高效液相色譜培訓(xùn)資料

地溝油中多環(huán)芳烴液相色譜之目錄頁地溝油液相色譜目錄地溝油的介紹地溝油的檢測方法液相色譜檢測地溝油中多環(huán)芳烴地溝油是什么1地溝油，泛指生活中存在的各類劣質(zhì)油。是下水道中的油膩漂浮物或者酒樓、賓館的剩飯、剩菜（通稱泔水）收集后的上層浮油，經(jīng)過簡單加工、提煉出的油；二是劣質(zhì)豬肉、豬內(nèi)臟、豬皮加工提煉后產(chǎn)出的油；三是高溫下反復(fù)用于油炸食品的油使用次數(shù)超過規(guī)定要求后，再被重復(fù)使用或往其中摻入一些新油后重新使用的油。地溝油的危害1地溝油中含有多種有毒有害成分，重金屬、細菌、真菌、黃曲霉毒素等嚴重超標(biāo)會引起消化不良、頭痛、頭暈、失眠、乏力、肝區(qū)不適等癥狀。會引起劇烈腹絞痛、貧血、中毒性肝病等癥狀。含有毒素，一旦食用，則會破壞白血球和消化道黏膜，引起食物中毒，甚至致癌。地溝油的檢測2地溝油的鑒定檢測方法一直受到人們的關(guān)注和討論，相關(guān)專家進行了深人的探索和研究，希望得到具有可靠性和特異性的地溝油檢測方法。我們并非對其束手無策地溝油的檢測3其他檢測方法化學(xué)鑒定方法感官鑒定儀器分析方法儀器分析方法，具有準(zhǔn)確度好，精度高，效果好，幾大特點。色譜法中，流動相可以是氣體，也可以是液體，由此可分為氣相色譜法（GC）和液相色譜法（LC）。固定相既可以是固體，也可以是涂在固體上的液體，由此又可將氣相色譜法和液相色譜法分為氣-液色譜、氣-固色譜、液-固色譜、液-液色譜。。高效液相色譜法（HPLC）是繼氣相色譜之后，70年代初期發(fā)展起來的一種以液體做流動相的新色譜技術(shù)。高效液相色譜具有分析速度快、分離效能高、自動化等特點。所以人們稱它為高壓、高速、高效或現(xiàn)代液相色譜法。HPLC1、液固色譜法使用固體吸附劑，被分離組分在色譜柱上分離原理是根據(jù)固定相對組分吸附力大小不同而分離。分離過程是一個吸附－解吸附的平衡過程。常用的吸附劑為硅膠或氧化鋁，粒度5~10μm。適用于分離分子量200~1000的組分，大多數(shù)用于非離子型化合物，離子型化合物易產(chǎn)生拖尾。常用于分離同分異構(gòu)體。HPLC3、離子交換色譜法固定相是離子交換樹脂，常用苯乙烯與二乙烯交聯(lián)形成的聚合物骨架，在表面未端芳環(huán)上接上羧基、磺酸基（稱陽離子交換樹脂）或季氨基（陰離子交換樹脂）。4、離子對色譜法。

5、排阻色譜法。2、液液色譜法使用將特定的液態(tài)物質(zhì)涂于擔(dān)體表面，或化學(xué)鍵合于擔(dān)體表面而形成的固定相，分離原理是根據(jù)被分離的組分在流動相和固定相中溶解度不同而分離。分離過程是一個分配平衡過程。液液色譜法按固定相和流動相的極性不同可分為正相色譜法(NPC)和反相色譜法(RPC)。HPCL 系統(tǒng)HPLC系統(tǒng)一般由輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器、數(shù)據(jù)記錄及處理裝置等組成。其中輸液泵、色譜柱、檢測器是關(guān)鍵部件。有的儀器還有梯度洗脫裝置、在線脫氣機、自動進樣器、預(yù)柱或保護柱、柱溫控制器等，現(xiàn)代HPLC儀還有微機控制系統(tǒng)，進行自動化儀器控制和數(shù)據(jù)處理。制備型HPLC儀還備有自動餾分收集裝置。FL2200II高效液相色譜儀；UltimatePAHC18/4.6*250mm，5um；wechromAlumina-N硅膠固相萃取柱；超聲波清洗器；分析天平。乙睛、丙酮、正己烷(以上均色譜級，美國進口)；水(二次蒸餾水以上)；多環(huán)芳烴混合標(biāo)準(zhǔn)品。準(zhǔn)備點評色譜柱為UltimatePAHC18/4.6*250mm，5um，以乙腈為流動相A，水位流動相B，按表1進行梯度洗脫，流速為1.5ml/min，檢測波長為220nm，柱溫35攝氏度。進料量20ul，使用外標(biāo)法定量。1精密稱取多環(huán)芳烴標(biāo)準(zhǔn)品適量，精密稱定，以丙酮和正己烷（l:1)制成每lmL含10ug的溶液，過濾，備用。配液稱取某地溝油樣品1.0g燒杯中，以5mL正己烷溶解后，倒入已經(jīng)活化的SPE小柱中，以10mL正己烷淋洗SPE小柱，棄去淋洗液，用10mL丙酮和正己烷(1:1)洗脫，收集洗脫溶液，濃縮定容至5mL，過0.45um有機過濾膜過濾，作待測液。2多環(huán)芳烴的線性試驗和最小檢測濃度分別移取0.lmL、0.25mL、0.5mL、lmL、2mL多環(huán)芳烴標(biāo)準(zhǔn)溶液于52mL容量瓶中，以丙酮和正己烷(1：1)定容至刻度，搖勻，過濾，并于上述色譜條件下進行分析。后以峰面積為縱坐標(biāo)，標(biāo)樣濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并以3S/N為最小檢測濃度，計算最小檢測濃度。平行取6份某地溝油，按上述油樣處理方法進行處理后進行分析，根據(jù)外標(biāo)法分別求得該地溝油。3色譜優(yōu)化實驗發(fā)現(xiàn)，流動相可采用甲醇和水，然后走梯度程序，但干擾較多，而且波長202nm，基線需要較長時間才平穩(wěn)。而采用乙睛和水做為流動相，選擇合適的梯度程序，可提高靈敏度高，提高檢測水平，并且穩(wěn)定也較好。波長掃描顯示，多環(huán)芳烴在210-206mn內(nèi)均有較大吸收。綜合考慮，選用20nm作為最佳波長，不僅響應(yīng)大，并且可有效的排除干擾。波長的選擇流動相梯度確定程序4關(guān)于HPLC小結(jié)4由于HPLC具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用，流出組分易收集等優(yōu)點，因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機分析等各種領(lǐng)域。高效液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個重要的發(fā)展方