新學(xué)期Abbkine利器助你細(xì)胞培養(yǎng)游刃有余

干貨分享|超全重組蛋白使用指南關(guān)鍵詞：重組蛋白、細(xì)胞因子、溶解方式、儲存條件、常見問答近期Abbkine上新一批經(jīng)過嚴(yán)格驗(yàn)證的活性細(xì)胞因子重組蛋白，很多小伙伴在咨詢重組蛋白的使用注意事項和保存方法。這不，它來咯~Abbkine重組蛋白均為凍干粉形式，-20℃或-80℃可以保存數(shù)年。蛋白凍干粉在使用前需溶解，部分重組蛋白產(chǎn)品帶有復(fù)溶buffer，優(yōu)先推薦使用配套的復(fù)溶buffer。不同重組蛋白復(fù)溶及儲存條件可能會存在差異，詳細(xì)參考說明書推薦方法。溶解方式打開試管前務(wù)必對產(chǎn)品進(jìn)行離心。10000-12000rpm離心30s或3000-3500rpm離心5min。建議將凍干后的蛋白在無菌無內(nèi)毒素的ddH2O中復(fù)溶至0.1-1mg/mL，期間可用槍輕輕吹打混勻，室溫靜置至少20min，使其完全溶解。注意避免劇烈渦旋。如何使用建議首先按照說明書指導(dǎo)對凍干粉按照一定的濃度進(jìn)行復(fù)溶，完全復(fù)溶后，再根據(jù)實(shí)際實(shí)驗(yàn)所需濃度，使用特定的稀釋液進(jìn)行稀釋。如何保存凍干粉形式：凍干粉形式的重組蛋白通常較為穩(wěn)定，-20℃或-80℃可以長期保存。復(fù)溶后液體形式：復(fù)溶后的重組蛋白4℃可以保存1周。復(fù)溶液的長期保存：由于Abbkine重組蛋白凍干液成分及復(fù)溶buffer均不含蛋白保護(hù)劑，溶解后的蛋白溶液如需長期保存，建議添加載體蛋白（5%HSA,10%FBS或0.1%BSA)后，分裝保存，避免反復(fù)凍融。常見問答Q:為何一定要開蓋前離心？A:打開試管前務(wù)必進(jìn)行離心，Abbkine重組蛋白不含載體蛋白或其他添加劑（如HSA、BSA或蔗糖、甘露醇、海藻糖等），通常以最少量的鹽溶液凍干處理后盛放于無菌管內(nèi)。微量的蛋白在凍干過程中會沉積在管壁內(nèi)，形成很薄或不可見的蛋白膜，凍干粉在運(yùn)輸過程中可能會因顛簸而飄散并粘附于管壁或管蓋上，因此開蓋前需離心將凍干粉收集到管底，以減少凍干粉的開蓋損失，確保溶解蛋白的正確濃度。Q:為何不能直接將蛋白稀釋至實(shí)驗(yàn)所需濃度，還要先復(fù)溶？A:說明書建議的復(fù)溶buffer是溶解凍干粉的最佳條件，直接稀釋可能會存在不溶的情況。蛋白在一定的濃度范圍內(nèi)可以保持良好的活性及穩(wěn)定性。低于或高于該濃度范圍，可能會導(dǎo)致蛋白無法完全溶解，甚至出現(xiàn)蛋白質(zhì)聚集現(xiàn)象，或是活性減弱甚至喪失。Q:為何有時凍干粉不易溶解？A:蛋白的溶解性與很多因素有關(guān)，如pH值和離子強(qiáng)度等，說明書上推薦的復(fù)溶buffer均經(jīng)過嚴(yán)格測試，是能夠?qū)⒃摶钚缘鞍淄耆芙獾囊后w。若難以立即溶解，可以室溫靜置20min，使其完全溶解，或?qū)⑵浞胖糜谒綋u床上低速搖一段時間，或是將重懸液在4℃靜置2小時以上。Q:能否使用渦旋儀劇烈震蕩，幫助蛋白快速溶解呢？A:切忌使用渦旋儀進(jìn)行快速振蕩。一般用移液槍的槍頭輕吹幾下，即可使重組蛋白完全溶解。如不易溶解，應(yīng)考慮其它因素，嘗試使用其它方式促進(jìn)溶解。Q:重組蛋白種是否含有防腐劑？A:Abbkine重組蛋白均為無菌級別且不含防腐劑，使用過程中注意避免微生物污染。建議使用滅菌溶液復(fù)溶，使用無菌管子進(jìn)行分裝保存，避免多次使用交叉污染。新品推薦貨號中文名稱規(guī)格PRP1048重組人轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1049重組人表皮生長因子（EGF）100μg/500μg/1mg/10mgPRP1050重組人干擾素-γ（IFN-γ）20μg/100μg/500μg/1mgPRP1151重組小鼠粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1051重組人白介素-13（IL-13)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1135重組小鼠白介素17（IL-17)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1052重組人白介素-17（IL-17)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1136重組小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子（M-CSF5μg/20μg/100μg/10mgPRP1053重組人干擾素-β1a（IFN-β1a）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1054重組人血管內(nèi)皮生長因子165（VEGF165)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1055重組人白介素-10（IL-10)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1056重組人核因子κB受體活化因子配體（RANKL）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1057重