微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制

微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制在實(shí)際工作中存在許多復(fù)雜因素影響微生物學(xué)檢驗(yàn)，可能給檢驗(yàn)結(jié)果帶來(lái)偏差甚至錯(cuò)誤，因此必須對(duì)影響檢驗(yàn)結(jié)果的諸多因素采取控制手段保證檢驗(yàn)結(jié)果的正確性，不斷完善微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制。

一、質(zhì)量控制

1、檢驗(yàn)人員

(1)微生物檢驗(yàn)不能完全依賴全自動(dòng)鑒定儀器，檢驗(yàn)工作中每一步驟均需要有高度的主觀分析和判斷能力，與個(gè)人的經(jīng)驗(yàn).技能和微生物檢驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)水平密切相關(guān)。

(2)除要求微生物檢驗(yàn)人員必須具備嚴(yán)肅認(rèn)真的工作態(tài)度，精密細(xì)致的觀察和操作習(xí)慣,注重個(gè)人衛(wèi)生外，還必須訓(xùn)練掌握微生物檢驗(yàn)技術(shù)。

(3)檢驗(yàn)人員應(yīng)執(zhí)行上崗前培訓(xùn)制度，上崗前培訓(xùn)合格方能上崗操作，還要主動(dòng)參加學(xué)習(xí)、培訓(xùn)、講座，學(xué)習(xí)新技術(shù)，掌握微生物學(xué)檢驗(yàn)方法，標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)法律法規(guī)。

(4)參與編寫測(cè)試程序及儀器操作程序，學(xué)習(xí)質(zhì)量保證體系知識(shí)和計(jì)量學(xué)基本知識(shí)。

(5)參加各類水平測(cè)試和盲樣測(cè)試，提高檢測(cè)水平和分析問(wèn)題，解決問(wèn)題的能力。

(6)微生物學(xué)檢驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)定期對(duì)檢驗(yàn)人員進(jìn)行專業(yè)知識(shí)和操作熟練程度的考核，提高檢驗(yàn)人員的素質(zhì)。

2、培養(yǎng)基

（1）為保證干粉培養(yǎng)基質(zhì)量指標(biāo)，在實(shí)際工作中應(yīng)注意；

加強(qiáng)包裝的密封性能；使用時(shí)盡量縮短開蓋時(shí)間；一般干性培養(yǎng)基放在低溫干燥的環(huán)境中保存，對(duì)于易受潮的品種，啟用后宜放入干燥器中保存；由于配制水分不同，啟用次數(shù)或時(shí)間增加，干粉培養(yǎng)基的pH值可能會(huì)有所變化，應(yīng)隨時(shí)略加調(diào)整。

（2）培養(yǎng)基的配制應(yīng)嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法進(jìn)行操作，并做好原始記錄。

（3）為保證培養(yǎng)基必須在玻璃容器，搪瓷或鋁鍋中進(jìn)行，如用銅，鐵器皿，會(huì)對(duì)微生物生長(zhǎng)有毒害作用；

（4）配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)按檢驗(yàn)項(xiàng)目規(guī)定的配方添加，不得隨意增減或更改培養(yǎng)基成分。

（5）要用專用的角匙取藥品，避免交叉污染而影響檢驗(yàn)結(jié)果；培養(yǎng)基配制最好用蒸餾水或去離子水，避免使用自來(lái)水，因其中含有氯等抗菌物質(zhì)；

3、檢驗(yàn)質(zhì)量

除按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法對(duì)所需檢驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行檢測(cè)外，在實(shí)際工作中還應(yīng)注意以下幾個(gè)方面，否則會(huì)影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性：

（1）在定量檢驗(yàn)時(shí)用重量法還是用體積法，檢驗(yàn)結(jié)果會(huì)有誤差，因?yàn)榇酥夭坏扔?的樣品，1ml和1g的化驗(yàn)結(jié)果絕不會(huì)相等。一般固態(tài)的樣品宜用重量法，液體樣品宜用體積法。但對(duì)粘性液體，如用體積法，會(huì)粘附一定量的樣品在吸管上，因此此類樣品最好用重量法。

(2)如檢樣需用用無(wú)菌水或無(wú)菌生理鹽水稀釋，則最好用均質(zhì)器或組織碎機(jī)，以8000`10000轉(zhuǎn)/min的轉(zhuǎn)速處理1min，制成均勻的菌懸液。

