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細(xì)胞工程第一節(jié)細(xì)胞工程一、植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)1.細(xì)胞工程概念:細(xì)胞工程是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué)等多學(xué)科的原理和方法,通過(guò)細(xì)胞器、細(xì)胞或組織水平上的操作,有目的地獲得特定的細(xì)胞、組織、器官、個(gè)體或其產(chǎn)品的一門(mén)綜合性生物工程。(P31)①原理方法:__________、___________和__________;②操作水平:__________、_____或__________;③目的:得特定的_____、_____、_____、個(gè)體或__________;④分類(lèi):____________________、____________________。(一)植物細(xì)胞的全能性1.概念:細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后,仍然具有_______________或_______________的潛能。(P34)2.是否表現(xiàn)出全能性的兩種判斷標(biāo)準(zhǔn):(1)________________________________________。(2)________________________________________。3.判斷以下例子是否表現(xiàn)出了細(xì)胞的全能性(1)利用菊花莖段培養(yǎng)獲得試管苗_____。(2)芽原基的細(xì)胞發(fā)育為芽,葉原基的細(xì)胞發(fā)育為葉_____。(3)受精卵發(fā)育成個(gè)體_____。(4)蜜蜂的孤雌生殖中,卵細(xì)胞直接發(fā)育成雄蜂_____。(5)造血干細(xì)胞可分化形成多種血細(xì)胞_____。(6)通過(guò)花藥離體培養(yǎng),獲得單倍體幼苗_____。(7)胚胎干細(xì)胞可分化發(fā)育成為各種組織器官的細(xì)胞_____。(8)種子發(fā)育成完整植株_____。4.細(xì)胞具有全能性的原因(物質(zhì)基礎(chǔ)):_____________________________________________________________________________________________________。5.生物體生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中細(xì)胞不表現(xiàn)全能性的原因(不離體的細(xì)胞無(wú)法表現(xiàn)出全能性的原因):______________________________________________________________________________________________________________________。(P34)6.是不是所有的活細(xì)胞都具有全能性?__________________________________________________________________。7.細(xì)胞具有的全能性一定能表現(xiàn)出來(lái)嗎?_____________________________________________。8.比較一般情況下下列細(xì)胞全能性的大?。ㄌ?lt;/>)(1)受精卵_____生殖細(xì)胞_____體細(xì)胞(2)分化程度低的細(xì)胞_____分化程度高的細(xì)胞、(3)分裂能力強(qiáng)的細(xì)胞_____分裂能力弱的細(xì)胞(4)植物細(xì)胞_____動(dòng)物細(xì)胞(5)幼嫩的細(xì)胞_____衰老的細(xì)胞(二)植物組織培養(yǎng)技術(shù)1.植物組織培養(yǎng)概念:將_____的植物器官、組織或細(xì)胞等,培養(yǎng)在__________上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)其形成__________的技術(shù)。(P35)2.離體培養(yǎng)的植物器官、組織或細(xì)胞被稱(chēng)為_(kāi)_________。(P35)3.植物組織培養(yǎng)的原理:____________________。植物組織培養(yǎng)的生殖方式:__________。植物組織培養(yǎng)的分裂方式:__________。菊花植物組織培養(yǎng)1.菊花植物組織培養(yǎng)的原理(1)植物細(xì)胞一般具有__________;(P35)(2)脫分化:在一定的_____和_____等條件的誘導(dǎo)下,讓_____分化的細(xì)胞經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)后,失去其特有的_____和_____,轉(zhuǎn)變成_____分化細(xì)胞的過(guò)程。結(jié)果:_____。*愈傷組織的特點(diǎn):_______________。(P35)一般不需要光照。此過(guò)程中涉及的生命活動(dòng)只有__________(有絲分裂),沒(méi)有__________。(3)再分化:脫分化產(chǎn)生的__________,在一定的培養(yǎng)條件下,再分化出_______________,進(jìn)而形成完整的小植株。(P35)需要給予適當(dāng)時(shí)間和強(qiáng)度的光照,誘導(dǎo)葉綠素的合成,使試管苗能夠進(jìn)行光合作用。此過(guò)程中涉及的生命活動(dòng)既有__________(有絲分裂),又有__________。再分化實(shí)質(zhì):____________________。(4)激素的作用:植物激素中__________和_______________是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵激素。它們的_____、_____等都會(huì)影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向;生長(zhǎng)素用量與細(xì)胞分裂素用來(lái)的比值結(jié)果比值高比值低比值適中2.選材:_______________________________________________________。原因:_______________________________________________________。3.若培養(yǎng)物取自植物的幼莖、葉片等含有葉綠體的部位,愈傷組織中是否會(huì)含有葉綠體?為什么?