《生藥分析》課程實(shí)施大綱

《生藥分析》本科課程實(shí)施大綱

《推薦參考版，2020》

說(shuō)明

本生物藥物分析教學(xué)實(shí)施大綱包括基本信息、課程描述、教學(xué)理念、教師

簡(jiǎn)介、先修課程、課程目標(biāo)、課程教學(xué)實(shí)施、課程要求、課程考核、學(xué)術(shù)誠(chéng)信、

課堂規(guī)范、課程資源、教學(xué)合同等13部分內(nèi)容。其中課程教學(xué)實(shí)施是本大綱的

主要闡述內(nèi)容：在主要參考的生物藥物分析教材自然章節(jié)的基礎(chǔ)上分20個(gè)講授

單元，總計(jì)46學(xué)時(shí)，〔不包含生藥分析實(shí)驗(yàn)部分）。每一授課單元教學(xué)時(shí)間依據(jù)

章節(jié)內(nèi)容分為2課時(shí)、4課時(shí)不等。以教材自然章節(jié)為撰寫(xiě)單元，撰寫(xiě)內(nèi)容包括

教學(xué)目標(biāo)，教學(xué)重難點(diǎn)，教學(xué)內(nèi)容，教學(xué)過(guò)程等。其中教學(xué)過(guò)程以每一節(jié)（90

分鐘）為單位依次進(jìn)行撰寫(xiě)，包括具體的課堂設(shè)計(jì)，采用的教學(xué)方法、授課過(guò)程，

課堂討論的主題、相關(guān)閱讀材料、作業(yè)內(nèi)容、課前準(zhǔn)備情況、課后反思內(nèi)容等方

面，個(gè)別章節(jié)依據(jù)授課內(nèi)容做細(xì)微調(diào)節(jié)。本大綱以白秀峰編寫(xiě)的《生物藥物分析》

為主要講課參考教材，同時(shí)參考何華編寫(xiě)的《生物藥物分析》及孫瑩和呂潔編寫(xiě)

的《藥物分析》。

課時(shí)安排如下:

章次教學(xué)內(nèi)容授課學(xué)時(shí)

—?結(jié)論、生物藥物的雜質(zhì)及安全性檢查8

二生物藥物的微生物限度檢杏法2

三生物藥物的酶學(xué)分析法2

四抗生素類(lèi)藥物的分析4

五維生素及輔酶類(lèi)藥物的分析2

六核昔與核甘酸類(lèi)藥物的分析2

七氨基酸、多肽與蛋白質(zhì)類(lèi)藥物的分析2

A多糖類(lèi)藥物的分析2

九福類(lèi)藥物的分析2

十抗體,疫苗與血液制品類(lèi)藥物的分析6

合計(jì)32

一、課程性質(zhì)與任務(wù)

《生物藥物分析》（BiopharmaceuticalAnalysis）是生物工程制藥專(zhuān)業(yè)設(shè)置的

一門(mén)專(zhuān)業(yè)課。生物藥物分析學(xué)是一門(mén)研窕生物藥品及其制劑的組成、理化性質(zhì)、

真?zhèn)舞b定、純度檢查及其有效成份的含量測(cè)定的一門(mén)科學(xué)。生物藥物分析學(xué)是整

個(gè)藥學(xué)領(lǐng)域中一個(gè)重要的組成部分。目的是為了保證人們用藥安全、合理、有效，

在藥品的生產(chǎn)、供應(yīng)、貯臧、調(diào)配以及臨床使用過(guò)程中都必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的分析檢

驗(yàn)。也就是必須運(yùn)用各種有效的方法（包括物理學(xué)、化學(xué)、物理化學(xué)、生物學(xué)和

微生物學(xué)等方法），在各個(gè)環(huán)節(jié)，控制藥品質(zhì)量。通過(guò)學(xué)習(xí)使學(xué)生對(duì)藥物分析學(xué)

知識(shí)尤其是各種分析方法基本掌握；對(duì)各種成分的分析思路清晰；進(jìn)而理解各種

藥物進(jìn)入體內(nèi)，吸收、分布、代謝、消除等動(dòng)力學(xué)過(guò)程。

生物藥物分析涉及生物制藥工程及相關(guān)學(xué)科的基礎(chǔ)內(nèi)容，知識(shí)點(diǎn)多、抽象概

念多、難點(diǎn)多。對(duì)于制藥相關(guān)專(zhuān)業(yè)的學(xué)生來(lái)說(shuō)，《生物藥物分析》是研究與藥物

相關(guān)的藥物分析理論、原理與技術(shù)及其在藥物研究、藥品生產(chǎn)、藥物質(zhì)量控制與

藥品臨床應(yīng)用的基礎(chǔ)學(xué)科。從上世紀(jì)末期開(kāi)始，現(xiàn)代制藥科學(xué)已經(jīng)從以化學(xué)模式

為主體迅速轉(zhuǎn)向以生物學(xué)和化學(xué)相結(jié)合的新模式，因此，對(duì)于化工學(xué)院的相關(guān)專(zhuān)

業(yè)來(lái)說(shuō)，《生物藥物分析》都在制藥學(xué)科的發(fā)展中起著先導(dǎo)作用。

但是，因?yàn)椤渡锼幬锓治觥肪哂幸浑s（機(jī)制復(fù)雜）、二多（概念多、內(nèi)容

多）、三性（規(guī)律性、理論性、系統(tǒng)性）的特點(diǎn)，所以學(xué)生一般都會(huì)感到內(nèi)容抽

象雜亂、難以記憶、無(wú)系統(tǒng)性，學(xué)習(xí)難度較大。《生物藥物分析》教學(xué)的基本任

務(wù)是系統(tǒng)闡述生物藥物分析的基本理論和基礎(chǔ)知一只，使學(xué)生掌握扎實(shí)的《生物藥

物分析》基礎(chǔ)理論知識(shí)、掌握《生物藥物分析》的講究方法、技術(shù)和手段。同時(shí)，

積極引導(dǎo)和鼓勵(lì)學(xué)生自主創(chuàng)新，讓學(xué)生既具備專(zhuān)業(yè)的視角，又具有創(chuàng)新的素質(zhì)。

我們教學(xué)的基本任務(wù)是傳授生物藥物分析的基本理論和基礎(chǔ)知識(shí)，使學(xué)生掌

握扎煲的生物藥物分析基礎(chǔ)理論知識(shí)、掌握生物藥物分析的研究方法、技術(shù)和手

段。同時(shí)，積極引導(dǎo)和鼓勵(lì)學(xué)生自主創(chuàng)新，讓學(xué)生既具備專(zhuān)業(yè)的視角，又具有創(chuàng)

新的素質(zhì)。

二、課程學(xué)習(xí)目標(biāo)

《生物藥物分析》（BiopharmaceuticalAnalysis）是生物制藥專(zhuān)業(yè)的一門(mén)專(zhuān)業(yè)

基礎(chǔ)課。應(yīng)用微生物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物藥物分析、有機(jī)化學(xué)、數(shù)學(xué)、

分析化學(xué)、生化工程等學(xué)科的理論及其技術(shù)成就，檢測(cè)和研究各種神武藥物質(zhì)量

的一門(mén)中和性學(xué)科。《生物藥物分析》是制藥專(zhuān)業(yè)的專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)課，在制藥專(zhuān)業(yè)學(xué)

