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板塊六生物技術(shù)與工程專題十三發(fā)酵工程醋酸菌碳源尿素稀釋涂布平板法考點(diǎn)1PART01第一部分考點(diǎn)1微生物的培養(yǎng)、分離與計數(shù)
1.無菌技術(shù)常用方法紫外線2.微生物的純化技術(shù)(1)制備馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基(2)兩種純化微生物方法的比較接種環(huán)涂布器3.微生物分離與計數(shù)的兩個實(shí)例(1)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)選擇(2)纖維素分解菌的分離纖維素紅色復(fù)合物透明圈【真題研讀】(2023·廣東選擇考)研究者擬從堆肥中取樣并篩選能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱菌。根據(jù)堆肥溫度變化曲線(如圖)和選擇培養(yǎng)基篩選原理來判斷,下列最可能篩選到目標(biāo)菌的條件組合是(
)A.a(chǎn)點(diǎn)時取樣、尿素氮源培養(yǎng)基B.b點(diǎn)時取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基C.b點(diǎn)時取樣、蛋白胨氮源培養(yǎng)基D.c點(diǎn)時取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基√解析:由圖可知,隨著堆肥時間的延長,堆肥溫度先升高后保持穩(wěn)定,a點(diǎn)時堆肥溫度最低,c點(diǎn)時堆肥溫度最高。該實(shí)驗(yàn)的目的是篩選能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱菌,應(yīng)該用以角蛋白為唯一氮源的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選培養(yǎng),且應(yīng)該在高溫條件下取樣,即c點(diǎn)時取樣,D符合題意。[命題延伸]——判斷與填空(1)某些香蕉植株組織中存在的內(nèi)生菌可防治香蕉枯萎病,其篩選流程及抗性檢測如圖。判斷內(nèi)生菌的抗性效果需比較有無接種內(nèi)生菌的平板上的病原菌菌斑大小。(
)√(2)不含氮源的平板不能用于微生物培養(yǎng)。(
)(3)將培養(yǎng)基分裝于培養(yǎng)皿中后滅菌,可降低培養(yǎng)基污染的概率。(
)(4)為提高一株石油降解菌的凈化能力,將菌涂布于以石油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,以致死率為90%的輻照劑量誘變處理。涂布用的菌濃度應(yīng)控制在30~300個/mL。(
)(5)稀釋涂布平板法和平板劃線法均能得到單菌落,都可用于細(xì)胞計數(shù)。(
)××××(6)采用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母菌,可以用淋洗液為原料制備培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中還需要加入氮源等營養(yǎng)成分,氮源的主要作用是_______________(答出1點(diǎn)即可)。提示:用于合成微生物細(xì)胞中的含氮化合物,如核酸、蛋白質(zhì)等(7)為快速分離產(chǎn)淀粉酶的枯草芽孢桿菌,可將土樣用________制成懸液,再將含有懸液的三角瓶置于80℃的________中保溫一段時間,其目的是________________。無菌水水浴殺死不耐熱微生物(8)枯草芽孢桿菌為好氧微生物,液體培養(yǎng)時應(yīng)采用________(填“靜置”或“搖床振蕩”)培養(yǎng)。培養(yǎng)過程中抽樣檢測活菌數(shù)量時,應(yīng)采用________________(填“稀釋涂布平板法”或“顯微鏡直接計數(shù)法”),其原因是_______________________________________________。提示:用稀釋涂布平板法在培養(yǎng)基上看到的每一個菌落一般都來自一個活細(xì)胞,而顯微鏡直接計數(shù)法會將死亡的枯草芽孢桿菌也計算在內(nèi)搖床振蕩稀釋涂布平板法【對點(diǎn)突破】題點(diǎn)1培養(yǎng)基的制備與無菌操作1.(2024·惠州高三一模)微生物的純培養(yǎng)既需要適宜的培養(yǎng)基,又要防止雜菌污染。下列相關(guān)敘述正確的是(