_______________________________________________________________________________________________________________________________。4.植物組織培養(yǎng)中細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的條件(1)____________________。(2)___________________。(3)_______________。(4)__________________________________。(5)_________________________。5.為什么一定要離體才能表現(xiàn)出全能性?_____________________________________________________________________________________________________________________________。6.如何控制嚴(yán)格的無(wú)菌條件?(1)用______________________對(duì)手、超凈工作臺(tái)、外植體進(jìn)行消毒,對(duì)外植體處理還需要質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%左右的次氯酸鈉溶液,清洗外植體需要使用__________。(2)對(duì)培養(yǎng)基和器械進(jìn)行_____;(3)接種操作必須在_______________進(jìn)行。7.適宜的培養(yǎng)條件包括那些?①_____________________________________________。②_____________________________________________。8.一定的營(yíng)養(yǎng)條件如何保證?____________________________________________________________________。9.培養(yǎng)基組成(1)_______________(水和無(wú)機(jī)鹽),(2)_______________(蔗糖、氨基酸、維生素),(3)特定濃度和比例的_____(主要是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素)。蔗糖的作用:___________________________________。培養(yǎng)基滅菌方法為:________________________________________。10.操作流程(1)外植體的消毒:將_____沖洗后的外植體用_____消毒30s,用_____清洗2~3次后,再用_______________處理30min,用_____清洗2~3次。(P36)若想縮短次氯酸鈉溶液處理時(shí)間應(yīng)___________________________________。(2)外植體的分割:用無(wú)菌濾紙吸去表面的水分,用解剖刀將外植體切成0.5~1cm長(zhǎng)的小段。(P36)大小應(yīng)_____。(3)接種:在__________旁,并且實(shí)驗(yàn)中使用的培養(yǎng)基和所有的器械及每次使用后的器械都要_____,將外植體的__________插入_______________的培養(yǎng)基中。用封口膜或瓶蓋封蓋瓶口,并在培養(yǎng)瓶上做好標(biāo)記。(P36)接種時(shí)注意外植體的方向,__________。(4)培養(yǎng):將接種了外植體的錐形瓶或植物組織培養(yǎng)瓶置于18~22℃的_____中培養(yǎng)。定期觀察和記錄__________的生長(zhǎng)情況。(P37)誘導(dǎo)愈傷組織期間一般__________光照,在后續(xù)的培養(yǎng)過(guò)程中,每日需要給予_______________的光照。(5)轉(zhuǎn)移培養(yǎng)(再分化過(guò)程):培養(yǎng)15-20d后,將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到__________的培養(yǎng)基上。長(zhǎng)出_____后,再將其轉(zhuǎn)接到__________的培養(yǎng)基上,進(jìn)一步誘導(dǎo)形成試管苗。(P37)(6)移栽:試管苗不可以直接移栽入土,需先打開(kāi)封口膜或瓶蓋,讓試管苗在培養(yǎng)箱內(nèi)生長(zhǎng)幾日,將試管苗移植到消過(guò)毒的_______________上,壯苗后再移栽入土。(P37)11.為什么整個(gè)過(guò)程要保證無(wú)菌操作?____________________________________________________________________。12.整個(gè)過(guò)程中使用的培養(yǎng)基中是一成不變的嗎?__________。____________________________________________________________________。13.以上培養(yǎng)基中,生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素的比值大小是如何變化的?__________________________________________________。14.接種后,外植體被污染的可能原因:(1)___________________________________。(2)________________________________________。(3)_____________________________________________。15.若想探究生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的使用比例對(duì)植物組織培養(yǎng)的影響,則應(yīng)如何設(shè)計(jì)對(duì)照實(shí)驗(yàn)?______________________________。_________________________________________________________________;_________________________________________________________________;_________________________________________________________________。(三)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)1.用傳統(tǒng)的有性雜交方法能得到雜種后代嗎?為什么?_______________________________________________________。2.植物體細(xì)胞雜交的概念:將__________的植物體細(xì)胞,在一定條件下融合成__________,并把雜種細(xì)胞培育成__________的技術(shù)。