病原生物與免疫學(xué)基礎(chǔ)（第5版）課件 第五章 免疫學(xué)應(yīng)用

免疫學(xué)應(yīng)用第一節(jié)

免疫學(xué)預(yù)防一、免疫學(xué)預(yù)防破傷風(fēng)針≠破傷風(fēng)預(yù)防大家口中的“破傷風(fēng)針”一般指的破傷風(fēng)抗毒素(TAT)，保護(hù)期只有10天左右，達(dá)不到預(yù)防破傷風(fēng)效果(潛伏期0一178天)，破傷風(fēng)免疫球蛋白保護(hù)期28天左右，兩者均屬于被動免疫；而破傷風(fēng)疫苗屬于主動免疫，全程接種，保護(hù)期5-10年。一、免疫學(xué)預(yù)防免疫預(yù)防：是指采用人工方法將抗原或抗體制成各種制劑，接種于人體，使人體主動或被動獲得特異性免疫能力，以達(dá)到預(yù)防某些疾病的一種措施。特異性免疫獲得方式：自然免疫、人工免疫1、自然免疫：自然主動免疫（感染病原體后）--抗原刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)自然被動免疫（經(jīng)胎盤、乳汁獲得抗體）--直接攝入抗體2、人工免疫：人為獲得人工主動免疫（也稱預(yù)防接種）--注射抗原人工被動免疫--注射抗體一、免疫學(xué)預(yù)防-人工主動免疫（一）人工主動免疫：是給機(jī)體輸入疫苗或類毒素等抗原物質(zhì)，剌激機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫力。1、死疫苗：用物理或化學(xué)的方法將病原微生物殺死制備而成的制劑。又稱滅活疫苗。

2、活疫苗：用人工變異或從自然界篩選獲得的減毒或無毒的活的病原微生物制成的制劑。又稱減毒活疫苗。

3、類毒素：用0.3-0.4%甲醛處理外毒素，使其失去毒性，保留免疫原性的物質(zhì)。

4、新型疫苗：亞單位疫苗、合成疫苗、基因工程疫苗1）亞單位疫苗：提取有效免疫原成分。如HA、NA，HBsAg2）合成肽疫苗：人工合成抗原肽。（無需培養(yǎng)微生物，可大量生產(chǎn)，無致癌、返祖的危險(xiǎn)性）3）基因工程疫苗編碼免疫原基因→載體→體內(nèi) ↓ 酵母菌、大腸桿菌（體外培養(yǎng)）如：重組抗原疫苗、重組載體疫苗、DNA疫苗、轉(zhuǎn)基因植物疫苗一、免疫學(xué)預(yù)防-死/活疫苗

區(qū)別點(diǎn)

死疫苗

活疫苗制劑特點(diǎn)死、強(qiáng)毒株活、弱毒或無毒接種劑量及次數(shù)較多，2-3次較少，1次副作用較大較小保存及有效期易保存，1年不易保存4℃數(shù)周免疫效果較差，維持?jǐn)?shù)月至2年較好，維持3-5年或更長一、免疫學(xué)預(yù)防-人工主動免疫注意事項(xiàng)1、接種對象：免疫力差、流行地區(qū)的易感者等；

2、接種劑量、次數(shù)和間隔時(shí)間：死疫苗2-3次，間隔7-10天；活疫苗1次；類毒素2次，間隔4-6周。

3、接種途徑：死疫苗多皮下注射、活疫苗多皮內(nèi)注射、皮上劃痕或以自然感染途徑接種。

4、接種后反應(yīng)：接種24小時(shí)左右局部出現(xiàn)紅腫、疼痛、淋巴結(jié)腫大；短暫發(fā)熱、頭痛、惡心等，一般癥狀輕微，數(shù)天恢復(fù)正常。

5、禁忌癥：高熱、嚴(yán)重心、肝、腎疾病、傳染病、惡性腫瘤、孕婦等。一、免疫學(xué)預(yù)防-計(jì)劃免疫一、免疫學(xué)預(yù)防-人工被動免疫人工被動免疫：是給機(jī)體輸入抗體，使機(jī)體獲得特異性免疫力。可立即獲得，但免疫維持時(shí)間短，2-3周，多用于治療或緊急預(yù)防。1、抗毒素：是抗細(xì)菌外毒素的抗體。多為馬血清制劑，具有抗體性和免疫原性。

2、人丙種球蛋白：從正常人血漿或健康產(chǎn)婦胎盤中提取制成。

3、人特異性免疫球蛋白：來源于恢復(fù)期病人及含高價(jià)特異性抗體供血者血漿，或接受類毒素和疫苗免疫者的血漿。一、免疫學(xué)預(yù)防-人工主動免疫VS人工被動免疫項(xiàng)目人工主動免疫人工被動免疫接種物質(zhì)抗原抗體接種次數(shù)1～3次1次生效時(shí)間2～3周立即維持時(shí)間數(shù)月至數(shù)年2～3周主要用途預(yù)防治療和緊急預(yù)防第二節(jié)

