2024年冀教新版選修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2024年冀教新版選修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷366考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、某研究小組為測(cè)定藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性，準(zhǔn)備對(duì)某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞（甲）和正常肝細(xì)胞（乙）進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。下列敘述正確的是A.制備肝細(xì)胞懸液時(shí)，可用胃蛋白酶處理肝組織塊B.恒溫培養(yǎng)箱中的CO2濃度維持在5％左右，以促進(jìn)細(xì)胞呼吸C.為了保證細(xì)胞培養(yǎng)所需的無(wú)毒環(huán)境，需大量添加各種抗生素D.本實(shí)驗(yàn)應(yīng)設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)，以檢測(cè)藥物對(duì)甲、乙的毒性大小2、注射抗小鼠Thy—1抗原的單克隆抗體，可以抑制小鼠同種皮膚移植產(chǎn)生的排斥反應(yīng)，有關(guān)制備抗小鼠Thy—1抗原的單克隆抗體，下列敘述不正確的是A.應(yīng)向小鼠體內(nèi)注入Thy—1抗原B.可用滅活的病毒誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合C.融合后的細(xì)胞即為所需的雜交瘤細(xì)胞D.該過(guò)程涉及動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)3、有關(guān)“轉(zhuǎn)基因猴”、“克隆猴”和“試管猴”的說(shuō)法合理的是（）A.三種猴都繼承了雙親的優(yōu)良性狀B.三種猴培育過(guò)程都體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性C.三種猴培育過(guò)程都應(yīng)用了早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)D.為提高繁殖效率三者都可采用原腸胚期的胚胎進(jìn)行胚胎分割4、下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是A.因動(dòng)物細(xì)胞具有接觸抑制特性，可在培養(yǎng)瓶壁上出現(xiàn)多層細(xì)胞B.原代培養(yǎng)過(guò)程中大多數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變C.二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無(wú)限的D.培養(yǎng)液中加入抗生素以防培養(yǎng)過(guò)程的污染5、關(guān)于轉(zhuǎn)基因鯉魚培育過(guò)程的敘述，正確的是A.構(gòu)建表達(dá)載體需要限制酶和DNA連接酶B.以幼小鯉魚的肝臟細(xì)胞為受體細(xì)胞C.可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入生長(zhǎng)激素基因D.可用二苯胺檢測(cè)受體細(xì)胞是否含生長(zhǎng)激素基因6、杜泊羊以其生長(zhǎng)速度快、肉質(zhì)好等優(yōu)點(diǎn)，深受廣“大消費(fèi)者的歡迎?？蒲泄ぷ髡邽闈M足市場(chǎng)需求，通過(guò)胚胎工程相關(guān)技術(shù)快速、大量繁殖杜泊羊。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.對(duì)受體杜泊羊進(jìn)行超數(shù)排卵處理可獲得較多的卵母細(xì)胞B.采集到的卵母細(xì)胞需在獲能培養(yǎng)液中進(jìn)行獲能培養(yǎng)C.人工授精后，以觀察到兩個(gè)極體或雌、雄原核作為受精的標(biāo)志D.收集到的胚胎進(jìn)行胚胎分割后獲得的二分胚的基因型不同評(píng)卷人得分二、多選題(共9題，共18分)7、人們對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性的關(guān)注，隨著轉(zhuǎn)基因成果的不斷涌現(xiàn)而與日俱增。下列敘述中，正確的是（）A.一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問(wèn)題，應(yīng)該馬上停止實(shí)驗(yàn)，并銷毀重組生物B.應(yīng)該嚴(yán)格地選擇轉(zhuǎn)基因植物的目的基因，以避免產(chǎn)生對(duì)人類有害的物質(zhì)C.轉(zhuǎn)基因生物不會(huì)對(duì)生物多樣性構(gòu)成威脅，也不會(huì)影響生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性D.外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機(jī)的，有可能會(huì)出現(xiàn)意想不到的后果8、離心是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的技術(shù)手段。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.梅塞爾森和斯塔爾通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明DNA分子半保留復(fù)制中，采用了差速離心法B.在細(xì)胞工程的操作中，利用離心法可以誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合C.用差速離心法對(duì)細(xì)胞勻漿進(jìn)行離心，分離核糖體比分離葉綠體的轉(zhuǎn)速低D.噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)中，離心可將DNA和蛋白質(zhì)分開，以便分別研究各自的作用9、我國(guó)科學(xué)家成功地用iPS細(xì)胞克隆出了活體小鼠，部分流程如下圖所示，其中Kdm4d為組蛋白去甲基化酶，TSA為組蛋白脫乙酰酶抑制劑。下列敘述正確的是（）

A.過(guò)程①中小分子化合物誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞突變?yōu)閕PS細(xì)胞B.過(guò)程②中的卵母細(xì)胞需要在體外培養(yǎng)到MⅡ期再除去細(xì)胞核C.過(guò)程③中可使用電融合法誘導(dǎo)兩細(xì)胞融合，進(jìn)而形成重構(gòu)胚D.組蛋白去甲基化和脫乙?；赡苡欣谥貥?gòu)胚后續(xù)的胚胎發(fā)育10、下列動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中屬于原代培養(yǎng)的是（）A.通常將動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)B.從機(jī)體取得細(xì)胞后立即進(jìn)行培養(yǎng)的過(guò)程C.出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象后接下來(lái)的細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程D.哺乳動(dòng)物細(xì)胞在培養(yǎng)基中的懸浮生長(zhǎng)過(guò)程11、下列有關(guān)哺乳動(dòng)物精子和卵子的發(fā)生以及受精作用的敘述，不正確的是（）A.采集到的精子和卵子相遇即可發(fā)生受精作用B.排卵就是排出成熟卵子的過(guò)程C.卵子形成時(shí)的分裂過(guò)程均在卵巢內(nèi)完成D.卵子受精的標(biāo)志是在卵細(xì)胞膜和透明帶之間觀察到兩個(gè)極體12、下圖是某種哺乳動(dòng)物體內(nèi)的減數(shù)分裂和受精作用過(guò)程示意圖。下列有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.圖甲可以在雌性動(dòng)物的卵巢中出現(xiàn)B.圖甲、乙、丙中都出現(xiàn)了基因重組C.受精卵中母方提供的遺傳物質(zhì)更多D.頂體反應(yīng)和透明帶反應(yīng)可防止多精入卵13、家高胚胎的性別鑒定技術(shù)對(duì)畜牧業(yè)發(fā)展具有重要意義。科研人員利用PCR技術(shù)同時(shí)擴(kuò)增優(yōu)質(zhì)奶牛Y染色體上雄性決定基因（SRY）和常染色體上的路蛋白基因（CSN1S1）；進(jìn)行早期胚胎的性別鑒定，并將鑒定后的胚胎進(jìn)行移植。下圖為取自不同胚胎的DNA樣品PCR產(chǎn)物的電泳結(jié)果。下列敘述正確的是（）