(P38)3.植物體細(xì)胞雜交的主要步驟:_______________和_______________。(P38)(1)在進(jìn)行體細(xì)胞雜交之前,必須先去除細(xì)胞壁:用____________________去除植物細(xì)胞壁,獲得原生質(zhì)體。(P37)去壁原因:__________________________________________________。(P36)(2)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法(P37)①物理法:__________法、__________法等。②化學(xué)法:_______________融合法、____________________融合法等。(3)細(xì)胞融合完成的標(biāo)志*:____________________。植物體細(xì)胞雜交完成的標(biāo)志:_________________________。(4)再生出細(xì)胞壁的相關(guān)的細(xì)胞器:_________________________。(5)驗(yàn)證再生出新壁的實(shí)驗(yàn):___________________________________。4.纖維素酶和果膠酶的酶溶液中一般加入一定濃度的無(wú)機(jī)鹽離子和甘露醇,試分析原因?___________________________________________________________________。5.植物體細(xì)胞雜交的原理:________________________________________。6.植物體細(xì)胞雜交的生殖方式:__________。7.植物體細(xì)胞雜交的分裂方式:__________。8.植物體細(xì)胞雜交的涉及的可遺傳變異類(lèi)型:_______________。9.獲得的所有細(xì)胞一定是需要的雜交細(xì)胞嗎?________________________________________________________________________________。10.植物體細(xì)胞雜交的意義:打破__________,實(shí)現(xiàn)_____雜交育種,培育植物新品種等方面展示出獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。(P38)11.雜種植株包含兩個(gè)物種的全部遺傳物質(zhì),各種基因都包含在內(nèi),卻未按照人們的要求表現(xiàn)出親本所有的性狀,例如“番茄-馬鈴薯”并沒(méi)有地上結(jié)番茄,地下長(zhǎng)馬鈴薯,這是為什么?(P36)_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。植物細(xì)胞工程的應(yīng)用1.植物細(xì)胞工程的應(yīng)用包括____________________、_______________________、___________________________________。(P39--P41)(一)植物繁殖的新途徑1.植物繁殖的新途徑包括__________(也叫__________)和_____________。(P39)2.快速繁殖(1)快速繁殖概念:用于快速繁殖優(yōu)良品種的_______________技術(shù)。(P39)(2)優(yōu)點(diǎn):____________________________________________________________;________________________________________;可實(shí)現(xiàn)工廠化生產(chǎn)。(P39)注意:扦插、壓條、嫁接等__________微型繁殖技術(shù)。2.作物脫毒(1)適用范圍:_____________________________________________。(2)進(jìn)行作物脫毒的原因:_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(P40)(3)外植體選材部位:________________________________________。(P40)(4)選分生區(qū)的原因:________________________________________。(P40)(5)優(yōu)點(diǎn):__________________________________________________。(P40)(6)作物脫毒具體操作過(guò)程:____________________________________________________________________________________________________。(P40)(7)脫毒苗是否不會(huì)再感染病毒?______________________________。(P40)(8)實(shí)例:目前采用__________培養(yǎng)技術(shù)來(lái)脫去病毒,在__________、草莓、甘蔗、菠蘿、香蕉等主要經(jīng)濟(jì)作物上已獲得成功。(P40)(二)作物新品種的培育1.作物新品種的培育包括_______________和_______________。(P40--P41)2.單倍體育種(1)過(guò)程:____________________離體培養(yǎng)(花藥取自二倍體植株)→單倍體植株eq\o(→,\s\up9(染色體加倍))純合子植株。當(dāng)年就能培育出遺傳性狀相對(duì)穩(wěn)定的_____二倍體植株。(P40)(2)優(yōu)點(diǎn)①后代是純合子,能穩(wěn)定遺傳。②極大地縮短了_______________,節(jié)約了大量的人力和物力。=3\*GB3③大多數(shù)單倍體植株可作為進(jìn)行體細(xì)胞誘變育種和研究遺傳突變的理想材料。(P40)(3)為什么大多數(shù)單倍體植株可作為進(jìn)行體細(xì)胞誘變育種和研究遺傳突變的理想材料?___________________________________________________________________________________________________________________。(P40)2.突變體的利用(1)過(guò)程:(2)誘變處理對(duì)象:一般為_(kāi)_________。(3)產(chǎn)生原因:在植物的組織培養(yǎng)過(guò)程中,易受__________和__________(如射線、__________等)的影響而__________。(P41)(4)原理:__________和__________________________

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