免疫學(xué)治療二、免疫學(xué)治療概念：利用免疫學(xué)原理，通過物理、化學(xué)和生物學(xué)的手段抑制或增強(qiáng)機(jī)體免疫應(yīng)答的功能，對機(jī)體進(jìn)行干預(yù)，達(dá)到治療疾病的目的。一、分子治療分子疫苗、抗體和細(xì)胞因子二、細(xì)胞治療造血干細(xì)胞移植、免疫效應(yīng)細(xì)胞過繼療法和細(xì)胞疫苗三、免疫調(diào)節(jié)劑免疫增強(qiáng)劑和免疫抑制劑二、免疫學(xué)治療-分子治療一、以抗體為基礎(chǔ)的免疫治療（一）抗感染血清：抗毒素血清、抗病毒血清、人丙種球蛋白等。（二）抗淋巴細(xì)胞丙種球蛋白：（三）單克隆抗體：1.抗細(xì)胞表面的單克隆抗體2.抗細(xì)胞因子的單克隆抗體3.抗體導(dǎo)向藥物治療二、免疫學(xué)治療-分子治療二、以細(xì)胞因子及其拮抗劑為基礎(chǔ)的免疫細(xì)胞因子療法是應(yīng)用重組細(xì)胞因子對疾病進(jìn)行治療。例如，IFN-γ主要用于病毒感染性疾病和腫瘤的治療；IFN-β用于治療多發(fā)性硬化癥；IL-2最早被批準(zhǔn)用于腎細(xì)胞瘤、黑色素瘤的治療；應(yīng)用紅細(xì)胞生成素治療腎性貧血等。二、免疫學(xué)治療-細(xì)胞治療（一）骨髓移植1．自體骨髓移植2．異體骨髓移植3．臍血干細(xì)胞移植（二）免疫效應(yīng)細(xì)胞1．同種淋巴細(xì)胞被動轉(zhuǎn)移2．自體免疫效應(yīng)細(xì)胞過繼免疫療法二、免疫學(xué)治療-免疫調(diào)節(jié)劑免疫增強(qiáng)劑和免疫抑制劑免疫增強(qiáng)劑（IPA）：是增強(qiáng)、促進(jìn)和調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能的生物或非生物制劑。主要用于惡性腫瘤、免疫缺陷病和傳染病的輔助治療。免疫增強(qiáng)劑分類分類舉例細(xì)胞因子制劑IL-2、TNF、IFN微生物制劑卡介苗、短小棒狀桿菌、脂磷壁酸化學(xué)藥物左旋咪唑、西咪替丁多糖類制劑茯苓多糖、人參多糖二、免疫學(xué)治療-免疫調(diào)節(jié)劑免疫抑制劑：是一類抑制機(jī)體免疫功能的生物或非生物制劑。主要用于抗移植排斥反應(yīng)、超敏反應(yīng)性疾病、自身免疫性疾病及感染性炎癥。常見免疫抑制劑種類分類舉例抗生素環(huán)孢霉素A、FK-506單克隆抗體制劑抗TC及亞群、抗MHC、抗IL和IL受體激素腎上腺皮質(zhì)類固醇烷化劑環(huán)磷酰胺抗代謝藥硫唑嘌呤、5-氟尿嘧啶第三節(jié)

免疫學(xué)診斷三、免疫學(xué)診斷免疫學(xué)檢測技術(shù)廣泛應(yīng)用于臨床疾病的診斷、發(fā)病機(jī)制的研究、預(yù)后判斷、防治和藥物療效評價(jià)，是當(dāng)今生命科學(xué)主要的研究手段之一。一、抗原或抗體的檢測二、細(xì)胞免疫功能的檢測三、免疫學(xué)診斷-抗原/抗體的檢測原理體外抗原和相應(yīng)抗體結(jié)合，在一定條件下出現(xiàn)肉眼可見反應(yīng)現(xiàn)象。實(shí)踐中常用已知的抗原或抗體來檢測相應(yīng)的抗體或抗原，并可進(jìn)行定性、定量、定位的檢測。抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)：特異性可逆性比例性階段性三、免疫學(xué)診斷-抗原/抗體的檢測方法1、凝集反應(yīng)：顆粒性抗原（如細(xì)胞、細(xì)菌等）與相應(yīng)抗體結(jié)合，在一定條件下出現(xiàn)可見的凝集現(xiàn)象。三、免疫學(xué)診斷-抗原/抗體的檢測方法2、沉淀反應(yīng)：可溶性抗原（血清蛋白、外毒素、組織浸液、細(xì)菌濾液等）與相應(yīng)抗體結(jié)合，在一定條件下出現(xiàn)可見沉淀物的現(xiàn)象。單向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)對流免疫電泳三、免疫學(xué)診斷-抗原/抗體的檢測方法3、免疫標(biāo)記技術(shù)：——免疫熒光技術(shù)免疫熒光直接法免疫熒光間接法用熒光素標(biāo)記已知抗體或抗原，用于相應(yīng)抗原或抗體的分析鑒定和定量測定。——免疫酶技術(shù)1、包被抗體

