2025年上外版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年上外版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷262考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、圖甲是果酒和果醋發(fā)酵的裝置圖；圖乙是果酒和果醋制作過程中發(fā)生的物質(zhì)變化。下列敘述不正確的是（）

A.用甲裝置制作果酒時(shí)，加入酵母菌后，一直關(guān)緊閥a，適時(shí)打開閥b幾秒鐘B.用甲裝置制作果醋時(shí)，閥a要關(guān)閉，閥b要持續(xù)打開C.乙圖中過程②只能發(fā)生在缺氧條件下D.過程③和④都需要氧氣的參與2、下列有關(guān)果酒和果醋制作的敘述，正確的是（）A.發(fā)酵過程中有關(guān)反應(yīng)主要發(fā)生在細(xì)胞外B.發(fā)酵過程中為防止被污染，需要嚴(yán)格滅菌C.將葡萄汁制成果酒和果醋后，有機(jī)物總量減少而種類增加D.制成果酒后再制果醋，只需向裝置中通入無菌空氣3、SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原；在SARS病人康復(fù)后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。研制預(yù)防SARS病毒的疫苗簡要的操作流程如下，有關(guān)敘述正確的是（）

A.步驟①所代表的反應(yīng)過程需要RNA聚合酶B.步驟③和⑤常用的方法分別是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和顯微注射法C.④和⑥表達(dá)S蛋白的過程，所需ATP均來源于線粒體D.可用抗原-抗體雜交法檢測細(xì)胞中是否真正成功表達(dá)了病毒S蛋白4、下列關(guān)于乳酸菌種的選育的敘述，不正確的是（）A.自然選育該菌種費(fèi)時(shí)且盲目性大B.該菌能發(fā)生染色體變異C.采用基因工程的方法可構(gòu)建工程菌D.誘變育種原理的基礎(chǔ)是基因突變5、小鼠單克隆抗體會(huì)使人產(chǎn)生免疫反應(yīng)，科學(xué)家將小鼠抗體上結(jié)合抗原的區(qū)域“嫁接”到人的抗體上，經(jīng)過這樣改造的抗體誘發(fā)免疫反應(yīng)的強(qiáng)度就會(huì)降低很多。下列說法正確的是（）A.對小鼠單克隆抗體的改造屬于細(xì)胞工程的范疇B.對“嫁接”小鼠單克隆抗體的高級(jí)結(jié)構(gòu)的研究是成功的關(guān)鍵C.天然蛋白質(zhì)的產(chǎn)生是由基因→蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)工程的思路是由蛋白質(zhì)→基因D.產(chǎn)生人鼠單克隆抗體的技術(shù)本身是中性的，技術(shù)不會(huì)產(chǎn)生安全性問題評(píng)卷人得分二、多選題(共9題，共18分)6、下列有關(guān)生物技術(shù)引起的安全性和倫理問題的敘述，不正確的是（）A.基因編輯制造嬰兒的行為是不符合倫理道德的B.設(shè)計(jì)試管嬰兒是為了治療疾病，不會(huì)出現(xiàn)負(fù)面影響C.我國禁止生殖性克隆人和有關(guān)人胚胎干細(xì)胞的研究D.世界各國都應(yīng)該禁止在任何情況下生產(chǎn)、儲(chǔ)存和發(fā)展生物武器7、科學(xué)家運(yùn)用基因工程技術(shù)，將人凝血因子基因?qū)肷窖虻氖芫阎校嘤錾窖蛉橄偕锓磻?yīng)器，使山羊乳汁中含有人凝血因子。以下有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.可用顯微注射技術(shù)將含有人凝血因子基因的重組DNA分子導(dǎo)入山羊的受精卵B.在該轉(zhuǎn)基因羊中，人凝血因子存在于乳腺細(xì)胞，而不存在于其他細(xì)胞C.人凝血因子基因開始轉(zhuǎn)錄后，DNA聚合酶以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNAD.科學(xué)家將人凝血因子基因與乳腺蛋白基因重組在一起，從而使人凝血因子基因只在乳腺細(xì)胞中特異表達(dá)8、限制酶BamHⅠ和BglⅡ是兩種常見的工具酶，它們的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)依次為G↓GATCC和A↓GATCT。研究中用BamHⅠ切割DNA獲得目的基因，用BglⅡ切割質(zhì)粒，并連接得到重組質(zhì)粒。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.酶切過程中，需控制好酶濃度、溫度和反應(yīng)時(shí)間等因素B.目的基因經(jīng)BamHⅠ切割后形成的黏性末端是—CTAGC.分別用兩種限制酶切割，保證了目的基因定向插入質(zhì)粒D.經(jīng)兩種酶處理得到的重組質(zhì)粒不能再被這兩種酶所識(shí)別9、生物興趣小組的三位同學(xué)吃冰激凌后有兩人嚴(yán)重腹瀉，他們懷疑冰激凌中大腸桿菌超標(biāo)。衛(wèi)生部門規(guī)定1000mL自來水37℃培養(yǎng)48h后大桿菌菌落數(shù)不能超過3個(gè)，于是他們設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)對此冰激凌進(jìn)行檢測。下列實(shí)驗(yàn)操作，不合理的是（）A.再去小店買一個(gè)同樣品牌的同種冰激凌，然后配制伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基（該培養(yǎng)基可用來鑒別大腸桿菌），滅菌、倒平板B.取10mL剛?cè)诨谋ち枳鳛樵哼M(jìn)行梯度稀釋、稀釋倍數(shù)為1×10～1×105C.取各個(gè)稀釋濃度的冰激凌液各0.lmL，用涂布平板法進(jìn)行接種，每個(gè)濃度涂3個(gè)平板，共培養(yǎng)18個(gè)平板，在適宜溫度下培養(yǎng)48hD.統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目，以菌落數(shù)代表大腸桿菌數(shù)會(huì)導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)結(jié)果比實(shí)際值偏小10、營養(yǎng)缺陷型菌株就是在人工誘變或自發(fā)突變后，微生物細(xì)胞代謝調(diào)節(jié)機(jī)制中的某些酶被破壞，使代謝過程中的某些合成反應(yīng)不能進(jìn)行的菌株。這種菌株能積累正常菌株不能積累的某些代謝中間產(chǎn)物，為工業(yè)生產(chǎn)提供大量的原料產(chǎn)物。以下是實(shí)驗(yàn)人員利用影印法初檢氨基酸缺陷型菌株的過程。下列說法不合理的是（）