生的知識(shí)結(jié)構(gòu)中起著承前啟后的重要作用。通過(guò)學(xué)習(xí)使學(xué)生對(duì)藥物分析學(xué)知識(shí)尤

其是各種分析方法基本掌握；對(duì)各種成分的分析思路清晰；進(jìn)而理解各種藥物進(jìn)

入體內(nèi)，吸收、分布、代謝、消除等動(dòng)力學(xué)過(guò)程。

2、知識(shí)方面：

掌握生物藥物分析的基礎(chǔ)知識(shí)，包括基本理論、研究方法和技術(shù)等。如生物

藥物的雜質(zhì)檢查、生物藥物的微生物限度檢查法；各種生物藥物的檢測(cè)分析方法

等。幫助學(xué)生形成生物藥物分析的基本觀(guān)點(diǎn)，明確生物藥物分析的基本原理及其

應(yīng)用。

3、能力方面：

要求學(xué)生掌握生物藥物分析的常用量度法，基本實(shí)驗(yàn)技能，如分光光度法和

離心機(jī)使用；某些代謝物的定性、定量測(cè)定。熟悉電泳、層析分離原理和方法。

4、情感與認(rèn)知方面：

培養(yǎng)學(xué)生的合作、交流與創(chuàng)新能力。

總之，順應(yīng)時(shí)代的發(fā)展要求，通過(guò)本課程的教與學(xué)，培養(yǎng)精通生物藥物分析

專(zhuān)業(yè)知識(shí)的制藥專(zhuān)業(yè)相關(guān)復(fù)合型人才。

三、課程學(xué)習(xí)目標(biāo)與畢業(yè)要求指標(biāo)點(diǎn)對(duì)應(yīng)關(guān)系

課程目標(biāo)畢業(yè)要求指標(biāo)點(diǎn)（舉例的內(nèi)容）支撐強(qiáng)度

3.認(rèn)識(shí)/分辨生物3-3能夠綜合考慮生物藥物性質(zhì)、生物藥物檢測(cè)方法、

目標(biāo)1藥物性質(zhì)與檢測(cè)制藥企業(yè)、公眾健康等因素，識(shí)別、選擇及優(yōu)化改進(jìn)生M

力法物藥物質(zhì)量檢測(cè)方案，體現(xiàn)經(jīng)濟(jì)性和創(chuàng)新意識(shí)。

6.生物藥物檢測(cè)、

6-2了解制藥行業(yè)相關(guān)的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)、知識(shí)產(chǎn)權(quán)、產(chǎn)'也政

目標(biāo)2制藥企業(yè)與民眾H

策、法律法規(guī)和企業(yè)管理體系。

健康

8-3理解生物藥物檢測(cè)理論的核心理念，了解生物藥物

目標(biāo)38.職業(yè)規(guī)范質(zhì)量監(jiān)控的職業(yè)性質(zhì)和責(zé)任，在實(shí)踐中能自覺(jué)遵'守職業(yè)H

道德和行為規(guī)范。

11-1掌握項(xiàng)目管理和經(jīng)濟(jì)決策的基本知識(shí)與方法，能夠

目標(biāo)41L項(xiàng)目管理M

理解其在解決制藥復(fù)雜工程問(wèn)題中發(fā)揮的作用。

注：H?強(qiáng)支撐;M-支撐。

四、課程學(xué)時(shí)分配與學(xué)習(xí)目標(biāo)對(duì)應(yīng)關(guān)系

序

號(hào)章節(jié)名稱(chēng)（知識(shí)單元）課時(shí)數(shù)支撐課程目標(biāo)及強(qiáng)度教學(xué)方法

1(M)

2理論講解

1第一章緒論2(M)

1(H)

笫二章生物藥物的雜質(zhì)及安全性檢理論講解

62(H)

2案例式教學(xué)

查3(M)

1(H)

第三章生物藥物的微生物限度檢理論講解

22(H)

3案例式教學(xué)

查法3(H)

1(H)

2(H)理論講解

2

4第四章生物藥物的施學(xué)分析法3(H)案例式教學(xué)

4(M)

1(H)

2(H)理論講解

4

5第五章抗生素類(lèi)藥物的分析3(H)案例式教學(xué)

4(M)

1(H)

2(H)理論講解

2

6第六章維生素及輔醐類(lèi)藥物的分析3(H)案例式教學(xué)

4(M)

1(H)

理論講解

22(H)

7第七章核昔與核甘酸類(lèi)藥物的分析案例式教學(xué)

3(M)

抗原最適濃度等測(cè)定

2、理解液相酶和均相酶免疫標(biāo)記技術(shù)的原理，酶免疫測(cè)定

法在生物藥物分析中的應(yīng)用實(shí)例，理解放射免疫分析法的概

念及基本原理

3、熟悉放射免疫分析法的實(shí)驗(yàn)條件的建立

重點(diǎn)和難點(diǎn)：

①酶免疫測(cè)定法的原理

②酶免疫測(cè)定法的類(lèi)型及操作步驟

第五章抗生素類(lèi)藥物的分析1、了解抗生素類(lèi)藥物的檢查項(xiàng)目，微生物檢定用標(biāo)準(zhǔn)4

品抗生素類(lèi)藥物的鑒別，抗生素類(lèi)藥物的鑒別的常用方法

,抗生素類(lèi)藥物的無(wú)機(jī)雜質(zhì)、殘留溶媒的檢查

抗生素效價(jià)微生物檢定法，抗生素效價(jià)管碟法測(cè)定結(jié)果的影

響因素及控制和操作技術(shù)，生物統(tǒng)計(jì)法在抗生素效價(jià)檢定中

的作用。

2、熟悉B-內(nèi)酰胺類(lèi)、敏基糖件類(lèi)、四環(huán)類(lèi)、大環(huán)內(nèi)防

類(lèi)、多烯大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)等結(jié)構(gòu)和鑒別方法

抗生素類(lèi)藥物的雜質(zhì)檢查：熟悉抗生素類(lèi)藥物中高分子雜

質(zhì)、降解產(chǎn)物及異構(gòu)體的檢查，熟悉抗生素效價(jià)微生物檢定

法，抗生素效價(jià)測(cè)定的生物統(tǒng)計(jì)計(jì)算步驟，容量分析法，抗

生素類(lèi)藥物含量的物理化學(xué)測(cè)定法

3、理解抗生素效價(jià)管碟法測(cè)定原理和計(jì)算，理解抗生

素效價(jià)的單位

4、掌握色譜測(cè)定法

重點(diǎn)與難點(diǎn)：

1.抗生物素類(lèi)藥物的鑒別

2.抗生物素類(lèi)藥物含量的物理化學(xué)測(cè)定法

第六章維生素及輔酶類(lèi)藥物1、熟悉維生素C的鑒別試驗(yàn)2

的分析

2、了解維生素C的雜質(zhì)檢查，酶A、Q10的鑒別和含晟測(cè)定

方法維生素及輔酶的分類(lèi)與作用

維生素類(lèi)藥物分析

3、掌握維生素C的含量測(cè)定

輔酶類(lèi)藥物分析

重點(diǎn)與難點(diǎn)：

1維生素類(lèi)藥物的分析

2輔酶類(lèi)藥物的分析

第七章核昔與核苜酸類(lèi)藥物1、了解核甘酸的結(jié)構(gòu)、分類(lèi)、化學(xué)性質(zhì)嚓吟類(lèi)核苜酸類(lèi)藥2

的分析物分析，喋聆類(lèi)核甘酸類(lèi)藥物的鑒別方法，熟悉其含量測(cè)定

方法，了解其雜質(zhì)檢查

2、掌握喋吟類(lèi)核甘酸類(lèi)藥物的鑒別方法，熟悉其含量測(cè)定

方法，了解其雜質(zhì)檢查。

喀咤類(lèi)核甘酸類(lèi)藥物分析

重點(diǎn)與難點(diǎn)：

1.喋吟類(lèi)核甘酸藥物分析

2.喀噬類(lèi)核甘酸藥物分析核昔酸合成代謝過(guò)程中的一些抗

代謝物，以及它們的作用機(jī)理

第八章筑基酸、多肽與蛋白1、了解氨基酸的結(jié)構(gòu)與分類(lèi)、生產(chǎn)制備方法及其其雜質(zhì)檢2

質(zhì)類(lèi)藥物的分析

查，氨基酸的含量分析，甲醛滴定法，蛋白質(zhì)藥物的含量測(cè)