)A.消毒和滅菌的殺菌程度存在差異B.培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度越高,對微生物的生長越有利C.微生物的純培養(yǎng)物就是不含有代謝廢物的微生物培養(yǎng)物D.操作者要對操作的空間、自己的衣著和手進(jìn)行清潔和滅菌√解析:由消毒和滅菌的概念可知,二者的殺菌程度存在差異,A正確;培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度過高,微生物會通過滲透作用失水,對微生物的生長不利,B錯誤;在微生物培養(yǎng)過程中,由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物,C錯誤;操作者對操作的空間、自己的衣著和手進(jìn)行的是清潔和消毒處理,D錯誤。2.進(jìn)行土壤中尿素分解菌的選擇培養(yǎng)時,利用的培養(yǎng)基組分及含量如下表所示。下列分析錯誤的是(
)組分含量KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g瓊脂15.0gH2O定容至1000mL√A.KH2PO4和Na2HPO4既可為菌體提供無機(jī)鹽,又可調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pHB.尿素既可為尿素分解菌提供氮源,又可對培養(yǎng)基中的微生物起選擇作用C.瓊脂在實(shí)驗(yàn)過程中起凝固劑的作用D.蒸餾水既可進(jìn)行定容,又可對培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋以便于計數(shù)題點(diǎn)2微生物的培養(yǎng)、篩選與計數(shù)3.(2024·惠州高三調(diào)研)野生型大腸桿菌能在基礎(chǔ)培養(yǎng)基上生長,氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株由于無法合成某種氨基酸,只能在完全培養(yǎng)基上生長。下圖為純化某氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株的部分流程圖,①②③④代表培養(yǎng)基,A、B、C表示操作步驟,D、E為菌落。下列敘述正確的是(
)A.A操作的目的是提高基因突變的頻率,增加突變株的數(shù)量B.B的正確操作是用接種環(huán)蘸取菌液后在②表面涂布來接種菌種C.圖中①②③為完全培養(yǎng)基,培養(yǎng)基一般用濕熱滅菌法進(jìn)行滅菌D.若要獲得氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株,可從④中挑取E進(jìn)行純化培養(yǎng)√解析:A操作(紫外線照射)可以提高基因突變的頻率,增加突變株的數(shù)量,A正確;B操作是將菌液滴加到培養(yǎng)基表面,再用涂布器將菌液均勻地涂布在②表面,B錯誤;由題意分析可知,野生型大腸桿菌菌株能在基礎(chǔ)培養(yǎng)基上生長,而氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株由于發(fā)生基因突變無法合成某種氨基酸,只能在完全培養(yǎng)基上生長,題圖中培養(yǎng)基③中只有部分菌落,故題圖中①②④為完全培養(yǎng)基,③為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,C錯誤;④為完全培養(yǎng)基,③為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,③中不能生長、④中能生長的即為氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株,故若要獲得氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株,可從④中挑取D進(jìn)行純化培養(yǎng),D錯誤。4.(2024·梅州高三一模)某興趣小組為研究“使用公筷對餐后菜品細(xì)菌數(shù)量的影響”,將每道菜分為3盤,一盤取樣冷藏,一盤使用公筷,一盤不用公筷,實(shí)驗(yàn)過程如下圖所示。下列相關(guān)操作或敘述正確的是(
