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關(guān)鍵詞:活細(xì)胞探針,微管,溶酶體,線粒體,飛躍的載體你絕對(duì)不容錯(cuò)過的多彩活細(xì)胞探針活細(xì)胞成像技術(shù)徹底革新了生物學(xué)家研究細(xì)胞、蛋白質(zhì)以及眾多分子之間相互作用和生理過程的方式。與固定細(xì)胞的成像研究中提供的“快照”相比,對(duì)于動(dòng)態(tài)變化的觀察使得人們對(duì)細(xì)胞的運(yùn)作過程的認(rèn)識(shí)更加深入。此外,由于活細(xì)胞成像更不容易引入實(shí)驗(yàn)偽影,它通常能提供比固定細(xì)胞成像更加真實(shí)可靠的信息。然而,目前市面上的但由于目前商業(yè)化的大多數(shù)性能優(yōu)秀的熒光染料(例如Alexa、Atto系列)大多存在以下弊端:它們大多數(shù)具有一定的細(xì)胞毒性;染料短時(shí)間曝光,容易淬滅;大多數(shù)染料與高分辨率顯微鏡(如SIM,TIRF,STORM,PALM)不兼容。在Abbkine技術(shù)團(tuán)隊(duì)的持續(xù)努力下,我們突破了層層困難,不斷精選和優(yōu)化,開發(fā)出了多款不同的活細(xì)胞探針。一、活細(xì)胞微管熒光探針微管蛋白(tubulin)是微管的主要組成部分。這種細(xì)胞內(nèi)圓柱形絲狀結(jié)構(gòu)存在于幾乎所有真核細(xì)胞中。微管在有絲分裂,細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn),鞭毛運(yùn)動(dòng)和細(xì)胞骨架中起結(jié)構(gòu)和移動(dòng)元件的作用。Tubulin是一種異二聚體,由α-微管蛋白和b-微管蛋白組成;兩個(gè)亞基的分子量均為55kDa,具有相當(dāng)大的同源性。研究最多的微管蛋白均已從脊椎動(dòng)物腦中提取分離了出來。通過在免疫熒光顯微鏡中對(duì)微管的觀察,使得研究者能夠觀察到超分子結(jié)構(gòu)形式的蛋白質(zhì)在細(xì)胞中的組織結(jié)構(gòu)。該系列探針是帶有熒光的可以特異性標(biāo)記哺乳動(dòng)物活細(xì)胞中微管的熒光探針,具有較強(qiáng)的水溶性和pH穩(wěn)定性;該探針可實(shí)現(xiàn)活細(xì)胞的標(biāo)記,需注意使用前細(xì)胞密度適宜及Buffer的使用濃度在適用范圍以保證良好的細(xì)胞狀態(tài)。該試劑盒與市售的熒光性能相比:在同等拍攝參數(shù)的HiS-SIM超分辨顯微鏡及Spiningdisk共聚焦顯微鏡成像結(jié)果對(duì)比顯示,它標(biāo)記效果好、抗漂白能力強(qiáng)。經(jīng)過測(cè)試,該系列可在U2OS、Hela、MCF-7、MDA-MB-231等細(xì)胞系中實(shí)現(xiàn)微管特異性標(biāo)記,具有較強(qiáng)的普適性。Fig.1.Abbkine的TraKine?ProLive-cellTubulin-trakerkit(GreenFluorescence)成像效果明亮且清晰,可以觀察到細(xì)胞微管形態(tài)的動(dòng)態(tài)變化。高特異性,低背景,具有完美的熒光穩(wěn)定性。Fig.2.Abbkine的TraKine?ProLive-cellMitochondrionStainingkit(DeepRedFluorescencewithSuperResolution)(15μM)對(duì)活細(xì)胞和固定細(xì)胞染色結(jié)果,這個(gè)結(jié)果顯示細(xì)胞固定對(duì)線粒體標(biāo)記形式幾乎無影響。二、活細(xì)胞溶酶體探針溶酶體(Lysosome)是動(dòng)物細(xì)胞中重要的細(xì)胞器,其存在的完整性與動(dòng)物生理病理均密切相關(guān)。