定方法

2、熟悉氨基酸的重要理化性質(zhì)，蛋白質(zhì)的重要理化質(zhì)

鑒別與檢查，氨基酸與蛋白質(zhì)藥物的鑒別方法，握荀三酮法

和非水滴定法的原理，凱氏定氮法、福林酚法的原理

氨基酸和蛋白質(zhì)的質(zhì)量分析

重點(diǎn)與難點(diǎn)：

氨基酸與蛋白質(zhì)類(lèi)藥物的鑒別與檢查

第九章多糖類(lèi)藥物的分析粘多糖2

1、熟悉多糖的鑒別試驗(yàn)

2、掌握多糖的含量測(cè)定方法

3、了解粘多糖的生物活性測(cè)定方法

細(xì)菌多糖，細(xì)菌多糖的鑒別、檢查和含量測(cè)定

真菌多糖，真菌多糖多糖的鑒別、檢查和含量測(cè)定，幾種多

糖藥物的質(zhì)量分析

重點(diǎn)和難點(diǎn)：

1、掌握粘多糖的分析方法

2、熟悉真菌多糖

第十章酶類(lèi)藥物的分析1、了解酶的特性與分類(lèi)2

2、理解酶的催化機(jī)理與活力單位

3、熟悉影響酶催化反應(yīng)速度的因素

酶類(lèi)藥物的鑒別與檢查

1、熟悉酶類(lèi)藥物的鑒別試驗(yàn)

2、了解酶類(lèi)藥物的檢查方法

酶類(lèi)藥物的含量測(cè)定與檢測(cè)方法

1、理解酶類(lèi)藥物的含量測(cè)定的原理

2、熟悉酶反應(yīng)的檢測(cè)方法

藥用酶的質(zhì)量分析

了解抑肽酶、尿激酶等質(zhì)量分析方法

重點(diǎn)和難點(diǎn)：

1、掌握多肽類(lèi)藥物的分析方法

2、熟悉基因工程藥物

3、了解幾種基因工程藥物的質(zhì)量分析

第T章抗體、疫苗與血液1、了解生物制品的定義、分類(lèi)、用途和研究進(jìn)展6

制品類(lèi)藥物的分析

2、了解生物制品進(jìn)行質(zhì)量控制的意義和標(biāo)準(zhǔn)

生物制品的質(zhì)量監(jiān)控

1、物制品的質(zhì)量監(jiān)控的主要內(nèi)容

2、理解生物制品的質(zhì)量檢定的方法和原理

生物制品的質(zhì)量檢定的實(shí)例

了解生物制品的質(zhì)量檢定的程序及標(biāo)準(zhǔn)

重點(diǎn)和難點(diǎn)：

1、掌握生物制品的質(zhì)量控制和分析的方法

2、熟悉幾種生物制品

六、課程考核方式及成績(jī)?cè)u(píng)定方式

1.成績(jī)組成

序號(hào)理論課成績(jī)組成比例

期中測(cè)試50%

1平時(shí)成績(jī)課后作業(yè)20%30%

平時(shí)考勤30%

2期末考試70%

總計(jì)100%

2.評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

(1)期中測(cè)試

試卷或開(kāi)卷測(cè)試、評(píng)分。

(2)課后作業(yè)

分?jǐn)?shù)段課后作業(yè)得分

作業(yè)書(shū)寫(xiě)清晰；問(wèn)答及分析題思路明確，結(jié)論合理，計(jì)算題正確率90%以90-100

1

上；沒(méi)有抄襲情況。分

作業(yè)書(shū)寫(xiě)清晰：?jiǎn)柎鸺胺治鲱}思路基本明確，結(jié)論可行但不夠合理，計(jì)算題

270?89分

正確率70%至89%；沒(méi)有抄襲情況。

作業(yè)書(shū)寫(xiě)較為清晰：?jiǎn)柎鸺胺治鲱}思路基本明確，結(jié)論基本可行，計(jì)算題正

360?69分

確率60%至69%,沒(méi)有抄襲情況。

4作業(yè)書(shū)寫(xiě)基本清晰，問(wèn)答及分析題思路不正確，計(jì)算題正確率低于60%.。?S9分

1.作業(yè)每遲交一次，扣2.5分；

2.作業(yè)出現(xiàn)抄襲情況，則當(dāng)次作業(yè)為最低等級(jí)；

備注

3.具體平時(shí)作業(yè)成績(jī)的標(biāo)記方式由老師自己確定；

4.平時(shí)作業(yè)總成績(jī)?yōu)楦鞔巫鳂I(yè)的平均分。

根據(jù)課后作業(yè)要求，按百分制評(píng)分，按10%折算成總評(píng)成績(jī)。

(3)平時(shí)考勤

按照缺席扣10分/次，缺席三次取消期末考試參考資格

(4)單元測(cè)試2

(5)期末考試

按照期末考試的標(biāo)準(zhǔn)答案閱卷，按百分制評(píng)分，按70%折算成總評(píng)成績(jī)。

(6)成績(jī)匯總示例

期中測(cè)課后作期中測(cè)期末測(cè)期末考

姓名總評(píng)總評(píng)成績(jī)計(jì)算公式

試業(yè)試試試

張三90901001009093

總評(píng)成績(jī)=期中測(cè)試X50%+

李四808090908083

課后作業(yè)x20%+平時(shí)考勤

王五909080807077

x30%+期末考試＞70%

..

