2025年冀教版選修3生物下冊月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年冀教版選修3生物下冊月考試卷492考試試卷考試范圍：全部知識點(diǎn)；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是A.目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，一定能穩(wěn)定遺傳B.DNA連接酶的作用是將兩個粘性末端的堿基連接起來C.基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心D.常用的運(yùn)載體有大腸桿菌、噬菌體和動植物病毒等2、第三代試管嬰兒技術(shù)包括胚胎植入前遺傳學(xué)診斷。在胚胎移植前，取胚胎細(xì)胞的遺傳物質(zhì)進(jìn)行分析，篩選出健康胚胎進(jìn)行移植。下列有關(guān)說法錯誤的是（）A.精子和卵子一般要放在培養(yǎng)液中共同培養(yǎng)一段時間才能受精B.胚胎植入前遺傳學(xué)診斷過程需要進(jìn)行羊水檢查C.胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)之一是母體子宮對植入胚胎基本無免疫排斥反應(yīng)D.第三代試管嬰兒技術(shù)的成熟并不意味著大家可以隨意選擇和定制孩子3、關(guān)于細(xì)胞工程技術(shù)在生產(chǎn)實(shí)踐中應(yīng)用的敘述，正確的是（）A.用馬鈴薯幼苗莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，可獲得抗病毒新品種B.愈傷組織細(xì)胞分裂能力強(qiáng)，可作為體細(xì)胞誘變育種材料C.動物細(xì)胞經(jīng)過細(xì)胞培養(yǎng)可以直接獲得動物的組織或器官D.動物胚胎細(xì)胞分化程度低，可優(yōu)先作為核移植受體細(xì)胞4、防止多精入卵的第一道屏障和第二道屏障分別是（）

①透明帶反應(yīng)②卵細(xì)胞膜封閉作用③滋養(yǎng)層封閉④頂體反應(yīng)A.①②B.④①C.④②D.①③5、生態(tài)工程建設(shè)的目的就是遵循自然界物質(zhì)循環(huán)規(guī)律，充分發(fā)揮資源的生產(chǎn)潛力，防治環(huán)境污染，達(dá)到經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益的同步發(fā)展。下列關(guān)于生態(tài)工程的敘述，錯誤的是（）A.生態(tài)工程是一類少消耗、多效益、可持續(xù)的工程體系B.生態(tài)工程要遵循“整體、協(xié)調(diào)、循環(huán)、再生”的原理C.林業(yè)工程建設(shè)主要遵循物質(zhì)循環(huán)再生原理D.生態(tài)工程修復(fù)所遵循的主要原理是整體性原理、協(xié)調(diào)平衡原理等評卷人得分二、多選題(共6題，共12分)6、下列關(guān)于基因工程的敘述，正確的是A.通常用一種限制性核酸內(nèi)切酶處理含目的基因的DNA，用另一種處理質(zhì)粒的DNAB.限制酶和DNA連接酶是構(gòu)建重組質(zhì)粒常用的工具酶C.基因工程的操作步驟首先要提取目的基因D.質(zhì)粒是廣泛存在于細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中的一種顆粒狀的細(xì)胞器7、下列有關(guān)生物實(shí)驗(yàn)的敘述，錯誤的是（）A.培養(yǎng)基經(jīng)干熱滅菌后，待冷卻至50℃左右時才可倒平板；PCR過程中復(fù)性所需溫度與前者相同，若溫度太高，引物與模板DNA單鏈不能牢固結(jié)合B.將供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞后，通過電融合法使兩細(xì)胞融合；在高滲或等滲溶液中也可采用此法促進(jìn)原生質(zhì)體的融合C.外植體脫分化形成愈傷組織，需要一定的激素誘導(dǎo)和營養(yǎng)條件；成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為iPS細(xì)胞則不同，可通過直接將特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞中來實(shí)現(xiàn)D.發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是選育菌種；而基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，該過程需要使用限制酶和DNA連接酶8、表中生物工程實(shí)驗(yàn)選擇的材料與實(shí)驗(yàn)?zāi)康拇钆浜侠淼氖牵ǎ?/p>

。組別實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)材料材料特點(diǎn)A獲得生產(chǎn)人生長激素的轉(zhuǎn)基因動物乳腺細(xì)胞分泌乳汁將相應(yīng)產(chǎn)物排出體外B獲得脫毒苗莖尖分生區(qū)附近病毒極少，甚至不含病毒C獲得植物突變體愈傷組織細(xì)胞分裂能力強(qiáng)，易誘發(fā)突變D胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)能分化形成各種組織和器官A.AB.BC.CD.D9、下列有關(guān)生殖細(xì)胞的發(fā)生和受精過程的敘述正確的是（）A.雄原核形成的同時，卵子完成減數(shù)第二次分裂B.透明帶反應(yīng)是防止多精入卵的第一道屏障C.精子與卵細(xì)胞膜相互融合，精子入卵D.卵子是從動物的初情期開始，經(jīng)過MⅠ和MⅡ兩次連續(xù)分裂形成的10、下列關(guān)于小鼠體外受精及胚胎發(fā)育的敘述，錯誤的是（）A.精子在獲能液中培養(yǎng)的目的是使精子獲取能量B.注射到囊胚腔中的胚胎干細(xì)胞可以參與個體器官的發(fā)育C.小鼠在特定光控周期條件下飼養(yǎng)，注射相關(guān)激素有促進(jìn)超數(shù)排卵的作用D.分割的胚胎細(xì)胞有相同的遺傳物質(zhì)，因此發(fā)育成的個體沒有形態(tài)學(xué)差異11、如圖是我國北方“四位一體”農(nóng)業(yè)生態(tài)工程模式圖；相關(guān)說法正確的是（）

A.日光溫室的增溫效應(yīng)對蔬菜等作物和豬禽的生長都是有利的B.溫室的高溫會抑制微生物的分解作用，不利于沼氣的產(chǎn)生，所以需適當(dāng)降溫C.沼液和沼渣是蔬菜的良好肥料，有助于減少蔬菜的病蟲害D.如果使用可以用燃料加熱的玻璃溫室，則農(nóng)業(yè)的綜合效益會更高評卷人得分三、填空題(共5題，共10分)12、基因治療：基因治療是指用正?；騙______或______患者細(xì)胞中有缺陷的基因，從而達(dá)到治療疾病的目的。13、根據(jù)課本知識填空：

（1）神經(jīng)元的軸突末梢經(jīng)過多次分支；最后每個小枝末端膨大，呈杯狀或球狀，叫做________。

（2）抗體可以與病原體結(jié)合；從而抑制病原體的繁殖或___________________________。

（3）要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA；可以用____________________________做探針。

（4）所謂人工種子就是以植物組織培養(yǎng)得到的________________________（寫出2個即可）等為材料；經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子。

（5）胰島素能促進(jìn)組織細(xì)胞加速_______________葡萄糖。14、下圖表示哺乳動物精子和卵細(xì)胞發(fā)生和成熟的示意圖。請據(jù)圖回答下列問題：

（1）③過程中精子頭部的頂體是由__________發(fā)育來的；④過程在__________內(nèi)完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放頂體酶，溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)和透明帶。為了阻止多精入卵，會發(fā)生__________反應(yīng)和__________反應(yīng)。

（3）精子的發(fā)生開始的時期是__________；雌性動物卵泡的形成的時期是__________。

（4）初級卵母細(xì)胞進(jìn)行Ⅰ過程是在__________時期完成的，Ⅱ過程是在__________過程中完成的。15、請寫出基因工程的概念：_________________。請寫出胚胎移植的概念：_____________________。請分別寫出植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理_________。16、自然條件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一頭奶牛一年只能繁殖一頭牛犢。通過胚胎工程技術(shù)可以快速繁育優(yōu)良個體，其主要步驟如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

