限為0.20mg/L，測定下限為0.80mg/L，未經(jīng)稀釋水樣的未經(jīng)稀釋水樣的測定上限為150mg/L。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。HJ91.1污水監(jiān)測技術(shù)規(guī)范HJ91.2地表水環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測技術(shù)規(guī)范HJ164地下水環(huán)境監(jiān)測技術(shù)規(guī)范HJ168—2020環(huán)境監(jiān)測分析方法標準制修訂技術(shù)導(dǎo)則HJ535水質(zhì)氨氮的測定納氏試劑分光光度法HJ924COD光度法快速測定儀技術(shù)要求及檢測方法3.1以游離氨（NH3）或銨鹽（NH4+）形式存在于水中的氮。[來源：HJ195—2023，3.1]3.2通過預(yù)先在生產(chǎn)工廠完成某種分析所需幾種試劑的稱量、溶解、混合、分裝等流程，得到獨立包裝、即開即用的化學(xué)試劑產(chǎn)品。[來源：T/ZJATA0001—2020，3.2]3.3將實驗用水代替實際樣品，按照與實際樣品一致的分析步驟進行測定的過程。2T/ZJATA0024—2024[來源：T/ZJATA0001—2020，3.3]3.4將實驗用水代替實際樣品，置于樣品容器中并按照與實際樣品一致的程序進行測定的過程。[來源：T/ZJATA0001—2020，3.4]以游離態(tài)的氨或銨離子等形式存在的氨氮與納氏試劑反應(yīng)生成淡紅棕色絡(luò)合物，該絡(luò)合物的吸光度與氨氮含量成正比，于波長420nm處測量吸光度。5干擾和消除水樣中含有鈣鎂等金屬離子、硫化物、氯化物、余氯和有機物時會產(chǎn)生干擾，含有此類物質(zhì)時要作適當處理，以消除對測定的影響。若樣品中存在余氯，可加入適量的硫代硫酸鈉溶液去除，用淀粉-碘化鉀試紙檢驗余氯是否除盡。若樣品中存在硫化物，可加入乙酸鋅溶液去除。若樣品中存在金屬離子、氯化物、甲醇和乙醇時，可用預(yù)蒸餾法處理，如存在丙酮、甲醛等沸點較低、水溶性大、具有揮發(fā)性的有機物，可在酸性條件下加熱煮沸后蒸餾處理。6試劑或材料除非另有說明，實驗時所用試劑均為符合國家標準的分析純試劑。6.1實驗用水的制備無氨水：實驗室純水器直接制備，或直接購買市售純水，應(yīng)滿足實驗空白要求。6.2試劑6.2.1硫酸（H2SO4）：ρ=1.84g/ml。6.2.2鹽酸（HCl）：ρ=1.18g/ml。6.2.3預(yù)制試劑：適用于測定氨氮值為0.20mg/L~150mg/L的樣品，主要組成成分為納氏試劑。預(yù)制試劑在常溫避光條件下，應(yīng)至少能穩(wěn)定保存1年。預(yù)制試劑在使用前應(yīng)進行消耗性材料的質(zhì)量檢驗，檢驗方法按附錄A執(zhí)行。6.2.4硫代硫酸鈉溶液，ρ=3.5g/L。稱取3.5g硫代硫酸鈉（Na2S2O3）溶于水中，稀釋至1000ml。6.2.5硫酸鋅溶液，ρ=100g/L。稱取10.0g硫酸鋅（ZnSO4·7H2O）溶于水中，稀釋至100ml。6.2.6氫氧化鈉溶液，ρ=250g/L。稱取25g氫氧化鈉溶于水中，稀釋至100ml。6.2.7氫氧化鈉溶液，c(NaOH)=1mol/L。稱取4g氫氧化鈉溶于水中，稀釋至100ml。6.2.8鹽酸溶液，c(HCl)=1mol/L。量取8.5ml鹽酸（6.2.2）于適量水中，用水稀釋至100ml。