說(shuō)明：以上各項(xiàng)成績(jī)要有相應(yīng)的書(shū)面記錄。

(7)課程目標(biāo)達(dá)成分析

課程目標(biāo)達(dá)成度評(píng)價(jià)

評(píng)價(jià)依據(jù)評(píng)價(jià)內(nèi)容的平均目標(biāo)課程分目

課程目標(biāo)

及方式目標(biāo)分值成績(jī)達(dá)成值標(biāo)達(dá)成度

課程目標(biāo)1:使學(xué)生理解保證

生物藥物質(zhì)量對(duì)使用者的身體期中測(cè)試

健康的重要性，掌握藥品生產(chǎn)

質(zhì)量監(jiān)控及檢測(cè)的基本原理、

期末考試

方法、技術(shù)措施和管理模式。

課程目標(biāo)2：使學(xué)生掌握生物

藥物質(zhì)量檢測(cè)的基本要求和準(zhǔn)課后作業(yè)

則，并能夠?qū)⑸锼幬镔|(zhì)量檢

測(cè)的基本理論、基本知識(shí)和技

期末考試

能應(yīng)用于藥品生產(chǎn)實(shí)踐。

課程目標(biāo)3：基于GMP的具體

要求，使學(xué)生具有全面的生物期末測(cè)試

藥物質(zhì)量意識(shí)，培養(yǎng)學(xué)生實(shí)事

求是的工作作風(fēng)，嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ?/p>

態(tài)度，嚴(yán)密的工作方法和整潔

期末考試

的工作習(xí)慣。

課程目標(biāo)4：使學(xué)生掌握生物

藥物質(zhì)量檢測(cè)的技術(shù)和方法，具

在線(xiàn)測(cè)試

有系統(tǒng)的生物藥物質(zhì)量思維和

系統(tǒng)化管理的能力，對(duì)生物藥

物質(zhì)量生產(chǎn)的全過(guò)程進(jìn)行計(jì)

戈人組織、指揮、協(xié)調(diào)、控制

和評(píng)價(jià)，以實(shí)現(xiàn)項(xiàng)目的目標(biāo)，期末考試

從而適應(yīng)現(xiàn)代醫(yī)約企業(yè)的發(fā)展

趨勢(shì)。

達(dá)成評(píng)價(jià)

課程達(dá)成目標(biāo)值

結(jié)果

七、教材及參考書(shū)

1.教材：《生物藥物分析》張怡軒中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015年

2.參考教材：

1.《生物藥物分析》何華化學(xué)工業(yè)出版社

2.《藥物分析》孫瑩呂潔人民衛(wèi)生出版社

八、教師簡(jiǎn)介

馬捷瓊，女，1975.3.20.出生，博士，化工學(xué)院教師，主要研究方向：天然

活性產(chǎn)物。

授課過(guò)程

第一章緒論、生物藥物的雜質(zhì)及安全性

授課題目授課日期2020年3月16日

檢查

化工學(xué)院生藥2017

授課班級(jí)授課時(shí)數(shù)4授課方式理論課

本科班

【教學(xué)目標(biāo)】

4、了解生物藥物分析的性質(zhì)和任務(wù)

5、了解各國(guó)藥典和生物藥物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

6、熟悉生物藥物的科學(xué)管理規(guī)范

4、掌握生物藥物檢驗(yàn)工作的基本程序及內(nèi)容。

【教學(xué)重難點(diǎn)】

1.生物藥物的性質(zhì)與任務(wù)

2.藥典與生物藥物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

3.生物藥物的質(zhì)量科學(xué)管理

【教學(xué)內(nèi)容】

一.藥物分析的性質(zhì)

1.藥學(xué)的分支學(xué)科，是藥學(xué)和分析學(xué)的交叉學(xué)科

2.包括藥物的檢驗(yàn)、藥物穩(wěn)定性、生物利用度、藥物臨床監(jiān)測(cè)和生物藥物檢定等多方面的定

性定量分析

二.藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1.藥典是國(guó)家對(duì)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及其檢驗(yàn)方法所做的技術(shù)規(guī)定，是藥物生產(chǎn)、監(jiān)控、供應(yīng)、使

用及管理部門(mén)共同遵循的法令。

2.藥典一般包括凡例、正文、附錄、索引四部分

三.藥典（藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、分析方法）

1.藥典是國(guó)家對(duì)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及其檢驗(yàn)方法所做的技術(shù)規(guī)定，是藥物生產(chǎn)、監(jiān)控、供應(yīng)、使

用及管理部門(mén)共同遵循的法令。

2.藥典與分析方法

【教學(xué)過(guò)程】

教學(xué)方法：多媒體教學(xué)、全.點(diǎn)難點(diǎn)案例教學(xué)

教學(xué)具體過(guò)程（90分鐘，學(xué)生出勤登記冊(cè)下發(fā)簽到作為平時(shí)上課考勤，下同不再列出）：

本課程的開(kāi)始首先出示生物藥物分析相關(guān)教學(xué)幻燈片，展示具體的生產(chǎn)生活中的生物藥

物分析現(xiàn)象，

屬生兒退燒甚召?*件鼻耳逋.孕B4得穌t。梆L超片分*

這些現(xiàn)象的發(fā)生是因?yàn)樗幬锷a(chǎn)和銷(xiāo)售等領(lǐng)域監(jiān)管不達(dá)到所致。由此引出本科講述的內(nèi)容:

藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：

藥典是國(guó)家對(duì)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及其檢驗(yàn)方法所做的技術(shù)規(guī)定，是藥物生產(chǎn)、監(jiān)控、供應(yīng)、

使用及管理部門(mén)共同遵循的法令。

藥典一般包括凡例、正文、附錄、索引四部分。

以乙酸乙酯為例講述藥物的分析方法和步驟：

乙酸乙睛

Yisuanyizhi

EthylAcetate

CHQ88.11

本品含GHQ不得少r99.5%(g/g).

【性狀】本品為無(wú)色輛做體：具揮發(fā)性，易燃燒,有K果香味。

本品他中溶解，能與乙解、乙酥,內(nèi)用或氯甲烷任源溶。

相對(duì)密度本品的相對(duì)密度(附或VIA)為0.898?0.902。

【筌別】本品燃燒時(shí)產(chǎn)生黃色火焰和情酸味.

【檢代】酸度取本品2.0ml,置錐形瓶中，加中性乙醉10ml與的敵將港2滴，搖勻，滴如,南化鈉滴

定?(0.1mol/L)至顯粉紅色。消%寂億鈉酒海(O.lmol/L)不得過(guò)0.10ml。

易發(fā)化物不揮發(fā)物

【合期定】取本品1.5g,精密稱(chēng)定，置250ml錐形瓶中，精密

氧化鈉滴定?(0.5mol/L)50ml,加熱除1小時(shí)，放冷，加的

歆指磁】滴，用鹽酸滴定夜(0.5mol/L)滴定至無(wú)色，并將滴定的結(jié)

果用空內(nèi)試驗(yàn)校正，每1ml氫氧化鈉滴定J(0.5mol/L湘當(dāng)于44.05映

的GH8c2。

【類(lèi)別】藥用輔料，溶劑.

【貯墓】密封保存。

結(jié)合ppt講述生物藥物的科學(xué)管理：

GLP《良好藥物實(shí)驗(yàn)研究規(guī)范》

GMP《良好藥品生產(chǎn)規(guī)范》

GSP《良好藥品供應(yīng)規(guī)范》

GCP《良好藥品臨床試驗(yàn)規(guī)范》

及生物藥物檢驗(yàn)工作的基本程序及內(nèi)容

1.生物藥物的分析檢驗(yàn)

2.藥物的取樣

藥物的鑒別

藥物的雜質(zhì)檢查

藥物的安全性檢查

藥物的含量（效價(jià)）測(cè)定

檢查報(bào)告的書(shū)寫(xiě).結(jié)合具體的事例介紹檢查報(bào)告的書(shū)寫(xiě)。

2.藥物的鑒別

藥鑒別目的

判斷藥物的真?zhèn)?/p>

藥物鑒別的特點(diǎn)

藥物分析的首要任務(wù)

為已知藥物的確證試驗(yàn)