（1）從供體奶牛獲得的精子，需對其進(jìn)行___________處理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母細(xì)胞，為使其超數(shù)排卵常使用____________激素處理；采集到卵母細(xì)胞后，在體外將其培養(yǎng)到___________期；使其成熟。

（3）步驟甲、乙分別指___________、___________。為篩選出具有優(yōu)良性狀的母牛，步驟乙之前應(yīng)鑒定胚胎中與___________有關(guān)的基因。

（4）進(jìn)行步驟乙時，受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生___________，這為胚胎在代孕母牛體內(nèi)的存活提供了可能。評卷人得分四、判斷題(共5題，共25分)17、一般情況下一個卵細(xì)胞只能由一個精子發(fā)生融合形成受精卵()A.正確B.錯誤18、精子入卵后形成雄原核；同時卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核()A.正確B.錯誤19、受精包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段，在自然狀態(tài)下，哺乳動物的受精在子宮內(nèi)完成。（選擇性必修3P56）()A.正確B.錯誤20、下圖表示哺乳動物發(fā)育過程的幾個階段；請判斷下列題的敘述是否正確？

（_____）（1）從A到C的過程中有機(jī)物的含量減少。

（_____）（2）A；B時期胚胎中的細(xì)胞都是全能細(xì)胞。

（_____）（3）胚胎移植必須使用處于B或C時期的胚胎。

（_____）（4）圖示過程細(xì)胞通過有絲分裂增殖，遺傳物質(zhì)可能會發(fā)生改變。A.正確B.錯誤21、在生態(tài)工程建設(shè)中，只能遵循“先污染、破壞、再治理”的發(fā)展思路______A.正確B.錯誤評卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共28分)22、閱讀下面科普短文；請回答問題。

2017年11月27日,世界上首例體細(xì)胞克隆猴在我國誕生，這是科學(xué)家首次成功地克隆出非人靈長類動物，這一研究成果的確意義非凡。這兩只克隆猴名字叫“中中”和“華華”，寓“中華”之意。它們的基因都來自同一個流產(chǎn)的雌性獼猴胎兒。自1996年第一只體細(xì)胞克隆羊“多莉”誕生以來，22年間，各國科學(xué)家競相研究哺乳動物的體細(xì)胞克隆，并且在牛、鼠、貓、狗等多種哺乳動物上獲得成功，但一直沒有跨越靈長類動物這道屏障。實(shí)現(xiàn)克隆猴主要有三道難關(guān)需要攻克。一是卵母細(xì)胞的核遺傳物質(zhì)區(qū)域不易識別，去掉猴卵母細(xì)胞核遺傳物質(zhì)的難度很大，而要培育體細(xì)胞克隆猴，必須先把受體卵母細(xì)胞的核遺傳物質(zhì)“摘除”，才能讓它容納體細(xì)胞細(xì)胞核這個“外來戶”。我國科學(xué)工作者借助顯微操作設(shè)備，反復(fù)練習(xí)，成功完成“去核”工作為后續(xù)的克隆工作奠定了基礎(chǔ)。二是卵母細(xì)胞“喚醒”時機(jī)難把握?？寺∵^程中，體細(xì)胞的細(xì)胞核進(jìn)入卵母細(xì)胞時，需先“喚醒”卵母細(xì)胞，然后才啟動一系列發(fā)育“程序”。因此，“喚醒”的時機(jī)要求非常精準(zhǔn)。但是使用傳統(tǒng)方式，猴的卵母細(xì)胞很容易被提前“喚醒”，往往導(dǎo)致克隆“程序”無法正常啟動。三是體細(xì)胞克隆胚胎的發(fā)育成功率低。被轉(zhuǎn)移到去核卵母細(xì)胞里的細(xì)胞核，需要與去核卵母細(xì)胞緊密結(jié)合，融為一體，并發(fā)揮其正常的功能，因此需要科學(xué)家采取多種手段處理，否則，絕大多數(shù)克隆胚胎都難以正常發(fā)育。我國科學(xué)家攻克了這些難關(guān)，將克隆技術(shù)的應(yīng)用推向了新的高度?？寺『锏恼Q生，標(biāo)志著我國克隆技術(shù)走在了世界的最前列!（1）下列關(guān)于“中中”和“華華”的說法，錯誤的是___________

A．它們的性別為一雌一雄。

B．它們的基因相同。

C．可通過克隆猴做對照實(shí)驗(yàn)。

D．它們是通過無性生殖方式誕生的。

（2）此實(shí)例說明，細(xì)胞核控制著細(xì)胞的代謝和_____，這是因?yàn)榧?xì)胞核中的DNA攜帶有指導(dǎo)發(fā)育的______。

（3）與羊相比,猴與人的親緣關(guān)系___________；因此,克隆猴的成功更有利于人類利用克隆技術(shù)治療疾病。

（4）有人說：“克隆猴成功了，克隆人離我們也就不遠(yuǎn)了?！笔澜缟虾芏鄧叶冀箍寺∪说难芯?，請根據(jù)自己所學(xué)知識解釋禁止的原因。___________。23、R-7是家蠶體內(nèi)的一種小分子非編碼RNA；可與某些mRNA尾端的一段非編碼序列(3′-UTR)結(jié)合，進(jìn)而影響基因的表達(dá)。為研究R-7是否影響家蠶基因B(調(diào)控家蠶眼睛發(fā)育)的表達(dá)，科研人員將基因B中對應(yīng)3′-UTR的DNA片段與熒光素酶基因(R-7不影響熒光素酶基因的表達(dá))重組后導(dǎo)入家蠶胚胎細(xì)胞觀察其表達(dá)結(jié)果。請回答下列問題：

（1）利用________技術(shù)擴(kuò)增基因B中對應(yīng)3′-UTR的DNA片段，應(yīng)先依據(jù)___________合成引物。若對一個含基因B的DNA擴(kuò)增n代，則共需消耗________對引物。

（2）圖甲中對應(yīng)3′-UTR的DNA片段應(yīng)插入到位點(diǎn)__________，原因是______。重組載體中的熒光素酶基因在基因工程中作為________。

（3）科研人員分別從實(shí)驗(yàn)組和對照組細(xì)胞中提取蛋白質(zhì)；經(jīng)處理檢測后獲得相對熒光值(在適宜條件下，熒光素酶可催化熒光素發(fā)生氧化反應(yīng)并發(fā)出熒光)，其結(jié)果如圖乙所示。

①實(shí)驗(yàn)組為將重組載體導(dǎo)入含R-7的家蠶胚胎細(xì)胞中，對照組1的處理為將含有熒光素酶基因的表達(dá)載體(不含對應(yīng)3′-UTR的DNA片段)導(dǎo)入含R-7的家蠶胚胎細(xì)胞中，則對照組2的處理應(yīng)為_______________________________________________________。

②依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可推知，R-7影響基因B的表達(dá)，即通過遵循________________原則，R-7與基因B所轉(zhuǎn)錄的mRNA的3′-UTR結(jié)合，進(jìn)而________(填“促進(jìn)”或“抑制”)基因B的表達(dá)。24、Period2（Per2）基因是一種抑癌基因，干擾Per2基因表達(dá)有利于腫瘤細(xì)胞存活和促進(jìn)腫瘤發(fā)生。p53腫瘤抑制因子是一個關(guān)鍵的轉(zhuǎn)錄因子，調(diào)節(jié)DNA修復(fù)、細(xì)胞周期、衰老凋亡等相關(guān)細(xì)胞途徑，是抵抗癌癥發(fā)病和進(jìn)展的重要防御因子，并且是通過與癌蛋白MDM2負(fù)調(diào)控作用調(diào)節(jié)其功能。為探究裸鼠體內(nèi)下調(diào)Per基因?qū)θ四z質(zhì)瘤細(xì)胞U343細(xì)胞株中P53的可能調(diào)控機(jī)制；科研人員做了如下實(shí)驗(yàn)：