(3)樣品稀釋時(shí)，常會(huì)滯留少量樣品在吸管內(nèi)外，應(yīng)多加注意。

吸入液體后，應(yīng)沿管壁慢慢注入遞增的稀釋中，特別注意此時(shí)吸管尖端切不可碰到稀釋液中。

(4)在培養(yǎng)基注入檢樣，菌懸液時(shí)，注意培養(yǎng)基溫度宜在45℃

-50℃

之間，并使培養(yǎng)基與檢樣，菌懸液充分混合。

(5)微生物培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)根據(jù)要求選擇正確的培養(yǎng)溫度和時(shí)間。二、微生物檢驗(yàn)常用需監(jiān)控的設(shè)備和儀器：

培養(yǎng)箱（生化培養(yǎng)箱或CO2培養(yǎng)箱等）、干燥箱、高壓滅菌鍋、凈化工作臺(tái)、pH計(jì)、冰箱，（低溫冰箱或冷柜）溫度計(jì)、紫外燈、顯微鏡、離心機(jī)、天平。

小計(jì)量容器。

微生物測(cè)定儀器、微生物檢定儀器、空氣采樣器、酶標(biāo)儀專用等。

1、高壓滅菌鍋的溫度控制

高壓滅菌鍋：生物指示菌法（常用）、化學(xué)變色紙片及高壓滅菌鍋溫度計(jì)等方法進(jìn)行檢測(cè)。

生物指示菌法是一種高壓滅菌鍋的效果顯示法。

高壓滅菌鍋由專人按作業(yè)指導(dǎo)書操作，并做好每一次的作業(yè)記錄。

高壓滅菌鍋使用時(shí)，內(nèi)置物品不能太多，單位體積內(nèi)的內(nèi)容物（每瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基）不能太多。同時(shí)應(yīng)注意內(nèi)容物不同耐受溫度。總的暴露時(shí)間最好不要超過(guò)45min。

高壓滅菌鍋日常工作記錄應(yīng)包含以下信息：高壓滅菌的材料、開始時(shí)間、壓力/溫度、取出時(shí)間、高壓滅菌膠帶的顏色變化（日常常用無(wú)菌培養(yǎng)代替）。

高壓滅菌鍋溫度波動(dòng)范圍：110，115和121±2℃。

高壓滅菌鍋校準(zhǔn)周期一般在半年。

2、干燥滅菌箱溫度控制

干燥滅菌箱日常工作記錄中應(yīng)包括以下信息：開始的時(shí)間、到達(dá)滅菌溫度時(shí)的時(shí)間、取出的時(shí)間（或關(guān)閉時(shí)間）。

干燥滅菌箱的溫度校準(zhǔn)；用參考溫度計(jì)進(jìn)行溫度測(cè)試。

干燥滅菌箱溫度要求與精確度：160±5℃或180

±5℃。前者為滅菌2h，后者為30min；

3、培養(yǎng)基配制用蒸餾水的控制

對(duì)于蒸餾水器來(lái)說(shuō)：按設(shè)備說(shuō)明，定期清潔離子交換器和更換離子交換材料。

檢測(cè)要求：西歐標(biāo)準(zhǔn)為微生物檢驗(yàn)用蒸餾水的特定電導(dǎo)率<0.5ms/m；細(xì)菌數(shù)<50cfu>。我們的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)要求電導(dǎo)率≤25μS/cm，菌落總數(shù)不超過(guò)1000CFU/mL。

檢測(cè)頻率：1次/每月。

蒸餾水定點(diǎn)供應(yīng)，并做好相應(yīng)的質(zhì)量控制，記錄檢測(cè)結(jié)果。

4、天平的管理

天平放置要求：無(wú)振動(dòng)、無(wú)氣流影響及水平臺(tái)面上

天平要有使用及運(yùn)行檢查記錄。

天平作為計(jì)量?jī)x器是列入國(guó)家強(qiáng)制檢定的范圍，一般1次/年進(jìn)行檢定。

運(yùn)行檢查頻率按運(yùn)行計(jì)劃或按產(chǎn)品（天平生產(chǎn)廠家）給出的標(biāo)準(zhǔn)重量單位進(jìn)行對(duì)照。

5、pH計(jì)

pH計(jì)使用前應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行校準(zhǔn)。

緩沖液使用有效期：pH4.00約6個(gè)月；pH7.00約6個(gè)月；pH9.00約6個(gè)月；

pH計(jì)的維護(hù)：電極外表的定期清洗；電極敏感性檢測(cè)及極性恢復(fù)。

6、凈化工作臺(tái)的控制

水平流凈化工作臺(tái)工作區(qū)域，要求潔凈度