A.選取胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞提取DNA進(jìn)行鑒定B.需要根據(jù)牛的SRY和CSN1S1序列設(shè)計(jì)2對(duì)引物C.對(duì)受體牛進(jìn)行同期發(fā)情處理后再進(jìn)行胚胎移植D.根據(jù)結(jié)果可以確定A為CSN1S1，3、5號(hào)胚胎為雄性14、下圖為胚胎干細(xì)胞獲取及培養(yǎng)簡(jiǎn)圖；據(jù)圖示信息判斷，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.通過(guò)③過(guò)程可定向培育人造組織器官，用于器官移植B.研究細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡的機(jī)理可選擇圖中②或③途徑C.胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中5%CO2的主要作用是促進(jìn)細(xì)胞呼吸D.②過(guò)程只能在飼養(yǎng)層細(xì)胞上進(jìn)行，該細(xì)胞可作為干細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞15、有一個(gè)嬰兒在出生后保留了臍帶血，在以后他生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中如果出現(xiàn)了某種難治療的疾病，就可以通過(guò)血液中的干細(xì)胞來(lái)為其治病。關(guān)于這個(gè)實(shí)例說(shuō)法不正確的是（）A.用干細(xì)胞培育出人體需要的器官用來(lái)移植治病，需要激發(fā)細(xì)胞的所有全能性B.用臍帶血中的干細(xì)胞能夠治療這個(gè)孩子所有的疾病C.如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官，需要用到細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)D.如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官，應(yīng)該長(zhǎng)期給他使用免疫抑制藥物評(píng)卷人得分三、填空題(共9題，共18分)16、生物學(xué)家利用基因工程技術(shù)通過(guò)生物反應(yīng)器生產(chǎn)人的血清蛋白。請(qǐng)根據(jù)相關(guān)知識(shí)回答下列問(wèn)題：

（1）在基因工程的操作中的“分子手術(shù)刀”是_______________________________

（2）在基因工程的操作中的“分子縫合針”是________

（3）基因工程中最常用的運(yùn)載體是______

（4）人的基因在牛體內(nèi)能表達(dá)，說(shuō)明人和牛______17、自然條件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一頭奶牛一年只能繁殖一頭牛犢。通過(guò)胚胎工程技術(shù)可以快速繁育優(yōu)良個(gè)體，其主要步驟如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）從供體奶牛獲得的精子，需對(duì)其進(jìn)行___________處理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母細(xì)胞，為使其超數(shù)排卵常使用____________激素處理；采集到卵母細(xì)胞后，在體外將其培養(yǎng)到___________期；使其成熟。

（3）步驟甲、乙分別指___________、___________。為篩選出具有優(yōu)良性狀的母牛，步驟乙之前應(yīng)鑒定胚胎中與___________有關(guān)的基因。

（4）進(jìn)行步驟乙時(shí)，受體母牛對(duì)移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生___________，這為胚胎在代孕母牛體內(nèi)的存活提供了可能。18、基因治療：基因治療是指用正常基因_______或______患者細(xì)胞中有缺陷的基因，從而達(dá)到治療疾病的目的。19、根據(jù)課本知識(shí)填空：

（1）神經(jīng)元的軸突末梢經(jīng)過(guò)多次分支；最后每個(gè)小枝末端膨大，呈杯狀或球狀，叫做________。

（2）抗體可以與病原體結(jié)合；從而抑制病原體的繁殖或___________________________。

（3）要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA；可以用____________________________做探針。

（4）所謂人工種子就是以植物組織培養(yǎng)得到的________________________（寫出2個(gè)即可）等為材料；經(jīng)過(guò)人工薄膜包裝得到的種子。

（5）胰島素能促進(jìn)組織細(xì)胞加速_______________葡萄糖。20、今年年初；爆發(fā)了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠狀病毒通過(guò)其表面的S-蛋白與人細(xì)胞膜上的ACE2相互識(shí)別，感染人的呼吸道上皮細(xì)胞。請(qǐng)分析回答問(wèn)題：

（1）新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為_________剌激淋巴細(xì)胞，使機(jī)體產(chǎn)生_________性免疫反應(yīng)，人細(xì)胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是_________。

（2）感染病毒后，免疫系統(tǒng)對(duì)肺細(xì)胞強(qiáng)烈攻擊引發(fā)肺炎，此時(shí)可通過(guò)適度使用_________對(duì)病人進(jìn)行治療；使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）科學(xué)家采集了感染新型冠狀病毒并已康復(fù)的甲、乙兩人的血液，檢測(cè)相關(guān)抗體的水平，結(jié)果如圖1。據(jù)此分析，應(yīng)選取_________的B淋巴細(xì)胞用以制備單克隆抗體（單抗）。

（4）將制備的多種單抗分別與病毒混合，然后檢測(cè)病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率，結(jié)果如圖2。據(jù)此分析，對(duì)病毒抑制效果最好的單抗是__________號(hào)。

（5）患者康復(fù)后一段時(shí)間，若再次受到該病毒的攻擊，機(jī)體內(nèi)相應(yīng)的__________細(xì)胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞。21、下圖表示哺乳動(dòng)物精子和卵細(xì)胞發(fā)生和成熟的示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）③過(guò)程中精子頭部的頂體是由__________發(fā)育來(lái)的；④過(guò)程在__________內(nèi)完成。

（2）在④過(guò)程中發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放頂體酶，溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)和透明帶。為了阻止多精入卵，會(huì)發(fā)生__________反應(yīng)和__________反應(yīng)。

（3）精子的發(fā)生開始的時(shí)期是__________；雌性動(dòng)物卵泡的形成的時(shí)期是__________。

（4）初級(jí)卵母細(xì)胞進(jìn)行Ⅰ過(guò)程是在__________時(shí)期完成的，Ⅱ過(guò)程是在__________過(guò)程中完成的。22、請(qǐng)寫出基因工程的概念：_________________。請(qǐng)寫出胚胎移植的概念：_____________________。請(qǐng)分別寫出植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理_________。23、自然條件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一頭奶牛一年只能繁殖一頭牛犢。通過(guò)胚胎工程技術(shù)可以快速繁育優(yōu)良個(gè)體，其主要步驟如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）從供體奶牛獲得的精子，需對(duì)其進(jìn)行___________處理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母細(xì)胞，為使其超數(shù)排卵常使用____________激素處理；采集到卵母細(xì)胞后，在體外將其培養(yǎng)到___________期；使其成熟。

（3）步驟甲、乙分別指___________、___________。為篩選出具有優(yōu)良性狀的母牛，步驟乙之前應(yīng)鑒定胚胎中與___________有關(guān)的基因。

（4）進(jìn)行步驟乙時(shí)，受體母牛對(duì)移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生___________，這為胚胎在代孕母牛體內(nèi)的存活提供了可能。評(píng)卷人得分四、判斷題(共5題，共30分)24、一般情況下一個(gè)卵細(xì)胞只能由一個(gè)精子發(fā)生融合形成受精卵()A.正確B.錯(cuò)誤25、精子入卵后形成雄原核；同時(shí)卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核()A.正確B.錯(cuò)誤26、受精包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段，在自然狀態(tài)下，哺乳動(dòng)物的受精在子宮內(nèi)完成。（選擇性必修3P56）()A.正確B.錯(cuò)誤27、下圖表示哺乳動(dòng)物發(fā)育過(guò)程的幾個(gè)階段；請(qǐng)判斷下列題的敘述是否正確？