Ⅰ．裸鼠膠質(zhì)瘤模型構(gòu)建。

（1）培養(yǎng)U343細(xì)胞常在培養(yǎng)基中加入____________，一段時間后用________________消化；制成細(xì)胞懸液。

（2）人工合成低表達(dá)Per2基因，以某種病毒作為運(yùn)載體，構(gòu)建重組DNA，導(dǎo)入到培養(yǎng)好的U343膠質(zhì)瘤細(xì)胞中（實(shí)驗(yàn)組），同時還需要設(shè)置2組對照組，分別為：________________（對照組1）；空白對照組（U343）（對照組2）。

（3）每組等量同齡健康裸鼠；皮下相同部位分別對應(yīng)注入上述組別的U343細(xì)胞，適宜條件下培養(yǎng)，定期記錄瘤體體積，記錄到成瘤（體積達(dá)1000mm3）的時間，處死小鼠，取出瘤體，提RNA和蛋白質(zhì)。

II．實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

（4）實(shí)驗(yàn)組小鼠成瘤時間短于兩對照組；且相同時間內(nèi)實(shí)驗(yàn)組瘤體體積大于兩對照組。

（5）檢測各組U343膠質(zhì)瘤細(xì)胞中Per2蛋白含量（各組mRNA含量關(guān)系同Per2蛋白含量關(guān)系）；如圖1所示。

注：圖中從左向右依次為實(shí)驗(yàn)組；對照組1、對照組2。

由圖1結(jié)果可知，細(xì)胞中GAPDH蛋白表達(dá)量相對穩(wěn)定，在實(shí)驗(yàn)中可作為參照，作用是____________________________。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明實(shí)驗(yàn)組Per2基因低表達(dá)體系構(gòu)建成功。

（6）已知當(dāng)DNA損傷后；DNA檢測點(diǎn)基因ATM被激活，隨后誘發(fā)p53激活，而c-myc是原癌基因，p53可與c-myc的啟動子相結(jié)合發(fā)生乙?；磻?yīng)，已知c-myc的轉(zhuǎn)錄，相關(guān)基因表達(dá)后蛋白檢測如圖2（各組mRNA含量關(guān)系同蛋白含量關(guān)系）

注：圖中從左向右依次為實(shí)驗(yàn)組；對照組1、對照組2。

由圖2可推測，Per2基因的作用為：____________________________________。

III．下調(diào)Per基因?qū)θ四z質(zhì)瘤細(xì)胞U343細(xì)胞株中P53的可能調(diào)控機(jī)制。

（7）綜上，Per2基因低表達(dá)可明顯促進(jìn)膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展，請你提出一種可能的調(diào)控機(jī)制：________________________________________________________，導(dǎo)致膠質(zhì)瘤的發(fā)生和發(fā)展。25、回答下列有關(guān)胚胎工程的相關(guān)問題；

（1）1890年；英國劍橋大學(xué)的生物學(xué)家將純種的安哥拉兔的兩個4細(xì)胞胚胎移入一只純種的比利時兔的輸卵管內(nèi)，成功地得到兩只純種的安哥拉子兔。這個實(shí)驗(yàn)首次證實(shí)了_____________________的可能性。

（2）哺乳動物卵子發(fā)生過程中；減數(shù)第二次分裂是在____________過程中完成的，哺乳動物卵子和精子在發(fā)生上的重要區(qū)別是_______________。在實(shí)施體外受精時，獲能的精子與培養(yǎng)成熟的卵子，通常都可以在_________中完成受精作用，在體外受精后，應(yīng)將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，以檢查_____________。

（3）胚胎移植需收集胚胎；收集胚胎時沖卵的生理學(xué)基礎(chǔ)是___________。胚胎分割時用分割針取樣的滋養(yǎng)層的用途是___________。

（4）ES細(xì)胞是研究細(xì)胞分化的理想材料，ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上，或在_______的培養(yǎng)液中，能夠維持不分化的狀態(tài)。評卷人得分六、綜合題(共4題，共24分)26、突尼斯軟籽石榴是一種熱門水果；深受大家喜愛，但其抗寒能力差，這成為限制該種石榴栽培的重要因素。科學(xué)家們利用基因工程對其進(jìn)行定向改造，以得到抗寒性強(qiáng)的優(yōu)良品種。下圖表示構(gòu)建基因表達(dá)載體的方法，圖中標(biāo)注的是限制酶的酶切位點(diǎn)，請回答下列問題：

（1）在切割目的基因時選擇的兩種限制酶最好為____________________；選擇兩種限制酶的優(yōu)勢是可避免________________。

（2）可通過________技術(shù)對獲得的抗寒基因進(jìn)行體外擴(kuò)增；該過程使DNA解旋的方法與細(xì)胞內(nèi)復(fù)制時的差異是________________，體外擴(kuò)增時使用的酶具有的顯著特點(diǎn)是__________________。

（3）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入經(jīng)________（過程）培養(yǎng)成的軟籽石榴的愈傷組織中常用________法。27、骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏X酶；在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA，無法生長；而B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生X酶。某科研小組制備單克隆抗體的步驟如下：

①給小鼠注射特定抗原；一段時間后獲取B淋巴細(xì)胞；

②將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞混合后；誘導(dǎo)細(xì)胞融合；

③將融合后的細(xì)胞在HAT篩選培養(yǎng)液中培養(yǎng)；獲得雜交瘤細(xì)胞；

④進(jìn)行第二次篩選；

⑤體外培養(yǎng)；獲得單克隆抗體。

回答下列問題：

（1）單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)是____________________________。給小鼠注射特定抗原的目的是使小鼠產(chǎn)生能分泌______________的B淋巴細(xì)胞。

（2）上述誘導(dǎo)細(xì)胞融合時；與誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合不同的方法是使用______________處理。細(xì)胞融合依據(jù)的原理是細(xì)胞膜具有______________。

（3）利用HAT培養(yǎng)液篩選雜交瘤細(xì)胞的原理是：①骨髓瘤細(xì)胞之間兩兩融合后；由于_____________而無法生長；②B淋巴細(xì)胞之間兩兩融合后，由于_____________而無法生長；③雜交瘤細(xì)胞由于_________________，因而能生長。

（4）第二次篩選要獲得的是_____________的細(xì)胞。28、乙烯具有促進(jìn)果實(shí)成熟的作用；ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄細(xì)胞合成乙烯的兩個關(guān)鍵酶。利用反義DNA技術(shù)（原理如圖1），可以抑制這兩個基因的表達(dá)，從而使番茄具有耐儲存；宜運(yùn)輸?shù)膬?yōu)點(diǎn)，下圖2為融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反義表達(dá)載體的結(jié)構(gòu)示意圖。

（1）圖2中的2A11為特異性啟動子，則該2A11應(yīng)在番茄的___（器官）中啟動基因的轉(zhuǎn)錄。

（2）從番茄成熟果實(shí)中提取___為模板；利用反轉(zhuǎn)錄法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，以進(jìn)行拼接構(gòu)成融合基因。

（3）合成出的ACC氧化酶基因兩端分別含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位點(diǎn)，ACC合成酶基因兩端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位點(diǎn)，用限制酶___對上述兩個基因進(jìn)行酶切，再串聯(lián)成融合基因，相應(yīng)的Ti質(zhì)粒應(yīng)用限制酶___進(jìn)行切割；確保融合基因能夠插入載體中。

（4）為了實(shí)現(xiàn)圖1中反義基因的效果，應(yīng)將融合基因___（正向/反向）插入在啟動子2A11的下游即可構(gòu)成反義融合基因。將圖中表達(dá)載體與農(nóng)桿菌菌液混合后，接種在含有___的培養(yǎng)基中；可篩選出含有反義融合基因的農(nóng)桿菌，再利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得轉(zhuǎn)基因番茄。