個(gè)別分析

化學(xué)鑒別試驗(yàn)要有明確的現(xiàn)象

鑒別試驗(yàn)條件要準(zhǔn)確

在對(duì)生物藥物分析主要內(nèi)容進(jìn)行講解的過(guò)程中需要根據(jù)講課的進(jìn)度來(lái)調(diào)控多媒體課件

的出示快慢和節(jié)奏，引入的日常生活現(xiàn)象須緊密貼近課堂的內(nèi)容，尤其要為突破重:難點(diǎn)服務(wù),

分別從微觀(guān)到宏觀(guān)，從理論到具體，從靜態(tài)到動(dòng)態(tài)多個(gè)角度分析和解釋生物藥物分析研究的

主要內(nèi)容。

（到此課程進(jìn)行90分鐘）

【教學(xué)H標(biāo)】

一生物藥物的雜質(zhì)及其來(lái)源

1、理解藥物雜質(zhì)的概念

2、了解藥物雜質(zhì)的來(lái)源

二生物藥物中雜質(zhì)檢查的要求及限量計(jì)算

1、掌握雜質(zhì)限量的概念

2、了解雜質(zhì)限量檢查的要求及特點(diǎn)

三生物藥物中雜質(zhì)檢查為原理

理解生物藥物與雜質(zhì)在理化生方面的差異進(jìn)行檢查的原理

四一般雜質(zhì)檢查

1、掌握一般雜質(zhì)檢查的規(guī)則

2、熟悉氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬鹽、碎鹽等檢查方法

3、了解酸堿度、澄清度、易炭化物等檢查方法

4、理解費(fèi)休法測(cè)水分的原理。

五特殊雜質(zhì)檢查及安全性檢查

了解異常毒性、熱源、升、降壓物質(zhì)、致敏物質(zhì)的方法

【教學(xué)重難點(diǎn)】

重點(diǎn)：

1）生物藥物雜質(zhì)及其來(lái)源

2）一般雜質(zhì)檢查：氯化物檢查法；溶液澄清度檢查法；

3）特殊雜質(zhì)檢查及安全性質(zhì)檢查：異常毒性檢查法；

難點(diǎn)：

1）生物藥物雜質(zhì)檢查的要求及限量計(jì)算

2）生物藥物雜質(zhì)的檢查原理

【教學(xué)內(nèi)容】

1、生物藥物的雜質(zhì)及其來(lái)源

2、生物藥物中雜質(zhì)檢查的要求及限量計(jì)算

3、生物藥物中雜質(zhì)檢查的原理.：（1）利用生物藥物和雜質(zhì)在物理性質(zhì)的差異；（2）利

用生物藥物和雜質(zhì)在化學(xué)性質(zhì)的差異；

4、一般雜質(zhì)檢查：（1）氯化物檢杳法；（2）硫酸能檢查法；（3）鐵鹽檢查法；（4）重

金屬檢查法；（5）碑鹽檢查法；（6）酸堿度檢查法；（7）溶液澄清度檢查法；（8）溶液顏色

檢杳法；（9）易碳化物檢查法；（10）殘?jiān)唬?1）干燥失重檢杳法；（12）水分檢查法。

5、特殊雜質(zhì)檢查及安全性檢查：（1）異常毒性檢查法；（2）熱源檢查法；（3）升壓物

質(zhì)檢查法；（4）降壓檢查法；（5）致敏物質(zhì)檢查法；

【教學(xué)過(guò)程】

對(duì)生物藥物分析整本教材內(nèi)容進(jìn)行總述性介紹；生物藥物分析的內(nèi)容可以分為三個(gè)大

的部分，

第一篇生物藥物分析學(xué)概述

第二篇常用生物藥物分析方法

第三篇各類(lèi)生物藥物的分析檢驗(yàn)

我們會(huì)在以后的章節(jié)中逐步學(xué)習(xí)。

首先對(duì)生物藥物的雜質(zhì)進(jìn)行系統(tǒng)的介紹：

1.雜質(zhì)及其來(lái)源

藥物中無(wú)治療作用，或影響藥物的穩(wěn)定型和療效，甚至對(duì)人體健康有害的物質(zhì)

藥物純度和一般化學(xué)品及試劑的要求不同

生產(chǎn)過(guò)程引入雜質(zhì)

2.雜質(zhì)的種類(lèi)

按性質(zhì)分為影響藥物穩(wěn)定性的雜質(zhì)、毒性雜質(zhì)和信號(hào)雜質(zhì)

按來(lái)源分為一般雜質(zhì)和特殊雜質(zhì)

3.雜質(zhì)檢查的原理

利用生物藥物和雜質(zhì)在物理性質(zhì)上的差異

利用生物藥物和雜質(zhì)在化學(xué)性質(zhì)上的差異

4.藥物的雜質(zhì)檢查方法

1）對(duì)照法

限量檢查法（LimitTest）

特點(diǎn)：不需知道雜質(zhì)的準(zhǔn)確含量

在供試品溶液中加入試劑，在一定反應(yīng)條件下，不得有王反應(yīng)出現(xiàn)

特點(diǎn)：不需對(duì)照品

2）比較法

含量測(cè)定法：測(cè)定雜質(zhì)的絕對(duì)含量，如測(cè)定吸收度、pH值等。

特點(diǎn)：準(zhǔn)確測(cè)定雜質(zhì)的量，不需對(duì)照品

一般雜質(zhì)檢查

I.一般雜質(zhì)檢查規(guī)則

《藥品檢驗(yàn)操作標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定：

2.遵循平行操作原則

儀器的配對(duì)性：如納氏比色管應(yīng)配對(duì)，刻度線(xiàn)高低布差不超過(guò)2mm,珅鹽檢杳時(shí)導(dǎo)氣

管長(zhǎng)度及孔的大小要一致

對(duì)照品與供試品的同步操作

正確的取樣及供試品的稱(chēng)量范圍Klg不超過(guò)±2%,不超過(guò)±1%

正確的比色、比濁方法

檢查結(jié)果不符合規(guī)定或在限度邊緣時(shí)應(yīng)對(duì)■供試管和對(duì)照管各復(fù)查二份（到此課程進(jìn)行30

分鐘）

3.氯化物檢查法

對(duì)照法

測(cè)定條件

I.標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液10nge17ml,50ml溶液中含50?8014g的C「所顯渾濁梯度明顯,相當(dāng)于

標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液5?8ml。

2.反應(yīng)需在硝酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀硝酸10ml為宜。

同時(shí)引出如下問(wèn)題（幻燈片給出）：

（1）加速AgC理濁的形成；

（2）產(chǎn)生較好的乳油；

（3）避免弱酸銀鹽如碳酸銀、銀以及蠹化

銀沉淀的形成?