洗2、加抗原

洗3、加酶標(biāo)抗體

洗4、加底物顯色1、包被抗原

洗2、加抗體

洗3、加酶標(biāo)抗

球蛋白

洗4、加底物顯色ELISA雙抗體夾心法ELISA間接法用酶標(biāo)記抗體或抗原，通過酶催化相應(yīng)底物顯色，觀察顏色的有無或深淺來判定抗原或抗體的有無和含量。三、免疫學(xué)診斷-抗原/抗體的檢測方法3、免疫標(biāo)記技術(shù)：

放射免疫測定法（RIA）是將放射性核素分析的靈敏性和抗原抗體反應(yīng)的特異性結(jié)合的測定技術(shù)。具有靈敏、精確、特異性高、易規(guī)范化及自動化等優(yōu)點(diǎn)的一種先進(jìn)的免疫標(biāo)記技術(shù)。

金免疫技術(shù)是一處以膠體金作為標(biāo)記物的免疫標(biāo)記技術(shù)。是目前應(yīng)用廣泛、簡便、快速的檢驗(yàn)方法。

化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)是將化學(xué)發(fā)光分析的高靈敏度和抗原抗體反應(yīng)的高度特異性相結(jié)合而建立的一種檢測抗原或抗體的新技術(shù)。該技術(shù)因標(biāo)記物為非放射性物質(zhì)，而且可進(jìn)行全自動化分析，具有快速、簡便、靈敏、特異等特點(diǎn)。三、免疫學(xué)診斷-細(xì)胞免疫功能的檢測（一）T細(xì)胞數(shù)量檢測通過檢測T細(xì)胞表面的CD（CD3分子）抗原來了解外周血T細(xì)胞數(shù)量和亞群的變化。一般采用免疫熒光法測定。正常外周血淋巴細(xì)胞中熒光陽性細(xì)胞占60%~80%。從外周血分離單個(gè)核細(xì)（PBM）后，用鼠抗人CD3的單克隆抗作第一抗體與PBM結(jié)合，再用熒光素（FITC）標(biāo)記的兔抗鼠IgG抗體作第二抗體進(jìn)行間接熒光染色。三、免疫學(xué)診斷-細(xì)胞免疫功能的檢測（二）T細(xì)胞亞群檢測T細(xì)胞的不同亞群各有其特有的分化抗原，如CD4Th細(xì)胞,CD8Tc細(xì)胞，因此可用其相應(yīng)的單克隆抗體進(jìn)行檢測。正常值為CD4占淋巴細(xì)胞數(shù)55%~60%，CD8占淋巴細(xì)胞數(shù)的20%~30%；CD4／CD8為2:1。用間接熒光法檢測CD4和CD8T細(xì)胞CD4/CD8正常比值為1.7-2.0左右。三、免疫學(xué)診斷-細(xì)胞免疫功能的檢測（三）T細(xì)胞功能檢測1．淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)是檢測T細(xì)胞功能的體外試驗(yàn)。當(dāng)T細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)受到有絲分裂原PHA、ConA等刺激后能轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞，根據(jù)T細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率，來判斷機(jī)體細(xì)胞免疫狀態(tài)。正常值為70%左右。

PHA刺激48~72小時(shí)（1）形態(tài)學(xué)方法（2）3H-TdR摻入法三、免疫學(xué)診斷-細(xì)胞免疫功能的檢測（1）植物血凝素(PHA)皮膚試驗(yàn)PHA是一種常用的非特異性有絲分裂原,皮內(nèi)注射后與注射局部的T淋巴細(xì)胞表面的相應(yīng)絲裂原受體結(jié)合,刺激T細(xì)胞發(fā)生有絲分裂,增殖的淋巴細(xì)胞6~12小時(shí)在局部出現(xiàn)紅腫硬結(jié),24~48小時(shí)達(dá)高峰。2．檢測細(xì)胞免疫功能的皮膚試驗(yàn)（2）特異性抗原皮膚試驗(yàn)常用的為結(jié)核菌素(OT)試驗(yàn)。將定量的OT注射到受試者前臂皮內(nèi)，24~48小時(shí)在注射的局部形成紅腫硬結(jié)，直徑大于0.5cm為陽性。陽性說明機(jī)體對結(jié)核桿菌有特異性免疫力,