（5）在檢測番茄細(xì)胞中是否存在反義融合基因時，___（填能/不能)用放射性物質(zhì)標(biāo)記的ACC氧化（合成）酶基因片段做探針進(jìn)行檢測，理由是___。29、寧夏渝河流域一度因生活污水；工業(yè)廢水隨意排入河流；導(dǎo)致水質(zhì)惡化、生態(tài)環(huán)境遭到破壞，而渝河流域生態(tài)系統(tǒng)功能失調(diào)成為制約當(dāng)?shù)剞r(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的重要因素。通過綜合養(yǎng)殖、發(fā)展生態(tài)農(nóng)業(yè)等途徑對渝河流域的生態(tài)進(jìn)行治理和恢復(fù)，渝河流域生態(tài)達(dá)到空前的良好發(fā)展勢態(tài)，栽種的楊、柳、檸條、沙棘、檉柳等植物可以防止人畜進(jìn)入渝河流域，保護(hù)環(huán)境，動物的種類大量提升，渝河流域的小氣候達(dá)到了人們宜居環(huán)境狀態(tài)，生態(tài)農(nóng)業(yè)的效益逐年提高，進(jìn)一步印證了“綠水青山，就是金山銀山”。回答下列問題：

（1）渝河流域生態(tài)治理前，流經(jīng)該生態(tài)系統(tǒng)的總能量包括________，能量通過綠色植物進(jìn)入生態(tài)系統(tǒng)時，伴隨暗反應(yīng)中能量固定而發(fā)生的物質(zhì)轉(zhuǎn)變過程是________，河流中草食性魚類糞便食物殘渣中的能量屬于第________營養(yǎng)級同化的能量。

（2）渝河流域生態(tài)治理過程中，改善環(huán)境的同時提升了生態(tài)農(nóng)業(yè)的效益，這體現(xiàn)了________的生態(tài)原理。移種的沙棘、檉柳可以防止人畜的進(jìn)入，體現(xiàn)了生物多樣性具有________價值，判斷的理由是_________________________。

（3）渝河流域的生態(tài)治理和恢復(fù)過程中，進(jìn)行綜合養(yǎng)殖不僅提高了經(jīng)濟(jì)效益，還能夠有效降低流行病害的發(fā)生率。試從生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性角度分析流行病害的發(fā)生率有效降低的原因________________。

（4）生態(tài)治理和恢復(fù)過程中，栽種的楊、柳、檸條、沙棘、檉柳等植物部是當(dāng)?shù)氐脑形锓N，原因是_______________。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、C【分析】目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后,必須整合在受體細(xì)胞的染色體DNA上才能穩(wěn)定遺傳,A錯誤。不同的DNA連接酶作用不同,如T4DNA連接酶既能連接黏性末端也能連接平末端,B錯誤。大腸桿菌常作為基因工程的受體細(xì)胞,而非載體,D錯誤。2、B【分析】【分析】

1；胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體；有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體。用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查。

2；胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)：

①動物發(fā)情排卵后；同種動物的供；受體生殖器官的生理變化是相同的，這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環(huán)境。

②早期胚胎在一定時間內(nèi)處于游離狀態(tài)；這就為胚胎的收集提供了可能。

③受體對移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；這為胚胎在受體的存活提供了可能。

④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系；但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。

【詳解】

A；精子和卵子一般要放在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤汗餐囵B(yǎng)一段時間才能受精；A正確；

B；胚胎植入前遺傳學(xué)診斷過程不需要進(jìn)行羊膜腔穿刺取羊水細(xì)胞；因?yàn)榇藭r羊水中不含有胚胎細(xì)胞，B錯誤；

C；母體子宮對植入胚胎基本無免疫排斥反應(yīng)；保證胚胎正常發(fā)育，C正確；

D；試管嬰兒技術(shù)的成熟并不意味著大家可以隨意選擇和定制孩子；D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】

本題考查胚胎移植的相關(guān)知識，要求考生識記胚胎移植的基本程序，掌握胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。3、B【分析】【分析】

1；作物脫毒材料：分生區(qū)（如莖尖）細(xì)胞；植物脫毒方法：進(jìn)行組織培養(yǎng)；結(jié)果：形成脫毒苗。

2；突變體的利用（1）原因：在植物組織培養(yǎng)的過程中；由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到培養(yǎng)條件和外界壓力的影響而產(chǎn)生突變。（2）利用：篩選出對人們有利的突變體培育成新品種。

3；若想利用此技術(shù)得到細(xì)胞產(chǎn)物；只需培養(yǎng)到愈傷組織即可．若想制造人工種子，需要培養(yǎng)到胚狀體。（在胚狀體外包一層人工種皮即可）

【詳解】

A；一定大小的草莓莖尖的病毒極少；甚至無病毒，進(jìn)行組織培養(yǎng)，可獲得無病毒新品種，A錯誤；

B；愈傷組織細(xì)胞分裂能力強(qiáng)；容易受到培養(yǎng)條件和外界壓力的影響而產(chǎn)生突變，可作為體細(xì)胞誘變育種材料，B正確；

C；動物細(xì)胞經(jīng)過細(xì)胞培養(yǎng)可以直接獲得動物細(xì)胞或者細(xì)胞產(chǎn)物；不能直接獲得動物的組織或器官，C錯誤；

D；動物胚胎細(xì)胞分化程度低；可優(yōu)先作為核移植供體細(xì)胞，而不是受體細(xì)胞，D錯誤。

故選B。4、A【分析】【分析】

受精過程為：頂體反應(yīng)→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應(yīng)）→卵細(xì)胞膜反應(yīng)（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始。

【詳解】

防止多精入卵的第一道屏障是透明帶反應(yīng)；即①；防止多精入卵的第二道屏障是卵黃膜封閉作用，即②，A正確。

故選A。5、C【分析】【分析】

1；生態(tài)工程是指人類應(yīng)用生態(tài)學(xué)和系統(tǒng)學(xué)等學(xué)科的基本原理和方法；通過系統(tǒng)設(shè)計、調(diào)控和技術(shù)組裝，對已被破壞的生態(tài)環(huán)境進(jìn)行修復(fù)、重建，對造成環(huán)境污染和破壞的傳統(tǒng)生產(chǎn)方式進(jìn)行改善，并提高生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)力，從而促進(jìn)人類社會和自然環(huán)境的和諧發(fā)展。

2；生態(tài)工程依據(jù)的基本原理：（1）物質(zhì)循環(huán)再生原理：物質(zhì)能在生態(tài)系統(tǒng)中循環(huán)往復(fù)；分層分級利用；（2）物種多樣性原理：物種繁多復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)具有較高的抵抗力穩(wěn)定性；（3）協(xié)調(diào)與平衡原理：生態(tài)系統(tǒng)的生物數(shù)量不能超過環(huán)境承載力（環(huán)境容納量）的限度；（4）整體性原理：生態(tài)系統(tǒng)建設(shè)要考慮自然、經(jīng)濟(jì)、社會的整體影響；（5）系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理：系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能原理：要通過改善和優(yōu)化系統(tǒng)結(jié)構(gòu)改善功能；系統(tǒng)整體性原理：系統(tǒng)各組分間要有適當(dāng)?shù)谋壤P(guān)系，使得能量、物質(zhì)、信息等的轉(zhuǎn)換和流通順利完成，并實(shí)現(xiàn)總體功能大于各部分之和的效果，即“1+1＞2”。

【詳解】

A；與傳統(tǒng)工程相比；生態(tài)工程體系的特點(diǎn)是少消耗、多效益、可持續(xù)，A正確；

B；生態(tài)工程應(yīng)遵循的原理有物質(zhì)循環(huán)再生原理、物種多樣性原理、協(xié)調(diào)與平衡原理、整體性原理、系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理；B正確；