3T/ZJATA0024—20246.2.9輕質(zhì)氧化鎂（MgO），不含碳酸鹽，在500℃下加熱氧化鎂，以除去碳酸鹽。6.2.10硼酸，ρ=20g/L。稱取20g硼酸溶于水中，稀釋至1L。6.2.11溴百里酚藍指示劑（bromthymolblue），ρ=0.5g/L。稱取0.05g溴百里酚藍溶于50ml水中，加入10ml無水乙醇，用水稀釋至100ml。6.2.12淀粉-碘化鉀試紙，稱取1.5g可溶性淀粉于燒杯中，用少量水調(diào)成糊狀，加入200ml沸水，攪拌混勻放冷。加0.50g碘化鉀（KI）和0.50g碳酸鈉（Na2CO3）,用水稀釋至250ml。將濾紙條浸漬后，取出晾干，于棕色瓶中密封保存。或直接購買市售淀粉-碘化鉀試紙。6.2.13乙酸鋅溶液，ρ=50g/L。稱取50g乙酸鋅溶于水中，稀釋至1000ml。6.3氨氮標準溶液6.3.1氨氮標準貯備溶液，ρ=1000mg/L。稱取3.8190g氯化銨（NH4Cl，優(yōu)級純，在100～105℃干燥2h），溶于水中，移入1000ml容量瓶中，稀釋至刻度線，可在2～5℃保存6個月?；蛑苯淤徺I市售有證標準物質(zhì)。6.3.2氨氮標準中間液I，ρ=500mg/L。量取50.00ml氨氮標準貯備液（6.3.1）于100ml容量瓶中，用水稀釋至標線，搖勻。此溶液至少可儲存3個月。6.3.3氨氮標準中間液II，ρ=100mg/L。量取10.00ml氨氮標準貯備液（6.3.1）于100ml容量瓶中，用水稀釋至標線，搖勻。此溶液至少可儲存1個月。6.3.4低量程氨氮標準系列使用液：分別量取0.50ml、1.00ml、2.50ml、5.00ml、10.0ml和15.0ml氨氮標準貯備溶液II（6.3.3）至50ml容量瓶中，用無氨水（6.1）稀釋至標線，混勻，配制成1.00mg/l、2.00mg/l、5.00mg/l、10.0mg/l、20.0mg/l和30.0mg/l的標準使用液。此系列溶液在4℃冷藏條件下保存，可穩(wěn)定1個月。6.3.5高量程氨氮標準系列使用液：分別量取1.00ml、2.00ml、4.00ml、6.00ml、10.0ml和15.0ml20.0mg/l、40.0mg/l、60.0mg/l、100mg/l和150mg/l的標準使用液。此系列溶液在4℃冷藏條件下保存，可穩(wěn)定1個月。7儀器和設(shè)備7.1分光光度計：應(yīng)符合HJ924的相關(guān)要求，具備數(shù)據(jù)存儲、曲線存儲、查閱、校準等功能，能清晰顯示濃度值和吸光度值。分光光度計具420nm波長，配套的比色器為專用比色管。在正常工作時，吸光度示值穩(wěn)定性、測量重復(fù)性和測量誤差應(yīng)符合HJ924中規(guī)定的性能指標要求。儀器測量范圍應(yīng)滿足方法測定范圍的要求。7.2氨氮蒸餾裝置：由500ml凱式燒瓶、氮球、直形冷凝管和導(dǎo)管組成，冷凝管末端可連接一段適當長度的滴管，使出口尖端浸入吸收液液面下。亦可使用500ml蒸餾燒瓶。7.3吸量管、容量瓶A級。7.4移液器（槍）：最小分度體積不大于0.01ml。7.5一般實驗常用儀器和設(shè)備。4T/ZJATA0024—20248采樣和樣品8.1樣品采集與保存水樣采集在聚乙烯瓶或玻璃瓶內(nèi)，立即分析。如需保存，應(yīng)加硫酸使水樣酸化至pH＜2，2～5℃下可保存7d。8.2樣品的預(yù)處理8.2.1調(diào)節(jié)pH樣品加入固定劑后呈酸性，可加入氫氧化鈉溶液（6.2.6）將樣品pH值調(diào)至6~8。