2025年人教五四新版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年人教五四新版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、下列關(guān)于單克隆抗體制備的說法，正確的是（）A.將特定的抗原注射到小鼠體內(nèi)，可以從小鼠的血清中獲得單克隆抗體B.經(jīng)特定抗原免疫過的B淋巴細胞在體外培養(yǎng)時可分泌單克隆抗體C.B細胞和骨髓瘤細胞融合時，必須用滅活的病毒誘導(dǎo)融合D.篩選出雜交瘤細胞后，需利用抗原抗體反應(yīng)的特異性再次篩選2、下列關(guān)于生物武器的敘述，不確切的是（）A.生物武器造價昂貴，但卻是具有大規(guī)模殺傷性的武器B.生物武器包括致病菌類，病毒類，生化毒劑類等C.生物武器可以直接或者通過食物，生活必需品等散布D.生物武器一旦使用，可造成大規(guī)模的殺傷后果3、下列有關(guān)PCR過程的敘述中，不正確的是（）A.變性過程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對之間的氫鍵B.復(fù)制過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補配對原則完成C.延伸過程中需要DNA聚合酶、能量、四種核糖核苷酸D.PCR技術(shù)與細胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需要的酶最適溫度較高4、下列關(guān)于治療性克隆和生殖性克隆的說法，錯誤的是（）A.使用病人自己的細胞產(chǎn)生胰島細胞以治療糖尿病屬于治療性克隆B.B；將一個克隆的胚胎植入一個女性子宮發(fā)育出嬰兒的過程屬于生殖性克隆。

C.治療性克隆屬于無性生殖，生殖性克隆屬于有性生殖D.治療性克隆和生殖性克隆技術(shù)均需要應(yīng)用到動物細胞培養(yǎng)和核移植5、下列有關(guān)制作果酒、果醋、腐乳的敘述，正確的是（）A.發(fā)酵過程發(fā)揮主要作用的微生物代謝類型都是異養(yǎng)需氧型B.發(fā)酵過程中所有的相關(guān)反應(yīng)都是在微生物的細胞內(nèi)進行的C.發(fā)酵過程中控制好溫度既有利于目的菌的生長，也可抑制雜菌的生長D.傳統(tǒng)發(fā)酵的操作過程中都必須進行嚴格的滅菌處理，防止雜菌污染6、紫草富含一種紅色的次生代謝產(chǎn)物——紫草寧，具有抗菌、消炎的功效?？蒲腥藛T利用紫草新生的營養(yǎng)芽進行培養(yǎng)獲得愈傷組織，再使用液體培養(yǎng)基進行細胞懸浮培養(yǎng)，以獲得更多的紫草寧。下列敘述正確的是（）A.次生代謝產(chǎn)物一般認為不是植物基本生命活動所必需的，其在植物細胞中含量很少B.愈傷組織是由高度分化的一團薄壁細胞組成，無特定形態(tài)C.為獲得愈傷組織，培養(yǎng)時需要加入PEGD.愈傷組織的誘導(dǎo)受植物激素配比的影響，不受營養(yǎng)物質(zhì)和光照等因素的影響7、如圖是構(gòu)建基因表達載體的過程示意圖。下列相關(guān)說法正確的是（）

A.經(jīng)限制酶切割后，質(zhì)粒多了1個游離的磷酸基團，DNA分子多了2個游離的磷酸基團B.一個基因表達載體一般包括目的基因、標(biāo)記基因、起始密碼子和終止密碼子等結(jié)構(gòu)C.構(gòu)建的重組質(zhì)粒一定含有目的基因并能表達出所需的性狀D.將構(gòu)建好的基因表達載體導(dǎo)入動物細胞常用顯微注射法評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)8、下列關(guān)于“轉(zhuǎn)基因”的敘述，錯誤的是（）A.轉(zhuǎn)入的外源基因不會使作物的其他基因的表達受到影響B(tài).被轉(zhuǎn)移的基因是功能已知的基因，人們對它們研究得已經(jīng)相當(dāng)透徹，絕對不會引起安全性問題C.在“轉(zhuǎn)基因”的過程中，必須用到工具酶D.轉(zhuǎn)基因技術(shù)成果已進入人類的生產(chǎn)和生活，特別是在醫(yī)藥和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上發(fā)揮了極大的作用9、B基因存在于水稻基因組中；其僅在體細胞（2n）和精子中正常表達，但在卵細胞中不轉(zhuǎn)錄。為研究B基因表達對卵細胞的影響，設(shè)計了如下實驗，培育轉(zhuǎn)基因植株。以下鑒定篩選轉(zhuǎn)基因植株的方式正確的是（）

A.將隨機斷裂的B基因片段制備成探針進行DNA分子雜交B.以Luc基因為模板設(shè)計探針進行DNA分子雜交C.以B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計探針與從卵細胞提取的mRNA雜交D.檢測加入熒光素的卵細胞中是否發(fā)出熒光10、下列實驗過程中，出現(xiàn)的正常現(xiàn)象有（）A.制作果酒時，發(fā)酵瓶中溶液產(chǎn)生較多泡沫B.用果酒制作果醋過程中，液面出現(xiàn)一層褐色菌膜C.制作腐乳過程中，豆腐表面發(fā)黏且長有白色菌絲D.用固定化酵母進行酒精發(fā)酵，凝膠珠浮在液面11、關(guān)于胚胎工程的敘述，不正確的是（）A.胚胎工程的理論基礎(chǔ)是體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育B.胚胎收集中沖卵指的是從母體輸卵管中沖取卵子C.受精的標(biāo)志為雌原核和雄原核融合D.胚胎移植時對所有供體牛和受體牛都要進行同期發(fā)情處理12、格瓦斯是一種廣泛流傳于東歐的低度酒精飲料。制作過程：①將發(fā)酵面包制成的面包液、糖化液裝入發(fā)酵罐，加入保加利亞乳酸菌、酵母菌進行發(fā)酵；②發(fā)酵液經(jīng)過嚴格的過濾；③過濾液經(jīng)5～8s迅速升溫到127℃進行高溫殺菌，冷卻后即可飲用。酵母菌產(chǎn)生酒精的能力差異較大，其產(chǎn)酒精能力與其耐受酒精的能力有關(guān)。下列說法正確的是（）A.保加利亞乳酸菌和酵母菌都能同時進行有氧呼吸和無氧呼吸B.面包液、糖化液可為微生物的生長提供碳源、氮源以及水和無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)C.若想得到產(chǎn)酒精能力比較強的酵母菌，可向培養(yǎng)基中添加較高濃度的酒精進行篩選D.過程③中瞬時高溫滅菌可使微生物蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)迅速破壞，從而達到滅菌效果13、熔噴布是口罩生產(chǎn)的重要原料；主要成分是聚丙烯，其易降解程度是評價口罩合格性的重要指標(biāo)之一。某研究小組從土壤中分離出高效降解聚丙烯的細菌，部分流程如圖所示。下列說法正確的是（）