C；在進(jìn)行林業(yè)工程建設(shè)時；一方面要號召農(nóng)民種樹，另一方面要考慮貧困地區(qū)農(nóng)民的生活問題，如糧食、燒柴以及收入等問題，說明生態(tài)系統(tǒng)建設(shè)要考慮自然、經(jīng)濟(jì)、社會的整體影響?？梢?，以上做法依據(jù)的生態(tài)工程原理是整體性原理，C錯誤；

D；生態(tài)恢復(fù)工程需要選擇適應(yīng)當(dāng)?shù)丨h(huán)境的生物來增加生物多樣性；還需要考慮增加的生物對當(dāng)?shù)丨h(huán)境和人們生活的影響，故生態(tài)恢復(fù)工程所遵循的主要原理是整體性原理、協(xié)調(diào)與平衡原理，D正確。

故選C。二、多選題(共6題，共12分)6、B:C【分析】【詳解】

在基因工程，通常使用同一種限制酶切割目的基因和運(yùn)載體，使它們產(chǎn)生相同的黏性末端，以便形成重組質(zhì)粒，A錯誤；限制酶和DNA連接酶是構(gòu)建重組質(zhì)粒常用的工具酶，B正確；基因工程的操作的第一個步驟是提取目的基因，C正確；質(zhì)粒不是細(xì)胞器，是廣泛存在于細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中的環(huán)狀DNA分子，D錯誤。7、A:B:D【分析】【分析】

動物體細(xì)胞核移植過程：動物核移植是指將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎。在體外將采集到的卵母細(xì)胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才成熟，可以通過顯微操作技術(shù)去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核和第一極體，使用電脈沖等方法可以激活重組細(xì)胞使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育。

【詳解】

A；配制好的培養(yǎng)基需要通過濕熱滅菌（高壓蒸汽滅菌）；A錯誤；

B；獲取原生質(zhì)體和原生質(zhì)體的融合都需要在等滲溶液中操作；等滲溶液可維持去除細(xì)胞壁后的原生質(zhì)體的正常形態(tài)，B錯誤；

C；植物組織培養(yǎng)技術(shù)中脫分化需要離體。激素、無菌等條件；iPS細(xì)胞的形成可借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞中、直接將特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞中或者用小分子化合物等來誘導(dǎo)，C正確；

D；基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建；需要使用限制酶和DNA連接酶，但發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)不是選育菌種，而是發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵，D錯誤。

故選ABD。8、B:C:D【分析】【分析】

囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞屬于胚胎干細(xì)胞；具有很強(qiáng)的分裂能力，可以用胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)；采用基因工程技術(shù)培養(yǎng)乳腺生物反應(yīng)器時，受體細(xì)胞是受精卵，因?yàn)槭芫讶苄宰罡摺?/p>

【詳解】

A；采用基因工程技術(shù)培養(yǎng)乳腺生物反應(yīng)器時；受體細(xì)胞是受精卵而不是乳腺細(xì)胞，因?yàn)槭芫讶苄宰罡?，A錯誤；

B；植物分生區(qū)附近（如莖尖）含病毒極少；甚至不舍病毒，因此可采用莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒苗，B正確；

C；愈傷組織分裂能力強(qiáng)；易發(fā)生突變，容易獲得突變體，C正確；

D；囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞具有很強(qiáng)的分裂能力；可以用于胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)，進(jìn)而誘導(dǎo)培養(yǎng)成各種組織和器官，D正確。

故選BCD。9、A:B:C【分析】【分析】

在受精作用過程中；精子頭部的頂體首先釋放頂體酶，發(fā)生頂體反應(yīng)；然后精子穿越放射冠和透明帶，此時透明帶發(fā)生透明帶反應(yīng)，這是防止多精入卵的第一道屏障；接著精子進(jìn)入卵黃膜，此時會發(fā)生卵黃膜封閉作用；此時卵細(xì)胞才真正完成減數(shù)分裂，并釋放第二極體；精子的細(xì)胞核和卵細(xì)胞的細(xì)胞核分別形成雄原核和雌原核，即雌；雄原核的形成；最后核膜消失，雌、雄原核融合，標(biāo)志著受精作用的完成。

【詳解】

A；雄原核形成與卵子完成減數(shù)第二次分裂是同時進(jìn)行的；A正確；

B；精子觸及卵黃膜的瞬間；發(fā)生透明帶反應(yīng)，阻止其他精子進(jìn)入，是防止多精入卵受精的第一道屏障，B正確；

C；精子的細(xì)胞膜與卵黃膜融合后；精子入卵，C正確；

D；卵子的發(fā)生開始于胎兒期性別分化之后；減數(shù)第一次分裂和減數(shù)第二次分裂是不連續(xù)的，D錯誤。

故選ABC。

【點(diǎn)睛】10、A:D【分析】【分析】

1；胚胎分割的特點(diǎn)：來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)；胚胎分割可以看做動物無性繁殖或克隆的方法之一。

2；胚胎干細(xì)胞的特點(diǎn)：具有胚胎細(xì)胞的特性；在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造。

【詳解】

A；精子在獲能液中培養(yǎng)的目的是使精子獲能；不是獲取能量，A錯誤；

B；注射到囊胚腔中的胚胎干細(xì)胞可以分化形成各種組織；因此可以參與個體器官的發(fā)育，B正確；

C；小鼠在特定光控周期條件下飼養(yǎng)；注射相關(guān)激素（促性腺激素）有促進(jìn)超數(shù)排卵的作用，C正確；

D；分割的胚胎細(xì)胞有相同的遺傳物質(zhì)；由于生物體的性狀還受環(huán)境因素的影響，因此發(fā)育成的個體可能會存在形態(tài)學(xué)差異，D錯誤。

故選AD。

【點(diǎn)睛】11、A:C【分析】【分析】

“四位一體”模式把沼氣池、豬禽舍、廁所及日光溫室有機(jī)結(jié)合在一起。人畜糞便及時進(jìn)入沼氣池，解決了沼氣發(fā)酵原料，而且凈化了環(huán)境；沼氣池為棚菜生產(chǎn)提供了豐富的有機(jī)肥料，蔬菜日光溫室和與之相連的暖畜禽舍間，又形成了CO2和O2的互補(bǔ)；日光溫室的適宜溫度為豬禽創(chuàng)造了良好的生長條件；保證沼氣池正常運(yùn)轉(zhuǎn)，常年產(chǎn)氣。從而在有限的土地上，科學(xué)；高效地利用時間、空間、小氣候、人力、物力等資源，實(shí)現(xiàn)了能源生態(tài)系統(tǒng)中物流和能流的良性循環(huán)，達(dá)到了能源、生態(tài)、經(jīng)濟(jì)與社會效益的統(tǒng)一。

【詳解】

A；日光溫室的增溫效應(yīng)促進(jìn)分解者的活動；為植物提供了礦質(zhì)元素，同時為豬禽創(chuàng)造了良好的生長條件，故日光溫室的增溫效應(yīng)對蔬菜等作物和豬禽的生長都是有利的，A正確；

B；溫室的適當(dāng)?shù)母邷貢龠M(jìn)微生物的分解作用；利于沼氣的產(chǎn)生，B錯誤；

C；沼液和沼渣是蔬菜的良好肥料；也因?yàn)槠浣?jīng)過發(fā)酵，有害微生物較少，有助于減少蔬菜的病蟲害，C正確；

D；如果使用可以用燃料加熱的玻璃溫室；則生產(chǎn)成本提高，不能使農(nóng)業(yè)的綜合效益更高，D錯誤。

故選AC。三、填空題(共5題，共10分)12、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】取代修補(bǔ)13、略