（_____）（1）從A到C的過(guò)程中有機(jī)物的含量減少。

（_____）（2）A；B時(shí)期胚胎中的細(xì)胞都是全能細(xì)胞。

（_____）（3）胚胎移植必須使用處于B或C時(shí)期的胚胎。

（_____）（4）圖示過(guò)程細(xì)胞通過(guò)有絲分裂增殖，遺傳物質(zhì)可能會(huì)發(fā)生改變。A.正確B.錯(cuò)誤28、在生態(tài)工程建設(shè)中，只能遵循“先污染、破壞、再治理”的發(fā)展思路______A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、非選擇題(共2題，共18分)29、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ),動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)在當(dāng)今生物制品的生產(chǎn)中已越來(lái)越重要。請(qǐng)回答下列有關(guān)的問(wèn)題:

(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中為了確保無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境,除了對(duì)培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理外,還可以通過(guò)_______________等方式防止雜菌污染。在培養(yǎng)液中加入適量的NaHCO3溶液,其作用是______________________。使用合成培養(yǎng)基時(shí),通常要加入血清；血漿等一些天然成分,其原因是______________________。

(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),將取得的動(dòng)物組織塊剪碎,再用胰蛋白酶處理一段時(shí)間以獲得__________________。對(duì)動(dòng)物組織塊做以上處理的原因是__________________。

(3)單克隆抗體可以借助動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)來(lái)生產(chǎn),要培養(yǎng)的目的細(xì)胞是__________________(填“骨髓瘤細(xì)胞”“已免疫的B淋巴細(xì)胞”或“雜交瘤細(xì)胞”),其中一種細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后不能存活,原因是___________________________30、人血清白蛋白（HSA）具有重要的醫(yī)用價(jià)值。科研人員通過(guò)生物工程技術(shù)獲得轉(zhuǎn)HSA基因奶牛；并通過(guò)乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)HSA，其主要技術(shù)流程如下圖所示：

回答下列問(wèn)題：

（1）如上圖所示，供核的牛胎兒成纖維細(xì)胞通常選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，其原因是_______________________________________________________________。

（2）SRY-PCR法性別鑒定的基本程序是：提取牛胎兒成纖維細(xì)胞的DNA；經(jīng)PCR反應(yīng)體系擴(kuò)增SRY基因（Y染色體上特有的性別決定基因）片段，然后對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)。

要大量獲得SRY基因，PCR擴(kuò)增時(shí)需要加入兩種引物：__________________（選填“引物I”、“引物II”、“引物III”、“引物IV”），原因是DNA聚合酶只能從核苷酸鏈的______________開始延伸DNA鏈，用兩種引物才能確保______________。除引物外，PCR反應(yīng)體系中還包含緩沖液、模板DNA、____________和____________等成分。通過(guò)SRY-PCR法進(jìn)行性別鑒定，可獲得更多的轉(zhuǎn)HSA基因________牛；以便其通過(guò)乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人血清白蛋白。

（3）在胚胎移植操作中，應(yīng)對(duì)供體和受體母牛進(jìn)行_____________處理，目的是使供體和受體處于相同的生理狀態(tài)，使胚胎在移植前后所處的生理環(huán)境保持一致。由此可見，胚胎移植的實(shí)質(zhì)是_____________________________________________。評(píng)卷人得分六、綜合題(共3題，共12分)31、我們?nèi)粘３缘拇竺字需F含量極低；科研人員通過(guò)基因工程等技術(shù)，培育出了鐵含量比普通大米高60%的轉(zhuǎn)基因水稻，改良了稻米的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)。下圖為培育轉(zhuǎn)基因水稻過(guò)程示意圖，請(qǐng)分析回答。

（1）鐵結(jié)合蛋白基因來(lái)自菜豆；可通過(guò)PCR擴(kuò)增獲取，如果該基因______________________已知且比較小，還可用化學(xué)方法直接人工合成。

（2）構(gòu)件重組Ti質(zhì)粒時(shí)；通常先要用同種限制酶分別切割________________________________。將重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌時(shí)，可以用_________________處理農(nóng)桿菌，使重組Ti質(zhì)粒易于導(dǎo)入。

（3）將含有重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌與水稻愈傷組織共同培養(yǎng)時(shí)；通過(guò)培養(yǎng)基2的篩選培養(yǎng)，可以獲得___________________；培養(yǎng)基2中需要添加________________________。檢測(cè)培育轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，需要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因稻米__________________。

（4）為研究外源基因的遺傳方式，將T0代植株上收獲的種子種植成T1代株系，檢測(cè)個(gè)單株的潮霉素抗性。在檢測(cè)的多數(shù)T1帶株系內(nèi)，抗潮霉素植株與潮霉素敏感植株的比例為3：1，此結(jié)果說(shuō)明外源基因的遺傳符合_______________________________。少數(shù)T1代株系的所有植株都表現(xiàn)為對(duì)潮霉素敏感，但其體內(nèi)能檢測(cè)到鐵結(jié)合蛋白基因，造成這一結(jié)果最可能的原因是_______________________________________。32、人乳鐵蛋白（hLF）對(duì)細(xì)菌、真菌和病毒等都有抑制作用。研究人員開展人乳鐵蛋白基因乳腺特異性表達(dá)載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)染研究，主要流程如下圖，圖中AseI、NheI、SalI、BamHI代表相關(guān)限制酶切點(diǎn)，neor為新霉素抗性基因；BLG基因?yàn)锽乳球蛋白基因，GFP基因?yàn)榫G色熒光蛋白基因。請(qǐng)回答：

（1）過(guò)程①中，不能從人肌肉細(xì)胞中提取RNA用于RT-PCR，是因?yàn)開______________。在RT—PCR過(guò)程中，加入的引物需在5’端添加_______________兩種限制酶的識(shí)別序列；以便于hLF基因插入pEB中。

（2）過(guò)程②中，hLF基因插入到BLG基因之后的目的是_______________。

（3）將轉(zhuǎn)染后的山羊乳腺上皮細(xì)胞先置于含新霉素的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，能夠存活的細(xì)胞應(yīng)該是導(dǎo)入_______________的細(xì)胞，再利用熒光顯微鏡觀察山羊乳腺上皮細(xì)胞中_______________；以篩選出轉(zhuǎn)染成功的細(xì)胞。

（4）要獲得轉(zhuǎn)基因山羊，還需要將成功表達(dá)hLF的乳腺上皮細(xì)胞的細(xì)胞核移植到山羊去核卵母細(xì)胞中，再借助_________________技術(shù)孕育出羊羔。33、如圖是大規(guī)模培育優(yōu)良種牛的流程圖；①；②表示操作過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問(wèn)題：

(1)①過(guò)程的技術(shù)名稱是___________。此前，通常是將精子放在一定濃度的________中；用化學(xué)藥物誘導(dǎo)精子獲能。