A.過程①的接種方法為稀釋涂布平板法，過程②兩種培養(yǎng)基的成分相同B.進(jìn)行過程②培養(yǎng)時(shí)必須先將絲絨布轉(zhuǎn)印至基本培養(yǎng)基上順序不能顛倒C.統(tǒng)計(jì)菌落種類和數(shù)量時(shí)要每隔24h觀察統(tǒng)計(jì)一次，直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定，以防止培養(yǎng)時(shí)間不足導(dǎo)致菌落數(shù)目偏大D.營養(yǎng)缺陷型菌株細(xì)胞代謝調(diào)節(jié)機(jī)制中的某些酶被破壞，可能與核孔復(fù)合體的蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變有關(guān)11、為探究提高“日照藍(lán)莓”品質(zhì)和產(chǎn)量的新途徑，某生物興趣小組以“日照藍(lán)莓”的主要品種——兔眼藍(lán)莓為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行脫毒處理，其技術(shù)路線為“取材→消毒→愈傷組織培養(yǎng)→出芽→生根→移栽”。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.取材時(shí)可選用兔眼藍(lán)莓的芽尖等分生組織作為外植體B.用70%酒精和5%左右次氯酸鈉對外植體消毒時(shí)，要控制好時(shí)間以避免造成傷害C.對分化培養(yǎng)基滅菌前需添加生長素類、細(xì)胞分裂素類和赤霉素類等生長調(diào)節(jié)劑D.脫毒后的兔眼藍(lán)莓果實(shí)體積更大，產(chǎn)量更高，后代個(gè)體中更不易被病毒感染12、北極比目魚中有抗凍基因，其編碼的抗凍蛋白有11個(gè)氨基酸的重復(fù)序列，該序列重復(fù)次數(shù)越多，抗凍能力越強(qiáng)，下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意圖，有關(guān)敘述不正確的是（）

A.過程①獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚基因組測序B.將多個(gè)抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達(dá)的新基因，不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白C.過程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)行篩選D.應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可以檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其表達(dá)13、載體是基因工程中攜帶外源DNA片段(目的基因)進(jìn)入受體細(xì)胞的重要運(yùn)載工具，常見的載體類型主要有基因克隆載體和基因表達(dá)載體。下圖是利用細(xì)菌生產(chǎn)人胰島素的基本流程示意圖，下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.重組載體重組載體B分別是基因克隆載體和基因表達(dá)載體B.載體A和載體B都必須含有限制酶切割位點(diǎn)、復(fù)制原點(diǎn)和標(biāo)記基因C.必須把目的基因插入重組載體A的啟動(dòng)子和終止子之間D.培養(yǎng)細(xì)菌A和細(xì)菌B的培養(yǎng)基在營養(yǎng)成分和功能上沒有明顯差異14、為了獲得抗蚜蟲棉花新品種，研究人員將雪花蓮凝集素基因（GNA）和尾穗莧凝集素基因（ACA）與載體（pBI121）結(jié)合，然后導(dǎo)入棉花細(xì)胞（如下圖所示）。下列操作與實(shí)驗(yàn)?zāi)康南喾氖牵ǎ?/p>

A.用限制酶BsaBⅠ和DNA連接酶處理兩種基因可獲得GNA-ACA融合基因B.用KpnⅠ和XhoⅠ兩種酶處理融合基因和載體可保證基因轉(zhuǎn)錄方向正確C.將棉花細(xì)胞接種在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上可篩選出轉(zhuǎn)基因細(xì)胞D.用PCR技術(shù)可檢測GNA和ACA基因是否導(dǎo)入棉花細(xì)胞中評(píng)卷人得分三、填空題(共7題，共14分)15、選用去核______的原因：卵（母）細(xì)胞______；卵（母）細(xì)胞______。16、平板劃線法是通過____________在_______________培養(yǎng)基表面______________的操作，將__________的菌種______________分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由____________繁殖而來的肉眼可見的_______________，這就是_______________________。稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的______________，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到_____________培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成____________，從而能在培養(yǎng)基表面形成___________________。17、來源：主要是從______中分離純化出來的。18、DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中，二苯胺要___________。19、對于DNA的粗提取而言，就是利用DNA與RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在__________方面的差異，提取DNA，去除雜質(zhì)。（人教P54）20、植物繁殖的新途徑。

微型繁殖：可以高效快速地實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖。

作物脫毒：采用______組織培養(yǎng)來除去病毒（因?yàn)橹参锓稚鷧^(qū)附近的病毒______）

人工種子：以植物組織培養(yǎng)得到的______、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)_____包裝得到的種子。優(yōu)點(diǎn)：完全保持優(yōu)良品種的遺傳特性，______；方便儲(chǔ)藏和運(yùn)輸。