A.②中的選擇培養(yǎng)基以聚丙烯為唯一碳源B.步驟③所用的接種工具是接種環(huán)C.在配制步驟②、③的培養(yǎng)基時，應(yīng)先調(diào)pH后高壓蒸汽滅菌D.對③中平板上的菌落進行計數(shù)，可以計算出土壤浸出液中細菌的濃度14、為保障公共健康；需要定期對公共飲用水進行衛(wèi)生檢測。飲用水的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)是100mL不得檢出大腸桿菌或者1000mL不超過3個大腸桿菌。若要確定飲用水是否合格，可采用膜過濾法檢測，過程如下圖所示。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）

A.檢測前一般需要對水樣收集瓶、培養(yǎng)皿、鑷子等進行干熱滅菌B.完成過濾后需將濾膜置于固體培養(yǎng)基上，在25℃下培養(yǎng)觀察C.為減少實驗誤差，應(yīng)按照上述實驗步驟多次取樣重復(fù)進行檢測D.可用血細胞計數(shù)板直接計數(shù)法替代膜過濾法檢測飲用水中的大腸桿菌數(shù)量15、北極比目魚中有抗凍基因，其編碼的抗凍蛋白有11個氨基酸的重復(fù)序列，該序列重復(fù)次數(shù)越多，抗凍能力越強，下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意圖，有關(guān)敘述不正確的是（）

A.過程①獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚基因組測序B.將多個抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達的新基因，不能得到抗凍性增強的抗凍蛋白C.過程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進行篩選D.應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可以檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其表達16、熒光原位雜交可用熒光標(biāo)記的特異DNA片段為探針；與染色體上對應(yīng)的DNA片段結(jié)合，從而將特定的基因在染色體上定位。下列說法正確的是（）

A.由圖1可知，DNA探針的本質(zhì)是熒光標(biāo)記的DNA片段，其基本單位是脫氧核苷酸B.由圖2可知，高溫可以使雙鏈DNA分子中的氫鍵斷裂形成DNA單鏈C.圖2中兩條姐妹染色單體中最多可有2條熒光標(biāo)記的DNA片段D.若C分別代表不同來源的一個染色體組，已知AA和BB中各有一對同源染色體可被熒光探針標(biāo)記。若植物甲（AABB）與植物乙（AACC）雜交，則F1有絲分裂中期的細胞中可觀察到6個熒光點評卷人得分三、填空題(共9題，共18分)17、人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)一一培養(yǎng)基。其中，配制成的_______________的基質(zhì)稱為液體培養(yǎng)基，配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)稱為________________________。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑_______________________后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基，它是實驗室中最常用的培養(yǎng)基之一。微生物在_________________培養(yǎng)基表面生長，可以形成肉眼可見的菌落。（瓊脂是一種從紅藻中提取的____________________。瓊脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常規(guī)培養(yǎng)條件下呈現(xiàn)固態(tài)。）18、（1）致病菌：第二次世界大戰(zhàn)期間，侵華日軍在中國領(lǐng)土上修建了幾十座_____工廠，曾用數(shù)千名中國人做實驗，還曾在中國20多個地區(qū)使用了_____；造成了幾十萬中國老百姓死亡。日本戰(zhàn)敗投降時，侵華日軍又一次把培養(yǎng)的細菌釋放出來，在中國造成傳染病大流行。

（2）生化毒劑：如_____分子可以阻滯神經(jīng)末梢釋放_____；從而引起肌肉麻痹。

（3）病毒：如_____病毒；在年輕人普遍都沒有接種天花疫苗的情況下，若有人用天花病毒或某些動物的痘病毒作為生物武器，后果不堪設(shè)想。

（4）基因重組致病菌：這些致病菌是人類的_____致病菌，可讓大批受感染者突然發(fā)病，而又無藥可醫(yī)。19、本課題對分解纖維素的微生物進行了初步的篩選。但是，這只是分離純化的第一步。為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實驗，纖維素酶的發(fā)酵方法有___________和___________發(fā)酵兩種。纖維素酶的測定方法，一般是采用對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的__________進行________的測定。20、DNA連接酶與DNA聚合酶作用的異同:

DNA聚合酶只能將______加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接_____的末端，形成磷酸二酯鍵。21、DNA的粗提取實驗中，如果實驗材料是非哺乳動物如雞血細胞，需要在雞血細胞中加入一定量的____________，如果實驗材料是植物細胞，需要先使用_______________溶解細胞膜。22、將DNA粗提取液在____________℃的恒溫水浴箱中保溫10—15分鐘。23、細胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細胞很快就______，稱為______。細胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細胞分裂生長到表面______時，細胞就會_____，這種現(xiàn)象稱為______。24、生物武器的致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，但對植物無害。（選擇性必修3P111）()25、我國中科院神經(jīng)科學(xué)研究所團隊率先攻克了體細胞克隆靈長類動物這一世界難題?他們首次成功培育出體細胞克隆猴，分別叫中中和華華（下圖）?猴子與人類同屬靈長類，此前克隆靈長類動物在技術(shù)上存在著不可逾越的障礙?克隆猴的誕生打破了這個障礙，也再次引起人們對于克隆人的擔(dān)憂和猜測?

從1997年宣布克隆羊多莉（上圖）的出生，到2018年克隆猴中中?華華的誕生，這期間一些科學(xué)家試圖克隆人?舉例說出克隆人面臨哪些倫理問題?_____評卷人得分四、判斷題(共1題，共10分)26、蛋白質(zhì)工程是一項難度很大的工程，主要是因為蛋白質(zhì)發(fā)揮功能必須依賴于正確的高級結(jié)構(gòu)，而這種高級結(jié)構(gòu)往往十分復(fù)雜。（選擇性必修3P95）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共3題，共30分)27、普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱；有人將地衣芽孢桿菌的a-淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中，經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種（過程如圖甲所示）。請據(jù)圖回答：

（1）圖甲中為達到篩選目的，平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應(yīng)以______________作為唯一碳源。②③過程需重復(fù)幾次，目的是______________。

（2）某同學(xué)嘗試過程③的操作，其中一個平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示。該同學(xué)的接種方法是_____________；推測該同學(xué)接種時可能的操作失誤是___________________________。

（3）以淀粉為原料，用等量的工程酵母菌和普通酵母菌在相同的適宜條件下密閉發(fā)酵一段時間，接種_____________菌的發(fā)酵罐需要先排氣，其原因是______________。

（4）用凝膠色譜法分離a-淀粉酶時，在色譜柱中移動速度較慢的蛋白質(zhì)，相對分子質(zhì)量較_____________。28、科研人員利用營養(yǎng)菌（只能利用乳糖；但不能降解四環(huán)素）和抗性菌（不能利用乳糖，但能降解四環(huán)素）對細菌間的相互作用進行了探究。

(1)將兩種菌液分別用______法單獨接種于加入含四環(huán)素并以乳糖為唯一碳源的______（選填“固體”或“液體”）培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后，培養(yǎng)皿中均未出現(xiàn)菌落，推測兩種菌______（填“發(fā)生”或“未發(fā)生”）可遺傳變異。