【分析】【分析】

1；神經(jīng)元由細(xì)胞體和突起兩部分組成；突起又分為樹突和軸突，樹突短而多，軸突長而少。神經(jīng)元的軸突末梢經(jīng)過多次分支，最后每個小枝末端膨大，呈杯狀或球狀，叫做突觸小體。

2；目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

3；人工種子就是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料；經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子，在適宜條件下同樣能夠萌發(fā)長成幼苗。

【詳解】

（1）神經(jīng)元由細(xì)胞體和突起兩部分組成；突起又分為樹突和軸突，樹突短而多，軸突長而少；軸突末端的多次分支后，每個小枝末端膨大的部分稱為突觸小體。

（2）抗體可以與病原體結(jié)合；從而抑制病原體的繁殖或?qū)θ梭w細(xì)胞的黏附。

（3）檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA可采用分子雜交技術(shù)。

（4）人工種子就是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體；不定芽、頂芽、腋芽為材料；經(jīng)過人工包膜包裝得到的種子，可以在適宜條件下同樣能夠萌發(fā)長成幼苗．植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)就是克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，或者是打破了生殖隔離。

（5）胰島素能促進(jìn)組織細(xì)胞加速攝?。焕煤蛢Υ嫫咸烟?；從而使血糖水平降低。

【點(diǎn)睛】

本題考查教材基礎(chǔ)知識，旨在考查考生的理解、記憶能力，要求考生熟記關(guān)鍵語句，并能運(yùn)用專業(yè)術(shù)語準(zhǔn)確作答?！窘馕觥客挥|小體對人體細(xì)胞的黏附放射性同位素）標(biāo)記的目的基因胚狀體、不定芽、腋芽、頂芽攝取、利用和儲存14、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：①表示染色體復(fù)制；②是減數(shù)分裂，③是精細(xì)胞變形為精子過程，④是受精作用；

2；哺乳動物精子和卵子發(fā)生的不同點(diǎn)：（1）精子的減數(shù)兩次分裂是連續(xù)的；場所唯一（MⅠ和MⅡ的場所都是睪丸）；而卵子的兩次分裂是不連續(xù)的，場所不唯一，（MⅠ場所在卵巢，MⅡ場所在輸卵管中）；（2）精子和卵子發(fā)生的時間不同：精子的發(fā)生是從初情期一直到生殖機(jī)能衰退；多數(shù)哺乳動物卵子的形成和在卵巢內(nèi)的貯備是胎兒出生前完成的；MⅠ是在雌性動物排卵前后完成的，MⅡ是在受精過程中完成的。

【詳解】

（1）精子變形③過程中精子頭部的頂體是由高爾基體發(fā)育來的；④過程是受精過程，在輸卵管內(nèi)完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放頂體酶，溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)和透明帶，透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)是阻止多精入卵的兩道防線。

（3）雄性動物精子產(chǎn)生的時期是初情期；雌性動物卵泡細(xì)胞的形成是在胚胎期性別分化以后完成的，這是精子和卵子在發(fā)生上的重要區(qū)別。

（4）初級卵母細(xì)胞進(jìn)行減數(shù)第一次分裂是在排卵前后時期完成的；減數(shù)第二次分裂是在受精作用過程中完成的。

【點(diǎn)睛】

本題考查卵細(xì)胞的形成過程和受精作用等相關(guān)知識，意在考查學(xué)生識記相關(guān)細(xì)節(jié)和解決問題的能力?！窘馕觥扛郀柣w輸卵管透明帶反應(yīng)卵細(xì)胞膜反應(yīng)初情期胚胎期性別分化以后排卵前后受精作用15、略

【分析】【分析】

動物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動物機(jī)體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和增殖。植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)，指從植物體分離出符合需要的組織；器官或細(xì)胞，原生質(zhì)體等，通過無菌操作，在無菌條件下接種在含有各種營養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。

【詳解】

1；基因工程又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)；是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預(yù)先設(shè)計的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品的遺傳技術(shù)。

2；胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)。

3；動物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動物機(jī)體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和增殖，其原理是細(xì)胞增殖。

4；植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)；指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細(xì)胞，原生質(zhì)體等，通過無菌操作，在無菌條件下接種在含有各種營養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程概念、胚胎移植、動植物細(xì)胞培養(yǎng)等相關(guān)知識，意在考察考生對知識點(diǎn)的理解掌握程度?！窘馕觥竣?又叫基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)②.又稱受精卵移植，是指將雌性動物體內(nèi)的的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀況相同的其他雌性動物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)③.植物細(xì)胞全能性、細(xì)胞增殖16、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)，其中提供胚胎的個體稱為“供體”，接受胚胎的個體稱為“受體”。(供體為優(yōu)良品種，作為受體的雌性動物應(yīng)為常見或存量大的品種)，如轉(zhuǎn)基因、核移植，或體外受精等任何一項(xiàng)胚胎工程技術(shù)所生產(chǎn)的胚胎，都必須經(jīng)過胚胎移植技術(shù)才能獲得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意義：大大縮短了供體本身的繁殖周期；充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖能力。

【詳解】

（1）體外受精前要對精子進(jìn)行獲能處理；使其具有受精能力。

（2）要使動物超數(shù)排卵；利用促性腺激素；需將卵子培養(yǎng)到MII中期后進(jìn)行體外受精。

（3）步驟甲是人工受精；將受精卵移入受體母牛，進(jìn)行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前應(yīng)鑒定胚胎中與有關(guān)的優(yōu)良基因。

（4）胚胎移植實(shí)現(xiàn)的前提是受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。

【點(diǎn)睛】

胚胎移植的實(shí)質(zhì)：早期胚胎在生理狀態(tài)相同的條件下空間位置的轉(zhuǎn)移?！窘馕觥烤荧@能促性腺M(fèi)Ⅱ中期人工受精胚胎移植優(yōu)良性狀受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。四、判斷題(共5題，共25分)17、A【分析】【詳解】

由于存在防止多精入卵的兩道屏障，故一個卵細(xì)胞一般只能同一個精子結(jié)合，形成受精卵，這句話是正確的。18、A【分析】【詳解】

受精過程為：頂體反應(yīng)→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應(yīng)）→卵細(xì)胞膜反應(yīng)（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始。精子入卵后形成雄原核，同時被激活的卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核，雄、雌原核充分發(fā)育后，相向移動，彼此靠近，核膜消失，形成受精卵，故此說法正確。

故正確。19、B【分析】【詳解】

受精包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段；在自然狀態(tài)下，哺乳動物的受精在輸卵管內(nèi)完成。

故錯誤。20、B【分析】【分析】

據(jù)圖分析；圖中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原腸胚。圖B中1是滋養(yǎng)層，2是內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，3是透明帶，4是囊胚腔；圖C中5是外胚層，6是滋養(yǎng)層，7是原腸腔，8是內(nèi)胚層。

【詳解】

（1）從A到C的過程中細(xì)胞均需要消耗能量；故胚胎中有機(jī)物的含量均減少，（1）正確。

（2）桑椹胚之前所有細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能；屬全能細(xì)胞，故A時期胚胎中的細(xì)胞都是全能細(xì)胞，囊胚期時細(xì)胞出現(xiàn)分化，滋養(yǎng)層細(xì)胞不是全能細(xì)胞，（2）錯誤。

（3）胚胎移植必須使用處于桑椹胚或囊胚時期的胚胎；處于A或B時期的胚胎，（3）錯誤。

（4）圖示過程細(xì)胞通過有絲分裂增殖；有絲分裂過程中可能發(fā)生突變，遺傳物質(zhì)可能會發(fā)生改變，（4）正確。

故分別為√、×、×、√。21、B【分析】【詳解】

生態(tài)系統(tǒng)的恢復(fù)力穩(wěn)定性是有一定限度的，導(dǎo)致了生態(tài)工程的局限性，使生態(tài)工程并不能解決所有的污染、破壞問題，因此不能走“先污染、破壞，后治理”的老路，故錯誤。五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共28分)22、略