(2)圖中將供體母牛進(jìn)行激素處理的目的題_________，將受體母牛進(jìn)行激素處理的目的是________。受精階段，機(jī)體具有兩道防止多精入卵受精的屏障，包括_____________。

(3)②過(guò)程表示__________，為了提高胚胎利用效率并獲得A牛、B牛，在對(duì)囊胚進(jìn)行分割時(shí)需要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行均等分割，否則會(huì)__________________。

(4)受精卵在體外培養(yǎng)時(shí)，需將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，目的是______________。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、D【分析】試題分析：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)制備細(xì)胞懸液時(shí)，應(yīng)用胰蛋白酶進(jìn)行處理，A項(xiàng)錯(cuò)誤；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中，濃度為5%的CO2的作用是維持培養(yǎng)液的PH；B項(xiàng)錯(cuò)誤；為了防止雜菌污染，保證細(xì)胞培養(yǎng)所需的無(wú)毒環(huán)境，需適量添加抗生素，C項(xiàng)錯(cuò)誤；為了檢測(cè)藥物對(duì)甲；乙的毒性大小，應(yīng)設(shè)置培養(yǎng)液中不加該藥物的對(duì)照實(shí)驗(yàn)，D項(xiàng)正確。

考點(diǎn)：本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。2、C【分析】應(yīng)向小鼠體內(nèi)反復(fù)注入Thy—1抗原，使小鼠產(chǎn)生相應(yīng)的免疫B淋巴細(xì)胞，A正確；可用滅活的病毒誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，這是動(dòng)物細(xì)胞融合的特有的方法，B正確；融合后的細(xì)胞不一定就能大量增殖并產(chǎn)生專一的抗體，還需要篩選，才可以得到所需的雜交瘤細(xì)胞，C錯(cuò)誤；該過(guò)程涉及動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，D正確。3、C【分析】【分析】

1；轉(zhuǎn)基因技術(shù)是指運(yùn)用科學(xué)手段從某種生物中提取所需要的基因；將其轉(zhuǎn)入另一種生物中，使與另一種生物的基因進(jìn)行重組，從而培育出轉(zhuǎn)基因生物。

2；克隆動(dòng)物的培育是無(wú)性生殖；共涉及到三個(gè)親本，一個(gè)是提供了細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)；另一個(gè)提供了細(xì)胞核；第三個(gè)提供了胚胎的發(fā)育場(chǎng)所（子宮）。

3；試管動(dòng)物的培育是有性生殖；是設(shè)法使精子與卵子在體外相遇并受精形成受精卵，培育至早期胚胎后進(jìn)行胚胎移植發(fā)育而成的猴。

【詳解】

A；“轉(zhuǎn)基因猴”獲得提供目的基因的供體和受體（父本和母本）性狀；“克隆猴”獲得提供細(xì)胞核的供體和去核卵母細(xì)胞的遺傳性狀，“試管猴”繼承了雙親的遺傳物質(zhì)，A錯(cuò)誤；

B；“克隆猴”培育過(guò)程都體現(xiàn)了細(xì)胞核的全能性；B錯(cuò)誤；

C；三種猴培育過(guò)程都應(yīng)用了早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)；C正確；

D；提高繁殖效率三者都可采用桑椹胚期或囊胚的胚胎進(jìn)行胚胎分割；D錯(cuò)誤。

故選C。

【點(diǎn)睛】

本題考查轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、克隆動(dòng)物和試管動(dòng)物，要求考生識(shí)記基因工程的操作步驟；識(shí)記動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的概念及操作過(guò)程，明確核移植形成的克隆動(dòng)物屬于無(wú)性生殖產(chǎn)物；識(shí)記體外受精技術(shù)及過(guò)程，明確體外受精形成的試管動(dòng)物屬于有性生殖產(chǎn)物。4、D【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)流程：

【詳解】

A；除癌細(xì)胞外；細(xì)胞一般都為貼壁生長(zhǎng)，且當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂到表面相互接觸時(shí)，因?yàn)榧?xì)胞的接觸抑制就會(huì)停止分裂增殖，從而無(wú)法形成多層細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；克隆培養(yǎng)法即細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中；細(xì)胞進(jìn)行的是有絲分裂，所以培養(yǎng)出來(lái)的多數(shù)細(xì)胞基因型相同，只有少數(shù)細(xì)胞可能在培養(yǎng)過(guò)程中遺傳物質(zhì)改變，B錯(cuò)誤；

C；一般來(lái)說(shuō)二倍體細(xì)胞傳代培養(yǎng)過(guò)程中一般傳至10代后就不易傳下去了；到10~50代左右，增殖會(huì)逐漸減緩，甚至停止，繼續(xù)培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞的細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變化，在保持二倍體核型的條件下，傳代培養(yǎng)的次數(shù)不可能達(dá)到無(wú)限次，C錯(cuò)誤；

D；在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液時(shí)；為了防止培養(yǎng)過(guò)程被細(xì)菌污染，可以在培養(yǎng)液中添加抗生素，D正確。

故選D。5、A【分析】【分析】

基因工程的基本操作流程：獲取目的基因→構(gòu)建表達(dá)載體→導(dǎo)入受體細(xì)胞→得到轉(zhuǎn)基因生物→目的基因檢測(cè)與鑒定。

【詳解】

首先用相同的限制性核酸內(nèi)切酶分別切割目的基因和載體DNA；使目的基因和載體DNA的兩端形成相同的粘性末端。然后用DNA連接酶將目的基因和載體DNA連接在一起，形成表達(dá)載體。因此，構(gòu)建表達(dá)載體需要限制酶和DNA連接酶，A正確；由于受精卵的全能性最高，可以發(fā)育成完整的動(dòng)物個(gè)體，因此常以受精卵為受體細(xì)胞，B錯(cuò)誤；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常采用顯微注射法，C錯(cuò)誤；可用抗原-抗體雜交來(lái)檢測(cè)受體細(xì)胞是否含生長(zhǎng)激素，二苯胺常用于鑒定DNA和硝酸鹽，D錯(cuò)誤。故選A。

【點(diǎn)睛】

識(shí)記基因工程的基本操作程序是解答本題的關(guān)鍵。6、C【分析】【分析】

胚胎工程指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)；如體外受精；胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞等技術(shù)。胚胎移植時(shí)，供受體需要處于相同的生理狀態(tài)；胚胎分割產(chǎn)生的胚胎基因型相同。

【詳解】

A；用促性腺激素對(duì)供體羊進(jìn)行超數(shù)排卵處理；可以獲得較多的卵母細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；采集到的精子需要在獲能溶液中進(jìn)行獲能培養(yǎng)；B錯(cuò)誤；

C；人工受精后；若觀察到兩個(gè)極體或雌雄原核，說(shuō)明卵子已經(jīng)完成了受精，C正確；

D；胚胎分割后獲得的胚胎基因型相同；D錯(cuò)誤。

故選C。二、多選題(共9題，共18分)7、A:B:D【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)；過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

【詳解】

A；一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問(wèn)題；應(yīng)該馬上停止實(shí)驗(yàn)，并銷毀重組生物，避免對(duì)安全造成影響，A正確；