人工種子的結(jié)構(gòu)包括：______、_____和______。21、什么是生物武器？簡述生物武器的危害。__________評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共14分)22、轉(zhuǎn)基因生物可能會(huì)破壞生態(tài)平衡（______）A.正確B.錯(cuò)誤23、胚胎發(fā)育早期，細(xì)胞的數(shù)量不斷增加，胚胎的總體積也增加。()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共6分)24、餐廚垃圾廢液中的淀粉；蛋白質(zhì)、脂肪等微溶性物質(zhì)可以被微生物分解并利用；但由于初期有益微生物數(shù)量相對較少，存在發(fā)酵周期長、效率低等缺點(diǎn)，極易對環(huán)境造成污染。為探究用圓褐固氮菌、巨大芽孢桿菌處理某餐廚垃圾廢液時(shí)，單獨(dú)接種和混合接種的效果差異及最佳接種量比，以制備微生物菌劑，研究者做了如下實(shí)驗(yàn)：

（1）將兩種菌液進(jìn)行不同配比分組處理如下表所示：。編號(hào)R0R1R2R3圓褐固氮菌：巨大芽孢桿菌1：00：11：12：1

將上表菌液分別接種于l00mL________________中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。本實(shí)驗(yàn)還需設(shè)置空白對照，對照組接種________________。

（2）培養(yǎng)3天后測定活菌數(shù)，取一定量菌液用_____________法接種于基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)，該方法包括_____________和____________兩個(gè)操作。進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，可依據(jù)______________對兩種菌進(jìn)行區(qū)分，并選取菌落數(shù)在__________內(nèi)的平板。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖所示，由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知___________________。

25、Hela細(xì)胞系是人工培養(yǎng)具有無限增殖能力的水生瘤細(xì)胞系；在世界各地的相關(guān)實(shí)驗(yàn)室中為研究者提供了相同的研究對象?；卮鹣铝袉栴}：

（1）Hela細(xì)胞源自一位美國婦女的宮頸癌細(xì)胞，目前實(shí)驗(yàn)室中為了進(jìn)步研究Hela細(xì)胞，需進(jìn)行___________(填“原代”或“傳代”)培養(yǎng)。在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，需要用胰蛋白酶，而不用胃蛋白酶的原因是________________________________________________。

（2）某小組為研究葡萄糖饑餓對Hela細(xì)胞生長的抑制情況，其他營養(yǎng)條件適宜，用不同葡萄糖濃度的培養(yǎng)基，培養(yǎng)Hela細(xì)胞24h，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示：。葡萄糖濃度（mmol:L-1）Hela細(xì)胞生長抑制率%056．161．036．301．525．002．016．44

該實(shí)驗(yàn)_____________(填“需要”或“不需要”)另設(shè)對照組。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：葡萄糖濃度與Hela細(xì)胞生長抑制率的關(guān)系是____________________。

（3）體內(nèi)低濃度葡萄糖可_________________癌細(xì)胞的增殖，為腫瘤的限食療法提供理論依據(jù)。Hela細(xì)胞在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，例如，它幫助科學(xué)家首次實(shí)現(xiàn)了人源細(xì)胞與小鼠細(xì)胞融合。細(xì)胞融合技術(shù)的意義是__________________________________________。26、四尾柵藻是一種淡水藻類；繁殖快；適應(yīng)性強(qiáng)，可作為制備生物柴油的重要原料之一。為提高四尾柵藻油脂含量，研究人員將從含油量高的紫蘇中獲得的二酰甘油酰基轉(zhuǎn)移酶基因（DGAT1）與pBI121質(zhì)粒構(gòu)建表達(dá)載體，經(jīng)轉(zhuǎn)化成功獲得高產(chǎn)油脂四尾柵藻，主要研究過程如下圖，其中DGAT1-F（5'-GCATCTAGAATGGCGATCTTGGACTC-3'）和DGAT1-R（5'-CGGATCCCTACCTTGCACTAGCTTTTC-3'）是以DGAT1基因?yàn)橐罁?jù)設(shè)計(jì)的一對引物，1acZ基因編碼產(chǎn)物在X-ga1和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色。請回答下列問題。

(1)過程①中需要的酶有____________，過程②應(yīng)選用的限制酶是____________和____________。

(2)研究中，在保存DGAT1基因時(shí)，將克隆載體導(dǎo)入大腸桿菌的優(yōu)點(diǎn)有____________。

①穩(wěn)定保存②準(zhǔn)確復(fù)制③快速表達(dá)④方便取用。

(3)過程③經(jīng)轉(zhuǎn)化的大腸桿菌通過____________（方法）接種到培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。為篩選獲得目標(biāo)菌株，培養(yǎng)基應(yīng)加入的成分有____________。

(4)為檢測表達(dá)載體轉(zhuǎn)化四尾柵藻的情況及確定目的基因是否表達(dá)，研究人員進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)，請完成下表。實(shí)驗(yàn)步驟簡要操作過程初篩培養(yǎng)經(jīng)轉(zhuǎn)化后的四尾柵藻接種于含①____________的BG11固體培養(yǎng)基并放置于人工氣候箱培養(yǎng)，一段時(shí)間后觀察其生長情況②____________在BG11固體培養(yǎng)基上分別挑取數(shù)個(gè)單藻落接種至BG11液體培養(yǎng)基中光照搖床培養(yǎng)，編號(hào)備用PCR驗(yàn)證收集四尾柵藻藻體，提取基因組DNA，以DGAT1-F和DGAT1-R為引物，進(jìn)行PCR驗(yàn)證，未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻作對照油脂含量測定利用索氏抽提法分別測定③____________的油脂含量結(jié)果處理統(tǒng)計(jì)并比較PCR驗(yàn)證結(jié)果及藻體中油脂的含量評(píng)卷人得分六、綜合題(共2題，共16分)27、某科研小組將抗蟲基因（圖甲）與農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒（圖乙）重組，PstI、SmaI、AluI表示限制酶切割位點(diǎn)；AmpR為氨芐青霉素抗性基因；tet為四環(huán)素抗性基因。利用人工破損處理的水稻幼苗細(xì)胞，借助農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得抗蟲水稻品種，農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞如圖丙所示。