(2)將兩種菌混合后接種在與上述成分相同的培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后，培養(yǎng)基中兩種菌落均有生長，推測兩種菌實現(xiàn)了“互利共生”，其原因最可能是：抗性菌增殖，______，為營養(yǎng)菌存活提供保障；營養(yǎng)菌增殖，______；代謝產(chǎn)物為抗性菌生長提供碳源。

(3)為進一步驗證上述現(xiàn)象；科研人員設(shè)計了如圖所示裝置進行實驗。

①實驗操作：在接種了營養(yǎng)菌和抗性菌混合菌液的培養(yǎng)板，左側(cè)加入以乳糖為唯一碳源的培養(yǎng)基，右側(cè)加入含______的培養(yǎng)基；培養(yǎng)基可從與兩側(cè)逐漸擴散到混合菌液培養(yǎng)板上。一段時間后檢測混合菌液培養(yǎng)板上兩種菌的數(shù)量情況。

②預(yù)期結(jié)果：左側(cè)______；右側(cè)______。29、研究者改造與腸道共生的大腸桿菌；口服該工程菌后激活機體特異性免疫，實現(xiàn)腫瘤的預(yù)防和治療。

(1)部分腸道細菌能夠分泌外膜囊泡（OMV）；如圖1．OMV能穿越腸道上皮屏障活化腸黏膜內(nèi)豐富的免疫細胞。細菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量較高的特異蛋白。

研究者利用含圖2所示元件的表達載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌制備工程菌，ClyA基因的作用是_____；Fc表達產(chǎn)物能夠與樹突狀細胞表面的特異性受體結(jié)合，提高樹突狀細胞_____OMV的能力。

(2)為研究上述工程菌在人為可控條件下引發(fā)特異性免疫反應(yīng)的效果，研究者用健康小鼠進行如下實驗：。組別第0、3、8天口服工程菌每次服用工程菌12小時后，飲用含阿拉伯糖的水結(jié)果檢測第1組空載體+第12天，每組隨機取5只小鼠等量的脾臟細胞與黑色素瘤細胞共培養(yǎng)，檢測殺傷率，結(jié)果如圖3．第2組ClyA-Fc+第3組ClyA-OVA+第4組第5組

注：“+”；“-”代表是否飲用；

口服工程菌12小時后其在腸道內(nèi)存在數(shù)量較多。

①第4、5組的操作是_____。圖3結(jié)果說明工程菌在人為可控條件下引發(fā)特異性免疫反應(yīng)，理由是_____。

②為進一步驗證上述結(jié)論，研究者進行如下實驗：先加入_____（填選項前字母）保溫后漂洗，再加入_____（填選項前字母）保溫后漂洗，檢測熒光細胞的數(shù)目，若第5組_____為最大值；則上述結(jié)論成立。

A．帶有紅色熒光標(biāo)記的OVA抗原肽復(fù)合物。

B．帶有綠色熒光標(biāo)記的細胞毒性T細胞特異性抗體。

C．第1-5組小鼠脾臟細胞。

③腫瘤患者術(shù)后極易復(fù)發(fā)，研究者重復(fù)上表實驗，并在第3次口服工程菌后第50天給小鼠注射黑色素瘤細胞。目的是_____。

(3)該工程菌的研發(fā)為不同腫瘤的精準(zhǔn)治療和預(yù)防提供了可能。依據(jù)本研究，設(shè)計針對肺癌治療的工程菌表達載體元件：_____。評卷人得分六、綜合題(共4題，共16分)30、人的血清蛋白在臨床上需求量很大；通常從血中提取。由于艾滋病等人類感染性疾病造成的威脅與日俱增，使人們對血液制品心存疑慮。生物技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用使利用動物生產(chǎn)人的血清蛋白成為可能，下圖是上海某研究所培育生產(chǎn)出血清蛋白奶牛的流程。請據(jù)圖回答。

（1）雌性奶牛胚胎細胞是（）。A．雌性奶牛產(chǎn)生的卵細胞B．雌性奶牛體內(nèi)的受精卵C．能發(fā)育成雌性奶牛的受精卵D．從奶牛胚胎上取出的細胞，這個奶牛胚胎將發(fā)育成雌性奶牛（2）此操作流程涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有動物細胞培養(yǎng)、________、________、________和________。

（3）將人的血清蛋白基因?qū)肽膛Ｅ咛ナ荏w細胞時，常用的方法是________；選擇早期胚胎細胞作為外源基因受體的原因是________________________________________。

（4）重組細胞1的特點是_________________________________________。

（5）重組細胞2的特點是_____________________________________________。

（6）早期胚胎培養(yǎng)在發(fā)育培養(yǎng)液中，培養(yǎng)液的成分比較復(fù)雜，除了一些無機鹽和有機鹽類外，還需添加__________________________________等物質(zhì)。

（7）小牛1、2、3的性別是________性，性狀________（相同；不同）。

（8）以上實例說明轉(zhuǎn)基因克隆動物可以作為動物乳腺生物反應(yīng)器；生物醫(yī)藥蛋白。在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域，你認為除此之外，轉(zhuǎn)基因克隆動物在治療人類疾病時還有哪些用途？

__________________________________________________________________31、雪花蓮凝集素（GNA）基因和尾穗莧凝集素（ACA）基因是兩種抗蚜蟲基因；其上的限制酶酶切位點如圖1所示。研究人員將GNA基因和ACA基因連接成融合基因后與pBI121質(zhì)粒載體結(jié)合，然后導(dǎo)人玉米細胞，最終獲得13株玉米植株，并對其細胞中的總DNA進行提取后，用特定的引物擴增融合基因后進行電泳，結(jié)果如圖2所示。

(1)①②過程均需要使用______酶進行連接；與只用KpnI相比，同時用KpnI和XhoI處理融合基因和pBI121質(zhì)粒載體的優(yōu)點是______。

(2)通過圖2分析可知，最終獲得的13株玉米植株中，未能成功導(dǎo)入融合基因的植株是_______，成功導(dǎo)入融合基因的玉米植株________（填“是”或“不是”）一定能抗蚜蟲，原因是______。

(3)由轉(zhuǎn)基因的玉米細胞培育成植株的過程所利用的技術(shù)是______，其原理是______。

(4)在個體水平上鑒定轉(zhuǎn)基因抗蚜蟲玉米培育是否成功的方法是______。32、新型冠狀病毒是一種RNA病毒；其表面的棘突蛋白（簡稱S蛋白）是主要的病毒抗原。單克隆抗體既可作為診斷試劑，又可阻斷病毒的黏附和入侵，故抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎的研究熱點之一。制備抗S蛋白單克隆抗體的流程如下圖，請回答下列問題：

(1)步驟①必須給小鼠注射__________________，目的是__________________________；取小鼠的脾臟剪碎后用酶處理一段時間，再加入培養(yǎng)液可制成單細胞懸液。

(2)步驟④誘導(dǎo)融合操作后，體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原因是____________________。