B；應(yīng)該嚴(yán)格地選擇轉(zhuǎn)基因植物的目的；使用安全基因?yàn)槟康幕?，以避免產(chǎn)生對(duì)人類有害的物質(zhì)，B正確；

C；轉(zhuǎn)基因生物有可能產(chǎn)生新的生物；可能會(huì)對(duì)生物多樣性構(gòu)成威脅，也可能會(huì)影響生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性，C錯(cuò)誤；

D；外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機(jī)的；有可能會(huì)出現(xiàn)意想不到的后果，因此存在安全性問(wèn)題，D正確；

故選ABD。

【點(diǎn)睛】8、A:C:D【分析】【分析】

1；分離各種細(xì)胞器常用差速離心法。

2；植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中；誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有物理法（離心、振動(dòng)、電刺激）和化學(xué)法（聚乙二醇）；誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法包括物理法（離心、振動(dòng)、電刺激）、化學(xué)法（聚乙二醇）和生物法（滅活的病毒）。

3；驗(yàn)證DNA分子復(fù)制方式為半保留復(fù)制的實(shí)驗(yàn)需要采用密度梯度離心法。

4；噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)中攪拌的目的是將噬菌體的蛋白質(zhì)外殼與被侵染的細(xì)菌分開；離心的目的是讓上清液中析出質(zhì)量較輕的噬菌體蛋白質(zhì)外殼，而質(zhì)量較重的大腸桿菌則分布在沉淀物中。

【詳解】

A；證明DNA分子半保留復(fù)制中；采用了密度梯度離心法，A錯(cuò)誤；

B；誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合的方法有離心、振動(dòng)、電刺激等；B正確；

C；分離各種細(xì)胞器常用差速離心法；即用不同的離心速度對(duì)細(xì)胞勻漿進(jìn)行離心，分離核糖體比分離葉綠體的轉(zhuǎn)速高，C錯(cuò)誤；

D；噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)中；進(jìn)行離心的目的是讓上清液中析出質(zhì)量較輕的噬菌體的蛋白質(zhì)外殼，而質(zhì)量較重的大腸桿菌（內(nèi)含噬菌體的DNA）則分布在沉淀物中，D錯(cuò)誤。

故選ACD。9、B:C【分析】【分析】

生物體基因的堿基序列保持不變；但基因表達(dá)和表型發(fā)生可遺傳變化的現(xiàn)象，叫作表觀遺傳；除了DNA甲基化，構(gòu)成染色體的組蛋白發(fā)生甲基化；乙?；刃揎椧矔?huì)影響基因的表達(dá)。

【詳解】

A；過(guò)程①中小分子化合物誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞脫分化為iPS細(xì)胞；并未發(fā)生突變，A錯(cuò)誤；

B；MⅡ期卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有促使細(xì)胞核全能性表現(xiàn)的物質(zhì)；故要選用MⅡ期卵母細(xì)胞去除細(xì)胞核，B正確；

C；過(guò)程③為動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程；可使用電融合法誘導(dǎo)兩細(xì)胞融合，C正確；

D；由圖可知；重構(gòu)胚在加入中Kdm4d的mRNA和TSA后，發(fā)育成克隆鼠，而Kdm4d的mRNA表達(dá)產(chǎn)物為組蛋白去甲基化酶，可以使組蛋白去甲基化，TSA為組蛋白脫乙酰酶抑制劑，抑制組蛋白脫乙酰酶的作用，保持組蛋白乙酰化，即組蛋白乙酰化和去甲基化有利于重構(gòu)胚后續(xù)的胚胎發(fā)育過(guò)程，D錯(cuò)誤。

故選BC。10、A:B【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)；取幼齡動(dòng)物的組織，剪碎后，用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸浮液，轉(zhuǎn)入細(xì)胞培養(yǎng)液中進(jìn)行的培養(yǎng)是原代培養(yǎng)；當(dāng)細(xì)胞貼滿瓶壁，在用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸浮液，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中進(jìn)行的是傳代培養(yǎng)。

【詳解】

A；通常將動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)；A正確；

B；從機(jī)體取得細(xì)胞后立即進(jìn)行培養(yǎng)過(guò)程是原代培養(yǎng)；B正確；

C；出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象后；接去下的細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程是傳代培養(yǎng)，C錯(cuò)誤；

D；無(wú)論原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程；細(xì)胞都有在培養(yǎng)基中的懸浮生長(zhǎng)過(guò)程，D錯(cuò)誤。

故選AB。11、A:B:C【分析】【分析】

受精包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段：準(zhǔn)備階段1-精子獲能；剛剛排出的精子，不能立即與卵子受精，必須在雌性動(dòng)物生殖道發(fā)生相應(yīng)的生理變化后，才能獲得受精能力；準(zhǔn)備階段2-卵子的準(zhǔn)備，動(dòng)物排出的可能是初級(jí)卵母細(xì)胞也可能是次級(jí)卵母細(xì)胞，都要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟，達(dá)到減數(shù)第二次分裂中期時(shí)，才具備與精子受精的能力。卵細(xì)胞形成過(guò)程，其中減數(shù)第一次分裂是在雌性動(dòng)物排卵前后完成的，場(chǎng)所在卵巢；減數(shù)第二次分裂是在受精過(guò)程中完成的，場(chǎng)所在輸卵管中。受精作用完成的標(biāo)志：在卵黃膜和透明帶之間的間隙可以觀察到兩個(gè)極體（一個(gè)是第一極體，還有一個(gè)是第二極體）

【詳解】

A；采集到的精子必需經(jīng)過(guò)獲能處理；卵細(xì)胞必需發(fā)育到減數(shù)第二次分裂的中期才具有受精能力，A錯(cuò)誤；

B；排卵就是卵細(xì)胞從卵泡中排出；可能是初級(jí)卵母細(xì)胞或次級(jí)卵母細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

C；卵細(xì)胞形成時(shí)的分裂過(guò)程在卵巢和輸卵管中完成；C錯(cuò)誤；

D；在卵黃膜和透明帶之間觀察到兩個(gè)極體；說(shuō)明卵細(xì)胞已經(jīng)完成了受精，這是判斷卵細(xì)胞是否受精的重要標(biāo)志，D正確。

故選ABC。

【點(diǎn)睛】12、A:B:D【分析】【分析】

根據(jù)題意和圖示分析可知：甲細(xì)胞內(nèi)同源染色體分離；處于減數(shù)第一次分裂后期，細(xì)胞質(zhì)均等分裂，為初級(jí)精母細(xì)胞；乙細(xì)胞不含同源染色體，著絲點(diǎn)已分裂，處于減數(shù)第二次分裂后期，細(xì)胞質(zhì)不均等分裂，為次級(jí)卵母細(xì)胞。丙表示受精作用。

【詳解】

A；據(jù)分析可知；圖甲細(xì)胞為初級(jí)精母細(xì)胞，為雄性個(gè)體的減數(shù)分裂過(guò)程，不可能在雌性動(dòng)物的卵巢中出現(xiàn)，A錯(cuò)誤；