請回答下列問題：

(1)據(jù)圖分析，構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，最佳方案是使用______分別切割目的基因和Ti質(zhì)粒，原因是______；再用DNA連接酶連接。

(2)經(jīng)過基因表達(dá)載體構(gòu)建形成的重組DNA分子，需要與______（填“有AmpR和tet”“有AmpR和無tet”“無AmpR和有tet”或“無AmpR和tet”）的農(nóng)桿菌混合，進(jìn)而使重組DNA進(jìn)入農(nóng)桿菌體內(nèi)，其原因是__________________________。

(3)圖丙中，植物受損信號(hào)傳導(dǎo)到農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)激活Ti質(zhì)粒上的Vir區(qū)多個(gè)基因表達(dá)，其表達(dá)的蛋白質(zhì)功能有______（至少寫出兩種）。

(4)將導(dǎo)入目的基因的水稻細(xì)胞經(jīng)過______技術(shù)培養(yǎng)成幼苗，該過程利用的原理是______，獲得的植株還需要進(jìn)行______才能鑒定轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功。28、花椰菜（2n=18；用MM表示）屬十字花科，經(jīng)人工長期定向選育，對黑腐病無抗性。黑芥（2=16，用NN表示）為花椰菜近緣野生種，對黑腐病等多種常見病害具有抗性。我國科學(xué)家將紫外線（UV）照射處理的黑芥葉肉原生質(zhì)體和花椰菜下胚軸原生質(zhì)體融合，獲得了抗黑腐病的雜合新植株（過程如下圖）

請回答下列問題：

(1)雜種植株的形成過程用到的植物細(xì)胞工程技術(shù)有______________和_____________。

(2)①過程用____________酶處理可以獲得有活力的原生質(zhì)體。

(3)圖②表示______________過程，誘導(dǎo)過程常用的化學(xué)物質(zhì)是________。

(4)雜種細(xì)胞形成的標(biāo)志是：____________。理論上獲得的雜種植株染色體組成為_________（用字母M和N表示）。

(5)已知供體黑芥葉肉原生質(zhì)體在UV處理前后形態(tài)上沒有明顯的區(qū)別，但是在和下胚軸原生質(zhì)體融合時(shí)較易破碎。在培養(yǎng)3天之內(nèi)，用顯微鏡觀察細(xì)胞中是否存在_________（細(xì)胞器）；作為早期鑒別雜合細(xì)胞的標(biāo)志，初步篩選出融合細(xì)胞。

(6)請說出鑒定新植株是否抗黑腐病的方法________________。

(7)對雙親和部分雜合新植株的染色體計(jì)數(shù)，結(jié)果如下表所示。。植株花椰菜黑芥雜合新植株H1雜合新植株H2雜合新植株H3染色體數(shù)/條1816581930

根據(jù)表中數(shù)據(jù)，嘗試推測雜合新植株H2、H3染色體數(shù)目少于34（雙親染色體數(shù)之和），雜合新植株H1染色體數(shù)目大于34可能的原因__________________和________________。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、B【分析】根據(jù)題意和圖示分析可知：甲是發(fā)酵裝置；乙是果酒；果醋制作的實(shí)驗(yàn)原理，①是葡萄糖酵解形成丙酮酸的階段，發(fā)生的場所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，②是酵母菌無氧呼吸的第二階段，發(fā)生的場所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，③是有氧呼吸的第二、第三階段，發(fā)生的場所是線粒體，④是醋酸菌發(fā)酵形成醋酸的過程。

【詳解】

A、甲裝置中，閥a控制進(jìn)氣，閥b控制排氣，制作果酒時(shí)應(yīng)關(guān)閉閥a以創(chuàng)造缺氧環(huán)境，適時(shí)打開閥b幾秒鐘以排出產(chǎn)生CO2；A正確；

B；由于制作果醋所需的微生物是醋酸菌；醋酸菌是好氧菌，所以閥a要始終打開，B錯(cuò)誤；

D；乙圖中過程②是無氧呼吸的第二階段；需要在缺氧條件下進(jìn)行，C正確；

D；過程③表示有氧呼吸的第二和第三階段；該過程需用氧氣的參與；過程④表示果醋發(fā)酵，由于醋酸菌是嗜氧菌，因此該果醋也需要氧氣的參與，D正確。

故選B。2、C【分析】1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：

有氧條件下；酵母菌有氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳和水分，并釋放大量的能量，無氧條件下，酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳和酒精，釋放少量的能量。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：

當(dāng)氧氣；糖源都充足時(shí)；醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。

當(dāng)缺少糖源時(shí)；醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A；發(fā)酵過程中有關(guān)反應(yīng)主要發(fā)生在細(xì)胞內(nèi)；A錯(cuò)誤；

B；發(fā)酵過程中為防止被污染；需要進(jìn)行消毒處理，但不需要嚴(yán)格滅菌，B錯(cuò)誤；

C；將葡萄汁制成果酒和果醋后；有機(jī)物總量減少（細(xì)胞呼吸不斷消耗有機(jī)物）而種類增加，C正確；

D；醋酸菌是好氧菌；制成果酒后制作果醋，需將裝置轉(zhuǎn)移至溫度較高的環(huán)境中，同時(shí)還需要不斷通入無菌空氣，D錯(cuò)誤。

故選C。3、D【分析】【分析】

分析題圖：①是以RNA為模板合成DNA的逆轉(zhuǎn)錄過程；②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，③表示將目的基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞，④表示目的基因在原核細(xì)胞中的表達(dá)；⑤表示將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞，⑥表示目的基因在真核細(xì)胞中的表達(dá)。

