02實驗二環(huán)境因素對微生物的影響培訓講學

實驗二環(huán)境因素對微生物的影響

P.188-204（一）實驗?zāi)康?.了解溫度對微生物生長的影響；2.了解抗生素（青霉素、氨芐青霉素）的抗菌范圍，學習抗菌譜試驗的基本方法。3、了解消毒劑（酒精）對微生物分布的影響。4、了解紫外線殺菌對微生物的作用特點（二）實驗原理1.溫度:溫度是影響微生物生長與存活的最重要因素。自然界的微生物可根據(jù)對溫度的適應(yīng)性分為低溫型、中溫型和高溫型。但不管哪一種溫度型的微生物，都有生長溫度范圍。分為最高、最適和最低生長溫度。在最適宜溫度里生長良好：超過最高溫度細胞死亡；低于最低溫度細胞被抑制或死亡。比如本實驗中用到的氨芐青霉素，對革蘭氏陽性球菌、變形桿菌、沙門氏菌、痢疾桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌、大腸桿菌及流感桿菌等都有很好的抗菌效果。3、化學消毒劑對微生物分布的影響人體皮膚分布著一定種類與數(shù)量的微生物。使用化學消毒劑對皮膚進行表面消毒是醫(yī)院里進行無菌操作常用的方法之一。4、紫外線的殺菌作用波長為200-300nm的紫外線都有殺菌能力，其中以260nm的殺菌能力最強。其殺菌機理是抑制DNA復(fù)制，以及產(chǎn)生臭氧和H2O2而產(chǎn)生一定的殺菌作用。但紫外線穿透力弱，一般適用于表面消毒和空氣消毒。（三）實驗步驟1.溫度對微生物生長的影響（每組）：A.菌種：大腸桿菌、枯草芽孢桿菌；B.取肉湯培養(yǎng)基5支（液體培養(yǎng)基）；C.分別接種大腸桿菌和枯草芽孢桿菌各2支試管，余下一支不接種作陰性對照；D.分別取接種的培養(yǎng)基各1管，于100℃作用15min后取出，37℃培養(yǎng)；E.培養(yǎng)24h后觀察現(xiàn)象。2.抗生素對微生物生長的影響A.菌種：大腸桿菌（G－）、金黃色葡萄球菌（G＋）B.用接種環(huán)取菌體，輕放在平板上（大培養(yǎng)皿）；C.將無菌的棉簽在無菌水中潤濕；D.用濕潤的無菌棉簽將平板上的菌體均勻涂布；E.用無菌鑷子取4種不同的抗生素藥敏片各1個，貼在平板上

注意：在貼濾紙條時不要在培養(yǎng)基上拖動濾紙條，避免抗生素溶液在培養(yǎng)基中擴散時分布不均勻。F.2種不同的菌各做1個平板，每組2個平板。G.平板于37℃培養(yǎng)24h后觀察實驗現(xiàn)象。3、化學消毒劑對微生物分布的影響A.將1個營養(yǎng)瓊脂平板平板分為4個區(qū)域；B.2名同學直接用手指在平板的2個區(qū)域劃之字形，待用碘酒/酒精消毒后，稍候片刻，再在另外2個區(qū)域劃之字形；2人1個平板，每組2個平板。C.平板于37℃培養(yǎng)24h后觀察實驗現(xiàn)象。4、紫外線的消毒作用（穿透作用）A.菌種：大腸桿菌（也可作2種菌）B.用接種環(huán)取菌體，輕放在平板上；C.將無菌的棉簽在無菌水中潤濕；D.用濕潤的無菌棉簽將平板上