B；基因重組包括減數(shù)第一次分裂分裂前期的交叉互換和減數(shù)第一次分裂后期的自由組合型；圖中只有甲可以發(fā)生基因重組，B錯(cuò)誤；

C；據(jù)圖丙可知；線粒體來(lái)自母方，含有少量DNA，所以母方提供的遺傳物質(zhì)更多，C正確；

D；防止多精入卵的兩道屏障為透明帶反應(yīng)和卵黃膜反應(yīng)；D錯(cuò)誤。

故選ABD。13、A:B:C:D【分析】【分析】

PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)，所利用的原理為DNA分子的復(fù)制，因此PCR技術(shù)一般用于基因擴(kuò)增。PCR技術(shù)：①概念：PCR全稱為整合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；②DNA復(fù)制條件：模板DNA，四種脫氧核苷酸，一對(duì)引物，熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；③方式：以指數(shù)的方式機(jī)增，即約2n：④過(guò)程：高溫變性；低溫復(fù)性、中溫延伸。

【詳解】

A；對(duì)牛胚胎進(jìn)行性別鑒定時(shí)；宜取囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞，A正確；

B；本實(shí)驗(yàn)利用PCR技術(shù)進(jìn)行DNA復(fù)制；因此需要設(shè)計(jì)2對(duì)引物，PCR過(guò)程一般是預(yù)變性→變性復(fù)性→延伸，B正確；

C；在胚胎移植前需要對(duì)受體牛進(jìn)行同期發(fā)情處理；以保證胚胎移植入相同的生理環(huán)境，C正確；

D；題中利用PCR技術(shù)同時(shí)擴(kuò)增Y染色體上雄性決定基因(SRY)和常染色體上的酪蛋白基因（CSNISI）并進(jìn)行電泳；雌性個(gè)體沒(méi)有SRY，只有一條帶，雄性有兩條帶，因此根據(jù)結(jié)果可以確定A為CSN1S1，1、2、4是雌性，3、5是雄性，D正確。

故選ABCD。14、B:C:D【分析】【分析】

1；胚胎干細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性；在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造。

2；識(shí)圖分析可知；圖中①為早期胚胎的囊胚階段，②為胚胎干細(xì)胞在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，如在飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)，③表示在胚胎干細(xì)胞體外誘導(dǎo)，分裂、分化形成各種組織和器官，培育出各種人造組織器官的過(guò)程。

【詳解】

A.圖中③過(guò)程為干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化；通過(guò)該過(guò)程可定向培育人造組織器官，用于器官移植，解決供體器官不足和移植后免疫排斥的問(wèn)題，A正確；

B.圖中途徑②沒(méi)有發(fā)生細(xì)胞分化；所以研究細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡的機(jī)理可選擇圖中③途徑，B錯(cuò)誤；

C.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，5%CO2的主要作用是調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH；C錯(cuò)誤；

D.②過(guò)程胚胎干細(xì)胞只分裂而不分化的培養(yǎng)；可在飼養(yǎng)層細(xì)胞上進(jìn)行，飼養(yǎng)層細(xì)胞可作為干細(xì)胞分裂；增殖的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞，也可在添加抑制因子的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，使干細(xì)胞只分裂而不分化，D錯(cuò)誤。

故選BCD。15、A:B:D【分析】【分析】

臍帶血中的干細(xì)胞分化程度低；全能性較高，能分裂分化形成多種組織，因此可以用干細(xì)胞培育出人體需要的器官用來(lái)移植治病，如果是自體器官移植不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，所以自體移植后不需要用免疫抑制藥物，但用臍帶血中的干細(xì)胞不能治療所有疾病。

【詳解】

A；用干細(xì)胞培育出人體需要的器官用來(lái)移植治??；不需要激發(fā)細(xì)胞的所有全能性，因?yàn)榕囵B(yǎng)的目標(biāo)是特定的器官，A錯(cuò)誤；

B；用臍帶血中的干細(xì)胞不能治療這個(gè)孩子所有的疾?。蝗鐐魅拘约膊〉?，B錯(cuò)誤；

C；如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官；需要用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，然后發(fā)育成器官用于移植，C正確；

D；自體器官移植不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；因此，如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官，不需要給他使用免疫抑制藥物，D錯(cuò)誤。

故選ABD。

【點(diǎn)睛】三、填空題(共9題，共18分)16、略

【分析】（1）在基因工程的操作中的“分子手術(shù)刀”即切割DNA的是限制核酸內(nèi)切酶簡(jiǎn)稱限制酶；

（2）在基因工程的操作中的“分子縫合針”是DNA連接酶；

（3）基因工程中最常用的運(yùn)載體是質(zhì)粒；

（4）人的基因在牛體內(nèi)能表達(dá)；說(shuō)明人和牛共用一套遺傳密碼。

【考點(diǎn)定位】基因工程的基本工具【解析】限制酶DNA連接酶質(zhì)粒共用一套遺傳密碼17、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎；或者通過(guò)體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)，其中提供胚胎的個(gè)體稱為“供體”，接受胚胎的個(gè)體稱為“受體”。(供體為優(yōu)良品種，作為受體的雌性動(dòng)物應(yīng)為常見或存量大的品種)，如轉(zhuǎn)基因、核移植，或體外受精等任何一項(xiàng)胚胎工程技術(shù)所生產(chǎn)的胚胎，都必須經(jīng)過(guò)胚胎移植技術(shù)才能獲得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意義：大大縮短了供體本身的繁殖周期；充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖能力。

【詳解】

（1）體外受精前要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理；使其具有受精能力。

（2）要使動(dòng)物超數(shù)排卵；利用促性腺激素；需將卵子培養(yǎng)到MII中期后進(jìn)行體外受精。

（3）步驟甲是人工受精；將受精卵移入受體母牛，進(jìn)行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前應(yīng)鑒定胚胎中與有關(guān)的優(yōu)良基因。

（4）胚胎移植實(shí)現(xiàn)的前提是受體母牛對(duì)移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。

【點(diǎn)睛】

胚胎移植的實(shí)質(zhì)：早期胚胎在生理狀態(tài)相同的條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。【解析】精子獲能促性腺M(fèi)Ⅱ中期人工受精胚胎移植優(yōu)良性狀受體母牛對(duì)移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】取代修補(bǔ)19、略

【分析】【分析】

1；神經(jīng)元由細(xì)胞體和突起兩部分組成；突起又分為樹突和軸突，樹突短而多，軸突長(zhǎng)而少。神經(jīng)元的軸突末梢經(jīng)過(guò)多次分支，最后每個(gè)小枝末端膨大，呈杯狀或球狀，叫做突觸小體。

2；目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

3；人工種子就是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料；經(jīng)過(guò)人工薄膜包裝得到的種子，在適宜條件下同樣能夠萌發(fā)長(zhǎng)成幼苗。

【詳解】

（1）神經(jīng)元由細(xì)胞體和突起兩部分組成；突起又分為樹突和軸突，樹突短而多，軸突長(zhǎng)而少；軸突末端的多次分支后，每個(gè)小枝末端膨大的部分稱為突觸小體。