【詳解】

A；步驟①所代表的反應(yīng)過程是以RNA為模板合成DNA的逆轉(zhuǎn)錄；該過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶，A錯(cuò)誤；

B、將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞常用Ca2+處理法，將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法，即步驟③和⑤常用的方法分別是Ca2+處理法和顯微注射法；B錯(cuò)誤；

C；④和⑥表達(dá)S蛋白的過程；所需ATP主要來自線粒體，也可來自細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，C錯(cuò)誤；

D；該目的基因能表達(dá)病毒S蛋白；且抗原（病毒S蛋白）能與抗體特異性結(jié)合，故可用抗原―抗體雜交法檢測細(xì)胞中是否真正成功表達(dá)了病毒S蛋白，D正確。

故選D。4、B【分析】【分析】

自然選育的菌種來源于自然界；菌種保藏機(jī)構(gòu)或生產(chǎn)過程；從自然界中選育菌種的過程較為復(fù)雜，而從生產(chǎn)過程或菌種保藏機(jī)構(gòu)得到菌種的自然選育過程較為簡單；此外也可通過誘變育種和基因工程育種獲得。

【詳解】

A；自然選育菌種要到相應(yīng)的環(huán)境從眾多的微生物中進(jìn)行篩選；所以費(fèi)時(shí)且盲目性大，A正確；

B；乳酸菌屬于原核生物；原核生物無染色體，B錯(cuò)誤；

C；基因工程是以基因重組為原理；能夠?qū)崿F(xiàn)定向改造基因的技術(shù)，可采用基因工程的方法可構(gòu)建工程菌，C正確；

D；菌種的選育可以采用誘變育種的方法；其原理是基因突變，D正確。

故選B。5、B【分析】【分析】

對蛋白質(zhì)分子的設(shè)計(jì)和改造是通過蛋白質(zhì)工程來實(shí)現(xiàn)的。蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過改造或合成基因，來改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類生產(chǎn)和生活的需求。

【詳解】

A；對小鼠單克隆抗體的改造是要產(chǎn)生一種自然界不存在的蛋白質(zhì)；屬于蛋白質(zhì)工程，A錯(cuò)誤；

B；蛋白質(zhì)發(fā)揮功能必須依賴于正確的高級(jí)結(jié)構(gòu)；因此對“嫁接”小鼠單克隆抗體的高級(jí)結(jié)構(gòu)的研究是成功的關(guān)鍵，B正確；

C；蛋白質(zhì)工程的思路是由蛋白質(zhì)→基因→蛋白質(zhì)；C錯(cuò)誤；

D；轉(zhuǎn)基因作為一項(xiàng)技術(shù)本身是中性的；但由其生產(chǎn)的產(chǎn)品是否安全不得而知，還需要經(jīng)過一系列的安全性評(píng)價(jià)才能確定，D錯(cuò)誤。

故選B。二、多選題(共9題，共18分)6、B:C【分析】【分析】

人們現(xiàn)在的倫理道德觀念還不能接受克隆人﹔設(shè)計(jì)試管嬰兒是為了治療疾?。坏锌赡鼙粸E用，如用于設(shè)計(jì)嬰兒性別等，可能會(huì)出現(xiàn)負(fù)面影響﹔進(jìn)行基因檢測時(shí)，可通過基因進(jìn)行檢測，也可通過測定基因的表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)來進(jìn)行;對于基因歧視現(xiàn)象，可通過正確的科學(xué)知識(shí)傳播；倫理道德教育和立法得以解決。

【詳解】

A；基因編輯制造嬰兒的行為不符合倫理道德；A正確；

B；設(shè)計(jì)試管嬰兒如專門用來設(shè)計(jì)嬰兒性別是不符合倫理道德的；可能會(huì)存在負(fù)面影響，B錯(cuò)誤；

C；我國禁止生殖性克隆人；但允許人胚胎干細(xì)胞的研究在有關(guān)規(guī)定下進(jìn)行，C錯(cuò)誤；

D；生物武器危害巨大；世界各國都應(yīng)禁止生物武器，D正確。

故選BC。7、B:C:D【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物：

(1)基因來源：藥用蛋白基因+乳腺組織特異性表達(dá)的啟動(dòng)子(原理：基因的選擇性表達(dá))。

(2)成果：乳腺生物反應(yīng)器。

(3)過程：將藥物蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起；導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的受精卵中，最終培育的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物進(jìn)入泌乳期后，可以通過分泌的乳汁生產(chǎn)所需要的藥物。(只有在產(chǎn)下雌性動(dòng)物個(gè)體中，轉(zhuǎn)入的基因才能表達(dá))。

【詳解】

A；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；因此可用顯微注射技術(shù)將含有人凝血因子基因的重組DNA分子導(dǎo)入羊的受精卵，A正確；

B；在該轉(zhuǎn)基因羊中；人凝血因子存在于所有細(xì)胞中，但只在乳腺細(xì)胞中表達(dá)，B錯(cuò)誤；

C；人凝血因子基因開始轉(zhuǎn)錄后；RNA聚合酶以DNA分子一條鏈為模板合成mRNA，C錯(cuò)誤；

D；科學(xué)家將人凝血因子基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起；從而使人凝血因子基因只在乳腺細(xì)胞中特異表達(dá)，D錯(cuò)誤。

