實驗1 微生物實驗室規(guī)則 實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌課件

微生物學實驗

華僑大學化工學院華僑大學化工學院實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌實驗1微生物實驗室規(guī)則、工作環(huán)境要求、實驗記錄、常用器皿材料和儀器設備實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌微生物實驗的意義、研究進展

和實驗內容

一、研究內容研究微生物的形態(tài)、結構、生理生化、遺傳變異、微生物與其他生物、與自然界之間的關系1.機理研究：微生物適應環(huán)境的機制，鞭毛運動的機理等（是生化和分子生物學研究的重要研究內容和研究材料。）實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌2.微生物與實際應用微生物與發(fā)酵工程微生物與環(huán)境工程微生物與農業(yè)微生物與醫(yī)學領域微生物與食品工業(yè)實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌二、微生物學研究進展

微生物基因組學研究（MicrobialGenomics）不可培養(yǎng)微生物（UnculturedMicroorganisms）DNA芯片（DNAChip）三域學說（Bacteria,Archae,Eucaryote）實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌三、微生物學與Nobel獎

到目前為止，幾十項Nobel生理學和醫(yī)學獎，化學獎都與微生物學有關參考：沈萍教授《微生物學》緒論部分Nobel獲獎者。實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌四、如何進行微生物學實驗嚴肅認真科學態(tài)度分析問題搞清原理實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌五、微生物實驗安排與考核平時表現、基礎實驗：10+30%，一次考試考試：60%實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌課堂紀律嚴格遵守實驗室規(guī)章制度嚴肅課堂紀律不允許無故曠課、早退遲到（3次）實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌實驗室安全和衛(wèi)生

安全實驗室嚴禁吸煙。注意用水、用電和防火正確使用化學試劑和儀器正確清洗器具

禁止在實驗室吃東西及飲水實驗廢棄物分類處理，勿污染環(huán)境衛(wèi)生每次實驗需留下4位同學值日，協(xié)助保持實驗室清潔（班長及生活委員安排）實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌實驗預習報告及實驗結果目的原理步驟結果及分析

學習委員（報告批改后返給同學修改，再收回留檔，統(tǒng)計分數）實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌周次教學內容、作業(yè)及考試安排周次教學內容、作業(yè)及考試安排3實驗1微生物實驗室規(guī)則、工作環(huán)境要求、實驗記錄、常用器皿材料和儀器設備實驗2微生物營養(yǎng)成分配制和消毒滅菌技術8實驗7放線菌的形態(tài)觀察霉菌的形態(tài)觀察4實驗3實驗室環(huán)境及人體表面微生物的檢查分離實驗4顯微鏡的使用及細菌的簡單染色法9實驗8酵母菌的形態(tài)觀察微生物大小的測定和計數5國慶放假10實驗9水中細菌總數的測定實驗10濾膜法測定水中大腸菌群6實驗3實驗室環(huán)境及人體表面微生物的檢查分離（結果觀察及描述）實驗5革蘭氏染色法、細菌莢膜染色法11實驗11環(huán)境因素對微生物生長的影響7實驗6細菌芽孢染色法和鞭毛染色法12-14考試實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌分組及各組器皿清單每組器皿清單酒精燈

1個/人鑷子

1把/人培養(yǎng)皿

5套/組三角瓶（250ml）2套/組燒杯（250ml）

1個/組載波片

10片/組廢液缸

1個/組接種針/環(huán)

1把/組（或人）玻棒

2根/組試管

6個/組試管架

1個/組繩子

2段/組蒸餾水瓶帶滴管

1套/組2人一組（最后一組3人）（按學號）用后各自清理保管。損毀或丟失，找實驗室管理老師登記賠償并補領實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌實驗2微生物營養(yǎng)成分配制和消毒滅菌技術實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌一、目的要求1、了解培養(yǎng)基制備原理，掌握培養(yǎng)基制備方法。2、掌握干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌的原理和方法。3、學會培養(yǎng)皿、瓶口的包扎。實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌（二）滅菌原理1干熱滅菌原理（蛋白質凝固變性）一般繁殖體——80－100℃，1h芽孢——160－170℃，2h＜180℃實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌2濕熱滅菌原理－高壓蒸汽滅菌

在密閉的蒸鍋內，鍋內溫度達121℃，15min－30min，可以很快殺死各種細菌及其高度耐熱的芽孢（蛋白凝固變性）。

優(yōu)點？實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌三、實驗器材1、材料瓊脂粉、酵母膏（粉）、蛋白胨、NaCl等。2、設備天平（6臺）、稱量紙、量筒、玻璃注射器（3-5把）、燒杯、玻璃棒、pH試紙、標簽，紗布（8層紗布，包扎瓶口用，每組1份）、報紙、三角瓶、繩子、試管及試管塞、酒精燈、火柴、藥勺（4把）、高壓蒸汽滅菌鍋（1臺）、烘箱（1臺）、電熱板（6臺）等。實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌四、操作步驟（一）培養(yǎng)基的制備LB培養(yǎng)基(Luria-Bertanimedium)為例實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌

LB酵母粉5g蛋白胨10gNaCl5g瓊脂粉或瓊脂條12-15g蒸餾水1000mlpH7.2-7.8依上述配方配制150ml，請換算好相應的質量數。（稱量紙，藥勺，天平，燒杯，量筒，三角瓶，試管）（試管4-5ml；剩余裝入三角瓶）倒平板（5個）擱置斜面（4個）干熱或濕熱實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌制備LB平板待培養(yǎng)基冷卻至45-60℃（不燙手）時，于酒精燈火焰無菌區(qū)均勻倒入培養(yǎng)皿中（每個約20ml），冷卻后凝固成固體膠狀平板（LB平板）。擱置斜面：適當冷卻后便可將試管口端擱在玻璃棒或其他合適高度的器具上，斜面長度不超過試管總長的1/2為宜。實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌每人攜帶2個平板，自己設計實驗，分離培養(yǎng)微生物。倒扣培養(yǎng)，盡可能密封。注意觀察，將實驗結果簡單描述。（采集的樣品、生長的狀況[時間，快慢]、種類和數量是否可區(qū)分，各多少），交給學習委員，下次課分享。實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌（二）滅菌

干熱滅菌操作步驟：（1）用報紙條包好干燥的培養(yǎng)皿。（2）將待滅菌物品均勻放入烘箱內。（3）開啟電源，設定溫度和時間（160－170℃，2小時）。（4）切斷電源，待溫度降至70℃以下時，打開箱門，取出滅菌物品。實驗1微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌濕熱滅菌操作步驟：1、滅菌物準備2、高壓蒸汽滅菌（1）加水（2）裝鍋（3）接通熱源，設置參數（121℃，15min－30min）（4）升壓、升溫（5）切斷電源（6）取出滅菌物（7）待培養(yǎng)基冷卻后置于37℃恒溫箱內培養(yǎng)24h，若無菌生長則放入冰箱或陰涼處保存?zhèn)溆?。實?微生物實驗室規(guī)則實驗2培養(yǎng)基配制及滅菌五思考題1、培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基應具備哪些條件？2、為什么培養(yǎng)基配制好后必須立即滅菌？采用那種滅菌方式？3、為什么高壓蒸汽滅菌時要先將冷空氣排盡？4、還有哪種滅菌方式屬于