（2）抗體可以與病原體結(jié)合；從而抑制病原體的繁殖或?qū)θ梭w細(xì)胞的黏附。

（3）檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA可采用分子雜交技術(shù)。

（4）人工種子就是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體；不定芽、頂芽、腋芽為材料；經(jīng)過(guò)人工包膜包裝得到的種子，可以在適宜條件下同樣能夠萌發(fā)長(zhǎng)成幼苗．植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)就是克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，或者是打破了生殖隔離。

（5）胰島素能促進(jìn)組織細(xì)胞加速攝?。焕煤蛢?chǔ)存葡萄糖；從而使血糖水平降低。

【點(diǎn)睛】

本題考查教材基礎(chǔ)知識(shí)，旨在考查考生的理解、記憶能力，要求考生熟記關(guān)鍵語(yǔ)句，并能運(yùn)用專業(yè)術(shù)語(yǔ)準(zhǔn)確作答?！窘馕觥客挥|小體對(duì)人體細(xì)胞的黏附放射性同位素）標(biāo)記的目的基因胚狀體、不定芽、腋芽、頂芽攝取、利用和儲(chǔ)存20、略

【分析】【分析】

分析圖1：表示多年前感染EV并已康復(fù)的甲；乙兩人的血液中抗EV-GP抗體的水平。根據(jù)曲線圖可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對(duì)照組。

分析圖2：表示單抗與病毒混合后病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率。根據(jù)柱形圖可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率明顯低于其他組別。

【詳解】

（1）由題意可知；新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為抗原刺激淋巴細(xì)胞，使機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，人細(xì)胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。

（2）免疫系統(tǒng)對(duì)被新冠病毒感染后肺細(xì)胞強(qiáng)烈攻擊引發(fā)肺炎；此時(shí)可通過(guò)適度使用免疫抑制劑對(duì)病人進(jìn)行治療，使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）由圖1可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對(duì)照組，故應(yīng)選取甲的B細(xì)胞用以制備單克隆抗體。

（4）由圖2可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ后，病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率較低。因此抑制效果最好的單抗是Ⅲ。

（5）患者康復(fù)后一段時(shí)間；若再次受到該病毒的攻擊，機(jī)體內(nèi)相應(yīng)的記憶細(xì)胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖解，考查病毒、單克隆抗體的制備等，要求考生識(shí)記病毒的結(jié)構(gòu)，明確病毒沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)；識(shí)記單克隆抗體的制備過(guò)程，掌握其優(yōu)點(diǎn)及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題【解析】①.抗原②.特異③.糖蛋白（或蛋白質(zhì)）④.免疫抑制劑⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.記憶21、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：①表示染色體復(fù)制；②是減數(shù)分裂，③是精細(xì)胞變形為精子過(guò)程，④是受精作用；

2；哺乳動(dòng)物精子和卵子發(fā)生的不同點(diǎn)：（1）精子的減數(shù)兩次分裂是連續(xù)的；場(chǎng)所唯一（MⅠ和MⅡ的場(chǎng)所都是睪丸）；而卵子的兩次分裂是不連續(xù)的，場(chǎng)所不唯一，（MⅠ場(chǎng)所在卵巢，MⅡ場(chǎng)所在輸卵管中）；（2）精子和卵子發(fā)生的時(shí)間不同：精子的發(fā)生是從初情期一直到生殖機(jī)能衰退；多數(shù)哺乳動(dòng)物卵子的形成和在卵巢內(nèi)的貯備是胎兒出生前完成的；MⅠ是在雌性動(dòng)物排卵前后完成的，MⅡ是在受精過(guò)程中完成的。

【詳解】

（1）精子變形③過(guò)程中精子頭部的頂體是由高爾基體發(fā)育來(lái)的；④過(guò)程是受精過(guò)程，在輸卵管內(nèi)完成。

（2）在④過(guò)程中發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放頂體酶，溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)和透明帶，透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)是阻止多精入卵的兩道防線。

（3）雄性動(dòng)物精子產(chǎn)生的時(shí)期是初情期；雌性動(dòng)物卵泡細(xì)胞的形成是在胚胎期性別分化以后完成的，這是精子和卵子在發(fā)生上的重要區(qū)別。

（4）初級(jí)卵母細(xì)胞進(jìn)行減數(shù)第一次分裂是在排卵前后時(shí)期完成的；減數(shù)第二次分裂是在受精作用過(guò)程中完成的。

【點(diǎn)睛】

本題考查卵細(xì)胞的形成過(guò)程和受精作用等相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生識(shí)記相關(guān)細(xì)節(jié)和解決問(wèn)題的能力?！窘馕觥扛郀柣w輸卵管透明帶反應(yīng)卵細(xì)胞膜反應(yīng)初情期胚胎期性別分化以后排卵前后受精作用22、略

【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)，指從植物體分離出符合需要的組織；器官或細(xì)胞，原生質(zhì)體等，通過(guò)無(wú)菌操作，在無(wú)菌條件下接種在含有各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。

【詳解】

1；基因工程又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)；是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來(lái)源的基因按預(yù)先設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品的遺傳技術(shù)。

2；胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎；或者通過(guò)體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。

3；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖，其原理是細(xì)胞增殖。

4；植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)；指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細(xì)胞，原生質(zhì)體等，通過(guò)無(wú)菌操作，在無(wú)菌條件下接種在含有各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程概念、胚胎移植、動(dòng)植物細(xì)胞培養(yǎng)等相關(guān)知識(shí)，意在考察考生對(duì)知識(shí)點(diǎn)的理解掌握程度?！窘馕觥竣?又叫基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)②.又稱受精卵移植，是指將雌性動(dòng)物體內(nèi)的的早期胚胎，或者通過(guò)體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀況相同的其他雌性動(dòng)物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)③.植物細(xì)胞全能性、細(xì)胞增殖23、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎；或者通過(guò)體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)，其中提供胚胎的個(gè)體稱為“供體”，接受胚胎的個(gè)體稱為“受體”。(供體為優(yōu)良品種，作為受體的雌性動(dòng)物應(yīng)為常見或存量大的品種)，如轉(zhuǎn)基因、核移植，或體外受精等任何一項(xiàng)胚胎工程技術(shù)所生產(chǎn)的胚胎，都必須經(jīng)過(guò)胚胎移植技術(shù)才能獲得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意義：大大縮短了供體本身的繁殖周期；充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖能力。

【詳解】

（1）體外受精前要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理；使其具有受精能力。

（2）要使動(dòng)物超數(shù)排卵；利用促性腺激素；需將卵子培養(yǎng)到MII中期后進(jìn)行體外受精。

（3）步驟甲是人工受精；將受精卵移入受體母牛，進(jìn)行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前應(yīng)鑒定胚胎中與有關(guān)的優(yōu)良基因。

（4）胚胎移植實(shí)現(xiàn)的前提是受體母牛對(duì)移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。

【點(diǎn)睛】

胚胎移植的實(shí)質(zhì)：早期胚胎在生理狀態(tài)相同的條件下空間位置的轉(zhuǎn)移?！窘馕觥烤荧@能促性腺M(fèi)Ⅱ中期人工受精胚胎移植優(yōu)良性狀受體母牛對(duì)移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。四、判斷題(共5題，共30分)24、A【分析】【詳解】