故選BCD。8、B:C【分析】【分析】

關(guān)于限制酶；考生可以從以下幾方面把握：（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來。（2）特異性：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端。

【詳解】

A；影響酶促反應(yīng)的因素有溫度、pH、酶濃度、底物濃度等；因此酶切過程中，需控制好酶濃度、溫度和反應(yīng)時(shí)間等因素，A正確；

B；根據(jù)題意可知；限制酶BamHⅠ的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)為G↓GATCC，因此目的基因經(jīng)BamHI切割后形成的黏性末端是是-GATC或CTAG-，B錯(cuò)誤；

C；由于這兩種酶切割形成的黏性末端相同；因此分別用這兩種限制酶切割，不能保證目的基因定向插入質(zhì)粒，C錯(cuò)誤；

D；經(jīng)兩種酶處理得到的重組質(zhì)粒的相應(yīng)部位的序列不能再被這兩種酶識(shí)別；D正確。

故選BC。

【點(diǎn)睛】9、A:B:C【分析】【分析】

1；微生物常見的接種的方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法；稀釋涂布平板法可用于微生物的計(jì)數(shù)。

2；稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的原理：①當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)；培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌；②通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)來推測樣品中大約含有的活菌數(shù)。

【詳解】

A；若只對一個(gè)冰激凌進(jìn)行檢測；樣品太少則不能確定是某個(gè)冰激凌的質(zhì)量問題還是這個(gè)品牌冰激凌的質(zhì)量問題，正確的做法是再去小店隨機(jī)買多個(gè)同樣品牌的同種冰激凌，A錯(cuò)誤；

B、測定細(xì)菌的數(shù)量，一般選用104、105、106倍的稀釋液進(jìn)行培養(yǎng)，應(yīng)取10mL剛?cè)诨谋ち枳鳛樵哼M(jìn)行梯度稀釋、稀釋倍數(shù)為1×10～1×106；B錯(cuò)誤；

C；實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置對照；取各個(gè)稀釋濃度的冰激凌液各0.lmL，用涂布平板法進(jìn)行接種，每個(gè)濃度涂3個(gè)平板，再取一個(gè)平板接種等量無菌水（作為對照），共培養(yǎng)19個(gè)平板，在適宜溫度下培養(yǎng)48h，當(dāng)對照組無菌落生長時(shí)，選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，C錯(cuò)誤；

D；因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)；平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，故統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目，以菌落數(shù)代表大腸桿菌數(shù)會(huì)導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)結(jié)果比實(shí)際值偏小，該說法合理，D正確。

故選ABC。10、A:C:D【分析】【分析】

完全培養(yǎng)基中含有微生物生長所需要的各種營養(yǎng)成分；基本培養(yǎng)基缺少某種營養(yǎng)成分，通過影印培養(yǎng)法，二者接種的菌種相同，基本培養(yǎng)基上不能生長的菌株即為營養(yǎng)缺陷型菌株。

【詳解】

A；過程①得到的菌落均勻分布；接種方法為稀釋涂布平板法，過程②兩種培養(yǎng)基的成分不同，基本培養(yǎng)基中缺乏某種氨基酸，A錯(cuò)誤；

B；進(jìn)行過程②培養(yǎng)時(shí)先將絲絨布轉(zhuǎn)印至完全培養(yǎng)基上；可能會(huì)攜帶某種氨基酸進(jìn)入基本培養(yǎng)基，因此順序不能顛倒，B正確；

C；統(tǒng)計(jì)菌落種類和數(shù)量時(shí)要每隔24h觀察統(tǒng)計(jì)一次；直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定，以防止培養(yǎng)時(shí)間不足導(dǎo)致菌落數(shù)目偏小，C錯(cuò)誤；

D；若該菌株為原核細(xì)胞；則不存在核孔復(fù)合體，營養(yǎng)缺陷型菌株細(xì)胞代謝調(diào)節(jié)機(jī)制中的某些酶被破壞，應(yīng)是控制該酶合成的基因發(fā)生突變，D錯(cuò)誤。

故選ACD。

【點(diǎn)睛】11、A:B【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)技術(shù)：

1；過程：離體的植物組織；器官或細(xì)胞(外植體)→愈傷組織→胚狀體→植株(新植體)。

2；原理：植物細(xì)胞的全能性。

3；條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件(如適宜溫度、適時(shí)的光照、pH和無菌環(huán)境等)；②一定的營養(yǎng)(無機(jī)、有機(jī)成分)和植物激素(生長素和細(xì)胞分裂素)。

【詳解】

A；取材時(shí)可選用兔眼藍(lán)莓的芽尖等分生組織作為外植體；這是因?yàn)檠考夥至淹?，且很少帶有病毒，甚至不含毒，A正確；

B；用70%酒精和5%左右次氯酸鈉對外植體消毒時(shí)；要控制好時(shí)間以避免造成傷害，否則外植體會(huì)受到損失，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，B正確；

C；生長調(diào)節(jié)劑應(yīng)該在培養(yǎng)基滅菌后添加；否則高溫可能使其失去效果，C錯(cuò)誤；

D；脫毒后的兔眼藍(lán)莓果實(shí)體積更大；產(chǎn)量更高，后代個(gè)體中含病毒較少，但并不是不易被病毒感染，D錯(cuò)誤。

故選AB。12、A:C:D【分析】【分析】

分析題圖：①表示反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因的過程；②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；之后采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；將目的基因?qū)敕呀M織塊；最后采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，將導(dǎo)入目的基因的番茄組織細(xì)胞培養(yǎng)成抗凍番茄植株?；虮磉_(dá)載體通常由啟動(dòng)子；目的基因、終止子和標(biāo)記基因構(gòu)成，其中標(biāo)記基因的作用是篩選重組質(zhì)粒，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法能將質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞。