【分析】【分析】

克隆指的是先將含有遺傳物質(zhì)的供體細(xì)胞的核移植到去除了細(xì)胞核的卵細(xì)胞中；然后促使這一新細(xì)胞分裂繁殖發(fā)育成胚胎，當(dāng)胚胎發(fā)育到一定程度后，再被植入動物子宮中使動物懷孕，便可產(chǎn)下與提供細(xì)胞者基因相同的動物。

【詳解】

（1）“中中”和“華華”是通過克隆產(chǎn)生；基因都來自同一個流產(chǎn)的雌性獼猴胎兒，所以其基因和性別都是相同的，理論上運(yùn)用克隆技術(shù)可培育出大批基因完全相同的獼猴，來用于醫(yī)學(xué)研究，這種繁殖方式?jīng)]有通過生殖細(xì)胞的融合，屬于無性繁殖，所以A選項(xiàng)錯誤，BCD正確。

故選A。

（2）體細(xì)胞的細(xì)胞核和去核的卵母細(xì)胞融合形成新的細(xì)胞；重新長成新的個體，說明了細(xì)胞核控制著細(xì)胞的代謝和遺傳過程，因?yàn)榧?xì)胞核中的DNA分子是由脫氧核苷酸連接而成，而脫氧核苷酸的排列順序攜帶者該生物生長發(fā)育的遺傳信息。

（3）猴和人都是靈長類生物；而羊不是，所以與與羊相比,猴與人的親緣關(guān)系更近。

（4）雖然從原理和技術(shù)層面看；克隆人是能夠做到的，但是，克隆人會帶來嚴(yán)重的社會和倫理問題，所以要禁止克隆人的研究。

【點(diǎn)睛】

本題以克隆猴為材料，主要考查細(xì)胞核的知識，同時考查了學(xué)生課外的關(guān)于生物尖端科學(xué)研究，需要學(xué)生廣泛涉獵相關(guān)知識的閱讀?！窘馕觥緼遺傳遺傳信息更近雖然從原理和技術(shù)層面看，克隆人是能夠做到的，但是，克隆人會帶來嚴(yán)重的社會和倫理問題。23、略

【分析】【分析】

1；基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。①將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；②將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；③將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

2；題圖分析：圖甲是基因表達(dá)載體的模式圖；包括：啟動子、目的基因、熒光素酶基因（標(biāo)記基因）、終止子。圖乙可以看出實(shí)驗(yàn)組的相對熒光值較低，而對照組1和對照組2的相對熒光值較高。

【詳解】

（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增基因B中對應(yīng)3′-UTR的DNA片段，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提，是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。因此該空白的答案為：應(yīng)先依據(jù)該基因的一段核苷酸序列合成引物。若對一個含基因B的DNA擴(kuò)增n代，共得到2n個DNA，凈增DNA為2n-1,因此共需消耗的引物為2n－1個。

（2）依題意可知；R-7是家蠶體內(nèi)的一種小分子非編碼RNA，可與某些mRNA尾端的一段非編碼序列(3′-UTR)結(jié)合，進(jìn)而影響基因的表達(dá)。也即3′-UTR位于某些mRNA的尾端，由于mRNA是以DNA分子的一條鏈為模板轉(zhuǎn)錄而來的，因此圖甲中對應(yīng)3′-UTR的DNA片段應(yīng)插入到位點(diǎn)2，原因是目的基因應(yīng)插入到啟動子與終止子之間，且不能破壞熒光素酶基因，重組載體中的熒光素酶基因在基因工程中作為標(biāo)記基因。

（3）①由圖乙可知實(shí)驗(yàn)組的相對熒光值較低；而對照組1和對照組2的相對熒光值較高。又因?yàn)閷φ战M1的的處理為將含有熒光素酶基因的表達(dá)載體(不含對應(yīng)3′-UTR的DNA片段)導(dǎo)入含R-7的家蠶胚胎細(xì)胞中，說明沒有R-7片段的細(xì)胞中熒光素酶基因正常表達(dá)，相對熒光值較高。實(shí)驗(yàn)組為將重組載體導(dǎo)入含R-7的家蠶胚胎細(xì)胞中，相對熒光值較低，說明R-7抑制了熒光素酶基因的表達(dá)。由此可以推測對照組2的處理應(yīng)為將重組載體導(dǎo)入不含(或去除)R-7的家蠶胚胎細(xì)胞中。

②基因的表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯；在轉(zhuǎn)錄和翻譯的過程中都遵循堿基互補(bǔ)配對原則。依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可推知，R-7影響基因B的表達(dá)，即通過遵循堿基互補(bǔ)配對原則，R-7與基因B所轉(zhuǎn)錄的mRNA的3′-UTR結(jié)合，進(jìn)而抑制基因B的表達(dá)。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握基因工程技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題，要求考生理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。【解析】PCR該基因的一段核苷酸序列2n－12目的基因應(yīng)插入到啟動子與終止子之間，且不能破壞熒光素酶基因標(biāo)記基因?qū)⒅亟M載體導(dǎo)入不含(或去除)R-7的家蠶胚胎細(xì)胞中堿基互補(bǔ)配對抑制24、略

【分析】【分析】

1；通常采用機(jī)械消化或胰酶消化動物組織；使其分散為單個細(xì)胞。動物細(xì)胞的培養(yǎng)：適宜的培養(yǎng)基、添加血清、激素（如胰島素）等。

2；由于生物實(shí)驗(yàn)研究對象存在差異性；大多采用對照實(shí)驗(yàn)法，即確定實(shí)驗(yàn)組后，根據(jù)等量原則和單一變量原則設(shè)計相應(yīng)對照組。

【詳解】

Ⅰ．（1）動物細(xì)胞的生長除了需要碳源；氮源、無機(jī)鹽和水分之外；還需要各種生長因子。因此，培養(yǎng)U343細(xì)胞常在培養(yǎng)基中加入血清，為動物細(xì)胞提供生長因子。培養(yǎng)一段時間后，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶消化，使細(xì)胞分散開制成細(xì)胞懸液。

（2）實(shí)驗(yàn)?zāi)康模禾骄柯闶篌w內(nèi)下調(diào)Per基因?qū)θ四z質(zhì)瘤細(xì)胞U343細(xì)胞株中P53的可能調(diào)控機(jī)制。實(shí)驗(yàn)變量：細(xì)胞中是否含有Per基因。實(shí)驗(yàn)設(shè)計：①實(shí)驗(yàn)組：人工合成低表達(dá)Per2基因；以某種病毒作為運(yùn)載體，構(gòu)建重組DNA，導(dǎo)入到培養(yǎng)好的U343膠質(zhì)瘤細(xì)胞中（實(shí)驗(yàn)組）。②對照組1：為了排除病毒對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，將同種病毒轉(zhuǎn)入到培養(yǎng)好的U343膠質(zhì)瘤細(xì)胞中。③對照組2：作為空白對照，培養(yǎng)好的U343膠質(zhì)瘤細(xì)胞。

II．（5）由圖1可知，細(xì)胞中GAPDH蛋白表達(dá)量相對穩(wěn)定，在實(shí)驗(yàn)中可作為參照，可排除細(xì)胞培養(yǎng)操作、點(diǎn)樣量、檢測方法等對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。實(shí)驗(yàn)組U343膠質(zhì)瘤細(xì)胞中Per2蛋白含量比對照組1和對照組2U343膠質(zhì)瘤細(xì)胞的低，說明Per2基因在實(shí)驗(yàn)組U343膠質(zhì)瘤細(xì)胞中成功表達(dá)，即Per2基因低表達(dá)體系構(gòu)建成功。