由于存在防止多精入卵的兩道屏障，故一個(gè)卵細(xì)胞一般只能同一個(gè)精子結(jié)合，形成受精卵，這句話是正確的。25、A【分析】【詳解】

受精過(guò)程為：頂體反應(yīng)→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應(yīng)）→卵細(xì)胞膜反應(yīng)（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始。精子入卵后形成雄原核，同時(shí)被激活的卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核，雄、雌原核充分發(fā)育后，相向移動(dòng)，彼此靠近，核膜消失，形成受精卵，故此說(shuō)法正確。

故正確。26、B【分析】【詳解】

受精包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段；在自然狀態(tài)下，哺乳動(dòng)物的受精在輸卵管內(nèi)完成。

故錯(cuò)誤。27、B【分析】【分析】

據(jù)圖分析；圖中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原腸胚。圖B中1是滋養(yǎng)層，2是內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，3是透明帶，4是囊胚腔；圖C中5是外胚層，6是滋養(yǎng)層，7是原腸腔，8是內(nèi)胚層。

【詳解】

（1）從A到C的過(guò)程中細(xì)胞均需要消耗能量；故胚胎中有機(jī)物的含量均減少，（1）正確。

（2）桑椹胚之前所有細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能；屬全能細(xì)胞，故A時(shí)期胚胎中的細(xì)胞都是全能細(xì)胞，囊胚期時(shí)細(xì)胞出現(xiàn)分化，滋養(yǎng)層細(xì)胞不是全能細(xì)胞，（2）錯(cuò)誤。

（3）胚胎移植必須使用處于桑椹胚或囊胚時(shí)期的胚胎；處于A或B時(shí)期的胚胎，（3）錯(cuò)誤。

（4）圖示過(guò)程細(xì)胞通過(guò)有絲分裂增殖；有絲分裂過(guò)程中可能發(fā)生突變，遺傳物質(zhì)可能會(huì)發(fā)生改變，（4）正確。

故分別為√、×、×、√。28、B【分析】【詳解】

生態(tài)系統(tǒng)的恢復(fù)力穩(wěn)定性是有一定限度的，導(dǎo)致了生態(tài)工程的局限性，使生態(tài)工程并不能解決所有的污染、破壞問(wèn)題，因此不能走“先污染、破壞，后治理”的老路，故錯(cuò)誤。五、非選擇題(共2題，共18分)29、略

【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：（1）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。（3）溫度和PH。（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的PH）。

【詳解】

（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，除了對(duì)培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理外，還可以通過(guò)在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素等方式防止雜菌污染；在培養(yǎng)液中加入適量的NaHCO3溶液；可以調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH；在使用合成培養(yǎng)基時(shí)通常需加入血清；血漿等天然成分，是因?yàn)檠搴脱獫{中可能含有未知的細(xì)胞所需的物質(zhì)。

（2）在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中；由于動(dòng)物組織塊中的細(xì)胞彼此靠在一起,限制了細(xì)胞的生長(zhǎng)和繁殖，因此需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理剪碎的動(dòng)物組織以獲得單個(gè)細(xì)胞，進(jìn)而制成細(xì)胞懸浮液。

（3）單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的；雜交瘤細(xì)胞是由已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成，其中已免疫的B淋巴細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞,不能進(jìn)行細(xì)胞分裂，因此其經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后不能存活。

【點(diǎn)睛】

解答本題的關(guān)鍵是識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程以及需要滿足的條件，掌握動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和制備單克隆抗體的過(guò)程，進(jìn)而利用所學(xué)知識(shí)結(jié)合題干要求分析答題?！窘馕觥吭谂囵B(yǎng)液中添加一定量的抗生素調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH血清和血漿中可能含有未知的細(xì)胞所需的物質(zhì)（3分）單個(gè)細(xì)胞動(dòng)物組織塊中的細(xì)胞彼此靠在一起,限制了細(xì)胞的生長(zhǎng)和繁殖雜交瘤細(xì)胞已免疫的B淋巴細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞,不能進(jìn)行細(xì)胞分裂30、略

【分析】【分析】

據(jù)圖分析；圖示涉及到的技術(shù)有基因工程和核移植技術(shù)，先將HAS基因與質(zhì)粒結(jié)合形成重組質(zhì)粒，再將重組質(zhì)粒導(dǎo)入牛胎兒成纖維細(xì)胞；接著將導(dǎo)入目的基因的成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核取出，與去核卵母細(xì)胞重組形成重組細(xì)胞，培養(yǎng)成早期胚胎后移植到代孕母牛體內(nèi)，最終獲得了轉(zhuǎn)基因母牛。

【詳解】

（1）由于10代以內(nèi)的細(xì)胞能保持正常的二倍體核型；因此圖示供核的牛胎兒成纖維細(xì)胞通常選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞。

（2）在PCR技術(shù)中；DNA聚合酶只能從核苷酸鏈的3’端開始延伸DNA鏈，用兩種引物才能確保DNA兩條鏈同時(shí)被擴(kuò)增，因此圖中要利用PCR技術(shù)擴(kuò)增SRY基因，應(yīng)該選擇的引物是引物Ι和引物IV。PCR反應(yīng)體系中，除了有兩種引物，還應(yīng)該有緩沖液；模板DNA、dNTP（原料）和熱穩(wěn)定DNA聚合酶等成分。該實(shí)驗(yàn)是通過(guò)乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人血清白蛋白，因此最終獲得的是轉(zhuǎn)HSA基因母牛。

（3）在胚胎移植操作中；應(yīng)對(duì)供體和受體母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理，以使供體和受體處于相同的生理狀態(tài)，使胚胎在移植前后所處的生理環(huán)境保持一致。由此可見，胚胎移植的實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。

【點(diǎn)睛】

解答本題的關(guān)鍵是識(shí)記基因工程、核移植技術(shù)、PCR技術(shù)等知識(shí)點(diǎn)，分析題圖弄清楚重組細(xì)胞的目的基因、細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)的來(lái)源，明確PCR技術(shù)的原理是雙鏈DNA的復(fù)制，需要引物的參與并且需要熱穩(wěn)定性的DNA聚合酶的催化?！窘馕觥渴詢?nèi)的細(xì)胞能保持正常的二倍體核型引物I和引物IV3’端DNA兩條鏈同時(shí)被擴(kuò)增dNTP熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）母同期發(fā)情早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移六、綜合題(共3題，共12分)31、略

【分析】【分析】

據(jù)圖分析：重組Ti質(zhì)粒中鐵結(jié)合蛋白基因稱為目的基因；潮霉素抗性基因?yàn)闃?biāo)記基因；將重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；將開花后未成熟的胚進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，脫分化形成愈傷組織，作為受體細(xì)胞，最終培育形成轉(zhuǎn)基因水稻，過(guò)程中需要生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素進(jìn)行調(diào)節(jié)。

【詳解】

（l）如果基因的脫氧核苷酸序列已知；可以用化學(xué)合成法獲得此目的基因，再用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。

（2）構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程中；通常要用同一種限制酶分別切割質(zhì)粒和含目的基