溶酶體是單層膜圍繞、內(nèi)含多種酸性水解酶類的囊泡狀細(xì)胞器,其主要功能是進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)消化,專司分解各種外源和內(nèi)源的大分子物質(zhì)。細(xì)胞內(nèi)的溶酶體具有異質(zhì)性,形態(tài)大小及內(nèi)含的水解酶種類都可能有很大的不同,標(biāo)志酶為酸性磷酸酶。最新研究發(fā)現(xiàn),吞噬體與溶酶體具有雙向信號(hào)功能;溶酶體朝向轉(zhuǎn)運(yùn)囊泡的運(yùn)動(dòng)能力,對(duì)于降解生物大分子而言至關(guān)重要。該系列染料具有的明顯優(yōu)勢(shì)如下:?優(yōu)化的哺乳動(dòng)物活細(xì)胞和固定細(xì)胞溶酶體染色方案,該產(chǎn)品目前已在U2OS,Hela,Cos-7,ARPE等多種細(xì)胞系測(cè)試,均能實(shí)現(xiàn)活細(xì)胞標(biāo)記。如果樣本種類不包含在以上細(xì)胞系,我們可提供針對(duì)特定細(xì)胞系的實(shí)驗(yàn)服務(wù)。?特別適合激光共聚焦顯微鏡(Confocal)及長(zhǎng)時(shí)超分辨率顯微鏡(如SIM,STED,TIRF)下的活細(xì)胞研究,完美用于觀察三維空間內(nèi)的細(xì)胞動(dòng)態(tài)。?專利染料LysOrange?高特異性,低背景,完美的熒光穩(wěn)定性。?幾乎無細(xì)胞毒性。Fig.2.Abbkine的TraKine?ProLive-cellLysosomeStainingkit(OrangeFluorescencewithSuperResolution)對(duì)U2OS細(xì)胞系染色的SIM結(jié)果。此圖說明該試劑盒可以清晰標(biāo)記活細(xì)胞的線粒體結(jié)構(gòu),同時(shí)進(jìn)行超分辨率成像。相關(guān)產(chǎn)品推薦如下:產(chǎn)品名稱貨號(hào)染料Ex/Em(nm)規(guī)格價(jià)格(元)TraKineTMPro活細(xì)胞溶酶體染色試劑盒(綠色熒光)KTC4200490/525nm50T/250T1598/3998TraKineTMPro活細(xì)胞溶酶體染色試劑盒(紅色熒光)KTC4210564/590nm50T/250T1598/3998TraKineTMPro活細(xì)胞微管染色試劑盒(綠色熒光)KTC4100500/520nm50T/250T1598/3998TraKineTMPro活細(xì)胞微管染色試劑盒(紅色熒光)KTC4110652/674nm50T/250T1598/3998活細(xì)胞探針技術(shù)還有很大的發(fā)展空間,將來會(huì)應(yīng)用到更多的實(shí)驗(yàn)領(lǐng)域,在生物行業(yè)發(fā)展中具有舉足輕重的地位,正持續(xù)獲得生物學(xué)家的關(guān)注。abbkine的技術(shù)專家為了給廣大讀者提供學(xué)習(xí)生物知識(shí)的平臺(tái),經(jīng)過不懈努力,將多種高端生物實(shí)驗(yàn)的干貨整理出來,后期陸續(xù)在微信公眾號(hào)中刊登,請(qǐng)廣大熱愛科學(xué)的讀者持續(xù)關(guān)注Abbkine公眾號(hào)。Abbkine專注于蛋白學(xué)和細(xì)胞學(xué)領(lǐng)域,致力于創(chuàng)新和研發(fā)各類抗體、蛋白質(zhì)、分析試劑與試劑盒,以期成為生命科學(xué)研究發(fā)展、藥物研發(fā)等領(lǐng)域的關(guān)鍵推動(dòng)者。我們?yōu)槟峁┑鞍缀兔庖哐芯坑脩糇钕矏鄣漠a(chǎn)品,從免疫學(xué)基礎(chǔ)產(chǎn)品,如蛋白提取定量,到免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)的內(nèi)參標(biāo)簽抗體、一抗及二抗等;細(xì)胞研究用
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