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DB33PCRdetectiontechniqueforfeli浙江省市場監(jiān)督管理局發(fā)布I1貓細(xì)小病毒PCR檢測方法本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了貓細(xì)小病毒PCR(polyme凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗4.1.1要求4.1.2試劑4.1.2.1核糖核酸酶(20mg/mL4.1.2.210%十二烷基磺酸鈉溶液。4.1.2.7瓊脂糖。2):4.1.2.112.5mmoldNTPs(deoxyribonucleosidetripho4.2儀器設(shè)備4.2.3核酸電泳儀和水平電泳槽。4.2.4微波爐。4.2.6恒溫水浴鍋。4.2.7冷藏冰箱和低溫冷凍冰箱。4.2.8微量移液器。4.2.9凝膠成像系統(tǒng)(或紫外透射儀)。4.2.10高壓滅菌鍋。4.2.11超凈工作臺或生物安全柜。5操作步驟5.1樣品的采集和處理5.1.1采集動物糞便、肛拭子、全血或腸道等組織樣品并進(jìn)行處理:5.2.1設(shè)立陽性、陰性樣品對照,陽性對照為貓細(xì)小病毒陽性樣品3用量(μL)215.4.2加樣取5μLPCR產(chǎn)物與0.5μL10×加樣緩沖液混合,加入瓊脂糖凝膠板的加樣孔中。每次電泳加陽性對照和陰性對照的擴(kuò)增產(chǎn)物,并設(shè)立DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)(DL2000)做分子質(zhì)量大小對45.4.4結(jié)
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