(3)步驟⑤培養(yǎng)的結(jié)果是__________________；還需進行步驟⑥的原因是______________________。

(4)步驟⑥含多次篩選，篩選依據(jù)的基本原理是_______________________________，選出的雜交瘤細胞的特點是_____________________________________________________________。33、產(chǎn)脂肪酶酵母可用于含油廢水處理。為篩選產(chǎn)脂肪酶酵母菌株；科研人員開展了相關(guān)研究。請回答下列問題：

(1)常規(guī)微生物實驗中，下列物品及其滅菌方法。編號①②③④物品培養(yǎng)基接種環(huán)培養(yǎng)皿涂布器滅菌方法高壓蒸汽火焰灼燒干熱臭氧

正確的是_________（填編號）

(2)稱取1.0g某土壤樣品，轉(zhuǎn)入99mL無菌水中，制備成菌懸液，經(jīng)梯度稀釋后，獲得細胞密度不同的菌懸液。分別取0.1ml菌懸液涂布在固體培養(yǎng)基上，其中10倍稀釋的菌懸液培養(yǎng)后平均長出了46個酵母菌落，則該樣本中每克土壤約含酵母菌_________個。

(3)為了進一步提高酵母菌產(chǎn)酶能力，對分離所得的菌株，采用射線輻照進行誘變育種。將輻照處理后的酵母菌涂布在以_________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，按照菌落直徑大小進行初篩，選擇直徑_________的菌落；純化后獲得A；B兩突變菌株。

(4)在處理含油廢水的同時，可獲得單細胞蛋白，實現(xiàn)污染物資源化。為評價A、B兩菌株的相關(guān)性能，進行了培養(yǎng)研究，結(jié)果如圖。據(jù)圖分析，應(yīng)選擇菌株_________進行后續(xù)相關(guān)研究，理由是_________.

參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、D【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過程：（1）制備產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原；然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細胞。（2）獲得雜交瘤細胞：①將鼠的骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，該雜種細胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測；（4）將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；（5）提取單克隆抗體：從細胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。

【詳解】

A；向小鼠體內(nèi)注射特定的抗原；小鼠會產(chǎn)生漿細胞，可以從小鼠血清中獲得抗體，但此時的抗體不是單克隆抗體，A錯誤；

B；經(jīng)特定抗原免疫過的B淋巴細胞在體外無增殖能力；無法通過培養(yǎng)獲得單克隆抗體，B錯誤；

C；將人細胞與小鼠細胞進行細胞融合時；可用滅活的仙臺病毒作為誘導(dǎo)劑，也可以采用物理法（離心、振動、電激等）和化學(xué)法（聚乙二醇），C錯誤；

D；單克隆抗體制備過程需要2次篩選：第一次篩選出雜交瘤細胞；第二次篩選出能夠產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞，因此經(jīng)過B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后的雜交瘤細胞還需進行抗原抗體陽性檢測才能可進行體內(nèi)或體外培養(yǎng)，D正確。

故選D。2、A【分析】【分析】

生物武器包括致病菌；病毒；生化毒劑，以及經(jīng)過基因重組的致病菌等，生物武器中使用的病原菌有可能會通過食物、生活必需品等散布，造成殺傷性后果，因此要禁止生物武器。

【詳解】

A；生物武器造價低；技術(shù)難度不大，但卻是具有大規(guī)模殺傷性的武器，A錯誤；

B；生物武器包括致病菌；病毒、生化毒劑，以及經(jīng)過基因重組的致病菌等，B正確；

C；這些病原菌直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方；C正確；

D；生物武器中的病原菌或生化毒劑直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方；可以對軍隊和平民造成大規(guī)模的殺傷后果，D正確。

故選A。3、C【分析】【分析】

PCR技術(shù)：

1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

2；原理：DNA復(fù)制。

3；前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。

4；條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶；高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；變性是將DNA雙鏈解開；該過程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對之間的氫鍵，A正確；

B；復(fù)性過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補配對原則完成；B正確；

C；延伸過程中需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶、ATP、四種脫氧核糖核苷酸、引物；C錯誤；

D；細胞內(nèi)DNA復(fù)制是生物體內(nèi)完成的；因此最適溫度就是生物體的體溫，而PCR技術(shù)是在較高溫度條件下進行的，總體來說PCR與細胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高，D正確。

故選C。4、C【分析】【分析】

1.“治療性克隆”將使人胚胎干細胞（簡稱ES細胞）造福于人類的一種非常重要的途徑。治療性克隆是指把患者體細胞移植到去核卵母細胞中構(gòu)建形成重組胚胎，體外培養(yǎng)到一定時期分離出ES細胞，獲得的ES細胞定向分化為所需的特定類型細胞（如神經(jīng)細胞、肌肉細胞和血細胞），用于治療。

2.生殖性克隆就是以產(chǎn)生新個體為目的克隆。即用生殖技術(shù)制造完整的克隆人。目的是產(chǎn)生一個獨立生存的個體。與此相對的是研究性克隆或醫(yī)學(xué)性克??；指的是產(chǎn)生研究所用的克隆細胞。不產(chǎn)生可獨立生存的個體。

【詳解】

A、把病人的胚胎干細胞在一定的條件下，通過離體培養(yǎng)和誘導(dǎo)分化形成胰島細胞以治療糖尿病，屬于治療性克隆，A正確；

B、生殖性克隆就是以產(chǎn)生新個體為目的進行克隆。即用生殖技術(shù)將一個克隆的胚胎植入一個女性子宮發(fā)育成嬰兒的過程，B正確；

C、克隆是無性生殖，C錯誤；

D、治療性克隆和生殖性克隆技術(shù)均需要應(yīng)用到動物細胞培養(yǎng)和核移植，D正確。

故選C。5、C【分析】【分析】

傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)是指直接利用原材料中天然存在的微生物；或利用前一次發(fā)酵保存下來的面團；鹵汁等發(fā)酵物中微生物進行發(fā)酵、制作食品的技術(shù)。

【詳解】

A；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型，參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其代謝類型是異養(yǎng)需氧型，參與腐乳制作的微生物是毛霉，其代謝類型是異養(yǎng)需氧型，A錯誤；