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2（BMP-2)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1137重組小鼠白介素-4（IL-4)5μg/20μg/100μg/10mgPRP1138重組小鼠干擾素-γ（IFN-γ）20μg/100μg/500μg/10mgPRP1058重組人促血小板生成素（TPO）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1059重組人Noggin蛋白（Noggin）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1060重組人白介素-1β（IL-1β）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1061重組人神經(jīng)生長因子-β（β-NGF）20μg/100μg/500μg/1mgPRP1062重組人Fms相關(guān)酪氨酸激酶3配體(Flt-3Ligand)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1063重組人白介素-15（IL-15)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1064重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-4（BMP-4）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1065重組人胰島素樣生長因子-I（IGF-I)100μg/500μg/1mg/10mgPRP1140睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子（CNTF）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1141重組小鼠白介素-10（IL-10)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1142重組小鼠表皮生長因子（EGF）100μg/500μg/1mg/1mgPRP1143重組小鼠神經(jīng)生長因子-β（β-NGF）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1144重組小鼠白介素-15（IL-15)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1145重組小鼠/大鼠血管內(nèi)皮生長因子165（VEGF165)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1146重組小鼠胰島素樣生長因子-I（IGF-I)20μg/100μg/500μg/1mgPRP1147重組小鼠骨形態(tài)發(fā)生蛋白-4（BMP-4)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1148重組小鼠趨化因子配體2（CCL2）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1149重組小鼠Fms相關(guān)酪氨酸激酶3配體（Flt-3Ligand）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1066重組人/小鼠/大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1067重組人膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（GDNF）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1068重組人成纖維細(xì)胞生長因子-2（FGF-2）20μg/100μg/500μg/1mgPRP1150重組小鼠/大鼠成纖維細(xì)胞生長因子-2（FGF-2）20μg/100μg/500μg/1mgPRP1069重組人轉(zhuǎn)化生長因子-β3（TGF-β3）5μg/20μg/100μg/1mg歡迎廣大“蝌蚪”們多多關(guān)注Abbkine公眾號，還會有更多科研驚喜等著大家喲。同時，Abbkine的技術(shù)專家為了給廣大讀者提供學(xué)習(xí)生物知識的平臺，經(jīng)過不懈努力，將多種高端生物實(shí)驗(yàn)的干貨整理出來，后期陸續(xù)在微信公眾號中刊登，請廣大熱愛科學(xué)的讀者持續(xù)關(guān)注Abbkine公眾號。Abbkine致力于為廣大科研用戶提供高品質(zhì)，高性價比的科研試劑！想要了解更多實(shí)驗(yàn)干貨，敬請關(guān)注Abbkine微信公眾號及視頻號！我們將持續(xù)更新更多技術(shù)前沿資訊，敬請期待！Abbkine的技術(shù)專家為了給廣大讀者提供學(xué)習(xí)生物知識的平臺，經(jīng)過不懈努力，將多種高端生物實(shí)驗(yàn)的干貨整理出來，后期陸續(xù)在微信公眾號中刊登，請廣大熱愛科學(xué)的讀者持續(xù)關(guān)注Abbkine公眾號。Abbkine專注于蛋白學(xué)和細(xì)胞學(xué)領(lǐng)域，致力于創(chuàng)新和研發(fā)各類抗體、蛋白質(zhì)、分析試