)A.將細(xì)菌接種在固體培養(yǎng)基X上可采用平板劃線法B.根據(jù)菌落的特征可以準(zhǔn)確判斷細(xì)菌的種類C.配制的培養(yǎng)基需經(jīng)濕熱滅菌后調(diào)整pH,冷卻后倒平板D.固體培養(yǎng)基X對菜品中的細(xì)菌沒有選擇性√解析:據(jù)題意可知,在固體培養(yǎng)基X上接種并培養(yǎng)后還需進(jìn)行計數(shù),故只能用稀釋涂布平板法接種而不能用平板劃線法接種,A錯誤;在一定的培養(yǎng)條件下,不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征,根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征,可以初步區(qū)分出不同種微生物,但不能準(zhǔn)確判斷,B錯誤;配制的培養(yǎng)基需調(diào)整pH后再進(jìn)行濕熱滅菌,冷卻后倒平板,C錯誤;固體培養(yǎng)基沒有做任何處理,所以對菜品中的細(xì)菌沒有選擇性,D正確??键c(diǎn)2PART02第二部分考點(diǎn)2傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用
1.乙酸30~35榨汁2.泡菜腌制過程中,乳酸菌、乳酸和亞硝酸鹽的變化√【真題研讀】1.(2024·湖北選擇考)制醋、制飴、制酒是我國傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)。醋酸菌屬于好氧型原核生物,常用于食用醋的發(fā)酵。下列敘述錯誤的是(
)A.食用醋的酸味主要來源于乙酸B.醋酸菌不適宜在無氧條件下生存C.醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶D.葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解發(fā)生在線粒體內(nèi)解析:醋酸菌常用于食用醋的發(fā)酵,食用醋的酸味主要來源于醋酸菌發(fā)酵產(chǎn)生的乙酸,A正確;醋酸菌是好氧細(xì)菌,不適宜在無氧條件下生存,B正確;當(dāng)缺少糖源時,醋酸菌可將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛,再將乙醛變?yōu)橐宜?,所以醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶,C正確;醋酸菌是原核生物,其細(xì)胞內(nèi)無線粒體,D錯誤?!?.(2024·河北選擇考改編)中國傳統(tǒng)白酒多以泥窖為發(fā)酵基礎(chǔ),素有“千年老窖萬年糟”“以窖養(yǎng)糟,以糟養(yǎng)泥”之說。多年反復(fù)利用的老窖池內(nèi)壁窖泥中含有大量與釀酒相關(guān)的微生物。下列敘述錯誤的是(
)A.傳統(tǒng)白酒的釀造是在以釀酒酵母為主的多種微生物共同作用下完成的B.窖池內(nèi)各種微生物形成了相對穩(wěn)定的體系,使釀造過程不易污染雜菌C.從窖泥中分離的釀酒酵母擴(kuò)大培養(yǎng)時,需在CO2或N2環(huán)境中進(jìn)行D.從谷物原料發(fā)酵形成的酒糟中,可分離出產(chǎn)淀粉酶的微生物解析:白酒的釀造主要依靠釀酒酵母,由于窖泥中含有大量與釀酒相關(guān)的微生物,故傳統(tǒng)白酒的釀造是在以釀酒酵母為主的多種微生物共同作用下完成的,A正確;窖池內(nèi)各種微生物形成了相對穩(wěn)定的體系,且釀造過程產(chǎn)生的酒精也會抑制雜菌的生長與繁殖,使釀造過程不易污染雜菌,B正確;酵母菌是兼性厭氧菌,與無氧呼吸相比,細(xì)胞有氧呼吸產(chǎn)生的能量更多,更能滿足酵母菌大量繁殖時的需求,因此,對分離的釀酒酵母擴(kuò)大培養(yǎng)時需要在有氧的環(huán)境條件下進(jìn)行,C錯誤;谷物原料如高粱、玉米、大米等富含淀粉,因此從谷物原料發(fā)酵形成的酒糟中可分離出產(chǎn)淀粉酶的微生物,D正確。[命題延伸]——判斷與填空(1)關(guān)于小曲白酒的釀造過程,糖化主要是利用霉菌將淀粉水解為葡萄糖。(
)(2)啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)中,大麥經(jīng)發(fā)芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、發(fā)酵、消毒等工序后,最終過濾、調(diào)節(jié)、分裝。焙烤是為了利用高溫殺死大麥種子的胚并進(jìn)行滅菌。(