B；腐乳制作的的過程中；蛋白質(zhì)脂肪的水解反應(yīng)是發(fā)生在微生物細胞外，B錯誤；

C；不同微生物適合生存的條件不同；因此發(fā)酵過程中控制好溫度既有利于目的菌的生長，也可抑制雜菌的生長，C正確；

D；傳統(tǒng)發(fā)酵的操作過程中進行消毒處理；但沒有進行滅菌處理，D錯誤。

故選C。6、A【分析】【分析】

次生代謝物：

（1）概念：植物代謝產(chǎn)生的一些一般認為不是植物基本生命活動所必需的產(chǎn)物。

（2）本質(zhì)：一類小分子有機化合物（如酚類；赭類和含氮化合物等）。

（3）作用：在植物抗??；抗蟲等方面發(fā)揮作用；也是很多藥物、香料和色素等的重要來源。

（4）缺點：①植物細胞的次生代謝物含量很低；從植物組織提取會大量破壞植物資源。②有些產(chǎn)物又不能或難以通過化學(xué)合成途徑得到。

【詳解】

A；植物的次生代謝產(chǎn)物一般不是植物基本生命活動所必需的；其在植物細胞中含量很少，A正確；

B；愈傷組織是由高度分化的細胞轉(zhuǎn)化而來的一團薄壁細胞組成；其分化程度很低，B錯誤；

C；誘導(dǎo)外植體脫分化獲得愈傷組織不需要PEG（聚乙二醇）；需要植物激素，C錯誤；

D；愈傷組織的誘導(dǎo)受植物激素配比的影響；也受營養(yǎng)物質(zhì)和光照等因素的影響，D錯誤。

故選A。7、D【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；經(jīng)限制酶切割后；質(zhì)粒上出現(xiàn)2個黏性末端，多了2個游離的磷酸基團，DNA分子多了2個游離的磷酸基團，A錯誤；

B；一個基因表達載體一般包括目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因等結(jié)構(gòu)；B錯誤；

C；構(gòu)建的重組質(zhì)粒含有目的基因；但不一定能表達出所需的性狀，還需要進一步檢測，C錯誤；

D；將構(gòu)建好的基因表達載體導(dǎo)入動物細胞常用顯微注射法；D正確。

故選D。二、多選題(共9題，共18分)8、A:B【分析】【分析】

1；基因工程的工具：（1）限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；（2）DNA連接酶：連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵；（3）運載體：常用的運載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒。

2；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

【詳解】

A；外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機的；因而極有可能破壞原有基因，并使之表達受到影響，A錯誤；

B；目前科學(xué)家對基因的結(jié)構(gòu)、基因間的相互作用以及基因的調(diào)控機制等都了解相當(dāng)有限；再加上轉(zhuǎn)移的基因雖然是功能已知的基因，但不少卻是異種生物的基因，因此可能會引起安全性問題，B錯誤；

C；在“轉(zhuǎn)基因”的過程中；必然用到工具酶，如限制酶和DNA連接酶，C正確；

D；轉(zhuǎn)基因技術(shù)成果在農(nóng)業(yè)和醫(yī)藥上發(fā)揮了極大的作用；已進入人類的生產(chǎn)和生活，D正確。

故選AB。

【點睛】9、B:C:D【分析】【分析】

分析題圖：圖中①表示將目的基因?qū)朕r(nóng)桿菌；②表示采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胫参锛毎?，之后再采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因植株。

【詳解】

A；探針是指用放射性同位素（或熒光分子）標(biāo)記的含有目的基因DNA片段；因此要以B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計探針，而不是將隨機斷裂的B基因片段制備成探針，A錯誤；

B；可用DNA分子雜交技術(shù)；即以Luc基因為模板設(shè)計探針進行DNA分子雜交，B正確；

C；用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交；即以B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計探針與從卵細胞提取的mRNA雜交，C正確；

D；檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)；由圖可知B基因與Luc基因連接形成B-Luc融合基因，因此可通過Luc基因表達，檢測加入熒光素的卵細胞中是否發(fā)出熒光，D正確。

故選BCD。10、A:C:D【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧條件下，進行有氧呼吸大量繁殖；（2）在無氧條件下，產(chǎn)生酒精和二氧化碳。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

3；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【詳解】

A；果酒制作時；除了產(chǎn)生酒精，還會產(chǎn)生大量二氧化碳，因此發(fā)酵瓶中容易產(chǎn)生較多泡沫，A正確；

B；用果酒制作果醋過程中；液面出現(xiàn)一層白色菌膜，而不是褐色菌膜，B錯誤；

C；制作腐乳過程中；豆腐表面發(fā)黏且長有白色菌絲，C正確；

D；用固定化酵母進行酒精發(fā)酵；酒精濃度越來越高，因此凝膠珠逐漸浮上液面，D正確。

故選ACD。

【點睛】11、B:C:D【分析】【分析】

1；胚胎工程--指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術(shù)；如體外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細胞培養(yǎng)等技術(shù)。經(jīng)過處理后獲得的胚胎，還需移植到雌性動物體內(nèi)產(chǎn)生后代，以滿足人類的各種需求。理論基礎(chǔ)：哺乳動物的體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育規(guī)律。

2；精過程為：頂體反應(yīng)→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應(yīng)）→卵細胞膜反應(yīng)（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成、核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始。

3；胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體；有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體。用激素進行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對胚胎進行質(zhì)量檢查，此時的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對胚胎進行移植；⑤移植后的檢查。

【詳解】

A；胚胎工程的理論基礎(chǔ)是哺乳動物的體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育規(guī)律；A正確；

B；胚胎收集中沖卵指的是從母體輸卵管中沖取早期胚胎；B錯誤；

C；受精的標(biāo)志為在卵黃膜和透明帶之間觀察到兩個極體；C錯誤；

D；胚胎移植時對供體母牛和受體牛都要進行同期發(fā)情處理；對供體公牛不需要進行同期發(fā)情處理，D錯誤。

故選BCD。

【點睛】12、B:C:D【分析】1；酵母菌的新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型；在利用酵母菌發(fā)酵時最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環(huán)境下一段時間使其繁殖，再隔絕氧氣進行發(fā)酵；酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2；乳酸菌的代謝類型是異養(yǎng)厭氧型；在無氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑵咸烟欠纸鉃槿樗帷?/p>

【詳解】

A；乳酸菌為嚴格厭氧菌；只能進行無氧呼吸，A錯誤；

B；面包液、糖化液主要成分為糖類；也含有其他物質(zhì)，可為微生物的生長提供碳源、氮源、水和無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，B正確；

C；酵母菌產(chǎn)酒精能力與其耐受酒精的能力有關(guān)；利用選擇培養(yǎng)基，向培養(yǎng)基中添加較高濃度的酒精篩選出產(chǎn)酒精能力比較強的酵母菌，C正確；

D；過程③中瞬時高溫會破壞微生物的蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)；進而將微生物殺死達到滅菌效果，D正確。

故選BCD。13、A:C【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

A；根據(jù)題意；熔噴布是口罩生產(chǎn)的重要原料，主要成分是聚丙烯，本實驗?zāi)康氖呛Y選出可以高效降解一次性口罩的細菌，②中的選擇培養(yǎng)基要以聚丙烯為唯一碳源，A正確；

B；步驟③接種方法為稀釋涂布平板法；接種工具為涂布器，B錯誤；

C；在配制步驟②、③的培養(yǎng)基時；為避免雜菌污染，應(yīng)先調(diào)pH值后再進行高壓蒸汽滅菌，C正確；

D；對③中平板上的菌落進行計數(shù)；可以計算出土壤浸出液中細高效降解聚丙烯的細菌的濃度，D錯誤。

故選AC。14、B:D【分析】【分析】

細菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測定。將已知體積的水過濾后；將濾膜放在伊紅美藍培養(yǎng)基上培養(yǎng)。在該培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈黑色，根據(jù)黑色菌落的數(shù)目，計算水樣中大腸桿菌的數(shù)量。微生物接種時，為了避免其它雜菌的污染，接種過程要進行無菌操作。灼燒滅菌常適用于接種環(huán)；接種針；干熱滅菌常適用于玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具；高壓蒸汽滅菌常適用于無菌水、培養(yǎng)基。