8.2.2加入抗干擾試劑若樣品中存在余氯，可加入3.5g/L硫代硫酸鈉溶液（6.2.4）去除，每加0.5ml可去除0.25mg余氯，用淀粉-碘化鉀試紙（6.2.12）檢驗余氯是否除盡；若樣品中存在S2-，可加入1.0ml乙酸鋅溶液（6.2.13）。8.2.3預(yù)蒸餾將20ml硼酸溶液（20g/L）移入100ml容量瓶內(nèi)，確保冷凝管出口在硼酸溶液液面之下。分取100ml樣品，移入蒸餾燒瓶（7.2）中，加幾滴溴百里酚藍指示劑（6.2.11），用氫氧化鈉溶液（6.2.6）或鹽酸溶液（6.2.8）調(diào)整pH值至6.0（指示劑呈黃色7.4（指示劑呈藍色）之間，加入0.10g輕質(zhì)氧化鎂（6.2.9）及數(shù)粒玻璃珠，立即連接氮球和冷凝管。加熱蒸餾，使餾出液速率約為10ml/min，待餾出液達80ml時，停止蒸餾，加水定容至100ml。9測定條件由于測試結(jié)果取決于測定條件，設(shè)定的分析測定條件應(yīng)保證測試時，被測組分與預(yù)制試劑生成的絡(luò)合物能夠得到的有效的識別。本文件分析測定條件見表1。表1分析測定條件10分析步驟10.1校準曲線分光光度計（7.1）具有制作校準曲線功能，測定時可使用預(yù)制試劑生產(chǎn)商提供的校準曲線，使用5T/ZJATA0024—2024前需用氨氮標準中間液Ⅰ（6.3.2）和氨氮標準中間液Ⅱ（6.3.3）分別配制高、低量程校準曲線中間點濃度標準溶液進行核查。當測試條件、儀器性能、試劑、人員等實驗條件發(fā)生較大改變時，會對校準曲線的符合性帶來一定的影響，尤其對低濃度水平的測定影響會更大，應(yīng)核查校準曲線的符合性，核查時，選取曲線相應(yīng)的低、中、高濃度點的標準溶液進行測定。核查時，其測定結(jié)果與曲線對應(yīng)點濃度之間的誤差應(yīng)不超過表2規(guī)定的限值。如果需要自行建立校準曲線測定樣品，按附錄B執(zhí)行。表2校準曲線的符合性要求±1010.2開機調(diào)試打開分光光度計（7.1），按要求進行預(yù)熱，根據(jù)水樣中氨氮濃度范圍選擇高、低量程。10.3樣品預(yù)處理待測試樣如無明顯干擾，可搖勻直接或用無氨水（6.1）稀釋后取樣，如存在干擾可采用8.2中方法對樣品進行預(yù)處理后再取樣測定。10.4試樣測定10.4.1試樣制備選擇合適量程的預(yù)制試劑管，準確量取一定體積的水樣至預(yù)制試劑管內(nèi)（低量程1.0ml，高量程0.2ml擰緊管蓋，上下?lián)u動試管，使試劑與水樣充分接觸。擰開管蓋，依次向試劑管中加入預(yù)制試劑（6.2.3）1.0ml，再次擰緊管蓋搖勻，并靜置反應(yīng)10min，待測。10.4.2空白制備用無氨水（6.1）代替水樣按照10.4.1步驟進行空白制備。取出反應(yīng)好的試管樣，用擦鏡布或無毛屑的軟紙擦干凈試管外壁，放入分光光度計內(nèi)進行比色操作。先放入空白樣置零，再放入待測樣，按讀數(shù)直接讀取氨氮濃度（mg/L）。空白試驗應(yīng)不少于2個平行樣，選擇氨氮濃度值較低的實驗室空白樣作為參比溶液。當分光光度計帶有自動取均值功能時，每支樣品管讀數(shù)1次作為最終濃度值；當分光光度計無自動取均值功能時，為減少讀數(shù)誤差，每支樣品管轉(zhuǎn)動應(yīng)不少于3個方向，記錄讀數(shù)，取平均值作為最終濃度值。11結(jié)果計算與表示6T/ZJATA0024—202411.1結(jié)果計算樣品中氨氮（以N計）的質(zhì)量濃度，按照公式（1）進行計算：C=ρ×D……（1）式中：C——試樣氨氮濃度（以N計單位為毫克每升（mg/Lρ——儀器直讀氨氮濃度（以N計單位為毫克每升（mg/LD——試樣稀釋倍數(shù)。