3.試劑：硝酸銀

4.供試液和對(duì)照液稀釋后，再加硝酸銀溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀

5.避光、暗處放置5分鐘后比濁，因氯化銀見(jiàn)光易分解。

6.比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀(guān)察。

7.平行操作原則

干擾及排除

1.若供試品有色，需經(jīng)處理后方可檢查。

（1）內(nèi)消色法：倍量法，如枸椽酸鐵鉉中氯化物的檢瓷。

（2）外消色法：如高鋅酸鉀中氯化物的檢杳，可先加乙醇適量，使其還原褪色后再依，法

檢查。

2.當(dāng)有其它干擾物質(zhì)存在時(shí)，必需在檢查前除去

（1）碘中氯化物的檢查

（2）碘化物中氯化物的檢查

（3）澳化物中氯化物的檢查

3.不溶于水的有機(jī)藥物

（1）加水振搖，過(guò)濾，取濾液進(jìn)行檢查。

（2）加熱，放冷，過(guò)濾，取濾液進(jìn)行檢查。

（3）溶于有機(jī)溶劑如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇或丙酮溶解后進(jìn)行檢查。

澄清度檢查法

檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì)，用作注射劑的原料藥一股應(yīng)作此項(xiàng)檢查。

1.檢查方法對(duì)照法

2.濁度標(biāo)準(zhǔn)液的配制

中國(guó)藥典規(guī)定用濁度標(biāo)準(zhǔn)液作為澄清度檢行的標(biāo)準(zhǔn)。

反應(yīng)原理：烏洛托品在偏酸性條件下水解產(chǎn)生甲醛，甲醛與腫縮合生成甲醛腺，不溶于水，

形成白色渾濁。

1.00%硫酸腫溶液與10%烏洛托品溶液等量混合配制濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液

濁度標(biāo)準(zhǔn)原液

濁度標(biāo)準(zhǔn)液（5個(gè)級(jí)號(hào)）

3.判斷:藥典中規(guī)定的“澄清”，指供試品溶液的澄清度相同于所用溶劑，或未超過(guò)（）.5號(hào)濁

度標(biāo)準(zhǔn)液。

4.溶劑：水、酸、堿、有機(jī)溶劑

有機(jī)酸的堿金屬鹽類(lèi)藥物強(qiáng)調(diào)用“新沸過(guò)的冷水”

有機(jī)溶劑殘留量測(cè)定法：

1.有機(jī)溶劑殘留量測(cè)定法

是用以檢杳藥物在生產(chǎn)過(guò)程中引入的有害有機(jī)溶劑，包括苯、氯仿、二氧六環(huán)、二氯甲

烷、毗噬、甲苯及環(huán)氧乙烷。

2.檢查方法中國(guó)藥典采用氣相色譜法檢查殘留有機(jī)溶劑

色譜條件：

固定相：直徑為0.25?0.18mm的二乙烯苯一乙基乙烯苯型高分子多孔小球

載氣：氮?dú)?/p>

檢測(cè)器：氫火焰離子化檢測(cè)器檢測(cè)

柱溫：80?170c

色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：中國(guó)藥典規(guī)定，在殘留溶劑測(cè)定前應(yīng)作色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)。（

三特殊雜質(zhì)檢查及安全性檢查

主要內(nèi)容；

異常毒性檢查法

熱原檢查法

升壓物質(zhì)檢杳法

降壓物質(zhì)檢查法

致敏物質(zhì)檢查法

首先需要理解特殊雜質(zhì)檢查的兩種類(lèi)型：特殊雜質(zhì)檢查和痕量安全檢查。

特殊雜質(zhì)檢查：特殊雜質(zhì)相對(duì)于一般雜質(zhì)，它根據(jù)某一特定藥物的性質(zhì)、生產(chǎn)方法和工

藝條件及貯存過(guò)程中發(fā)生妁變化，可能引入的雜質(zhì)。品種不同，雜質(zhì)也不同。在藥典中各藥

物的檢查項(xiàng)下，檢查方法不外乎前面介紹的各種方法。

痕量安全檢查：它們是痕量的存在于生物藥物中，對(duì)生物體能產(chǎn)生特殊生理作用，嚴(yán)重

影響用藥安全的雜質(zhì)，因此這類(lèi)特殊雜質(zhì)檢查又稱(chēng)為安全性檢杳。安全性檢杳又可以分為:

熱原檢查法，升壓物質(zhì)檢查法，降壓物質(zhì)檢查法，致敏物質(zhì)檢查法。（到此課程進(jìn)行20

分鐘）

異常毒性檢查法：

用一定劑量的藥物按照制定的操作方法和給藥途徑給予規(guī)定體重的某種動(dòng)物，觀(guān)察其急

性毒性反應(yīng)，反應(yīng)的判斷以動(dòng)物死亡與否為終點(diǎn)，實(shí)際上是個(gè)限量檢杳。

1.異常毒性檢查的原理：

中國(guó)藥典異常毒性檢查方法：

結(jié)果判斷

2.熱原檢查法：

熱原：不是化學(xué)物質(zhì)，而是微生物代謝產(chǎn)生的

熱原檢查方法：

兔溫法：

原理：

操作方法：

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:

檢查法：

結(jié)果判斷:

3.升壓物質(zhì)檢查法:

原理:

檢查法：

降壓物質(zhì)檢杳法:

是藥物中含有某些能夠降低血要的雜質(zhì)，組胺或類(lèi)組胺。

中國(guó)藥典中關(guān)于降壓物質(zhì)的檢查規(guī)定。

檢查法：

4.致敏物質(zhì)檢杏法:

致敏物質(zhì)檢杳也是異性蛋白質(zhì)檢查，藥物中如果含有異性蛋白，在臨床使用時(shí)易引起病人多

種過(guò)敏反應(yīng)，輕者皮膚出現(xiàn)紅斑或丘疹,嚴(yán)重者出現(xiàn)窒息等致命癥狀。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：豚鼠

方法：

作業(yè)布置及課程預(yù)習(xí)(5分鐘》

作業(yè)：

1特.殊物質(zhì)檢查

2.安全性檢查

參考書(shū)：

1.《生物藥物分析》向秀峰、張怡軒中國(guó)醫(yī)藥科技出版社

2.《生物藥物分析》何華化學(xué)工業(yè)出版社

3.《藥物分析》孫瑩呂潔人民衛(wèi)生出版社

授課題目第三章微生物限度檢查法授課日期2020年3月23日

授課班級(jí)化工學(xué)院生藥2017本授課時(shí)數(shù)4授課方式理論課

科班

【教學(xué)目標(biāo)】

生物藥物被微生物污染后引起的質(zhì)量變化

1、了解生物藥物被微生物污染的范圍和原因及質(zhì)量變化

2、了解生物藥物微生物限度檢查的意義及綜合防止措施

生物藥物的微生物限度檢查法

1、了解染菌限度標(biāo)準(zhǔn)