)(3)目前已實(shí)現(xiàn)青霉素的工業(yè)化生產(chǎn),選育出的高產(chǎn)菌株經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)后才可接種到發(fā)酵罐中。(
)√×√(4)果醋發(fā)酵時,發(fā)酵液產(chǎn)生的氣泡量明顯少于果酒發(fā)酵時。(
)(5)酵母菌和醋酸菌發(fā)酵過程中控制通氣的情況不同。(
)(6)某同學(xué)在家用帶蓋玻璃瓶制作果酒和果醋時將玻璃瓶用酒精消毒后,裝滿葡萄汁,待酒精發(fā)酵后去除瓶蓋,蓋一層紗布,再進(jìn)行乙酸發(fā)酵。(
)(7)制作果酒需要__________菌,這一過程中也需要O2,O2的作用是____________________________________________。提示:酵母促進(jìn)有氧呼吸,使酵母菌大量繁殖√√×√【對點(diǎn)突破】題點(diǎn)1傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用1.在《詩經(jīng)》中有“中田有廬,疆場有瓜。是剝是菹,獻(xiàn)之皇祖”的描述,據(jù)東漢許慎《說文解字》解釋:“菹菜者,酸菜也”,由此可見,我國制作酸菜的歷史頗為悠久。下列有關(guān)酸菜的制作,敘述錯誤的是(
)A.酸菜壇中的乳酸菌數(shù)量會逐漸增加至最高峰B.制作酸菜初期,酸菜壇中的氧氣有利于乳酸菌的繁殖C.制作酸菜利用了植物體表面的乳酸菌來進(jìn)行發(fā)酵D.酸菜壇中的亞硝酸鹽會隨著發(fā)酵時間的延長,先增加后減少解析:酸菜壇中的乳酸菌數(shù)量會逐漸增加至最高峰,隨著乳酸菌發(fā)酵,酸菜壇中乳酸濃度越來越高,逐漸抑制乳酸菌活動,乳酸菌數(shù)量減少,A正確。乳酸菌是厭氧型微生物,制作酸菜時需隔絕空氣,酸菜壇中的氧氣不利于乳酸菌的繁殖
,B錯誤。制作酸菜利用了植物體表面的天然的乳酸菌來進(jìn)行發(fā)酵,C正確。亞硝酸鹽含量的變化規(guī)律是發(fā)酵初期,由于硝酸鹽還原菌的作用使亞硝酸鹽含量增加;發(fā)酵中期,硝酸鹽還原菌受抑制且部分亞硝酸鹽被分解,含量下降;發(fā)酵后期,亞硝酸鹽含量下降至相對穩(wěn)定,酸菜壇中的亞硝酸鹽會隨著發(fā)酵時間的延長,先增加后減少
,D正確。√2.下圖裝置既可用于制作葡萄酒,也可用于制作葡萄醋。下列關(guān)于該裝置的分析,正確的是(
)A.可使用同一菌種制作葡萄酒和葡萄醋B.制作葡萄酒時要持續(xù)關(guān)閉閥a和閥bC.制作葡萄醋時要持續(xù)打開閥a和閥bD.增加菌種接種量可提高葡萄醋的產(chǎn)量解析:制作葡萄酒的菌種為酵母菌,制作葡萄醋的菌種為醋酸菌,A錯誤;利用該裝置制作葡萄酒時,由于利用的是酵母菌的無氧呼吸,故需保持無氧環(huán)境,操作時應(yīng)一直關(guān)閉閥a,發(fā)酵過程中會產(chǎn)生二氧化碳,還需要適時打開閥b,排出二氧化碳,B錯誤;葡萄醋發(fā)酵利用的是醋酸菌,醋酸菌是好氧菌,發(fā)酵過程中需要提供有氧環(huán)境,此時閥a、閥b要持續(xù)打開,C正確;增加菌種接種量能加快發(fā)酵速度,但不能提高葡萄醋的產(chǎn)量,D錯誤。題點(diǎn)2發(fā)酵工程及其應(yīng)用3.與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)相比,發(fā)酵工程的產(chǎn)品種類更加豐富,產(chǎn)量和質(zhì)量明顯提高。發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)如下圖所示,下列敘述錯誤的是(
)√A.若能生產(chǎn)人生長激素的工程菌是通過①培育的,①應(yīng)為誘變育種B.菌種在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵是整個過程的中心環(huán)節(jié)C.環(huán)境條件會影響微生物的生長繁殖,也會影響微生物代謝物的形成D.⑥⑦過程中對發(fā)酵產(chǎn)品分離、提純要根據(jù)產(chǎn)品類型選擇合適的方法解析:若能生產(chǎn)人生長激素的工程菌是通過①培育的,則①應(yīng)為基因工程,實(shí)現(xiàn)了兩個物種之間的基因重組,A錯誤。發(fā)酵工程一般包括菌種的選育,擴(kuò)大培養(yǎng),培養(yǎng)基的配制、滅菌,
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