【詳解】

A；檢測前需要對水樣收集瓶、濾膜、培養(yǎng)基、鑷子滅菌；防止雜菌干擾，A正確；

B；完成過濾后需將濾膜置于固體培養(yǎng)基上；在37℃下培養(yǎng)觀察，B錯誤；

C；為減少實驗誤差；按照上述實驗步驟多次取樣重復(fù)進行檢測，取平均值作為實驗數(shù)據(jù)，C正確；

D；大腸桿菌較??；不能用血細胞計數(shù)板直接計數(shù)法替代膜過濾法檢測，D錯誤。

故選BD。15、A:C:D【分析】【分析】

分析題圖：①表示反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因的過程；②表示基因表達載體的構(gòu)建過程；之后采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；將目的基因?qū)敕呀M織塊；最后采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，將導(dǎo)入目的基因的番茄組織細胞培養(yǎng)成抗凍番茄植株?；虮磉_載體通常由啟動子；目的基因、終止子和標(biāo)記基因構(gòu)成，其中標(biāo)記基因的作用是篩選重組質(zhì)粒，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法能將質(zhì)粒導(dǎo)入受體細胞。

【詳解】

A；過程①是通過人工合成法獲取的目的基因；由于真核生物體內(nèi)的基因含有不能編碼蛋白質(zhì)的序列（內(nèi)含子），導(dǎo)致逆轉(zhuǎn)錄合成的目的基因與原基因有較大的差異，因此人工合成的目的基因不能用于比目魚基因組測序，A錯誤；

B；抗凍蛋白的11個氨基酸的重復(fù)序列重復(fù)次數(shù)越多；抗凍能力越強，并不是抗凍基因的編碼區(qū)重復(fù)次數(shù)越多抗凍能力越強，抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成的新基因已不是原來的抗凍基因，因此不能得到抗凍性增強的抗凍蛋白，B正確；

C；②是基因表達載體的構(gòu)建過程；基因表達載體通常由啟動子、目的基因、終止子和標(biāo)記基因構(gòu)成，其中標(biāo)記基因的作用是篩選重組質(zhì)粒，過程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，可以通過DNA分子雜交或PCR技術(shù)檢測受體細胞是否含有目的基因，C錯誤；

D；利用DNA探針技術(shù)檢測目的基因是否導(dǎo)入到受體細胞；但表達的產(chǎn)物通常是蛋白質(zhì)，可利用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測目的基因是否表達出來，D錯誤。

故選ACD。

【點睛】16、A:B:D【分析】【分析】

1；基因探針是用放射性同位素、熒光分子等標(biāo)記的DNA分子作為探針；原理是DNA分子雜交。

2；DNA分子是一個獨特的雙螺旋結(jié)構(gòu)；是由兩條平行的脫氧核苷酸長鏈盤旋而成，外側(cè)由脫氧核糖和磷酸交替連接構(gòu)成基本骨架，內(nèi)側(cè)是堿基對（A-T；C-G）通過氫鍵連接。

3；目的基因的檢測與鑒定：

分子水平上的檢測：

①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；

②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；

③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。

個體水平上的鑒定：

抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；由圖1可知；DNA探針是用熒光分子標(biāo)記的DNA分子，DNA的基本組成單位是脫氧核苷酸，因此熒光標(biāo)記的DNA探針的基本單位是脫氧核糖核苷酸，A正確；

B；由圖2可知；高溫（煮沸）可以使雙鏈DNA分子中的氫鍵斷裂形成DNA單鏈，B正確；

C；圖中兩條姐妹染色單體中含有2個DNA分子共有4條鏈；所以最多可有4條熒光標(biāo)記的DNA片段，C錯誤；

D、由于AA和BB中各有一對同源染色體可被熒光探針標(biāo)記，若植物甲（AABB）與植物乙（AACC）雜交，則其F1（AABC）含有3個熒光點；經(jīng)間期復(fù)制加倍，有絲分裂中期的細胞中可觀察到6個熒光點，D正確。

故選ABD。三、填空題(共9題，共18分)17、略

【解析】①.液體狀態(tài)②.固體培養(yǎng)基③.瓊脂④.固體⑤.多糖18、略

【分析】【詳解】

（1）早在第二次世界大戰(zhàn)中；侵華日軍就組建了從事細菌戰(zhàn)的731部位和100部隊，并在中國領(lǐng)土上修建了幾十座細菌武器工廠，大量培養(yǎng)鼠疫；霍亂、傷寒、炭疽和菌痢等一系列能使人致命的傳染性疾病。曾用數(shù)千名中國人做實驗，還曾在中國20多個地區(qū)使用了細菌武器，造成了幾十萬中國老百姓死亡。日本戰(zhàn)敗投降時，侵華日軍又一次把培養(yǎng)的細菌釋放出來，在中國造成傳染病大流行。

（2）某些國家或恐怖組織大量生產(chǎn)肉毒桿菌毒素；肉毒桿菌毒素分子可以阻滯神經(jīng)末梢釋放乙酰膽堿，從而引起肌肉麻痹。

（3）1978年天花就已經(jīng)在地球上消滅；但是某些國家至今保留著天花病毒菌株，今天，在年輕人普遍都沒有接種天花疫苗的情況下，若有人用天花病毒或某些動物的痘病毒作為生物武器，后果不堪設(shè)想。

（4）目前，有一些國家對重組基因技術(shù)制造全新的致病菌表現(xiàn)了極大的興趣，這些人類從來沒有接觸過的致病菌，可以讓大批受感染者突然發(fā)病，而又無藥可醫(yī)?！窘馕觥竣?細菌武器②.細菌武器③.肉毒桿菌毒素④.乙酰膽堿⑤.天花⑥.從未接觸過19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】液體發(fā)酵固體發(fā)酵葡萄糖定量20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】單個核苷酸兩個DNA片段21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蒸餾水洗滌劑和食鹽22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】60—7523、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】貼附在瓶壁上細胞貼壁相互抑制停止分裂增殖細胞的接觸抑制。24、略

【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，同時可毀壞植物，該說法錯誤?！窘馕觥垮e誤25、略

【分析】【詳解】

①克隆人是對人權(quán)和人的尊嚴的挑戰(zhàn)：

人不僅是自然人；在生物進化中人自從脫離了動物界，還成為有價值觀念的社會的人，因此人是具有雙重屬性的，是生物；心理和社會的集合體?？寺∪艘簿褪侨斯o性生殖的人，只在遺傳性狀上與原型人一致，而人的心理、行為、社會特征和特定人格是不能克隆的，因此克隆人是不完整的人，是一個喪失自我的人，嚴重違反了人權(quán)，危害人類尊嚴；