【詳解】

A；過程①是通過人工合成法獲取的目的基因；由于真核生物體內(nèi)的基因含有不能編碼蛋白質(zhì)的序列（內(nèi)含子），導(dǎo)致逆轉(zhuǎn)錄合成的目的基因與原基因有較大的差異，因此人工合成的目的基因不能用于比目魚基因組測序，A錯(cuò)誤；

B；抗凍蛋白的11個(gè)氨基酸的重復(fù)序列重復(fù)次數(shù)越多；抗凍能力越強(qiáng)，并不是抗凍基因的編碼區(qū)重復(fù)次數(shù)越多抗凍能力越強(qiáng)，抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成的新基因已不是原來的抗凍基因，因此不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白，B正確；

C；②是基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；基因表達(dá)載體通常由啟動(dòng)子、目的基因、終止子和標(biāo)記基因構(gòu)成，其中標(biāo)記基因的作用是篩選重組質(zhì)粒，過程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，可以通過DNA分子雜交或PCR技術(shù)檢測受體細(xì)胞是否含有目的基因，C錯(cuò)誤；

D；利用DNA探針技術(shù)檢測目的基因是否導(dǎo)入到受體細(xì)胞；但表達(dá)的產(chǎn)物通常是蛋白質(zhì)，可利用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測目的基因是否表達(dá)出來，D錯(cuò)誤。

故選ACD。

【點(diǎn)睛】13、A:B【分析】【分析】

分析題圖：圖中重組載體A導(dǎo)入受體菌后隨著受體菌的繁殖而擴(kuò)增；因此是基因克隆載體，而重組載體B導(dǎo)入受體菌后，表達(dá)產(chǎn)生胰島素，因此是基因表達(dá)載體。

【詳解】

A；重組載體A導(dǎo)入受體菌后隨著受體菌的繁殖而擴(kuò)增；因此是基因克隆載體，而重組載體B導(dǎo)入受體菌后，表達(dá)產(chǎn)生胰島素，因此是基因表達(dá)載體，A正確；

B；作為運(yùn)載體必須要具備的條件有：含有限制酶的切割位點(diǎn)(便于目的基因的插入)、復(fù)制原點(diǎn)(便于目的基因的擴(kuò)增)及標(biāo)記基因(便于篩選含有目的基因的受體細(xì)胞)等；因此載體A和載體B都必須含有限制酶切割位點(diǎn)、復(fù)制原點(diǎn)和標(biāo)記基因，B正確；

C；培養(yǎng)細(xì)菌A的目的是擴(kuò)增目的基因；不需要獲得表達(dá)產(chǎn)物，因此目的基因不一定要插入重組載體A的啟動(dòng)子和終止子之間，C錯(cuò)誤；

D；培養(yǎng)細(xì)菌A的目的是擴(kuò)增目的基因；培養(yǎng)細(xì)菌B的目的是獲得胰島素，因此培養(yǎng)兩者的培養(yǎng)基在營養(yǎng)成分和功能上有明顯差異，D錯(cuò)誤。

故選AB。14、A:D【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是Ca2+處理法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)：抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；兩個(gè)基因中都有限制酶BsaBⅠ的一個(gè)識(shí)別位點(diǎn)；用該限制酶切割后再用DNA連接酶可拼接成GNA-ACA融合基因，A正確；

B；GNA-ACA融合基因的兩端有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位點(diǎn)；而質(zhì)粒上也有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位點(diǎn)，但方向不一致，用兩酶切割，正好是反向連接目的基因和運(yùn)載體，B錯(cuò)誤；

C；運(yùn)載體上帶有卡那霉素的抗性基因；沒有氨芐青霉素的抗性基因，轉(zhuǎn)基因細(xì)胞在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上不能存活，C錯(cuò)誤；

D；用PCR技術(shù)擴(kuò)增GNA和ACA基因后；再通過分子雜交或電泳的方式，可檢測是否導(dǎo)入棉花細(xì)胞中，D正確。

故選AD。三、填空題(共7題，共14分)15、略

【解析】①.卵（母）細(xì)胞②.比較大，容易操作③.細(xì)胞質(zhì)多，營養(yǎng)豐富。16、略

【解析】①.接種環(huán)②.瓊脂固體③.連續(xù)劃線④.聚集⑤.逐步稀釋⑥.一個(gè)細(xì)胞⑦.子細(xì)胞群體⑧.菌落⑨.梯度稀釋⑩.瓊脂固體?.單個(gè)細(xì)胞?.單個(gè)的菌落17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】原核生物18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】現(xiàn)配現(xiàn)用19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】物理和化學(xué)性20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】莖尖極少或沒有）胚狀體人工薄膜不受季節(jié)的限制人工種皮；胚狀體和人工胚乳。

（2）21、略

【分析】【詳解】

生物武器種類：包括致病菌類、病毒類、生化毒劑類等，以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。生物武器致病力強(qiáng)、攻擊范圍廣。把這些病原體直接或者間接通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由消化道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，也能損害植物，若用與戰(zhàn)爭，則可以對軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果?！窘馕觥可镂淦鞣N類：包括致病菌類、病毒類、生化毒劑類等，以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。生物武器致病力強(qiáng)、攻擊范圍廣。把這些病原體直接或者間接通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由消化道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，也能損害植物。四、判斷題(共2題，共14分)22、A【分析】【詳解】