2、理解染菌限度檢查原則

3、熟悉染菌限度檢查步驟

控制菌檢查法

1、掌握大腸桿菌、沙門(mén)菌、綠濃桿菌的檢查原理及方法

2、熟悉金黃色葡萄球菌、破傷風(fēng)桿菌、痢疾桿菌的檢查原理及方法

含抑菌成分的生物藥物菌檢方法

1、了解含抑菌成分的生物藥物染菌的原因

2、熟悉含抑菌成分的供試品液的制備方法

【重點(diǎn)和難點(diǎn)】

1）生物藥物被微生物污染后引起的質(zhì)量變化

2）抑制菌的檢查法

【教學(xué)內(nèi)容】

1、生物藥物被微生物污染后引起的質(zhì)量變化：（I）生物藥物染菌的原因與范圍（2）生

物藥物被微生物污染后引起的質(zhì)量變化；（3）生物藥物微生物限度檢查的意義（4）生物藥

物防止被微生物污染的綜合措施

2、生物藥物的微生物限度檢查法：（1）染菌限度標(biāo)準(zhǔn)；（2）染菌限度檢查原則（3）微

生物限度檢查步驟

3、控制菌檢查法：（1）大腸桿菌：（2）沙門(mén)菌（3）銅綠假單抱菌；（4）金黃色葡萄球

菌；（5）破傷風(fēng)桿菌；（6）痢疾桿菌；

4、含抑菌成分的生物藥物菌檢方法（1）含抑菌成分的藥物；（2）含抑菌成分藥品染菌

的原因（3）含抑菌成分供試品的確定（4）含抑菌成分供試液的制備

【教學(xué)過(guò)程】

第一節(jié)生物藥物微生物污染后的質(zhì)量變化及微生物限度檢查法

教學(xué)方法：多媒體教學(xué)結(jié)合講授

教學(xué)具體過(guò)程（90分鐘）：

復(fù)習(xí)上節(jié)學(xué)習(xí)內(nèi)容：（5分鐘）。

結(jié)合教材，聯(lián)系實(shí)際提出本章主要內(nèi)容：

1.微生物污染后引起的質(zhì)量變化

2.微生物限度檢查法

3.控制菌的檢查法

4.含抑菌成分的菌檢方法

結(jié)合ppt對(duì)上述內(nèi)容逐一進(jìn)行講解：

微生物污染后引起的質(zhì)量變化

然后每個(gè)內(nèi)容具體講述：

染菌的范圍與原因：

染菌范圍：

染菌原因：

微生物的特征：

生產(chǎn)過(guò)程和設(shè)備：

制藥原料和藥物本身的性質(zhì)：

藥品理化性質(zhì)改變：

藥品含微生物毒性代謝物：

藥效的變化：

三微生物限度檢查的意義兒國(guó)內(nèi)外菌檢限度概況

1微生物限度檢查的意義：

保證藥品質(zhì)量

檢測(cè)藥物生產(chǎn)工藝的科學(xué)性

染菌限度檢查

2國(guó)內(nèi)外菌檢限度概況

四、防止被微生物污染的綜合措施

了解污染來(lái)源，杜絕污染機(jī)會(huì)

進(jìn)行微生物限度檢查，以控制質(zhì)量

加入適量防腐劑，保持藥物在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)穩(wěn)定

二、微生物限度檢查法

1、染菌限度標(biāo)準(zhǔn)

2、染菌限度檢察原則

檢查應(yīng)符合規(guī)定的條件

供試品需要保持原有狀態(tài)

接觸用品需要無(wú)菌

防止污染菌種死亡

可直接判斷無(wú)需限度檢查

需做相應(yīng)已知菌對(duì)照試驗(yàn)

控制菌的檢查法

限度檢查步驟

1、供試品的制備

供試品的抽樣量

供試液的制備

2、限度檢查方法

細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定：

霉菌和酵母菌數(shù)的測(cè)定:

控制菌的檢杳：

3、藥檢結(jié)果判斷

三、控制菌的檢查法

1.大腸桿菌：

形態(tài)特征、

初步鑒別和分離培養(yǎng)

生化試驗(yàn)(IMViC)

檢查結(jié)果判斷與報(bào)告

2.沙門(mén)菌：

形態(tài)特征、

初步鑒別和分離培養(yǎng)

生化試驗(yàn)(IMViC)

檢查結(jié)果判斷與報(bào)告

3.銅綠假單胞菌：

形態(tài)特征、

初步鑒別和分離培養(yǎng)

生化試驗(yàn)(IMViC)

檢查結(jié)果判斷與報(bào)告

控制菌的檢查法

4、金黃色葡萄球菌:

形態(tài)特征、

初步鑒別和分離培養(yǎng)

生化試驗(yàn)(IMViC)

檢查結(jié)果判斷與報(bào)告

5、破傷風(fēng)桿菌：

形態(tài)特征、

初步鑒別和分離培養(yǎng)

生化試驗(yàn)(IMViC)

檢查結(jié)果判斷與報(bào)告

6.痢疾桿菌：

形態(tài)特征、

初步鑒別和分離培養(yǎng)

生化試驗(yàn)(IMViC)

檢查結(jié)果判斷與報(bào)告

四、含抑菌成分的生物藥物菌檢方法

1、含抑菌成分的藥物

2、含抑菌成分藥品染菌原因

3、含抑菌成分供試品的確定

4、含抑菌成分供試液制備

(到此課程進(jìn)行85分鐘)

作業(yè)布置及課程預(yù)習(xí)(5分鐘):

作業(yè)：

1.復(fù)習(xí)本章節(jié)內(nèi)容

2.預(yù)習(xí)下一章節(jié)

參考書(shū)：

1.《生物藥物分析》白秀峰、張怡軒中國(guó)醫(yī)藥科技出版社

2.《生物藥物分析》何華化學(xué)工業(yè)出版社

3.《藥物分析》孫瑩呂潔人民衛(wèi)生出版社

授課題目第四章命法在生藥分析中的應(yīng)用授課日期2020年3月30日

授課班級(jí)化工學(xué)院生藥2017本科班授課時(shí)數(shù)4授課方式理論課

【教學(xué)目標(biāo)】

概述

1、理解酶免疫測(cè)定法的概念及基本原理

2、了解酶免疫測(cè)定法的分類(lèi)

酶免疫測(cè)定法的類(lèi)型及操作步驟

1、理解各種酶免疫測(cè)定法的原理

2、熟悉陋免疫測(cè)定法的操作步驟

酶聯(lián)方法

了解戊二醛法的酶聯(lián)原理及方法

的免疫測(cè)定法的技術(shù)要點(diǎn)

1、熟悉酶免疫測(cè)定法的實(shí)驗(yàn)條件的建立

2、了解酶與抗體活性、酶結(jié)合物、抗原最適濃度等測(cè)定

其他酶免疫標(biāo)記技術(shù)

理解液相酶和均相酶免疫標(biāo)記技術(shù)的原理

酶免疫測(cè)定法在生物藥物分析中的應(yīng)用實(shí)例

了解胰島素的測(cè)定

放射免疫分析法簡(jiǎn)介

1、理解放射免疫分析法的概念及基本原理

2、熟悉放射免疫分析法的實(shí)驗(yàn)條件的建立

【重點(diǎn)和難點(diǎn)】

①酶免疫測(cè)定法的原理

②酶免疫測(cè)定法的類(lèi)型及慷作步驟

【教學(xué)內(nèi)容】

1、概述：（1）酶免疫測(cè)定法的分類(lèi)；（2）酶免疫測(cè)定法的原理；

2、的免疫測(cè)定法的類(lèi)型及操作步驟

3、酶聯(lián)方法

4、酹免疫測(cè)定法的技術(shù)要點(diǎn)（1）酶與抗體的活性測(cè)定；（2〉結(jié)合物的定量測(cè)定；（3）晦結(jié)

合物最適濃度的測(cè)定；（4）抗原最適濃度的測(cè)定；（5）底物最適時(shí)間的測(cè)定（6）酶與底物；

5、其他酶免疫標(biāo)記技術(shù)（1）液相酶免疫測(cè)定；（2）均用酶免疫測(cè)定；

6、酶免疫測(cè)定法在生物藥物分析中的應(yīng)用實(shí)例

7、放射免疫分析法簡(jiǎn)介（1）基本原理；（2）測(cè)定方法。

參考書(shū)：

1.《生物藥物分析》白秀峰、張怡軒中國(guó)醫(yī)藥科技出版社

2.《生物藥物分析》何華化學(xué)工業(yè)出版社

3.《藥物分析》孫瑩呂潔人民衛(wèi)生出版社

第一節(jié)酶免疫測(cè)定技術(shù)

教學(xué)方法：多媒體教學(xué)結(jié)合講授

教學(xué)具體過(guò)程（90分鐘）：

復(fù)習(xí)上節(jié)學(xué)習(xí)內(nèi)容:

簡(jiǎn)單介紹酶免疫測(cè)定技術(shù)，由此引出本節(jié)課講授的具體內(nèi)容：能免疫測(cè)定法(到此課程進(jìn)行

20分鐘)。

概述：

類(lèi)型及操作步驟：

酶聯(lián)方法：

技術(shù)要點(diǎn)：

其他醐標(biāo)志免疫技術(shù)：

在生藥分析中的應(yīng)用實(shí)例：

的免疫分析法簡(jiǎn)介：

(結(jié)合多數(shù)幻燈片內(nèi)容播放，相互配合進(jìn)行講解?。需要理解和識(shí)記的內(nèi)容播放內(nèi)容教慢)

酶免疫分析是一種非放射性標(biāo)記免疫分析技術(shù)，以酶標(biāo)記抗原或抗體作為示蹤物，由高活性

的酶催化底物顯色或發(fā)光,依據(jù)免疫反應(yīng)后是否需要分離結(jié)合的酶標(biāo)志物可以分為均相和非

均相。

酶免疫測(cè)定法的原理

+Abo^Ag-Ab

(F)+(B)

Ab

3

Ag—Ab

酶免疫法測(cè)定的類(lèi)型及操作步驟：

1、雙抗體夾心法：

原理：檢測(cè)抗原最常用的方法。

操作步驟：

固相抗體一加待檢標(biāo)本--加酶標(biāo)抗體---加底物顯色

2、雙位點(diǎn)一步法：

原理：

操作步驟：

3、間接法

原理：

二、酶免疫測(cè)定法技術(shù)要點(diǎn)及其他酶免疫測(cè)定技術(shù)

本節(jié)涉及圖片較多，需要緊密結(jié)合PPT進(jìn)行講解。主要按照下面的PPT綱領(lǐng)進(jìn)行圖片

和文本的結(jié)合講解。

酶免疫測(cè)定法技術(shù)要點(diǎn)：

1、試劑

2、酶與抗體的活性測(cè)定

3、結(jié)合物的定量測(cè)定

4、酶結(jié)合物最適濃度的測(cè)定

5、抗原最適濃度的測(cè)定

6、底物的最適時(shí)間測(cè)定

7、酶和底物

酶免疫測(cè)定法在生藥分析中的應(yīng)用實(shí)例

1、蛇毒的測(cè)定

2、胰島素的測(cè)定

3、嗎啡含量測(cè)定

4、甲狀腺激素測(cè)定

5、芍藥行腸內(nèi)代謝產(chǎn)物分析

6、用EMIT測(cè)定血中利多卡因濃度

7、氨節(jié)西林的測(cè)定

8、夾心法測(cè)定IL-2

放射免疫分析法簡(jiǎn)介

基本原理

測(cè)定方法

RIA在生藥中應(yīng)用實(shí)例

其他酶標(biāo)志免疫技術(shù)

1、液相酶免疫測(cè)定：

2、均相酶免疫測(cè)定：

作業(yè)布置及課程預(yù)習(xí)（PPT給出）：

作業(yè)：

1.能免疫測(cè)定技術(shù)的原理

2.酶免疫測(cè)定技術(shù)的應(yīng)用實(shí)例

參考書(shū)：

I.《生物藥物分析》白秀峰、張怡軒中國(guó)醫(yī)藥科技出版社

2.《生物藥物分析》何華化學(xué)工業(yè)出版社

3.《藥物分析》孫瑩呂潔人民衛(wèi)生出版社

第二節(jié)酶法分析

教學(xué)方法：多媒體教學(xué)結(jié)合講授

教學(xué)具體過(guò)程（90分鐘）:

復(fù)習(xí)上節(jié)學(xué)習(xí)內(nèi)容：

復(fù)習(xí)酶免疫分析法的原理和種類(lèi)。出示相關(guān)教學(xué)幻燈片，同時(shí)引出本節(jié)內(nèi)容:

＞酶法分析在生物藥物分析中的應(yīng)用有兩個(gè)方面

/以酶為分析對(duì)象

/以酹作為分析工具貨分析試劑

＞酶法分析具有獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)

/特異性強(qiáng)干擾少

/操作簡(jiǎn)便樣品及試劑用曷少

/測(cè)定快速靈敏度高

?酣法分析的原理

＞酶的定義及性質(zhì)

酶是具有專(zhuān)一性催化功能的蛋白質(zhì)，具有以下特性

/高效

/反應(yīng)中不變化

,并不影響可逆反應(yīng)的平衡，但顯著提高達(dá)到平衡的反應(yīng)速度

＞酶法測(cè)定的原則

/酶活性

/代謝物濃度

/酶底物復(fù)合物

酶一底物復(fù)合物

E+S＜=O＞ES＜=＞E+P

?酶法分析的原理

＞酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)

派1913年Michaelis和Mcntcn提出反應(yīng)速度與底

物濃度關(guān)系的數(shù)學(xué)方程式，即米-曼氏方程

式，簡(jiǎn)稱(chēng)米氏方程式.

V=VmgJS]

Km+[S]

[S]：底物濃度

V:不同[S]時(shí)的反應(yīng)速度

V-ax：最大反應(yīng)速度

Km:米氏常數(shù)

所用的試劑有三種類(lèi)型

單酶法

前偶聯(lián)法

二底物或多底物的酶反應(yīng)

測(cè)定方法兩類(lèi)

酶反應(yīng)速率

固定反應(yīng)時(shí)間

單酶試劑的動(dòng)力學(xué)

測(cè)定方法為在被測(cè)物中加入酶，根據(jù)反應(yīng)的速率或最終產(chǎn)物的濃度求得被測(cè)物的含

量

酶偶聯(lián)測(cè)定法的動(dòng)力學(xué)

,一個(gè)酶反應(yīng)的產(chǎn)物如不能或不易直接測(cè)定，需要加另一個(gè)能，把它轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪划a(chǎn)物

然后進(jìn)行測(cè)定

＞酶法分析的檢測(cè)方法

/紫外-可見(jiàn)分光光度法

/熒光光度法

/氧電極法

/固定化能和酶電極法

?終點(diǎn)測(cè)定法

＞通過(guò)直接測(cè)定轉(zhuǎn)化前后底物的減少量、產(chǎn)物的增加量或輔酶的變化可以定量測(cè)定待

測(cè)物，稱(chēng)為“終點(diǎn)測(cè)定法”

＞應(yīng)用終點(diǎn)測(cè)定法應(yīng)滿(mǎn)足以下條件

/有專(zhuān)一作用于該被測(cè)物的酶和酶制劑

/能確定的反應(yīng)終點(diǎn)

/反應(yīng)中底物減少、產(chǎn)物增加或輔酶的變化等可以借助簡(jiǎn)便的方法測(cè)定

＞單的反應(yīng)測(cè)定法

/利用底物量的減少測(cè)定法

/利用產(chǎn)物量的增加測(cè)定法

/輔酶變化量的測(cè)定

＞偶聯(lián)指示酶反應(yīng)測(cè)定法

/脫氫酶為指示劑

/以脫氧iW以外的廂作指示劑

葡萄糖+ATP，葡萄糖6,酸+ADP：-

葡苜糖6璘酸+NADP葡萄球6碳酸+NADPH.

?反應(yīng)速率法

＞測(cè)定反應(yīng)初速度，其與被測(cè)物質(zhì)的濃度成正比關(guān)系

＞動(dòng)力學(xué)測(cè)定法

?酶循環(huán)放大分析法

＞利用酶的底物特異