②克隆人沖擊了現(xiàn)有的婚姻家庭和兩性關(guān)系等傳統(tǒng)的倫理道德觀念：

克隆人的出現(xiàn)將徹底攪亂代際關(guān)系和家庭倫理定位；克隆人過程中可以出現(xiàn)體細胞核供者；卵細胞供者以及孕育者三位生物學(xué)父母，以及撫養(yǎng)者的社會學(xué)父母的多種選擇，被克隆者只是生物學(xué)上復(fù)制，人類世代的傳承也將被打破，家庭倫理關(guān)系含混不清；

③克隆人是制造在心理上和社會地位上都不健全的人；

④克隆人違反生物進化的自然發(fā)展規(guī)律：

人類所以發(fā)展到如此高的進化文明程度，是由其自然發(fā)展規(guī)律形成的。而克隆人要把有性生殖倒退到無性生殖，這種行為如不加阻止，必將給人類種下無窮的災(zāi)難?！窘馕觥竣倏寺∪耸菍θ藱?quán)和人的尊嚴的挑戰(zhàn)；②克隆人沖擊了現(xiàn)有的婚姻家庭和兩性關(guān)系等傳統(tǒng)的倫理道德觀念；③克隆人是制造在心理上和社會地位上都不健全的人；④克隆人違反生物進化的自然發(fā)展規(guī)律等。四、判斷題(共1題，共10分)26、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是一項難度很大的工程，主要是因為蛋白質(zhì)發(fā)揮功能必須依賴于正確的高級結(jié)構(gòu)，而這種高級結(jié)構(gòu)往往十分復(fù)雜，并且蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)具有多樣性，這也在一定程度上增加了蛋白質(zhì)工程的難度，故說法正確。五、實驗題(共3題，共30分)27、略

【分析】【分析】

據(jù)圖分析；圖甲為可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種的培育過程，其中①表示基因表達載體的構(gòu)建過程，是基因工程的關(guān)鍵步驟；②③表示分離純化工程酵母菌菌種。乙圖為稀釋涂布平板法得到的菌落，但是其菌落沒有均勻分布，說明其涂布是不均勻的。

【詳解】

（1）該實驗的目的是獲得可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種；因此其培養(yǎng)基應(yīng)該以淀粉為唯一碳源；②；③過程為分離純化工程酵母菌菌種，多次重復(fù)篩選可以提高分解淀粉能力強的工程酵母菌菌種的純度。

（2）圖乙顯示平板培養(yǎng)后；形成了多個菌落，因此該同學(xué)的接種方法是稀釋涂布平板法；但是菌落分布不均勻，集中分布在一定區(qū)域，說明是涂布不均勻?qū)е碌摹?/p>

（3）與普通酵母菌相比；在以淀粉為原料的培養(yǎng)條件下，工程酵母菌更能夠高效地利用淀粉，其分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的能力更強，呼吸作用產(chǎn)生二氧化碳速率更快，所以需要先排氣。

（4）凝膠色譜法分離的原理是相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)分子；不能進入凝膠顆粒內(nèi)部，只能分布在顆粒之間，通過的路程較短，移動的速度較快；相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)分子比較容易進入凝膠內(nèi)部的通道，通過的路程較長，移動的速度較慢。因此，在色譜柱中移動速度較慢的蛋白質(zhì)，相對分子質(zhì)量較小。

【點睛】

解答本題的關(guān)鍵是掌握基因工程的基本步驟、微生物的培養(yǎng)和分離、蛋白質(zhì)的分離等相關(guān)知識，能夠根據(jù)實驗?zāi)康姆治雠囵B(yǎng)基成分，并能夠根據(jù)工程菌的特點分析其代謝情況?！窘馕觥康矸圻M一步篩選純化獲得分解淀粉能力強的酵母菌（或高效利用利用淀粉的工程酵母菌）稀釋涂布平板法涂布不均勻工程酵母工程菌分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的能力強，工程菌呼吸強度大，產(chǎn)生CO2多小28、略

【分析】【分析】

接種最常用的方法是平板劃線法和稀擇涂布平板法；接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養(yǎng)甚表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體菌落。

【詳解】

（1）為了觀察菌落；需用固體培養(yǎng)基，接種方法為平板劃線法或稀釋涂布平板均可，培養(yǎng)皿中均未出現(xiàn)菌落，說明未發(fā)生可遺傳變異。

（2）混合接種能形成菌落的原因是相互產(chǎn)生或創(chuàng)造了各自所需的物質(zhì)或條件；所以推測兩種菌最可能是：抗性菌增殖，降解了四環(huán)素，為營養(yǎng)菌存活提供保障；營養(yǎng)菌增殖，分解了乳糖，代謝產(chǎn)物為抗性菌生長提供營養(yǎng)所需。

（3）①由題意可知；營養(yǎng)菌只能利用乳糖，但不能降解四環(huán)素，抗性菌不能利用乳糖，但能降解四環(huán)素，故在接種了營養(yǎng)菌和抗性菌混合菌液的培養(yǎng)板，左側(cè)加入以乳糖為唯一碳源的培養(yǎng)基，右側(cè)應(yīng)加入四環(huán)素但不含乳糖的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基可從與兩側(cè)逐漸擴散到混合菌液培養(yǎng)板上。

②根據(jù)兩種菌能實現(xiàn)了“互利共生”，左側(cè)添加以乳糖為唯一碳源的培養(yǎng)基后營養(yǎng)菌和抗性菌都能生長。右側(cè)加入含四環(huán)素的培養(yǎng)基，因沒有碳源則兩種菌都不能生長。【解析】(1)（稀釋）涂布平板或平板劃線固體未發(fā)生。

(2)降解了四環(huán)素分解了乳糖。

(3)四環(huán)素但不含乳糖營養(yǎng)菌和抗性菌都能生長兩種菌都不能生長29、略

【分析】【分析】

樹突狀細胞為抗原呈遞細胞；可識別；攝取和傳遞抗原信息。

【詳解】

（1）細菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量較高的特異蛋白；而OMV能穿越腸道上皮屏障活化腸黏膜內(nèi)豐富的免疫細胞。所以，ClyA基因的作用為表達出細菌溶素A（ClyA），使OVA和Fc定位至OMV表面，進而融合基因可以被免疫細胞識別。Fc表達產(chǎn)物能夠與樹突狀細胞表面的特異性受體結(jié)合，進而提高樹突狀細胞識別；攝取和傳遞抗原信息的能力。

（2）①根據(jù)表格和柱狀圖可知；服用的工程菌采用“加法原理”，逐漸增加部件，且第4組和第5組工程菌都是完整的，即第4組:ClyA-OVA-Fc第5組:ClyA-OVA-Fc，但是第4組飲用含阿拉伯糖的水，進而激活融合基因的表達；第5組不飲用含阿拉伯糖的水，不能激活融合基因的表達。所以，第3；5組含有OVA，在人為控制口服阿拉伯糖后產(chǎn)生OMV，激活特異性免疫，對腫瘤細胞的殺傷率較高；1、2組缺乏OVA，第4組無阿拉伯糖誘導(dǎo)，殺傷率均低。