（6）由圖2可知，細(xì)胞中GAPDH蛋白表達(dá)量相對穩(wěn)定，可排除細(xì)胞培養(yǎng)操作、點(diǎn)樣量、檢測方法等對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。Per2蛋白含量與p53、ATM的含量成正比，說明Per2高表達(dá)促進(jìn)p53、ATM的表達(dá)。Per2蛋白含量與c-myc和MDM2的含量成反比，說明Per2高表達(dá)抑制c-myc和MDM2的表達(dá)。

III．（7）由（6）的結(jié)果可知，Per2基因低表達(dá)時；抑制p53；ATM的表達(dá)，促進(jìn)c-myc和MDM2的表達(dá)，而MDM2的表達(dá)可負(fù)調(diào)控P53，使p53的表達(dá)量更低，導(dǎo)致膠質(zhì)瘤的發(fā)生和發(fā)展。

【點(diǎn)睛】

解答本題的關(guān)鍵是熟練掌握實(shí)驗(yàn)設(shè)計的對照性原則、單一變量原則和等量原則，然后根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，得出正確的結(jié)論?！窘馕觥垦澹ㄑ獫{）胰蛋白酶（膠原蛋白酶）轉(zhuǎn)入同種病毒到U343膠質(zhì)瘤細(xì)胞中排除細(xì)胞培養(yǎng)操作、點(diǎn)樣量、檢測方法等對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響Per2高表達(dá)促進(jìn)p53、ATM表達(dá)，抑制c-myc和MDM2表達(dá)Per2基因低表達(dá)時，抑制了p53和ATM的表達(dá)，促進(jìn)了MDM2和c-myc的表達(dá)，MDM2負(fù)調(diào)控P53，使p53表達(dá)量更低25、略

【分析】【分析】

1；進(jìn)行胚胎分割時；應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚，胚胎分割后，可取滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析進(jìn)行性別鑒定。

2；試管動物是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

3；胚胎干細(xì)胞。

（1）哺乳動物的胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞；來源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來。

（2）具有胚胎細(xì)胞的特性；在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造。

【詳解】

（1）將純種的安哥拉兔的兩個4細(xì)胞胚胎移入一只純種的比利時兔的輸卵管內(nèi)；成功地得到了兩只純種的安哥拉子兔。由于安哥拉兔和比利時兔為兩個不同的品種，故這個實(shí)驗(yàn)可證實(shí)同種動物的胚胎在異體動物體內(nèi)發(fā)育的可能性。

（2）哺乳動物卵子發(fā)生過程中；減數(shù)第一次分裂是在雌性動物排卵前后完成的，其結(jié)果產(chǎn)生一個次級卵母細(xì)胞和第一極體，進(jìn)入輸卵管，準(zhǔn)備與精子受精。減數(shù)第二次分裂是在精子和卵子結(jié)合過程中完成的，哺乳動物卵泡的形成和在卵巢內(nèi)儲備，是在出生前（即胎兒時期）完成的，這是卵子和精子在發(fā)生上的重要區(qū)別。在實(shí)施體外受精時，獲能的精子與培養(yǎng)成熟的卵子，一般情況下都可以在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫饔?，在體外受精后，應(yīng)將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力。

（3）哺乳動物的早期胚胎形成后；在一定時間內(nèi)不會與母體子宮建立組織上的聯(lián)系，而是處于游離狀態(tài)，這就為胚胎的收集提供了可能。胚胎分割后，可取滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析進(jìn)行性別鑒定。

（4）ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上；或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中，能夠維持不分化的狀態(tài)，而在培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，就可以誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化。

【點(diǎn)睛】

?本題主要考查胚胎工程和基因工程的知識，解題關(guān)鍵是基因工程、胚胎工程的相關(guān)知識點(diǎn)的掌握，把握知識的內(nèi)在聯(lián)系?！窘馕觥浚?）同種動物的胚胎在異體動物體內(nèi)發(fā)育（2）精子和卵子結(jié)合卵泡的形成和在卵巢內(nèi)儲備，是在出生前完成的獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤菏芫珷顩r和受精卵的發(fā)育能力（3）早期胚胎形成后處于游離狀態(tài)，未與母體子宮建立聯(lián)系（4）做DNA分析性別鑒定添加抑制因子六、綜合題(共4題，共24分)26、略

【分析】【分析】

分析題圖可知：HindIII的切割位點(diǎn)會破壞質(zhì)粒的標(biāo)記基因；AluI會破壞目的基因，故不能用上述兩種酶切割。

【詳解】

（1）根據(jù)圖中各種限制酶的切割位點(diǎn)，既可以獲得目的基因又不能破壞質(zhì)粒上的標(biāo)記基因，故選用SmaI和PstI；選擇兩種酶的優(yōu)勢是可避免含有目的基因的外源DNA自身環(huán)化；可以防止質(zhì)粒自身環(huán)化，也可避免質(zhì)粒與目的基因的反向連接。

（2）對獲得的抗寒基因進(jìn)行體外擴(kuò)增；可用PCR技術(shù)；在細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制需要解旋酶將雙鏈解開，而PCR技術(shù)利用加熱至90~95℃的高溫使DNA解旋；該技術(shù)使用的DNA聚合酶具有耐高溫的特性。

（3）軟籽石榴的愈傷組織經(jīng)過植物組織培養(yǎng)得過程中的脫分化環(huán)節(jié)得到；將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。

【點(diǎn)睛】

明確基因工程的基本操作程序是解答本題的關(guān)鍵，且能明確限制酶的選擇依據(jù)，結(jié)合題圖分析作答。【解析】SmaI和PstI質(zhì)粒自身成環(huán)和質(zhì)粒與目的基因的反向連接PCR體外擴(kuò)增目的基因利用加熱至90~95℃的高溫使DNA解旋，細(xì)胞內(nèi)復(fù)制目的基因使用解旋酶使DNA解旋耐高溫（或具有熱穩(wěn)定性）脫分化農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化27、略

【分析】【分析】

單克隆抗體的制備。

（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原；然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。

（2）獲得雜交瘤細(xì)胞。

①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；

②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。

（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測；

（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；

（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。

【詳解】

（1）單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)；靈敏度高、可以大量制備。給小鼠注射特定抗原的目的是使小鼠產(chǎn)生能分泌特定抗體的B淋巴細(xì)胞。

（2）誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合可以通過物理方法離心；振動、電刺激；化學(xué)方法聚乙二醇，誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合除了物理方法和化學(xué)方法外，還可以使用滅活的病毒處理。細(xì)胞融合依據(jù)的原理是細(xì)胞膜具有一定的流動性。

（3）利用HAT培養(yǎng)液篩選雜交瘤細(xì)胞的原理是：①骨髓瘤細(xì)胞之間兩兩融合后；由于骨髓瘤細(xì)胞缺乏X酶，在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA而無法生長；②B淋巴細(xì)胞之間兩兩融合后，由于B淋巴細(xì)胞不能分裂增殖而無法生長；③雜交瘤細(xì)胞由于既能產(chǎn)生X酶，在HAT篩選培養(yǎng)液中能正常合成DNA，且又能無限增殖，因而能生長。

（4）單克隆抗體制備過程中；第一次篩選是為了獲得雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選要獲得的是專一抗體檢驗(yàn)呈陽性的細(xì)胞。

【點(diǎn)睛】

本題考查單克隆抗體的制備相關(guān)知識點(diǎn)，熟悉單克隆抗體制備過程及相關(guān)知識是解決這道題的關(guān)鍵?！窘馕觥刻禺愋詮?qiáng)、靈敏度高、可以大量制備特定抗體滅活的病毒一定的流動性骨髓瘤細(xì)胞缺乏X酶，在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNAB淋巴細(xì)胞不能分裂增殖既能產(chǎn)生X酶，在HAT篩選培養(yǎng)液中能正常合成DNA，且又能無限增殖專一抗