11.2結(jié)果表示當測定結(jié)果小于1.00mg/L時，保留至小數(shù)點后2位；當測定結(jié)果大于或等于1.00mg/L時，保留3位有效數(shù)字。12準確度12.1精密度按HJ168-2020要求，7家實驗室采用低量程分別對氨氮濃度為1.76mg/L、9.76mg/L和24.7mg/L的統(tǒng)一有證標準物質(zhì)/標準樣品進行了6次重復(fù)測定：實驗室內(nèi)相對標準偏差分別為0.8%～4.0%、0.6%~1.4%和0.4%～1.7%；實驗室間相對標準偏差分別為3.2%、2.2%和2.1%；重復(fù)性限分別為0.15mg/L、7家實驗室采用高量程分別對氨氮濃度為24.7mg/L、57.4mg/L和140.8mg/L的統(tǒng)一有證標準物質(zhì)/標準樣品進行了6次重復(fù)測定：實驗室內(nèi)相對標準偏差分別為0.4%～2.6%、0.4%～2.0%和0實驗室間相對標準偏差分別為2.6%、2.4%和3.9%；重復(fù)性限分別為0.93mg/L、2.3mg/L和6.5mg/L；7家實驗室采用低量程分別對氨氮平均測定濃度為2.55mg/L、12.1mg/L和28.9mg/L的實際水樣進行了6次重復(fù)測定：實驗室內(nèi)相對標準偏差分別為0.5%～4.7%、1.0%～1.7%和0.9%～3.2%；實驗室間相對標準偏差分別為5.4%、3.9%和2.8%；重復(fù)性限分別為0.14mg/L、0.50mg/L和1.4mg/L；再7家實驗室采用高量程分別對氨氮平均測定濃度為15.5mg/L、57.6mg/L和113mg/L的實際水樣進行了6次重復(fù)測定：實驗室內(nèi)相對標準偏差分別為0.8%～4.7%、0.5%～3.0%和1.5%～3.3%；實驗室間相對標準偏差分別為5.9%、4.5%和6.1%；重復(fù)性限分別為1.2mg/L、3.2mg/L和7.2mg/L；再現(xiàn)性限分別12.2正確度證標準樣品進行了6次重復(fù)測定，相對誤差均值分別為：3.5%、1.6%和2.5%，相對誤差范圍分別為1.1%~6.3%、0.1%～3.5%和1.2%～4.5%，相對誤差最終值分別為：3.5%±4.2%、1.6%±2.4%和2.5%±2.6%。7家實驗室采用高量程對氨氮濃度為24.7mg/L、57.4mg/L和140.8mg/L的有證標準樣品進行了6次重復(fù)測定，相對誤差均值分別為：3.0%、2.4%和2.2%，相對誤差范圍分別為1.2%～4.9%、0.9%～5.1%和0.1%～7.2%，相對誤差最終值分別為：3.0%±2.6%、2.4%±3.4%和2.2%±4.6%。7家實驗室采用低量程分別對氨氮平均測定濃度為2.55mg/L、12.1mg/L和28.9mg/L，加標量分別為50μg、250μg和300μg的實際水樣進行了6次重復(fù)測定：加標回收率范圍分別為93.0%～104%、97.3%～108%和94.4~106%，加標回收率最終值分別為98.7%±8.2%、101%±8.6%和101%±8.2%。7T/ZJATA0024—20247家實驗室采用高量程分別對氨氮平均測定濃度為15.5mg/L、57.6mg/L和113mg/L，加標量分別為400μg、1000μg和1500μg的實際水樣進行了6次重復(fù)測定：加標回收率范圍分別為91.8%～104%、94.7%～109%和97.2~108%，加標回收率最終值分別為100%±8.6%、103%±10.2%和103%±8.0%。