轉(zhuǎn)基因生物可能會(huì)破壞生態(tài)平衡，特別是對生物多樣性的影響。大自然經(jīng)過億萬年的演化，各種生物相對處于一種和諧的生態(tài)平衡狀態(tài)。但是，如果我們用轉(zhuǎn)基因技術(shù)把某種生物人為地變得更加“強(qiáng)悍”，那其他物種就會(huì)衰敗以至滅絕，故本題正確。23、B【分析】【詳解】

胚胎發(fā)育早期；細(xì)胞數(shù)量不斷增加，但胚胎總體積不變或略有縮小。

故錯(cuò)誤。五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共6分)24、略

【分析】微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)操作：1；制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的過程為：計(jì)算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板。2、純化大腸桿菌：（1）原理：在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成單個(gè)細(xì)胞；使其長成單個(gè)的菌落，這個(gè)單個(gè)菌落就是一個(gè)純化的細(xì)菌菌落。（2）微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在-起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

（1）將上表菌液分別接種于100mL餐廚垃圾廢液中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)；振蕩處理的目的是增加溶液中的溶氧量；有利于目的菌與溶液充分接觸；本實(shí)驗(yàn)還需設(shè)置對照組為接種等量無菌水。

（2）測定活菌數(shù)；需要利用稀釋涂布平板法，接種時(shí)故需要取一定量菌液進(jìn)行梯度稀釋，然后分別取0.1mL的菌液采用涂布法接種于基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)。進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，可依據(jù)菌落的特征對兩種菌進(jìn)行區(qū)分，并選取菌落數(shù)在30-300內(nèi)的平板。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知：兩種菌混合接種時(shí)有效菌落數(shù)均大于單獨(dú)接種；兩菌種接種量比例為1:1時(shí)，廢液中兩種菌種的有效活菌數(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)同步最大化。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖表，考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記制備培養(yǎng)基的過程;識(shí)記接種微生物常用的兩種方法及微生物的計(jì)數(shù)方法，能結(jié)合柱形圖中信息準(zhǔn)確答題?！窘馕觥磕巢蛷N垃圾廢液等量無菌水稀釋涂布平板系列（梯度）稀釋涂布平板菌落特征30~300兩種菌混合接種時(shí)有效菌落數(shù)均大于單獨(dú)接種；兩菌種接種量比例為1：1時(shí)，廢液中兩種菌種的有效活菌數(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)同步最大化25、略

【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

2；培養(yǎng)條件：

（1）無菌無毒環(huán)境：無菌--對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理；在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；無毒--定期更換培養(yǎng)液；防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對自身造成危害。

（2）營養(yǎng)：

成分：所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同；例如需要有糖；氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分。

培養(yǎng)基類型：合成培養(yǎng)基（將細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基）

（3）溫度和pH值：哺乳動(dòng)物多以36.5±0.5℃為宜；多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

（4）氣體環(huán)境：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。

【詳解】

（1）目前實(shí)驗(yàn)室中為了進(jìn)一步研究Hela細(xì)胞；需進(jìn)行傳代培養(yǎng)；由于是在多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液適宜的pH范圍內(nèi)，胃蛋白酶（最適pH是強(qiáng)酸性）已失去活性，所以在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，需要用胰蛋白酶處理制備細(xì)胞懸液。

（2）分析表格數(shù)據(jù)；該實(shí)驗(yàn)需要另設(shè)對照組，觀察在正常條件下細(xì)胞生長情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：葡萄糖濃度與Hela細(xì)胞生長抑制率的關(guān)系是葡萄糖濃度越低，Hela細(xì)胞生長抑制率越高。

（3）體內(nèi)低濃度葡萄糖可抑制癌細(xì)胞的增殖；為腫瘤的限食療法提供理論依據(jù)。兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞融合形成的單核細(xì)胞叫做雜交細(xì)胞，細(xì)胞融合技術(shù)的意義是突破了有性雜交局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。

【點(diǎn)睛】

本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)內(nèi)容，重點(diǎn)考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程和條件，相關(guān)知識(shí)點(diǎn)只需考生識(shí)記即可正確作答，屬于考綱識(shí)記層次的考查。對于此類試題，考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過程中，應(yīng)該注意構(gòu)建知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。【解析】傳代在多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH范圍內(nèi)，胃蛋白酶已失去活性需要葡萄糖濃度越低，Hela細(xì)胞生長抑制率越高抑制突破了有性雜交局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能26、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本工具：限制性內(nèi)切核酸酶；識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開。DNA連接酶，將兩個(gè)DNA片段連接起來，恢復(fù)被限制酶切開的磷酸二酯鍵。載體，將外源基因送入受體細(xì)胞。

2；基因工程的基本過程：目的基因的篩選與獲取；基因表達(dá)載體的構(gòu)建，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，目的基因的檢測和鑒定。

【詳解】

（1）過程①包括逆轉(zhuǎn)錄和PCR，逆轉(zhuǎn)錄需要反轉(zhuǎn)錄酶的參與，PCR過程需要耐高溫的DNA聚合酶。限制酶的作用是識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開，對比幾種限制酶的結(jié)合位點(diǎn)和DGAT1-F、DGAT1-R的堿基序列，可知過程②應(yīng)選用的限制酶是BamHI和XbaI。

（2）將克隆載體導(dǎo)入大腸桿菌；可以與外界環(huán)境隔離，能夠穩(wěn)定保存，準(zhǔn)確復(fù)制，大腸桿菌比基因方便取用，故選①②④。

（3）根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的分布可知所用接種方法是稀釋涂布平板法?？寺≥d體中含有氨芐青霉素抗性基因；1acZ基因；1acZ基因編碼產(chǎn)物在X-ga1和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色，所以