②小鼠脾臟細胞具有免疫細胞；可在抗原刺激下引起特異性免疫。帶有紅色熒光標(biāo)記的OVA抗原肽復(fù)合物可引起小鼠脾臟細胞發(fā)生特異性免疫，故先加入第1-5組小鼠脾臟細胞和帶有紅色熒光標(biāo)記的OVA抗原肽復(fù)合物進行保溫，判斷特異性免疫的強度；

故選AC。

再加入帶有綠色熒光標(biāo)記的細胞毒性T細胞特異性抗體；目的是檢測OVA抗原肽復(fù)合物是否能夠產(chǎn)生特異性細胞毒性T細胞。

故選B。

若第5組同時被紅色和綠色熒光標(biāo)記的細胞數(shù)目占比越多；說明工程菌在人為可控條件下引發(fā)特異性免疫反應(yīng)，結(jié)論成立。

③腫瘤患者術(shù)后極易復(fù)發(fā)；說明特異性免疫功能減弱。所以，可多次注射黑色素瘤細胞，進而研究該口服工程菌是否能夠誘發(fā)長期免疫記憶，從而抑制腫瘤復(fù)發(fā)。

（3）本實驗中融合基因里面有OVA（黑色素瘤細胞特異性抗原），所以只需將OVA替換為肺癌細胞特異性抗原即可。即將元件中的OVA替換為肺癌細胞特異性表達的抗原基因?！窘馕觥?1)表達ClyA；使OVA和Fc定位至OMV表面識別；攝取。

(2)第4組:ClyA-OVA-Fc和-第5組:ClyA-OVA-Fc和+第3；5組含有OVA；在人為控制口服阿拉伯糖后產(chǎn)生OMV，激活特異性免疫，對腫瘤細胞的殺傷率較高;1、2組缺乏OVA，第4組無阿拉伯糖誘導(dǎo)，殺傷率均低ACB同時被紅色和綠色熒光標(biāo)記的細胞數(shù)目占比研究該口服工程菌是否能夠誘發(fā)長期免疫記憶，從而抑制腫瘤復(fù)發(fā)。

(3)將元件中的OVA替換為肺癌細胞特異性表達的抗原基因六、綜合題(共4題，共16分)30、略

【分析】【分析】

1；據(jù)圖分析：利用基因工程技術(shù)將人體血清蛋白基因?qū)氪菩阅膛Ｅ咛ゼ毎行纬芍亟M細胞1；重組細胞1實現(xiàn)了基因的重組；重組細胞1的核與去核牛卵細胞通過核移植技術(shù)形成了重組細胞2，重組細胞2實現(xiàn)了細胞核和細胞質(zhì)的重組；重組細胞2經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)獲得的早期胚胎，再經(jīng)過胚胎分割技術(shù)分成的若干胚胎細胞，通過胚胎移植到不同受體母牛子宮內(nèi)，發(fā)育成的小牛基因型是相同的，因為這些胚胎干細胞都是同一個受精卵經(jīng)過有絲分裂得到的。

2；人體血清白蛋白基因一般利用顯微注射技術(shù)導(dǎo)人“奶牛胚胎”細胞中。當(dāng)受精卵分裂到囊胚期時；需要取囊胚的滋養(yǎng)層細胞做DNA分析，進行性別鑒定，以確保發(fā)育成熟的牛能分泌乳汁。

（1）

雌性奶牛能分泌乳汁；需要選擇雌性奶牛的胚胎，即從奶牛胚胎上取出的細胞，這個奶牛胚胎將發(fā)育成雌性奶牛，故選D。

（2）

重組細胞1通過基因工程技術(shù)而來；重組細胞2是通過核移植技術(shù)而來的，重組細胞2培育成早期胚胎之后，再經(jīng)過胚胎分割技術(shù)分成的若干胚胎細胞，通過胚胎移植到不同受體母牛子宮內(nèi)，故此操作流程涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有動物細胞培養(yǎng)；基因工程、核移植、胚胎分割和胚胎移植。

（3）

受體細胞是動物細胞時；常用顯微注射法將人的血清蛋白基因?qū)肽膛Ｅ咛ナ荏w細胞中；因為早期胚胎細胞具有全能性，可使外源基因在相應(yīng)的組織細胞表達，所以選擇早期胚胎細胞作為外源基因受體。

（4）

重組細胞1中導(dǎo)入了人體血清蛋白基因；因此它細胞核內(nèi)的DNA分子含有血清蛋白基因的特點。

（5）

重組細胞2是由重組細胞1的細胞核與去核牛卵母細胞重組組成的；依然具備發(fā)育成胚胎的可能，因為動物細胞核具有全能性。

（6）

早期胚胎需要在培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)；培養(yǎng)液成分一般都比較復(fù)雜，除了含有各種無機鹽；有機鹽類、維生素、氨基酸、核苷酸、激素等外，還要添加血清等物質(zhì)。

（7）

早期胚胎分離成的若干胚胎細胞發(fā)育成的小?；蛐褪窍嗤?；因為這些胚胎干細胞都是同一個重組細胞2經(jīng)過有絲分裂得到的；重組細胞2的核來自于重組細胞1，因此小牛1；2、3均為雌性動物，性狀大致相同。

（8）

轉(zhuǎn)基因克隆動物在治療人類疾病時；轉(zhuǎn)基因克隆動物的細胞；組織和器官可以作為異體移植的供體；人的核移植胚胎干細胞經(jīng)過誘導(dǎo)分化，形成相應(yīng)的組織、器官后，可用于組織器官的移植；動物乳腺生物反應(yīng)器，生產(chǎn)醫(yī)藥蛋白等等作用。

【點睛】

本題考查胚胎工程、基因的表達、細胞核移植等技術(shù)，屬于考綱綜合運用層次．意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系；理論聯(lián)系實際，綜合運用所學(xué)知識解決自然界和社會生活中的一些生物學(xué)問題的能力?！窘馕觥浚?）D

（2）基因工程核移植胚胎分割胚胎移植。

（3）顯微注射法早期胚胎細胞具有全能性；可使外源基因在相應(yīng)的組織細胞中表達。

（4）細胞核內(nèi)的DNA分子中含有血清蛋白基因。

（5）細胞核與去核卵母細胞重組；具備發(fā)育成胚胎的可能。

（6）維生素；激素、氨基酸、核苷酸、血清。

（7）雌相同。

（8）轉(zhuǎn)基因克隆動物的細胞、組織和器官可以作為異體移植的供體；人的核移植胚胎干細胞經(jīng)過誘導(dǎo)分化，形成相應(yīng)的組織、器官后，可用于組織器官的移植。31、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@??；利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測與鑒定。

【詳解】

（1）據(jù)圖分析；①②過程包括目的基因連接及基因表達載體的構(gòu)建，兩個過程均有需要DNA連接酶進行連接；與只用KpnI相比，同時用KpnI和XhoI