13質(zhì)量保證和質(zhì)量控制13.1空白試驗每批樣品(≤20個）應(yīng)至少做2個實驗室空白試驗，以空氣為參比，在420nm波長處測定，空白試驗濃度差值應(yīng)不大于本文件的方法檢出限，否則應(yīng)查明原因，重新測定合格后才能測定樣品。13.2全程序空白每批樣品至少做1個全程序空白，測定結(jié)果應(yīng)低于方法檢出限，否則應(yīng)查明原因，重新分析至合格后才能測定樣品。13.3精密度控制每批樣品(≤20個）至少測定10%的平行樣，樣品數(shù)量≤10個時，應(yīng)至少測定1個平行樣，平行雙樣測定結(jié)果的相對偏差應(yīng)≤10%。13.4正確度控制每批樣品(≤20個）至少測定1個有證標準樣品或基體加標樣品。有證標準樣品測定值應(yīng)在其給出的不確定度范圍內(nèi)，加標回收率應(yīng)控制在85%～115%之間。14廢棄物處理實驗產(chǎn)生的廢棄試管與試劑應(yīng)統(tǒng)一收集，委托有資質(zhì)單位集中處理。15注意事項15.1水樣的預(yù)蒸餾蒸餾過程中，某些有機物很可能與氨同時餾出，對測定仍有干擾，其中有些物質(zhì)（如甲醛）可以在酸性條件（pH＜1）下煮沸除去。部分工業(yè)廢水，可加入石蠟碎片等做防沫劑。15.2蒸餾器清洗向蒸餾燒瓶中加入150ml水，加數(shù)粒玻璃珠，裝好儀器，蒸餾到至少收集了100ml水，將餾出液及瓶內(nèi)殘留液棄去。15.3當需要自行建立校準曲線測定樣品時，制作的校準曲線不得少于6個濃度點，且最低濃度點的濃度水平應(yīng)接近方法檢出下限；校準曲線回歸方程的相關(guān)系數(shù)│r│值應(yīng)≥0.999。8T/ZJATA0024—2024（規(guī)范性）預(yù)制試劑的質(zhì)量檢驗方法A.1檢驗?zāi)康拇_保預(yù)制試劑的質(zhì)量滿足本文件要求A.2檢驗技術(shù)要求、檢驗項目和試驗方法A2.1檢驗技術(shù)要求預(yù)制試劑使用前應(yīng)進行質(zhì)量檢驗，以滿足方法測定結(jié)果的精準度要求。檢驗時隨機抽取含預(yù)制試劑的比色管進行試驗。檢驗項目包括空白試驗及標準樣品正確度試驗。A2.2空白試驗A2.2.1以測定任意二支實驗室空白樣的差值為空白試驗的檢驗指標。A2.2.2試驗步驟按10.4規(guī)定進行，用無毛紙擦凈比色管外壁，以空氣為參比，在420nm波長處直接讀取實驗室空白樣（A2.2.1）氨氮濃度值。A2.2.3一般同一批次預(yù)制試劑至少做2個實驗室空白樣的差值，要求至少重復(fù)測定3次，取平均值作為最終值。A2.3正確度試驗分別采用低量程方法及高量程方法對氨氮有證標準樣品進行試驗，要求至少重復(fù)測定3次，取平均值作為最終值。試驗步驟按10.4規(guī)定進行。A.3檢驗結(jié)果評判空白試驗濃度差值不大于本文件方法檢出限，且標準樣品測定結(jié)果在有證標準物質(zhì)允許誤差范圍內(nèi)，則判定該預(yù)制試劑的質(zhì)量符合要求。否則，判定該預(yù)制試劑的質(zhì)量不合要求，應(yīng)查找原因進行糾正。9T/ZJATA0024—2024（規(guī)范性）自建立校準曲線的樣品測定方法B.1概述當實驗室需要自行建立校準曲線測定水樣時，可按以下給出的樣品測定方法進行試驗。B.2氨氮標準溶液的配制B.2.1氨氮標準儲備液(以N計)：ρ=1000mg/L，該標準溶液的配制見6.3.1。B.2.2氨氮標準中間液I(以N計)，ρ=500mg/L。該標準溶液的配制見6.3.2。B.2.3氨氮標準中間液Ⅱ(以N計)，ρ=100